CC BY
29
удк 615.2:004.057:661.743.2
doi 10.30914/2411 -9687-2020-6-3-280-286
Обоснование разработки нового метаболического средства
О. А. Грачева1, Ф. А. Медетханов1, И. Г. Галимзянов1,
? 2 Д. М. Мухутдинова , С. Ю. Смоленцев
1 Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана, г. Казань, Россия 2 Марийский государственный университет, г. Йошкар-Ола, Россия
Аннотация. Применение комбинированных лекарственных средств усиливает органопротекцию, поскольку при воздействии на органы-мишени наблюдается взаимодополняющий эффект из-за наличия физиологического и фармакологического синергизма между препаратами разных классов. Основной задачей любой фармацевтической разработки является получение качественного, эффективного и безопасного препарата. При проведении фармацевтической разработки фармакологических препаратов в ходе исследований по разработке состава и предшествующих им исследований необходимо тщательно изучить три важных взаимосвязанных аспекта, а именно: вопросы стабилизации, совместимости и биологической активности. В данной публикации рассмотрены перспективы фармацевтического создания новой комбинированной формы в виде водного раствора, включающего в своем составе 1 % янтарной кислоты, 10 % бутафосфа-на. Препарат разработан для орального и парентерального введения. Для инъекционного использования в состав средства включен водный раствор новокаина в 0,5 % концентрации для снятия болевой реакции. Данных по использованию бутафосфана и янтарной кислоты в одной лекарственной форме в литературе нет. Действующие компоненты способны стимулировать энергетический обмен, снижать повреждающий эффект гипоксии и окислительного стресса. Для выбора необходимых условий при разработке технологии получения раствора были изучены химические свойства, стабильность и совместимость данных фармацевтических субстанций. Идентификация химических веществ в растворах и смеси двух ингредиентов производили методом масс-спектрометрии с ионизацией электроспреем. Показано, что субстанции янтарной кислоты и бутафосфана не взаимодействуют между собой и новокаином, позволяя получить комбинированное лекарственное средство. Отмечена стабильность полученного раствора через 12 месяцев хранения в защищенном от света месте при температуре +5±2 °С.
Ключевые слова: совместимость, стабильность, янтарная кислота, бутафосфан, новокаин, раствор
Для цитирования: Грачева ОА., Медетханов ФА., Галимзянов И.Г., Мухутдинова Д.М., Смоленцев С.Ю. Обоснование разработки нового метаболического средства // Вестник Марийского государственного университета. Серия «Сельскохозяйственные науки. Экономические науки». 2020. Т. 6. № 3. С. 280-286. DOI 10.30914/2411-9687-2020-6-3-280-286
Substantiation of a new metabolic drug development
1 11 O. A. Gracheva , F. A. Medetkhanov, I. G. Galimzyanov ,
D. M. Mukhutdinova1, S. Yu. Smolentsev2
1 Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman, Kazan, Russia 2 Mari State University, Yoshkar-Ola, Russia
Abstract. The use of combined drugs enhances organ protection, since when exposed to target organs, a complementary effect is observed due to the presence of physiological and pharmacological synergism between drugs of different classes. The main objective of any pharmaceutical development is to obtain a high-quality, effective and safe drug. When carrying out the pharmaceutical development of pharmacological preparations, during composition development studies and previous studies, it is necessary to carefully study three important interrelated aspects, namely: stabilization, compatibility and biological activity. This publication discusses the prospects for the pharmaceutical development of a new combined drug in the form of aqueous solution, containing 1 % succinic acid and 10 % butafosfan. The drug is designed for oral and parenteral administration. For injection use, an aqueous solution of novocaine in a 0.5 % concentration is included in the composition to relieve pain. There are no data on the use of butafosfan and succinic acid in one dosage form in the literature. The active ingredients are able to stimulate energy metabolism, reduce the damaging effect of hypoxia and oxidative stress, thereby the combination has greater pharmacological activity. To select the necessary conditions
when developing the technology for producing the solution, the chemical properties, stability, and compatibility of these pharmaceutical substances were studied. The identification of chemicals in solutions and a mixture of the two ingredients was carried out by mass spectrometry with electrospray ionization. It was shown that the substances of succinic acid and butafosfan do not interact with each other and with novocaine, making it possible to obtain a combined drug. The stability of the resulting solution was noted after 12 months of storage in a dark place at a temperature of +5±2 °C.
Keywords: compatibility, stability, succinic acid, butafosfan, novocaine, solution
For citation: Gracheva O.A., Medetkhanov F.A., Galimzyanov I.G., Mukhutdinova D.M., Smolentsev S.Yu.. Substantiation of a new metabolic drug development. Vestnik of the Mari State University. Chapter "Agriculture. Economics". 2020, vol. 6, no. 3, pp. 280-286. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.30914/2411-9687-2020-6-3-280-286
Введение
Современное лечение любой патологии включает комбинацию двух и более препаратов в хорошо переносимых дозах. Применение комбинированных лекарственных средств усиливает органопротекцию, поскольку при воздействии на органы-мишени наблюдается взаимодополняющий эффект из-за наличия физиологического и фармакологического синергизма между препаратами разных классов [1; 2; 3]. Основной задачей любой фармацевтической разработки является получение качественного, эффективного и безопасного препарата, поэтому одним из обязательных этапов исследований является идентификация и изучение физико-химических свойств действующего вещества, оценка совместимости действующего вещества со вспомогательными веществами, а в случае комбинированных лекарственных средств - и совместимости действующих веществ между собой [4; 5; 6].
Цель данной работы - исследование химической совместимости двух фармацевтических субстанций в одной лекарственной форме и с вспомогательными веществами. Разрабатываемая лекарственная форма - раствор, содержащий два активных фармацевтических ингредиента: янтарную кислоту и бутафосфан [7]. Данных по использованию бутафосфана и янтарной кислоты в одной лекарственной форме в литературе нет.
Материалы и методы
Основными этапами изучения химической совместимости янтарной кислоты и бутафосфана в одной лекарственной форме являлось исследование химической совместимости двух субстанций
(как совместно, так и вместе с вспомогательными веществами) в виде модельных растворов.
Бутафосфан (1-бутиламино-1-метил) - органическое соединение фосфора. Химическое название -этилфосфоновая кислота. Бутафосфан по своим фармакологическим свойствам относится к стимуляторам метаболических процессов в организме [8].
Янтарная кислота (бутандиовая кислота, этан-1,2-дикарбоновая кислота) представляет собой дикарбоновую кислоту, состоящую из четырех атомов углерода и встречающуюся в растительных и животных тканях. В лекарственных препаратах янтарная кислота применяется в качестве активного вещества как средство, улучшающее метаболизм и энергообеспечение тканей, уменьшающее гипоксию тканей [9; 10; 11].
Первый экспериментальный этап изучения совместимости комбинированного лекарственного препарата заключался в мониторинге образования идентифицированных растворов исследуемых субстанций и, возможно, новых (неидентифицирован-ных) веществ, образующихся при их нахождении в комбинированной лекарственной форме.
Идентификация химических веществ в растворах и смеси двух ингредиентов производили методом масс-спектрометрии с ионизацией электроспреем (ESI-MS-анализ) на приборе AmazonX (фирмы BrukerDaltonikGmbH, Germany) [12; 13]. В качестве осушающего газа в источнике применен азот с температурой 220 °С. Напряжение на источнике составляло 4,5 кВ. Ввод образца осуществлялся при помощи автосемплера жидкостного хроматографа Agilent 1260 Infinity (Agilent Technologies, USA). В качестве элюента использовали изопропанол и воду в соотношении 50:50, скорость потока элюента регистрировали в режиме отрицательно заряженных частиц.
Результаты
Были приготовлены маточные растворы бута-фосфана и янтарной кислоты в деионизированной воде с концентрацией 1 мг/мл. Образцы хорошо растворились, без осадка. Затем растворы центрифугировались в течение 5 минут при 14 тыс. об/мин. для осаждения микропримесей и твердых частиц. Маточные растворы разбавлялись перед регистрацией спектров до концентрации 20 мкг/мл. Были получены чистые спектры бутафосфана (рис. 1) и янтарной кислоты (рис. 2) в режиме регистрации отрицательно заряженных частиц.
В масс-спектре ESI-MS (рис. 3) пики m/z 178 и 357 относятся к ионам [M-H]- и ßM-Нрбута-фосфана. Высокая интенсивность пики m/z 178 делает его предпочтительным при анализе этого вещества в различных смесях.
В масс-спектре ESI-MS (рис. 1) пики m/z 117 и 235 относятся к ионам [M-H]- и [2M-H]-, следовательно, эти пики являются аналитическими при
Intens. x106 8-
определении янтарной кислоты. Высокая интенсивность пики m/z 117 делает его предпочтительным при анализе этого вещества в различных смесях.
Далее, для определения химической совместимости была приготовлена смесь из маточных растворов 10 % бутафосфана и 1 % янтарной кислоты в 1 мл деионизированной воды. Смесь перемешивали на шейкере 1 минуту и центрифугировали 5 минут при 14 тыс. об/мин. Таким образом, был получен чистый спектр смеси бутафосфана и янтарной кислоты.
Анализ масс-спектра смеси бутафосфана, янтарной кислоты и новокаина (рис. 3) указывает, что не происходит взаимодействия между компонентами смеси. В масс-спектре отсутствуют пики с другими значениями m/z. Пики ионов m/z 117 и m/z 178 относятся к аналитическим пикам молекул янтарной кислоты и бутафосфана соответственно. Соотношение интенсивностей этих пиков отражает их концентрацию в этой смеси.
Inten: x1C
—г
200 300 400 500 600 700 800 m/z
Рис. 1. ESI-MS анализ раствора бутафосфана / Fig. 1. ESI-MS analysis of butafosfan solution
1-
6CC
-1-
7CC
0
100 200 300 400 500 600 700 m/z
Рис. 2. ESI-MS анализ раствора янтарной кислоты / Fig. 2. ESI-MS analysis of succinic acid solution
6-
4-
2-
C
3
2
1
Рис. 3. ESI-MS анализ смеси растворов 10 % бутафосфана, 1 % янтарной кислоты и 0,5 % новокаина / Fig. 3. ESI-MS analysis of a mixture of solutions of 10 % butafosfan, 1 % succinic acid and 0.5 % novocaine
Аналогично был приготовлен раствор 0,5 % новокаина в деионизированной воде. В масс-спектре этой пробы ESI-MS в режиме отрицательно заряженных частиц не наблюдалось пика m/z 235 иона [M-H]- новокаина. В связи с этим использовалась методика идентификации новокаина по масс-спектрам ESI-MS в режиме положительно заряженных частиц. В этом случае в масс-спектре наблюдался интенсивный пик m/z237 иона [M+H]+. Следовательно, этот пик является аналитическим при определении новокаина в образцах.
Создание лекарственного средства предполагает определение сроков годности и обоснование оптимальных сроков и режимов хранения. При этом должны быть определены и стандартизированы свойства лекарственного препарата в соответствии с фармакопейными требованиями. Для стандартизации и контроля качества комплексных антибактериальныхпрепаратов, а также изучения стабильности при хранении были использованы методы оценки лекарственного средства, предъявляемые к инъекционным растворам, включающие определение внешнего
вида и концентрации действующих веществ в растворах. Срок годности устанавливали по результатам исследований стабильности в условиях долгосрочного хранения растворов при температуре +5±2 °С в течение 6 и 12 месяцев в защищенном от света месте. Органолептиче-ский контроль модельных смесей показал, что в течение срока хранения 6 и 12 месяцев все смеси выдерживают требования к внешнему виду: растворы прозрачные, без посторонних примесей.
После 12-месячного хранения идентификация веществ в модельных смесях в масс-спектре в режиме отрицательно заряженных частиц (рис. 4) отчетливо видны анализируемые пики основных компонентов - янтарной кислоты и бутафосфана. Пики с другими значениями m/z незначительны. Отмеченные выше пики ионов m/z 117 и m/z 178 относятся к аналитическим пикам молекул янтарной кислоты и бутафосфа-на соответственно. Наличие в этом образце новокаина установлено по масс-спектру в режиме положительно заряженных частиц. В масс-спектре этой пробы наблюдался интенсивный пик m/237 иона [M+H] +.
Рис. 4. ESI-MS анализ смеси растворов 10 % бутафосфана и 1 % янтарной кислоты, 0,5 % новокаина
через 6 и 12 месяцев хранения / Fig. 4. ESI-MS analysis of a mixture of solutions of 10 % butafosfan, 1 % succinic acid and 0.5 % novocaine after 6 and 12 months of storage
Заключение
интенсивностеи этих пиков отражает их концен-
Таким образом, методом масс-спектров в ре- трацию веществ в этой смеси, свидетельствуя
жимах отрицательно и положительно заряженных о стабильности полученного раствора через
частиц произведена идентификация бутафосфа- 12 месяцев хранения в защищенном от света
на, янтарной кислоты и новокаина. Соотношение месте при температуре +5±2 °С.
Литература
1. Ахмадышин Р.А., Канарский А.В., Канарская З.А., Тремасов М.Я., Семенов Э.И. Применение адсорбентов микоток-синов в животноводстве и птицеводстве // Ветеринарный врач. 2006. № 1. С. 64-66. URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id= 11763313 (дата обращения: 3.08.2020).
2. Губанов Д.Г., Семёнов С.Н., Слащилина Т.В. Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса различного биохимического статуса // Ветеринарно-санитарные аспекты качества и безопасности сельскохозяйственной продукции: материалы I-й международной конференции по ветеринарно-санитарной экспертизе. Воронежский государственный аграрный университет. 2015. С. 175-178. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=26360079 (дата обращения: 3.08.2020).
3. Егоров И.А. Современные подходы к кормлению птицы // Птицеводство. 2014. № 4. С. 11-16. URL: https://elibrary.ru/ item. asp?id=21593421 (дата обращения: 3.08.2020).
4. Зиннатов Ф.Ф., Шамсова А.Р., Зиннатова Ф.Ф.., Ахметов Т.М., Сафиуллина А.Р. Взаимосвязь полиморфизма генов липидного обмена (LEP, TG5) с молочной продуктивностью крупного рогатого скота // Ученые записки КГАВМ. Казань, 2017. Т. 231. С. 72-76. URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=30016055 (дата обращения: 3.08.2020).
5. Зиннатова Ф.Ф., Юльметьева Ю.Р., Зиннатов Ф.Ф., Шакиров Ш.К. Межлинейный полиморфизм гена каппа-казеина в популяции первотелок крупного рогатого скота // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. 2015. № 4. С. 180-183. URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=24825734 (дата обращения: 3.08.2020).
6. Колесник Е.А., Дерхо М.А. Оценка интенсивности обмена веществ и прироста массы тела у цыплят-бройлеров по липопротеиновому индексу // Ветеринария. 2014. № 7. С. 47-51. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=21868808 (дата обращения: 3.08.2020).
7. Кундышев П., Ландшафт М., Кузнецов А. Способы повышения эффективности птицеводства // Птицеводство. 2013. № 6. С. 19-22. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=20274708 (дата обращения: 3.08.2020).
8. Хайруллин Д.Д., Валиуллин Л.Р., Егоров В.И., Овсянников А.П. Изучение гематологических показателей крови коров при применении УВМК «Лизунца Солевит» // Международный вестник ветеринарии. 2017. № 2. С. 55-59. URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=29411592 (дата обращения: 3.08.2020).
9. Хайруллин Д.Д., Егоров В.И., Халикова К.Ф., Алеев Д.В., Бирюля В.В. Изучение действия пробиотика «Биосок+» на кроликах при длительном применении // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2019. Т. 237. № 1. С. 194-198. URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=37042500 (дата обращения: 3.08.2020).
10. Хайруллин Д.Д. Изучение действия углеводно-витаминно-минерального комплекса «Лизунец-Солевит» на дойных коровах // Ветеринарный врач. 2017. № 4. С. 60-64. URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=29808734 (дата обращения: 3.08.2020).
11. Hannah J.S., Arpit S., William B.M. Metabolic Communication and Healthy Aging: Where Should We Focus Our Energy // Developmental Cell. 2020. Vol. 54 (2). P. 196-211.
12. Mun S.K., Byung T.L., Sang Y.L., Hyun U.K. Modeling regulatory networks using machine learning for systems metabolic engineering // Current Opinion in Biotechnology. 2020. Vol. 65. P. 163-170.
13. Toranmal S.S., Buchade R.S., Tandale S.D., Wagh V.H., Chaure P.P. Development and Validation of Stability Indicating HPLC Method for Simultaneous Estimation of Milbemycin Oxime and Praziquantel from Bulk and Marketed Formulation [Development and Validation of Stability Indicating HPLC Method for Simultaneous Estimation of Milbemycin Oxime and Praziquantel from Bulk and Marketed Formulation]. Journal of Pharmaceutical Sciences and Research = Journal of Pharmaceutical Sciences and Research, 2019, no. 11 (9), рр. 3108-3115. URL: https: www.jpsr.pharmainfo.in/index.php (дата обращения: 3.08.2020).
References
1. Akhmadyshin R.A., Kanarsky A.V., Kanarskaya Z.A., Tremasov M.Ya., Semenov E.I. Primenenie adsorbentov mikotoksinov v zhivotnovodstve i ptitsevodstve [The use of mycotoxin adsorbents in livestock and poultry]. Veterinarnyi vrach = Veterinarian, 2006, no. 1, pp. 64-66. Available at: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=11763313 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
2. Gubanov D.G., Semenov S.N., Slashchilina T.V. Veterinarno-sanitarnaya ekspertiza myasa razlichnogo bio-khimicheskogo statusa [Veterinary and sanitary examination of meat of various bio-chemical status]. Veterinarno-sanitarnye aspekty kachestva i bezopasnosti sel'skokhozyaistvennoi produktsii: materialy I mezhdunarodnoi konferentsii po veterinarno-sanitarnoi ekspertize = Veterinary and sanitary aspects of the quality and safety of agricultural products: materials of the I International conference on veterinary and sanitary examination. Voronezh State Agrarian University Publ., 2015, pp. 175-178. Available at: https://elibrary.ru/ item.asp?id=26360079 (accessed 3.08.2020). (In Russ.)
3. Egorov I.A. Sovremennye podkhody k kormleniyu ptitsy [Modern approaches to poultry feeding]. Ptitsevodstvo = Poultry Farming, 2014, no. 4, pp. 11-16. Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=21593421 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
4. Zinnatov F.F., Shamsova A.R., Zinnatova F.F., Akhmetov T.M., Safiullina A.R. Vzaimosvyaz' polimorfizma genov lipidnogo obmena (LEP, TG5) s molochnoi produktivnost'yu krupnogo rogatogo skota [Interrelation of polymorphism of lipid metabolism genes (LEP, TG5) with milk productivity of cattle]. Uchenye zapiski Kazanskoi gosudarstvennoi akademii veteriarnoi meditsiny im. N.E. Baumana = Scientific Notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman, 2017, vol. 231, pp. 72-76. Available at: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=30016055 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
5. Zinnatova F.F., Yulmetyeva Yu.R., Zinnatov F.F., Shakirov Sh.K. Mezhlineinyi polimorfizm gena kappa-kazeina v pop-ulyatsii pervotelok krupnogo rogatogo skota [Interline polymorphism of kappa-casein in the populations heifers cattle]. Voprosy normativno-pravovogo regulirovaniya v veterinarii = Issues of Legal Regulation in Veterinary Medicine, 2015, no. 4, pp. 180-183. Available at: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=24825734 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
6. Kolesnik E.A., Derkho M.A. Otsenka intensivnosti obmena veshchestv i prirosta massy tela u tsyplyat-broilerov po lipopro-teinovomu indeksu [Estimation of intensity of metabolism and increase of body weight in broiler chickens by lipoprotein index]. Veterinariya = Veterinary, 2014, no. 7, pp. 47-51. Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=21868808 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
7. Kundyshev P., Landshaft M., Kuznetsov A. Sposoby povysheniya effektivnosti ptitsevodstva [Ways of increase of efficiency of poultry farming]. Ptitsevodstvo = Poultry Farming, 2013, no. 6, pp. 19-22. Available at: https://elibrary.ru/item.asp?id=20274708 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
8. Khairullin D.D., Valiullin L.R., Egorov V.I., Ovsyannikov A.P. Izuchenie gematologicheskih pokazatelei krovi korov pri primenenii UVMK "Lizuntsa Solevit" [Studying of hematologic indicators of blood of cows at use of mineral additive "Salt Lick"]. Mezhdunarodnyi vestnik veterinarii = International Bulletin of Veterinary Medicine, 2017, no. 2, pp. 55-59. Available at: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=29411592 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
9. Khairullin D.D., Egorov V.I., Khalikova K.F., Aleev D.V., Biryulya V.V. Izuchenie deistviya probiotika «Biosok+» na krolikakh pri dlitel'nom primenenii [Study of the action of probiotics "Biosok +" on rabbits with long-term application]. Uchenye zapiski Kazanskoi gosudarstvennoi akademii veteriarnoi meditsiny im. N.E. Baumana = Scientific Notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman, 2019, vol. 237, pp. 194-198. Available at: https://www.elibrary.ru/item.asp?id= 37042500 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
10. Khairullin D.D. Izuchenie deistviya uglevodno-vitaminno-mineral'nogo kompleksa «Lizunets-Solevit» na doinykh korovakh [The action of carbohydrate-vitamin-mineral complex "Lizunets-Solevit" on dairy cows]. Veterinarnyi vrach = Veterinarian, 2017, no. 4, pp. 60-64. Available at: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=29808734 (accessed 3.08.2020). (In Russ.).
11. Hannah J.S., Arpit S., William B.M. Metabolic Communication and Healthy Aging: Where Should We Focus Our Energy. Developmental Cell, 2020, vol. 54 (2), pp. 196-211. (In Eng.).
12. Mun S.K., Byung T.L., Sang Y.L., Hyun U.K. Modeling regulatory networks using machine learning for systems metabolic engineering. Current Opinion in Biotechnology, 2020, vol. 65, pp. 163-170. (In Eng.).
13. Toranmal S.S., Buchade R.S., Tandale S. D., Wagh V.H., Chaure P.P. Development and Validation of Stability Indicating HPLC Method for Simultaneous Estimation of MilbemycinOxime and Praziquantel from Bulk and Marketed Formulation [Development and Validation of Stability Indicating HPLC Method for Simultaneous Estimation of MilbemycinOxime and Praziquantel from Bulk and Marketed Formulation]. Journal of Pharmaceutical Sciences and Research = Journal of Pharmaceutical Sciences and Research, 2019, no. 11 (9), рр. 3108-3115. Available at: https: www.jpsr.pharmainfo.in/index.php (accessed 3.08.2020). (In Eng.).
Статья поступила в редакцию 8.08.2020 г.; принята к публикации 5.10.2020 г.
Submitted 8.08.2020; revised 5.10.2020.
Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.
All authors have read and approved the final manuscript.
Об авторах
Грачева Ольга Анатольевна
кандидат ветеринарных наук, доцент, заведующая кафедрой терапии, Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, г. Казань, Россия, ОЯСШ: https://orcid.org/0000-0002-6075-1127, gracheva-oa@mail.ru
Медетханов Фазил Акберович
доктор биологических наук, доцент, заведующий кафедрой фармакологии, Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, г. Казань, Россия, ОЯСГО: https:// orcid.org/0000-0002-9316-2695, ffazilak2@mail.ru
Галимзянов Ильсур Габдулхакович
кандидат ветеринарных наук, доцент, заведующий кафедрой хирургии, Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, г. Казань, Россия, ОЯСГО: https://orcid.org/
0000-0001-5833-7915, ilsour@rambler. ги
Мухутдинова Дина Мингалиевна
кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры терапии, Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана, г. Казань, Россия, ОЯСГО: https://orcid.org/0000-
0001-7443-8652, dinavet23@mail.ru
Смоленцев Сергей Юрьевич
доктор биологических наук, доцент, профессор кафедры технологии производства продукции животноводства, Марийский государственный университет, г. Йошкар-Ола, Россия, ОЯСГО: https://orcid.org/0000-0002-6086-1369, Smolentsev82@mail. ти
About the authors Olga A. Gracheva
Ph. D. (Veterinary), Associate Professor, Head of the Department of Therapy, Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman, Kazan, Russia, ORCID: https://orcid.org/0000-0002-6075-1127, gracheva-oa@mail.ru
Fazil A. Medetkhanov
Dr. Sci. (Biology), Associate Professor, Head of the Department of Pharmacology, Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman, Kazan, Russia, ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9316-2695, ffazilak2@mail.ru
Ilsur G. Galimzyanov
Ph. D. (Veterinary), Associate Professor, Head of the Department of Surgery, Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman, Kazan, Russia, ORCID: https://orcid.org/0000-0001-5833-7915, ilsour@rambler.ru
Dina M. Mukhutdinova
Ph. D. (Veterinary), Associate Professor of the Department of Therapy, Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman, Kazan, Russia, ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7443-
8652, dinavet23@mail.ru
Sergey Yu. Smolentsev
Dr. Sci. (Biology), Associate Professor, Professor of the Department of Livestock Production Technology, Mari State University, Yoshkar-Ola, Russia, ORCID: https://orcid.org/0000-0002-6086-1369,
Smolentsev82@mail ru
