CC BY
18
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
25
ционного фактора) проводили в культуре клеток крови после 72 ч культивирования в тесте РБТЛ с ФГА и верапамилом (разведения исходного препарата в 1000 и 10000 раз).
Результаты. Повышенная экспрессия гена Snail отмечена как у пациентов с глиомами, так и у 2 пациентов с кровоизлиянием в головной мозг. У здоровых людей экспрессия гена Snail не обнаружена. Под действием верапа-мила в разведении в 1000 и 10000 раз экспрессия гена Snail в мезенхимальных клетках крови была подавлена. Более эффективно экспрессию гена Snail подавлял верапамил в разведении в 10000 раз по сравнению с разведением в 1000 раз. При разведении верапамила в 10000 раз экспрессия гена Snail подавлялась в 2 раза сильнее по отношению к контрольному показателю.
Заключение. Полученные в эксперименте данные свидетельствуют о том, что верапамил является вероятным протектором индукции ЭМП, подавляя экспрессию гена Snail — ключевого индуктора ЭМП. Можно предположить, что у пациентов с глиомами превращение лимфоцитов в лимфобласты сопровождается повышением активности экспрессии гена Snail. Это может быть следствием особенностей опухоль-ассоциированного воспаления при глиомах головного мозга, когда III стадия воспаления имеет незавершенный характер по типу «незаживающей раны». В результате этого процессы репарации за счет воспаления переходят в процессы регенерации посредством механизмов ЭМП и сопровождаются репрограммированием муль-ти- и плюрипотентных клеток, которые в дальнейшем становятся источником продолженного роста глиом.
М.А. Грин1, Н.В. Суворов1, П.В. Островерхов1, М.А. Каплан2, А.Г. Мажуга34, А.Ф. Миронов1 РАЗРАБОТКА ТАРГЕТНЫХ НАНОСТРУКТУРИРОВАННЫХ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОВ НА ОСНОВЕ БАКТЕРИОХЛОРОФИЛЛА А ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ РАКА Московский технологический университет, Москва, Россия;
2Медицинский радиологический научный центр им. А.Ф. Цыба — филиал ФГБУ«ФМИЦим. П.А. Герцена» Минздрава России, Обнинск, Калужская обл., Россия; 3МГУ им. М.В. Ломоносова, химический факультет, Москва, Россия;
4Национальный исследовательский технологический университет «МИСиС», лаборатория биомедицинских наноматериалов, Москва, Россия
Введение. Повышение результативности фотодинамической терапии (ФДТ) в онкологии непосредственно связано с увеличением селективности накопления фотосенсибилизаторов (ФС) в опухолевой ткани. В настоящей работе рассмотрены два возможных подхода к таргетной доставке пигментов в опухоль.
Цель исследования — разработать способы получения наноструктурированных ФС с векторными молекулами, реализующими повышенное накопление в опухоли и, как следствие, фотодинамическую эффективность.
Материалы и методы. В качестве ключевого соединения взят дипропоксибактериопурпуринимид (дипропокси-
БПИ), метиловый эфир которого обладает высокой стабильностью, поглощает в области 800 нм и, как показали эксперименты на животных, проявляет высокую фотоин-дуцированную активность. Для активного таргетинга ФС в опухоль при раке предстательной железы (РПЖ) получен конъюгат с векторным пептидом на простатический специфический мембранный антиген (PSMA), сверхэкспрес-сированный на быстропролиферирующих клетках РПЖ. Для пассивного таргетинга ФС в опухоль были получены наночастицы золота, ковалентно связанные с N-амино-БПИ ( max = 830 нм) за счет остатка липоевой кислоты, а также наночастицы золота и магнетита, покрытые плю-роником (Pluronic F127), с нековалентно иммобилизованными дипропоксибактериопурпуринимидами в виде кислоты и ее метилового эфира.
Результаты. Наноструктурированные ФС представляют собой сферы с гидродинамическим диаметром не более 100 нм, поглощают свет в области 795 нм и интенсивно флуоресцируют при 803 нм, что подтверждает наличие мономерной формы пигмента на поверхности наночастиц.
Селективность накопления полученных ФС была исследована на клетках опухолей различного генеза и живот-ных-опухоленосителях.
Заключение. Получены наноструктурированные ФС путем ковалентной и нековалентной иммобилизации пигментов на наночастицы золота и магнетита. Присоединение векторной молекулы на периферию хлоринового макроцикла реализует таргетную доставку пигмента в зону интереса.
Работа выполнена при финансовой поддержке РНФ (грант № 16-13-10092) и РФФИ (грант ОФИ-м № 15-29-01150).
И.А. Гринева12, А.А. Балакина2, Т.С. Ступина2, Б.С. Федоров2, А.А. Терентьев12 ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ КОМПЛЕКСА ПЛАТИНЫ (IV) С ЛИГАНДАМИ - ПРОИЗВОДНЫМИ ИЗОНИКОТИНОВОЙ КИСЛОТЫ МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; 2ФГБУНИнститут проблем химической физики РАН, Черноголовка, Московская область, Россия
Введение. Комплексы на основе платины (II) широко используются в качестве химиотерапевтических агентов. Основным недостатком препаратов платиновой группы является высокая токсичность для нормальных клеток организма человека. Комплексы на основе платины (ГУ) — перспективные противоопухолевые соединения, поскольку обладают не только высокой активностью, но и пониженной токсичностью. В ходе работы получен и исследован новый комплекс платины (IV), включающий лиганды — производные изоникотиновой кислоты (ИНК-2).
Цель исследования — изучить влияние комплекса платины (IV) с ИНК-2 на опухолевые клетки различного происхождения.
Материалы и методы. В работе использовали комплекс платины (ГУ) с лигандами — ИНК-2. Эксперименты проводили на клеточных линиях HepG2 (гепатоклеточная карцинома человека), Caco2 (аденокарцинома прямой кишки
Спецвыпуск/ том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
26 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
человека), А-172 (глиобластома человека), РАЫС-1 (аде- конденсация протекает при использовании метода смешан-нокарцинома протоков поджелудочной железы человека), ных ангидридов. Поскольку исходные ^ациламинокислоты HeLa (аденокарцинома шейки матки человека). Цитоток- на основе карборана имеют в своей структуре хиральную сичность соединения определяли после 24 и 72 ч действия плоскость, дипептиды на их основе представляют собой по методу МТТ-теста. Профиль клеточного цикла изучали смеси диастереомеров. Нами разработаны методы анализа методом проточной цитофлуориметрии. Уровень экспрес- и разделения диастереомерных борсодержащих пептидов, сии генов р21, 14-3-3, репа, поха и sod2 определяли методом в каждом случае получены индивидуальные стереоизомеры ПЦР в режиме реального времени с использованием реак- ^е > 95 % по данным ВЭЖХ и спектроскопии ЯМР). ционной смеси qPCRmix-HS SYBR (Евроген, Россия) по- Расщепление трет-бутиловых эфиров под действием сле 12 ч действия комплекса в дозе 1С50. трифторуксусной кислоты позволило получить карбора-Результаты. Показано, что комплекс ИНК-2 обладает нил-дипептиды со свободной карбоксильной группой. токсичностью для опухолевых клеток всех изученных ли- Карборансодержащие #-ациламинокислоты получены ний. Наибольшую цитотоксичность исследуемый ком- в диастереомерно чистом виде ^е > 95 %). Абсолютная плекс проявил на линии А-172 (87 мкМ), а наименьшую — конфигурация всех полученных соединений определена на клетках линии РАЫС-1 (189 мкМ). Анализ клеточного методом рентгеноструктурного анализа. цикла при действии комплекса ИНК-2 выявил существен- Результаты. Синтезирован ряд новых С- и ^защищенных ное снижение количества клеток в фазах G1 и G2/М, а так- псевдо-дипептидов на основе планарно-хиральной борсодер-же накопление клеток в области subG1, что говорит об ин- жащей аминокислоты. Проведен кислотный гидролиз трет-дукции клеточной гибели. В клетках А-172 комплекс бутиловых эфиров карборанил-дипептидов. Исследованы ИНК-2 вызывает значительную активацию экспрессии возможности получения индивидуальных стереоизомеров гена остановки клеточного цикла р21 и проапоптотическо- пептидов, имеющих в структуре остаток карборана. го гена поха. Заключение. Полученные соединения представляют Заключение. Показано, что комплекс платины (IV) интерес в качестве потенциальных агентов для БНЗТ, а такс лигандами — производными ИНК-2 — оказывает цито- же полупродуктов в синтезе опухолетропных карборансо-токсическое действие на опухолевые клетки разных типов; держащих олигопептидов. самая высокая токсичность показана для клеток глиобла- Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ стомы А-172. Цитотоксическое действие комплекса ИНК- (грант 16-33-60122). 2 на клетки А-172 сопровождается выраженным изменением клеточного цикла и экспрессии генов, участвующих Д.А. Груздев1, Г.Л. Левит1, В.А. Ольшевская2, В.П. Краснов1 в регуляции пролиферации и клеточной гибели. СИНТЕЗ НОВЫХ БОРСОДЕРЖАЩИХ ПРОИЗВОДНЫХ (Л) - ГЛУТАМИНА И (Л) -Д.А. Груздев1. В.О. Устинова1. А.Ю. Вигоров1, Г.Л. Левит1, АСПАРАГИНА КАК ОСНОВА ДЛЯ СОЗДАНИЯ НОВЫХ В.А. Ольшевская2, В. П. Краснов1 АГЕНТОВ ДЛЯ БНЗТ ОПУХОЛЕЙ ПОЛУЧЕНИЕ КАРБОРАНСОДЕРЖАЩИХ ПСЕВДО- Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского ДИПЕПТИДОВ НА ОСНОВЕ ПРИРОДНЫХ УрО РАН, Екатеринбург, Россия; АМИНОКИСЛОТ, НОВЫХ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ 2Институт элементоорганических соединений им. А.Н. НеАГЕНТОВ ДЛЯ БОР-НЕЙТОРОНОЗАХВАТНОЙ смеянова РАН, Москва, Россия ТЕРАПИИ ОПУХОЛЕЙ Введение. Бор-нейтронозахватная терапия (БНЗТ) — 1Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского важный современный подход к лечению онкологических УрО РАН, Екатеринбург, Россия; заболеваний. Метод предусматривает комбинированное 2Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Не- использование борсодержащих химических агентов и об-смеянова РАН, Москва, Россия лучение тепловыми нейтронами. Производные биомоле-Введение. Производные 1,2-дикарба-клозо-додекабора- кул, содержащие фрагменты 1,2-дикарба-клозо-додекабо-нов (карборанов) представляют интерес в качестве агентов ранов (карборанов), привлекают к себе пристальное для бор-нейторонозахватной терапии (БНЗТ) опухолей. внимание в связи с поиском эффективных агентов для БН-Важным путем оптимизации агентов для БНЗТ является ЗТ. Известно, что клетки злокачественных новообразова-введение в их структуру фрагментов природных аминокис- ний активно утилизируют аминокислоты и соединения лот. Известно, что транспорт и биологическая активность на их основе. Производные полифункциональных амино-хиральных соединений существенно зависят от их про- кислот, содержащие фрагмент карборана в боковой цепи странственной конфигурации и оптической чистоты. и имеющие свободные карбоксильную и аминогруппы Цель исследования — разработать методы получения в альфа-положении, являются привлекательными соеди-дипептидов на основе природных (5) — аминокислот и пла- нениями с точки зрения доставки бора внутрь опухолевых нарно-хиральных (3-ациламино-1,2-дикарба-клозо-до- клеток. декаборан-1-ил) уксусных кислот. Цель исследования — получить производные (5) — глу-Материалы и методы. Защищенные псевдо-дипептиды таминовой и (5) — аспарагиновой кислот со свободными получены исходя из трет-бутиловых, метиловых и 1-ада- функциональными группами в альфа-положении, содер-мантиловых эфиров (5) — аминокислот (валина, фенилала- жащих остаток карборана в боковой цепи. нина и др.) и рацемических карборансодержащих #-ацил- Материалы и методы. Трет-бутиловые эфиры N-трет-аминокислот. Показано, что с наибольшим выходом бутоксикарбонил (Вое) — (5) — глутамина и Вое- (5) —
Спецвыпуск / том 16 / 2017 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
