CC BY
12
22 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
И.С. Голубева, О.В. Горюнова, Т.Н. Апрышко, ФГБУНИФХЭ РАН, Москва, Россия: Р.Б. Пугачева, Н.П. Яворская ФГБУН ИФАВ РАН, Черноголовка, Московская область, изучение противоопухолевой активности Россия аминокислотных производных введение. Лабильные супрамолекулярные ансамбли ГликоЗидов индолокАрБАЗолА гелеобразователей как низкомолекулярных, так и поли-ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» мерных, выступают в качестве превосходных хозяев для Минздрава России, Москва, Россия внедрения различных гостей, включая наноматериалы. введение. Провели поиск противоопухолевых низко- Краун-содержащие фталоцианины (ФЦ) несут в молекуле молекулярных соединений, опирающийся на возможность 2 потенциально активные медико-биологические структу-компьютерного прогнозирования их биологической актив- ры — макроцикл и краун-фрагменты, присутствие которых ности. на периферии макроцикла обеспечивает растворимость Цель исследования. Оценить перспективность созда- ФЦ в водной среде. Представляемая работа посвящена со-ния производных N-гликозидов индолокарбазола, содер- стоянию ФЦ в микрогетерогенных средах на основе дезок-жащих аминокислотные остатки, как потенциальных про- сихолата натрия (ДХН) — представителя семейства солей тивоопухолевых средств. желчных кислот, образованию с его участием гидрогелей, материалы и методы. Аминокислотные производные включая флуоресцентно-активные. гликозидов индолокарбазола (АПГИК) были синтезиро- Цель исследования. Образование и свойства низко-ваны в лаборатории химического синтеза ФГБУ «НМИЦ молекулярных гидрогелей на основе ДХН с участием онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Иссле- окта[(4'-бензо-15-краун-5)-окси]фталоцианината магния дования проведены на модели рака шейки матки РШМ5. (Mgcr8Pc) в качестве активного компонента, в том числе В опытах использованы мыши-самки CBA/Lac с массой состояние Mgcr8Pc и высвобождение его из геля. тела 18—22 г. Критериями эффективности служили тормо- материалы и методы. Изучение поведения Mgcr8Pc жение роста опухоли (ТРО, %) и увеличение продолжи- в микрогетерогенных средах на основе ДХН проводили тельности жизни (УПЖ, %) опытных мышей по сравнению в водном растворе или в фосфатном буфере с использова-с нелеченым контролем. нием электронной и флуоресцентной спектроскопии. При результаты. Показано, что в соответствии с компью- формировании геля с введенным ФЦ использовали прямой терным прогнозом с использованием программы PASS (смешение компонентов) или диффузный метод. вероятность цитотоксической активности для соединений результаты. Данные абсорбционной спектроскопии АПГИК не превышала 30 %. В результате изучения их in vitro о преимущественно мономерном состоянии Mgcr8Pc в мина клетках опухолей человека соединения не обнаружили целлярных растворах ДХН в присутствии NaCl подтвер-цитотоксическую активность, что подтвердилось значени- ждаются результатами флуоресцентной спектроскопии. ем индекса IC50 >10-5 М, полученным для всех изученных Показано образование супрамолекулярных гидрогелей на производных этого ряда. При этом соединения АПГИК основе ДХН с включением Mgcr8Pc в качестве активного проявили противоопухолевую активность in vivo, о вероят- компонента. Гели формируются при значениях рН и ион-ности до 75 % которой указывал прогноз на основе ком- ной силы, близких к физиологическим. При внешнем пьютерного анализа. Из 19 соединений АПГИК, объеди- воздействии — плавлении геля или ослаблении его силы ненных в 7 групп по строению боковых цепей аминокислот, в присутствии некоторых аминокислот — ФЦ переходит 11 проявили противоопухолевую активность без гибели в раствор в состоянии мицеллосвязанного мономера. От-мышей с 50—93 % ТРО. После окончания лечения у 2 АПГИК сутствие рефлексов кристаллического ДХН на рентгено-ТРО сохранялось на уровне 50—67 % до 16-го дня, у 3 — граммах ксерогелей Mgcr8Pс/ДХН/NaQ согласуется с фор-до 21-го дня наблюдения с ТРО 59—61 %, у 1 — до 25-го дня мированием геля. Волокна (структурная единица геля) с ТРО 54 % и у 2 — с ТРО 52—65 % до 29-го дня наблюдения. состоят из стержневидных агрегатов микрометровой длины УПЖ составляло 16—25 %. и шириной 100—200 нм. На основании результатов флуо-Заключение. Подтверждена предсказанная с использо- ресцентной микроскопии сделан вывод о состоянии ванием программы PASS противоопухолевая активность Mgcr^ в гелях и ксерогелях в форме супрамолекулярных АПГИК в опытах in vivo на мышах с РШМ5 с отбором 5 ли- агрегатов мономера ФЦ с ДХН/NaCl. дерных соединений. На основании полученных данных Заключение. Показано образование супрамолекуляр-необходимо отобрать 1—2 соединения для углубленного ных гидрогелей на основе природных поверхностно-ак-изучения. тивных веществ (солей желчных кислот) с включением модельного соединения — окта[(4'-бензо-15-краун-5)-окси] Н.Ф. Гольдшлегер1, М.А. Лапшина1, А.М. Колесникова1, фталоцианината магния в качестве активного компо-Н.Н. Дремова1, В.Е. Баулин2-3, А.Ю. Цивадзе2 нента. краун-содержащие фталоцианины Работа выполнена по теме гос. задания ФАНО как компоненты низкомолекулярных (№ 0089-20-14-0036) и поддержана Программой гидрогелей НА основе СолЕй ЖЕлчНыХ фундаментальных научных исследований кислот: СвойСтвА, молекулярное Президиума РАН № 34. состояние и высвобождение из геля ФГБУН ИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область, Россия:
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 23
Н.Я. Гридина, А.Н. Морозов, В.Д. Розуменко, ЛБ от УАКК при всех разведениях верапамила гидрохло-Н.Г. Драгунцова, О.И. Веселова рида. При больших разведениях (физиологических кон-ОБОСНОВАНИЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ центрациях) верапамила лимфопролиферативная функция К ПРИМЕНЕНИЮ ИММУНОТЕРАПИИ ЛБ остается повышенной на фоне снижения УАКК. Эти ПРИ ЛЕЧЕНИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИМИ ДОЗАМИ результаты могут свидетельствовать об умеренном имму-ВЕРАПАМИЛА ГИДРОХЛОРИДА, ностимулирующем действии верапамила. ПОДАВЛЯЮЩИМИ АКТИВНОСТЬ Заключение. В работе проведено обоснование для про-NMDA-РЕЦЕПТОРОВ И ПРОЯВЛЕНИЯ ведения патогенетического лечения пациентов с глиобла-ОПУХОЛЬАССОЦИИРОВАННОГО ВОСПАЛЕНИЯ стомами в послеоперационном периоде с помощью блока-У ПАЦИЕНТОВ С ГЛИОБЛАСТОМАМИ тора кальциевых каналов верапамила гидрохлорида без Институт нейрохирургии им. акад. А.П. Ромоданова комбинации с методами искусственной иммуностимуля-НАМНУкраины, Киев, Украина ции, так как верапамила гидрохлорид обладает патогене-Введение. Глиобластомы, наиболее злокачественные тически обоснованным иммуностимулирующим механиз-внутримозговые опухоли, ограничивают продолжитель- мом, связанным с УАКК. ность жизни пациентов в послеоперационном периоде до 1—2 лет. Наряду с традиционными эмпирическими ме- И.А. Гринева12, А.А. Балакина2, Т.С. Ступина2, тодами лечения глиобластом появляются новые, патогене- Б.С. Федоров2, А.А. Терентьев2 3 тически обоснованные методы лечения, одним из которых МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ является метод, основанный на торможении проявле- ЦИТОТОКСИЧНОСТИ КОМПЛЕКСА ПЛАТИНЫ (IV) ний опухольассоциированного воспаления (ОАВ), которое С ЛИГАНДАМИ — ПРОИЗВОДНЫМИ в послеоперационном периоде способствует появлению ИЗОНИКОТИНОВОЙ КИСЛОТЫ рецидивов глиобластом в течение 1-го года после опера- 1МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; ции. Верапамил является блокатором кальциевых каналов 2ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область, и обладает противовоспалительным и противоопухолевым Россия; действием, подавляя активность NMDA-рецепторов и сни- 3МГОУ, Москва, Россия жая уровень агрегации клеток крови (УАКК — II стадия Введение. Комплексы на основе платины (II) широко воспаления) в определенном интервале концентраций. используются в лечении опухолевых заболеваний. Одним Однако применение препарата в клинических условиях из основных недостатков препаратов платиновой группы проводится на фоне других лечебных мероприятий, на- является высокая токсичность для нормальных клеток значаемых пациентам в послеоперационном периоде. Со- организма человека. Преимущество комплексов платины четание лечения верапамила гидрохлоридом с химио- (IV) перед комплексами платины (II) заключается в том, препаратами способствует преодолению резистентности что они обладают не только высокой активностью, глиобластом к этим препаратам, что известно из источни- но и пониженной токсичностью. В ходе работы был по-ков литературы. В то же время совместное назначение ве- лучен и исследован новый комплекс платины (IV) ИНК-2, рапамила гидрохлорида с мероприятиями по проведению включающий лиганды — производные изоникотиновой иммунотерапии пациентов с глиобластомами вызывает кислоты. некоторые сомнения в их обоснованности. Цель исследования. Изучение механизма действия Цель исследования. Исследование влияния различных комплекса платины (IV) ИНК-2 на опухолевые клетки раз-концентраций верапамила гидрохлорида на пролифератив- личного происхождения. ную активность лимфоцитов периферической крови в те- Материалы и методы. В работе использовали комплекс сте РБТЛ (реакция бласттрансформации) и УАКК у паци- платины (IV) с лигандами — производными изоникотино-ентов с глиобластомами. вой кислоты (ИНК-2). Эксперименты проводили на кле-Материалы и методы. Исследовали кровь у 53 пациен- точных линиях HepG2 (гепатоклеточная карцинома чело-тов с глиобластомами на 7-8-е сутки после операции с до- века), Caco2 (аденокарцинома прямой кишки человека), бавлением гепарина, который, как известно, не влияет A-172 (глиобластома человека), PANC-1 (аденокарцинома на агрегацию клеток крови. К образцам клеток крови протоков поджелудочной железы человека), HeLa (адено-по 200 мл в объеме добавляли по 20 мл 0,25 % раствора карцинома шейки матки человека). Цитотоксичность со-верапамила гидрохлорида («Фармак») в разведениях от 10 единения определяли после 24 и 72 ч действия по методу до 100 000 раз. Проводили реакцию РБТЛ общеприня- МТТ-теста. Профиль клеточного цикла изучали методом тым методом с добавлением раствора ФГА (фитогемаг- проточной цитофлуориметрии. Уровень экспрессии генов глютинин, Sigma). УАКК после добавления разведений p21,14-3-3,pcna, noxa и sod2определяли методом ПЦР в ре-верапамила гидрохлорида определяли на биосенсоре жиме реального времени с использованием реакционной «Плазмон». Сопоставляли количество лимфобластов (ЛБ) смеси qPCRmix-HS SYBR (Евроген, Россия) после 12 ч с показателями УАКК методом стандартизации получен- действия комплекса в дозе IC50. Иллюстрации клеток, по-ных данных. гибших путем апоптоза, были сделаны в флуоресцентном Результаты. Увеличение количества ЛБ при повыше- и проходящем свете на микроскопе, предварительно за-нии УАКК под влиянием разведения верапамила в 10 раз фиксированные клетки были обработаны красителем может свидетельствовать об отсутствии иммуносупрессии DAPI. Накопление активных форм кислорода определяли при глиобластомах. Отмечается зависимость количества с использованием красителя DCFDA. Для изучения
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
