CC BY
4
ций серебра в питьевой воде на судах (см. рису-, нок). Основной частью прибора является индика-4|тор серебра. В корпусе индикатора укреплен штатив, в котором находятся шесть ампул с окрашенными калиброванными растворами. В штативе имеется ячейка для колориметрической пробирки с анализируемым раствором. Калиброванные растворы приготовлены из растворов-имитаторов и откалиброваны по стандартным растворам нитрата серебра. Калиброванные растворы имеют окраску от светло-желтой до краской и соответствуют содержанию серебра в питьевой воде 0,015; 0,03; 0,05; 0,07; 0,10; 0,15 мг/л. Ампулы с окрашенными растворами отражаются в зеркале и видны на экране индикатора как шесть цветных кружков на черном фоне. В комплекте прибора имеются реагенты, необходимые для выполнения анализа воды: 1. Реагент А — ТКМ, 0,05 % раствор в диметилформамиде. 2. Реагент Б — смесь 3 % водного раствора ДДС и 1 % раствора гексаметафосфата натрия (6 г ^ДДС и 2 г гексаметафосфата натрия растворены в 200 мл горячей дистиллированной воды). 3. Реагент В — сернистокислый натрий (сухой препарат). Количество реагентов, входящих в комплект прибора, достаточно для выполнения 200 определений. Свежие растворы реагентов готовят в стационарных лабораторных условиях.
Концентрацию серебра определяют путем визуального сравнения окраски анализируемого раствора с окраской калиброванных растворов шкалы. Для этого в коническую колбу отмеряют мерным цилиндром 20 мл подлежащей анализу питьевой воды, прибавляют реагент В на кончике мерной ложки и перемешивают до полного растворения соли. Затем приливают 1 мл раствора Б и к полученному раствору прибавляют по 1—4 капли раствора А, осторожно перемешивая после прибавления каждой капли. Окрашенный раствор наливают в колориметрическую пробир-
4
УДК 6М.777:[547.533 + 547.539.2]-074
ку до метки, вставляют пробирку в свободную ячейку индикатора и сравнивают окраску анализируемого раствора с окраской калиброванных растворов. Для этого индикатор располагают так, чтобы свет падал на ампулы сверху. Отражение ампул в зеркале рассматривают через окно в нижней части индикатора. Для выполнения анализа необходимо не более 5 мин, причем на судах его может проводить не только судовой медицинский персонал, но и любой член команды, ответственный за дезинфекцию и кондиционирование воды. Прибор в судовом исполнении может входить в комплект оборудования судового медицинского пункта или санитарной каюты. Ошибка определения серебра на приборе СВ-82 не превышает 20 % (при концентрации 0,05 мг/л), что удовлетворяет требованиям экспрессного анализа.
Прибор апробирован в лабораторных условиях, на судах Черноморского пароходства и Глав-речфлота УССР. Метод и прибор для определения остаточного количества серебра в питьевой воде получили положительный отзыв Киевского НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Марзеева Минздрава УССР и одобрены Минздравом УССР. Дано разрешение на разработку технических условий, серийное производство и применение данного прибора на морских и речных судах.
Литература
1. Кульский Л. А. Серебряная вода. Киев, 1571, с. 126.
2. Марков Г. Д., Эльпинер Л. И., Аронова Е. Н. — Труды НИИ гигиены водного транспорта, 1968, вып. 1, с. 264, 276.
3. Методические указания по гигиене хозяйственно-питьевого водоснабжения морских судов МЗ СССР № 1975—79. М., 1979.
4. Пятницкий И. В., Сухан В. В. Аналитическая химия серебра. М., 1975, с. 100.
Поступила 10.07.85
В. С. Козлова, И. А. Кочеровская
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ПАРА-ХЛОРБЕНЗОТРИФТОРИДА И ТОЛУОЛА В ВОДЕ
Киевский научно-исследовательский филиал ГосНИИхлорпроекта
К числу токсичных соединений, содержание которых в воде лимитируется предельно допустимыми концентрациями, относятся пара-хлорбен-зотрифторид — п-ХБТФ (ПДК 0,012 мг/л) и толуол (ПДК 0,5 мг/л). Вместе с тем до настоящего времени не разработаны методы определения содержания п-ХБТФ и его смеси с толуолом в воде.
Прямое газохроматографическое определение содержания указанных веществ в воде провести ^девозможно в связи с недостаточной чувстви-
тельностыо пламенно-ионизационного детектора, наиболее часто используемого для определения органических примесей в воде. Для концентрирования анализируемых веществ был использован метод анализа равновесной паровой. фазы [6], позволяющий повысить чувствительность определения примесей примерно на два порядка по сравнению с прямым анализом воды [3].
Для концентрирования анализируемые пробы воды объемом 10 мл помещали в имеющие резьбу флаконы вместимостью 30 мл. Флаконы за-
крывали уплотнительным устройством, представляющим собой пластмассовую крышку с резьбой, в которой просверлено отверстие диаметром 1 — 2 мм. В крышку вставляли обрезанную пеницил-линовую пробку, которую для уменьшения на ней адсорбции анализируемых веществ изолировали от паровой фазы прокладкой из фторопластовой пленки. Для устранения остаточной адсорбции на флаконах их перед повторным использованием заливали хромовой смесью на 15 мин. Адсорбцию на шприце устраняли нагревом и продувкой. Пробы термостатировали в ультратермостате и вводили паровоздушную смесь в хроматограф нагретым шприцем. Воспроизводимость дозирования пробы 10%. Хро-матографический анализ паровой фазы проводили на хроматографе «Цвет-102» с пламенно-ионизационным детектором, на колонке длиной 1 м, диаметром 3 мм, заполненной 15% полифе-нилметилсилоксана-4 на хроматоне N—А\У, зернением 0,25—0,315 мм. Температура термостата колонок 110°С при анализе п-ХБТФ и 80 °С при анализе смеси п-ХБТФ с толуолом, температура испарителя 200°С, скорость газа-носителя (азот) на входе в колонку 1,2 л/ч, соотношение расходов азота, водорода и воздуха 1 : 1 : 10. Скорость диаграммной ленты 200 мм/ч, предел измерения 50 А-Ю-12.
С целью выбора оптимальных условий концентрирования была изучена зависимость высоты пика п-ХБТФ от температуры и времени термо-статирования пробы. Для получения необходимого предела обнаружения была выбрана максимально возможная температура термостатирова-ния пробы — 90 °С. Время установления равновесия при этой температуре равно 10 мин. Величина вводимой на анализ пробы составляла 5 мл.
Количественное определение проводили с внешним стандартом, в качестве которого использовали раствор п-ХБТФ в воде. Концентрация п-ХБТФ в стандартном растворе после разбавления равна 0,011 мг/л. Раствор стандарта может храниться без заметного изменения состава не более 3 ч. Следовательно, если проба воды не может быть проанализирована в течение 2,5—3 ч, бе следует отбирать в сосуд с герметично закрывающейся стеклянной пробкой таким образом, чтобы в нем по возможности не было газовой фазы. Это позволит исключить потерю анализируемого вещества за счет диффузии в газовую фазу.
Статистическая обработка результатов определения п-ХБТФ [4, 5] на уровне ПДК показала, что допустимая ошибка [1] может быть получена при 5 параллельных определениях. Была проверена возможность использования разработанной методики для определения больших концентраций п-ХБТФ. Статистическая обработка результатов определения п-ХБТФ при концентрации 0,54 мг/л (ПДК 50 мг/л) показала, что относительное стандартное отклонение при довери-
тельной вероятности 0,95 и 5 параллельных определениях равно в этом случае 14 %. Для проверки влияния примесей, присутствующих в природных водах, на количественное определение п-ХБТФ была проанализирована днепровская вода. Установлено, что примеси, мешающие определению содержания п-ХБТФ, в ней отсутствуют. Следовательно, разработанная методика может быть использована для определения содержания п-ХБТФ в природных водах.
Для контроля процесса очистки сточных вод перед сбросом их в водоемы необходимо определение в них содержания п-ХБТФ и его смеси с толуолом. Для этого была приготовлена вода, содержащая ПДК указанных выше веществ. При его анализе было установлено, что пик толуола перекрывает пик п-ХБТФ. Поэтому для разделения этих веществ температура термостата колонок была снижена до 80 °С. Введение толуола в воду уменьшает мольную долю п-ХБТФ в растворе, что, согласно закону Генри, приводит к уменьшению парциального давления п-ХБТФ, следствием чего является значительное снижение предела обнаружения его. Чтобы повысить предел обнаружения, было исследовано влияние электролитов на константу распределения. Как известно [2], высалива1ошее действие ионов тем больше, чем меньше их радиус, причем разные концентрации одной и той же соли могут по-разному влиять на растворимость веществ в воде. Опыты с фторидом, хлоридом и сульфатом натрия, а также карбонатом калия показали, что применение этих солей не повышает предела обнаружения анализируемых веществ, так как в данном случае имеет место эффект всаливания. Необходимый предел обнаружения был получен путем увеличения вводимой на анализ пробы до 10 мл.
Количественное определение п-ХБТФ и толуола проводили с внешним стандартом, в качестве которого использовали раствор анализируемых веществ в воде, концентрация которых после разбавления была равна 0,5 мг/л для толуола и 0,011 мг/л для п-ХБТФ. Среднюю высоту пиков рассчитывали по результатам 5 параллельных определений. Статистическая обработка результатов определения п-ХБТФ и его смеси с толуолом в воде на уровне ПДК показала, что относительные стандартные отклонения для них равны соответственно 23 и 11 последовательно, предлагаемые методики могут быть использованы при санитарно-химическом анализе содержания указанных веществ в воде.
Литература
1. ГОСТ 12.1.007—76. Вредные вещества.
2. Коренман И. М. Экстракция органических веществ.
Горький, 1970, с. 41—46.
3. Костюкова Л. В., Беляева Ю. Л. — Журн. аналит. химии, 1978, т. 33, № 4, с. 794—796.
4. Нейман Е. Я., Каплан Б. #. — Там же, № 3, с. 607—
609.
5. Термины, определения и обозначения метрологических 6. Хахенбсрг X., Шмидт А. Газохроматографический ана-характеристик анализа веществ. — Там же, 1975, № 10, лиз равновесной паровой фазы: Пер. с англ. М., 1979. С. 2058—2063. Поступила 10.07.85
УДК 614.777:579.842.151-078
Л. А. Сичинский
МЕТОД УСКОРЕННОГО ВЫЯВЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ДИЗЕНТЕРИИ И ИХ АНТИГЕНОВ В ВОДЕ
Кишиневский медицинский институт
В литературе имеются указания на возможность вторичного загрязнения водопроводной воды патогенными микроорганизмами, в том числе шигеллами, при недостаточно эффективной работе очистных сооружений на водопроводных станциях, вследствие изношенности труб разводящей сети, неполной их герметизации, при аварийных ситуациях, а также в тех случаях, когда вода населению подается с перебоями [1, 3, 6, 7]. Несмотря на то что водный путь передачи дизентерии отмечен в основном для шигелл Флекснера [4], в последнее время встречаются сообщения о передаче через воду и дизентерии Зонне, возбудители которой обладают высокой устойчивостью во внешней среде [2].
В данной работе описан новый ускоренный метод обнаружения шигелл Зонне в воде при их наличии даже в незначительных концентрациях.
В ходе экспериментальных исследований была разработана реакция торможения агглютинации цветных шигеллезных шариков (РТАЦШ)—ускоренный иммунологический тест индикации шигелл и их антигенов в воде и других объектах внешней среды, не требующий выделения возбудителя в чистой культуре. При постановке реакции использовали полученный нами [5] синтетический цветной шигеллезный диагностикум (СЦШД), который представляет собой гомогенную суспензию цветных искусственных клеток-шариков диаметром 5—7 мкм, нагруженных дизентерийным антигеном Зонне и взвешенных в забуференном физиологическом растворе рН [7,2]. Принцип РТАЦШ состоит в том, что воду, в которой предполагается наличие шигелл, смешивают с диагностической сывороткой и через определенное время добавляют СЦШД. Если в воде имеется антиген шигелл, соответствующий антителам сыворотки, то происходит нейтрализация последних. В результате добавляемые сенсибилизированные шигеллезным антигеном шарики не склеиваются, а скатываются, подобно эритроцитам, на дно лунки. Таким образом, специфическое взаимодействие антигена и антитела в реакции выявляется с помощью сенсибилизированных искусственных клеток-шариков по феномену задержки их агглютинации.
Постановка РТАЦШ осуществляется микрометодом в плексигласовых лунках. Для этого разводят не воду, содержащую антиген шигелл [как
зто принято в реакции нейтрализации антител (РНАт), например, с использованием эритроци-тарного диагностикума], а иммунную сыворотку, причем разведения делают не двукратные, а 1 :1,5, что позволяет значительно повысить чувствительность реакции. К разведениям иммунной сыворотки в объеме 0,025 мл (1 капля) в микролунках добавляют по 0,05 мл воды (2 капли), содержащей антигены шигелл, после ее предварительного прогревания на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Пластинки с микролунками встряхивают, накрывают стеклом и инкубируют при 37 °С в течение 45—60 мин, после чего во все микролунки добавляют по 0,025 мл СЦШД, встряхивают и вновь инкубируют. Результаты РТАЦШ учитывают через 2—3 ч по феномену торможения агглютинации цветных шигеллезных шариков и образованию на дне микролунки осадка з виде зеленой точки с ровными краями (положительный результат) вследствие скатывания цветных шариков, указывающего на наличие в воде антигенов шигелл. При их отсутствии отмечается агглютинация цветных шариков с формированием в лунке нежно-голубоватой полусферы (отрицательный результат). К реакции ставят несколько контролей: 1) заведомо известный дизентерийный антиген + диагностическая дизентерийная сыворотка + гомологичный сыворотке СЦШД (положительный результат); 2) заведомо известный дизентерийный антиген + нормальная сыворотка + СЦШД (положительный результат); 3) заведомо отрицательный антиген -г диагностическая дизентерийная сыворотка + гомологичный сыворотке СЦШД (отрицательный результат).
Чувствительность РТАЦШ мы определяли в модельных опытах с использованием 18-часовых агаровых культур шигелл Зонне и аналогичных бактериальных диагностикумов производственного изготовления. Эта реакция позволяла выявлять до 10 тыс. микробных клеток на 1 мл, что в 50—60 раз превышает возможности известной РНАт по Леви и Момот. При постановке РТАЦШ с культурами и стандартными сыворотками против родственных в антигенном отношении бактерий, а также других представителей семейства Enterobacteriaceae (S. enteritidis, S. paratyphi В, E. coli 0124, 055, Sil. sonnei, Sh. flexneri 1—5, Sh. flexneri 6, J. enterocolitica и др.) положитель-
