CC BY
10
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 23
Н.Я. Гридина, А.Н. Морозов, В.Д. Розуменко, ЛБ от УАКК при всех разведениях верапамила гидрохло-Н.Г. Драгунцова, О.И. Веселова рида. При больших разведениях (физиологических кон-ОБОСНОВАНИЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ центрациях) верапамила лимфопролиферативная функция К ПРИМЕНЕНИЮ ИММУНОТЕРАПИИ ЛБ остается повышенной на фоне снижения УАКК. Эти ПРИ ЛЕЧЕНИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИМИ ДОЗАМИ результаты могут свидетельствовать об умеренном имму-ВЕРАПАМИЛА ГИДРОХЛОРИДА, ностимулирующем действии верапамила. ПОДАВЛЯЮЩИМИ АКТИВНОСТЬ Заключение. В работе проведено обоснование для про-NMDA-РЕЦЕПТОРОВ И ПРОЯВЛЕНИЯ ведения патогенетического лечения пациентов с глиобла-ОПУХОЛЬАССОЦИИРОВАННОГО ВОСПАЛЕНИЯ стомами в послеоперационном периоде с помощью блока-У ПАЦИЕНТОВ С ГЛИОБЛАСТОМАМИ тора кальциевых каналов верапамила гидрохлорида без Институт нейрохирургии им. акад. А.П. Ромоданова комбинации с методами искусственной иммуностимуля-НАМНУкраины, Киев, Украина ции, так как верапамила гидрохлорид обладает патогене-Введение. Глиобластомы, наиболее злокачественные тически обоснованным иммуностимулирующим механиз-внутримозговые опухоли, ограничивают продолжитель- мом, связанным с УАКК. ность жизни пациентов в послеоперационном периоде до 1—2 лет. Наряду с традиционными эмпирическими ме- И.А. Гринева12, А.А. Балакина2, Т.С. Ступина2, тодами лечения глиобластом появляются новые, патогене- Б.С. Федоров2, А.А. Терентьев2 3 тически обоснованные методы лечения, одним из которых МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ является метод, основанный на торможении проявле- ЦИТОТОКСИЧНОСТИ КОМПЛЕКСА ПЛАТИНЫ (IV) ний опухольассоциированного воспаления (ОАВ), которое С ЛИГАНДАМИ — ПРОИЗВОДНЫМИ в послеоперационном периоде способствует появлению ИЗОНИКОТИНОВОЙ КИСЛОТЫ рецидивов глиобластом в течение 1-го года после опера- 1МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; ции. Верапамил является блокатором кальциевых каналов 2ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область, и обладает противовоспалительным и противоопухолевым Россия; действием, подавляя активность NMDA-рецепторов и сни- 3МГОУ, Москва, Россия жая уровень агрегации клеток крови (УАКК — II стадия Введение. Комплексы на основе платины (II) широко воспаления) в определенном интервале концентраций. используются в лечении опухолевых заболеваний. Одним Однако применение препарата в клинических условиях из основных недостатков препаратов платиновой группы проводится на фоне других лечебных мероприятий, на- является высокая токсичность для нормальных клеток значаемых пациентам в послеоперационном периоде. Со- организма человека. Преимущество комплексов платины четание лечения верапамила гидрохлоридом с химио- (IV) перед комплексами платины (II) заключается в том, препаратами способствует преодолению резистентности что они обладают не только высокой активностью, глиобластом к этим препаратам, что известно из источни- но и пониженной токсичностью. В ходе работы был по-ков литературы. В то же время совместное назначение ве- лучен и исследован новый комплекс платины (IV) ИНК-2, рапамила гидрохлорида с мероприятиями по проведению включающий лиганды — производные изоникотиновой иммунотерапии пациентов с глиобластомами вызывает кислоты. некоторые сомнения в их обоснованности. Цель исследования. Изучение механизма действия Цель исследования. Исследование влияния различных комплекса платины (IV) ИНК-2 на опухолевые клетки раз-концентраций верапамила гидрохлорида на пролифератив- личного происхождения. ную активность лимфоцитов периферической крови в те- Материалы и методы. В работе использовали комплекс сте РБТЛ (реакция бласттрансформации) и УАКК у паци- платины (IV) с лигандами — производными изоникотино-ентов с глиобластомами. вой кислоты (ИНК-2). Эксперименты проводили на кле-Материалы и методы. Исследовали кровь у 53 пациен- точных линиях HepG2 (гепатоклеточная карцинома чело-тов с глиобластомами на 7-8-е сутки после операции с до- века), Caco2 (аденокарцинома прямой кишки человека), бавлением гепарина, который, как известно, не влияет A-172 (глиобластома человека), PANC-1 (аденокарцинома на агрегацию клеток крови. К образцам клеток крови протоков поджелудочной железы человека), HeLa (адено-по 200 мл в объеме добавляли по 20 мл 0,25 % раствора карцинома шейки матки человека). Цитотоксичность со-верапамила гидрохлорида («Фармак») в разведениях от 10 единения определяли после 24 и 72 ч действия по методу до 100 000 раз. Проводили реакцию РБТЛ общеприня- МТТ-теста. Профиль клеточного цикла изучали методом тым методом с добавлением раствора ФГА (фитогемаг- проточной цитофлуориметрии. Уровень экспрессии генов глютинин, Sigma). УАКК после добавления разведений p21,14-3-3,pcna, noxa и sod2определяли методом ПЦР в ре-верапамила гидрохлорида определяли на биосенсоре жиме реального времени с использованием реакционной «Плазмон». Сопоставляли количество лимфобластов (ЛБ) смеси qPCRmix-HS SYBR (Евроген, Россия) после 12 ч с показателями УАКК методом стандартизации получен- действия комплекса в дозе IC50. Иллюстрации клеток, по-ных данных. гибших путем апоптоза, были сделаны в флуоресцентном Результаты. Увеличение количества ЛБ при повыше- и проходящем свете на микроскопе, предварительно за-нии УАКК под влиянием разведения верапамила в 10 раз фиксированные клетки были обработаны красителем может свидетельствовать об отсутствии иммуносупрессии DAPI. Накопление активных форм кислорода определяли при глиобластомах. Отмечается зависимость количества с использованием красителя DCFDA. Для изучения
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
