ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИПРОФЛОКСАЦИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ, ОРГАНАХ И ТКАНЯХ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

SUMMARY

The bivalent SalmAbic vaccine was administered for prevention of Sallmonella enteritidis infection in poultry breeding farm. This is vaccine promotes producing of high level of antibodies for a double vaccination. Sallmonella enteritidis germs were not determined in dead birds. There was one case only which Sallmonel-la enteritidis was determined in samples derived from hatchery and eggs storehouse.

Литература

1. Программа ВОЗ по надзору за сальмонеллеза- 3. СП 3.1. 086-96 и ВП 13.4.1318-96/Профилактика ми (изоляция, идентификация и лекарственная и борьба с заразными болезнями, общими для устойчивость Salmonella). Протокол лаборатор- человека и животных: сб. сан. и вет. правил.- М., ных исследований.- 3,2002. 1996.-с.50- 70.

2. ЕС(2003) Regulation (EC) No 2160/2003/. 4. ЕС(2003) Regulation (EC) No 2160/2003/.

УДК: 619:618

С.В. Русаков, Д.А Журавлев

(ФГУ ВГНКИ)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИПРОФЛОКСАЦИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ, ОРГАНАХ И ТКАНЯХ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Ключевые слова: ципрофлоксацин, ципровет 5%.

Введение

Ципрофлоксацин характеризуется широким спектром антимикробного действия и является наиболее активным (in vitro) среди применяющихся фторхинолонов.

Ципрофлоксацин в сравнении с другими фторхинолонами является одним из наиболее активных ингибиторов ДНК-гиразы: в опытах с Е. coli ИД50 в отношении выделенного фермента составляет 0,13 мг/л. Топоизамераза II млекопитающих тимуса теленка в 1200 раз менее чувствительна.

Препарат проявляет бактерицидное действие на размножающиеся клетки, и том числе в условиях подавления клеткой синтеза белка и РНК, а также в отношении покоящихся клеток; характеризуется наиболее длительным постантибиотическим эффектом.

Ципрофлоксацин, как правило, хорошо переносится. Большинство побочных реакций, связанных с применением ци-профлоксацина, наблюдаются со стороны желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), включая тошноту, рвоту, диарею, нарушение аппетита.

Согласно данным отечественных исследователей ципрофлоксацин во всем спектре терапевтических доз приводит к повышению синтеза всех типов иммуноглобулинов. Авторы рассматривают этот факт в качестве существенного дополнения к реализации антимикробного эффек-

та, с привлечением механизмов иммунитета на уровне макроорганизма (1, 2, 3).

Материалы и методы

Определение ципрофлоксацина проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием флуоресцентного детектора после их экстракции из образцов сыворотки крови, органов и тканей водно-метальным раствором, содержащим НСЬО4 и Н3РО4. Количественное определение проводилось методом абсолютной калибровки.

Раствор для экстракции ципрофлокса-цина из сыворотки крови готовили следующим образом. К 50 см3 бидистиллирован-ной воды добавляли 3 см3 60% перхлорной кислоты и 3 см3 35% фосфорной кислоты. К водному раствору добавляли 50 см3 метилового спирта и тщательно перемешивали.

Подготовка проб сыворотки, органов и тканей к определению: 1 см3 сыворотки (1 г органов и тканей) помещали в сцинтилляционные флаконы и добавляли 4,5 см3 экстрагирующего раствора. Пробы перемешивали на шейкере 15 минут, затем помещали в термостат, где выдерживали при 70°С в течение часа. После этого пробы охлаждали при комнатной температуре и центрифугиронали в течение 15 минут при 0°С и 2500 об/мин.

Супернатант переносили в чистые флаконы, добавляли 0,5 см3 6 М раствора ги-дроксида натрия. Осадок удаляли центрифугированием в течение 15 минут при 0°С

Таблица 1

Концентрация ципрофлоксацина (СТ) в сыворотке крови коров, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный ООО «НВЦ Агроветзащита»

Сроки отбора проб №№ коров Площадь пика С, mV*s Концентрация С, нг/см3

1 - *Н.О.

2 - Н.О.

10 мин 3 - Н.О.

4 - Н.О.

5 - Н.О.

1 5,300 81,338

2 - Н.О.

30 мин 3 - Н.О.

4 4,281 65,700

5 5,618 86,219

1 10,678 163,874

2 13,217 202,839

1 час 3 11,315 173,650

4 9,853 151,213

5 8,946 137,293

1 86,592 1328,915

2 79,008 1212,524

3 часа 3 93,147 1429,513

4 61,356 941,622

5 72,503 1112,693

1 55,748 855,556

2 60,315 925,646

5 часов 3 58,072 891,223

4 64,520 990,179

5 48,563 745,289

1 25,712 394,598

2 19,000 291,590

10 часов 3 22,684 348,128

4 28,545 438,076

5 16,899 259,346

1 6,326 97,084

2 7,480 114,794

15 часов 3 5,957 91,421

4 6,108 93,738

5 4,212 64,641

1 3,920 60,160

2 - Н.О.

24 часа 3 4,865 74,662

4 - Н.О.

5 - Н.О.

1 - Н.О.

2 - Н.О.

48 часов 3 - Н.О.

4 - Н.О.

5 - Н.О.

*Н.О. - не обнаружено (концентрация ципрофлоксацина (СТ) в сыворотке крови ниже предела количественного определения метода - 43,24 нг/см3)

и 2500 об/мин. Прозрачную надосадочную жидкость переносили в стеклянные пробирки для анализа на ВЭЖХ. В устройство для ввода проб в хроматограф инжектиро-

вали 0,05 см3 пробы.

Результаты определения: Для определения процента извлечения ципрофлоксацина из сыворотки крови, молока, печени,

Таблица 2

Средние концентрации ципрофлоксацина (СБ) в сыворотке крови коров, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный ООО «НВЦ Агроветзащита»

Сроки отбора проб Концентрация албендазола ципрофлоксацина (CF), нг/см3

10 мин *Н.О.

30 мин 46,651 ± 43,256

1 час 165,774 ± 24,812

3 часа 1205,053 ± 189,543

5 часов 881,579 ± 90,941

10 часов 346,348 ± 72,995

15 часов 92,336 ± 18,005

24 часа 26,964 ± 37,277

48 часов Н.О.

*Н.О. - не обнаружено (концентрация ципрофлоксацина (CF) в сыворотке крови ниже предела количественного определения метода - 43,24 нг/см3)

Таблица 3

Концентрация ципрофлоксацина (CF) в молоке коров, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный ООО «НВЦ Агроветзащита»

Сроки отбора проб, часы №№ коров Площадь пика (CF), mV*s Концентрация (CF), нг/см3

1 20,676 353,991

2 27,359 468,410

12 3 33,165 567,814

4 35,108 601,080

5 29,503 505,117

1 49,132 841,183

2 42,576 728,938

24 3 38,119 652,631

4 45,225 774,292

5 44,826 767,460

1 18,653 319,356

2 21,178 362,586

48 3 16,434 281,364

4 25,249 432,285

5 23,045 394,551

1 - Н.О.

2 - Н.О.

96 3 - Н.О.

4 - Н.О.

5 - Н.О.

*Н.О. - не обнаружено (концентрация ципрофлоксацина (CF) в молоке ниже предела количественного определения метода - 38,76 нг/см3)

почек, мышц, сердца и жира при пробопод-готовке, в контрольные образцы объемом 1 см3 (массой 1 г) искусственно внесли 1 см3 стандартного раствора ципрофлоксацина с концентрацией 1000 нг/см3. Пробоподготов-ку проводили по отработанной методике.

Опытным путем было установлено, что предел количественного определения ципрофлоксацина (СБ) в стандартах равен 60 нг / см3.

Анализ образцов сыворотки крови коров представлен в таблицах 1 и 2.

Таблица 4

Средние концентрации ципрофлоксацина (СД) в молоке коров, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный ООО «НВЦ Агроветзащита»

Сроки отбора проб, часы Концентрация ципрофлоксацина (CF), нг/см3

12 499,282 ± 96,379

24 752,901 ± 69,086

48 358,028 ± 59,669

96 *Н.О.

*Н.О. - не обнаружено (концентрация ципрофлоксацина (СД) в молоке ниже предела количественного определения метода - 38,76 нг/см3)

Таблица 5

Концентрация ципрофлоксацина (СД) в органах и тканях телят, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный ООО «НВЦ Агроветзащита»

Сроки отбора проб, сутки №№ телят Орган/ткань Площадь пика СД Концентрация СД, нг/см3

Почки 45,188 742,172

Печень 52,300 919,254

1 Мышцы 19,341 284,545

Сердце 27,159 426,477

Жир 13,026 212,701

Почки 40,825 670,514

Печень 59,367 1043,467

2 Мышцы 22,540 331,609

Сердце 25,374 398,448

14 Жир 10,209 166,702

Почки 49,518 813,288

Печень 55,423 974,145

3 Мышцы 20,016 294,476

Сердце 21,349 335,243

Жир 9,775 159,616

Почки 48,458 795,879

Печень 57,286 1006,890

4 Мышцы 15,734 231,479

Сердце 24,363 382,572

Жир 12,045 196,682

Почки 27,921 458,577

Печень 32,216 566,246

5 Мышцы 6,458 95,010

Сердце 19,675 308,956

Жир 9,197 150,178

Почки 23,265 382,107

Печень 28,332 497,979

6 Мышцы 10,405 153,078

Сердце 13,925 218,664

21 Жир 8,015 130,877

Почки 16,534 435,797

Печень 22,003 386,737

7 Мышцы 11,641 171,262

Сердце 15,247 239,423

Жир 10,156 165,837

Почки 21,046 345,662

Печень 24,345 427,901

8 Мышцы 7,199 105,912

Сердце 16,208 254,514

Жир 12,444 203,198

Почки - *Н.О.

Печень - Н.О.

9 Мышцы - Н.О.

Сердце - Н.О.

Жир - Н.О.

Почки - Н.О.

Печень - Н.О.

10 Мышцы - Н.О.

Сердце - Н.О.

28 Жир - Н.О.

Почки - Н.О.

Печень - Н.О.

11 Мышцы - Н.О.

Сердце - Н.О.

Жир - Н.О.

Почки - Н.О.

Печень - Н.О.

12 Мышцы - Н.О.

Сердце - Н.О.

Жир - Н.О.

*Н.О. - не обнаружено (концентрация ципрофлоксацина (CF) в органах и тканях ниже предела количественного определения метода)

Таблица 6

Средние концентрации ципрофлоксацина (CF) в органах и тканях телят, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный ООО «НВЦ Агроветзащита»

Сроки отбора проб, сутки Орган/ткань Концентрация ципрофлоксацина (CF) , нг/см3

14 Почки 755,463 ± 64,214

Печень 985,939 ± 52,708

Мышцы 285,527 ± 41,335

Сердце 385,685 ± 38,214

Жир 183,925 ± 25,022

21 Почки 405,536 ± 51,195

Печень 469,716 ± 79,059

Мышцы 131,315 ± 36,664

Сердце 255,389 ± 38,617

Жир 162,522 ± 30,655

28 Почки *Н.О.

Печень Н.О.

Мышцы Н.О.

Сердце Н.О.

Жир Н.О.

*Н.О. - не обнаружено (концентрация ципрофлоксацина (CF) в органах и тканях ниже предела количественного определения метода)

Результаты анализа образцов молока коров

Результаты, полученные при анализе экстрактов молока коров, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный представлены в нижеприведенных таблицах 3 и 4.

Результаты анализа образцов органов и тканей телят Результаты, полученные при анализе

экстрактов органов и тканей коров, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный представлены в нижеприведенных таблицах 5 и 6.

Заключение На основании полученных результатов можно заключить, что:

1) Максимальная концентрация в сыворотке крови животных, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный

ципрофлоксацин (СД), достигает, через 3 часа.

2) Период полного выведения остаточных количеств ципрофлоксацина (СД) из организма животных, обработанных препаратом Ципровет 5% инъекционный со-

ставляет 28 суток.

3) Период полного выведения остаточных количеств ципрофлоксацина (СД) из организма животных с молоком после применения препарата Ципровет 5% инъекционный составляет 4 суток.

SUMMARY

Based on these results we can conclude that:

1) The maximum concentration in the serum of animals treated with the drug Ciprovet 5% injectable ciprofloxacin (CF), reaches in 3 hours.

2) The period of complete removal of residual quantities of ciprofloxacin (CF) from the body of animals treated with the drug Ciprovet 5% of injecting drug use is 28 days.

3) The period of complete removal of residual quantities of ciprofloxacin (CF) from the organism of animals with milk after the drug Ciprovet 5% of injecting drug use is 4 days.

HnTepaypa

Bergan T., Thorsteinsson S.B., Solberg R. et. al.// Pharmacokineti of enrofloxain intravenous and increasing oral doses. - Amer.J.Med., 1987; 82: suppl. 4A : 97-102.

Hoffken G., Lode H., Prinzig C. et. al.// Pharmaco-kinetics of ciprofloxain after oral and parenteral

administration. - Antimicrob. Ag. Chemother., 1985; 27: 375-379.

Lungberg B., Nilsson-Ehle J.// Pharmacokinetics of intravenous ciprofloxain at three different doses. -J. Antimicrob. Chemother., 1988; 22: 715-720.

1.

УДК: 636.4.085.12.16 Д.В.Пчельников

(Тверская ГСХА)

БИОКООРДИНАЦИОННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КОРМЛЕНИИ СУПОРОСНЫХ СВИНОМАТОК И ПОРОСЯТ

Ключевые слова: алиментарная анемия, свиноматки, гемовит-плюс, гемовит-меян.

Одной из проблем современного свиноводства является заболевание поросят алиментарной анемией. Данное неинфекционное заболевание ничто иное, как результат недостаточности в рационах ряда микроэлементов. Для решения данной проблемы мы предложили ввести в корм поросят препараты серии гемовит. Препарат гемовит-плюс - биокоординационное соединение этилендиаминдиянтарной кислоты с рядом микроэлементов Де, Си, Мп, Со, Zn, 8е, I; гемовит-меян - метионинянтар-ной кислоты с вышеназванными микроэлементами.

С 15 января по 15 июля 2009 года на свиноферме СПК «Большевик», Калининского района, Тверской области проводили испытания препаратов гемовит-плюс и гемовит-меян, введенных в концкорм. Исследования проводились сотрудниками кафедры «Основ ветеринарии, акушерства и зоогигиены» Тверской ГСХА, совместно с сотрудниками ООО Гемовит. Исследова-

ния крови проводили на базе Тверской ветеринарной лаборатории.

Для изучения влияния препаратов ге-мовит на продуктивность свиноматок было сформировано три группы маток крупной белой породы % кровности в помеси с породой ландрас % кровности. Группы формировались по принципу аналогов и делились на две опытные и контрольную. Свиноматок подбирали на второй неделе супоросности. Животные содержались в соседних индивидуальных станках, подвергались производственным стрессам в одинаковой степени. Первые десять дней после постановки на опыт животные всех групп получали общехозяйственный рацион и находились под наблюдением. После окончания подготовительного периода маткам опытных групп в рацион дополнительно вводили: 1 опытной - препарат гемовит-плюс в дозе 13 мг действующего вещества на 1 кг массы тела животного, 2 опытной - препарат гемовит-меян в той же