CC BY
7
что в некоторых цехах присутствуют минеральные кислоты и основа ния, которые не мешают колориметрическому методу и мешают титро-метрическому; во-вторых, кислоты с более высоким молекулярным весом менее летучи, они могут присутствовать только в незначительных количествах, которые титрометрическим методом не могут быть определены.
ЛИТЕРАТУРА
1. А л е к с е е в с к и й Е. В., Г о л ь ц Р. К., М у с а к и н А. II. Количественный анализ. Л—М., 1948. — 2. Б ы х о в с к а я М. С., Г и н з б у р г С. Л., X а л и з о в а О. Д. Методы определения вредных веществ в воздухе и других средах. М., 1961, ч. 2. стр. 270. — Дюжева Ю. В. Определение суммы одноосновных кислот жирного ряда в воздухе. Гиг. и сан., 1962. № 1. стр. 47.
Поступила 14/11 1962 г.
# #
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО ЧИСЛА БАКТЕРИЙ В ВОДЕ НА МЕМБРАННЫХ УЛЬТРАФИЛЬТРАХ С ПРИМЕНЕНИЕМ
ТРИФЕНИЛТЕТРАЗОЛА
Кандидат медицинских наук Ю. Т. Лошаков
»
Из кафедры коммунальной гигиены Харьковского медицинского института
Широко распространенные в водно-санитарной бактериологии мембранные ультрафильтры находят все же ограниченное применение для определения общего числа бактерий в воде. Это связано с тем, что выращенные на мембранных ультрафильтрах колонии бактерий трудно подсчитать из-за отсутствия контрастности цвета колоний по отношению к белому цвету поверхности ультрафильтров. Предложенные методы проявления колоний с помощью различного рода красителей (А. С. Разумов, Е. Ю..Зуйкова и др.) не намного улучшают дело— окрашиваются не только колонии, но и поверхность фильтра, хотя и менее интенсивно.
В поисках улучшения метода определения общего числа бактерий с применением мембранных ультрафильтров, который бы сохранял все преимущества мембранных ультрафильтров и не имел недостатков прежних метрдик, мы провели исследования с 2, 3, 5-трифенилтетра-золхлоридом (ТТХ).
ТТХ относится к пятичленным гетероциклическим соединениям. Это белый, легко растворимый в воде порошок. Под действием редуцирующих ферментативных систем клеток живых организмов (дегидраз) он переходит в формазан — соединение, имеющее интенсивную темно-красную окраску.
N N
\ \ С6Н5-С Ы-С6Н5+Н2->СвН5-С Ы-СвН5+НС1
II' II
N = Ы—СбН5 N = Ы—СсН5
I I
С1 н
ф
2,3,5-Трифенилтетразолхлорид Формазан
Благодаря этому свойству ТТХ нашел применение и при бактериологических исследованиях.
ТТХ обладает токсичностью, которая в отношении бактерий выражается в остановке их размножения и даже спорообразования. Разные виды бактерий проявляют к нему различную чувствительность [Вунд
(Wundt, 1950)]. Исходя из этого, были предложены такие концентрации ТТХ, которые в отношении некоторых видов бактерий не обладали токсичностью. Это позволило Варди (Vardi, 1955) получить удачные результаты при определении общего числа бактерий на пищевых продуктах; однако приемлемой методики он не предложил.
Данные литературы навели нас на мысль использовать ТТХ для окрашивания колоний, выращенных на мембранных ультрафильтрах, для определения общего числа бактерий в воде. Результаты исследований оказались очень хорошими; это позволило нам рекомендовать применение ТТХ для подсчета общего числа бактерий в воде по следующей методике.
После выращивания колоний на мембранных ультрафильтрах (в качестве питательной среды применяли стандартный мясо-пептонный агар) их осторожно снимают пинцетом с поверхности агара и перекладывают на чашки Петри с вложенной на их дно по размеру чашки фильтровальной бумагой, смоченной 1% водным раствором ТТХ. Необходимо следить, чтобы ультрафильтры плотно прилегали к фильтровальной бумаге. Это обеспечивает равномерное окрашивание колоний по всей площади мембранного ультрафильтра. Окрашивание колоний начинается через несколько секунд и постепенно нарастает. На время окрашивания чашки ставят в термостат на 90 минут при такой же температуре, при которой происходило выращивание колоний. После этого обычным способом с помощью лупы производят подсчет колоний. Колонии имеют ярко-красный цвет на белом фоне мембранного ультрафильтра, причем легко видны ярко-красные точки даже мельчайших колоний, которые при других методах могли быть не замечены. Окрашиваются только колонии, что облегчает их учет и повышает достоверность результатов подсчета.
После подсчета ультрафильтры могут быть высушены и сохранены. Окраска колоний прочна и сохраняется долго, что имеет особенно большое значение в научных исследованиях, когда результат работы необходимо сохранить как документ. Удобство метода может быть оценено и в экспедиционных условиях.
Серии опытов с ТТХ были поставлены при 37° (24 часа) и 20° (48 часов). Результаты получились одинаково хорошими. Описываемый метод можно применить для определения общего числа бактерий не только в водопроводной воде, но и в воде открытых водоемов; нужны только соответствующие разведения ТТХ.
Наши исследования были поставлены с 0,5 и 1% раствором ТТХ. Лучшие результаты — интенсивность и быстрота окрашивания — получены с 1% раствором.
ЛИТЕРАТУРА
Vardi Р., Elelmez. Ip., 1955, т. 9, стр. 380. — W u n d t W., Dtsch. med. Wschr., J950, Bd. 75, S. 1471.
Поступила 23/1 II 1962 r.
ft # -fr
0
ПРИМЕНЕНИЕ СРЕДЫ РДА ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ ОБЪЕКТОВ
МЕТОДОМ СМЫВОВ
I •
Врач-бактериолог В. В. Воробьев (Саратов)
В системе профилактических мероприятий при кишечных инфекциях одним из важных звеньев следует считать систематический лабораторный контроль за санитарным состоянием объектов питания и проведение дезинфекционных мероприятий.
4 Гигиена и санитария, Хг И 49
