CC BY
47
УДК 619: 615.9:636.085
ОБ ИССЛЕДОВАНИЯХ КОРМОВ НА ОБЩУЮ ТОКСИЧНОСТЬ В ИСПЫТАТЕЛЬНОМ ЦЕНТРЕ ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»
Галяутдинова Г.Г. - к.б.н., Валиев А.Р. - к.б.н., Сагдеева З.Х. - научный сотрудник,
Шлямина О.В. - к.хим.н.
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»
Ключевые слова: общая токсичность, корма, комбикорм, биотестирование, простейшие, кролики, мыши
Keywords: general toxicity, feed, compound feed, bio testing, protozoa, rabbits, mice
Здоровье сельскохозяйственных животных, их продуктивность,
воспроизводительная функция и биологическая ценность получаемых продуктов животноводства в значительной степени зависит от санитарного качества кормов.
Понятие качества кормов включает в себя совокупность показателей исходного химического состава корма (содержание протеина, углеводов, клетчатки, жира, макро- и микроэлементов, влажность), изменение содержания компонентов корма и его свойств в зависимости от сроков хранения.
Устойчивость свойств кормов и комбикормов по времени имеет большое значение, поскольку в процессе хранения происходит ухудшение качества кормов по химическим и биологическим показателям. К химическим показателям относятся перекисное и кислотное числа, к биологическим - зараженность
патогенными бактериями и грибами. Комплекс химических и биологических показателей составляет важную интегральную характеристику кормов -общую токсичность, которая определяется как способность вещества или продукта в средних дозировках вызывать негативную реакцию у живого организма [2, 3, 6].
Под воздействием
недоброкачественных кормов происходят серьезные нарушения в организме животных, обмене веществ,
расстраиваются функции центральной
нервной системы, эндокринных желез, органов пищеварения, а при попадании с кормом ядовитых растений, грибов или химических веществ (пестициды, дезинфекционные средства, минеральные удобрения) могут возникать отравления. Токсичность кормов является причиной появления токсикозов у животных и птиц [4, 5, 7].
Основной мерой по профилактике токсикозов в животноводстве и птицеводстве является контроль качества кормов, определение их общей токсичности.
Целью настоящей работы являлось изучение общей токсичности комбикормов для рыб, поступивших в Испытательный центр (ИЦ) ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», по выживаемости на тест-культурах, влияние на пищеварительную систему и дермонекротическое действие токсинов на виварных лабораторных животных (мыши, кролики) согласно ГОСТ 31674-2012 «Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения токсичности» [1].
Материал и методы исследований.
Скрининговый метод определения токсичности комбикормов
биотестированием на 8£у1опуеЫа шуШт проводили в секторе испытаний микотоксинов ИЦ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Постановка арбитражных методов на вивариумных животных кроликах и мышах производилась в секторе
токсикологических испытаний ИЦ
«ФЦТРБ-ВНИВИ».
Метод биотестирования на простейших основан на извлечении из исследуемых кормов водных или ацетоновых фракций токсичных веществ с последующим воздействием этих экстрактов на 81у1опуеЫа шуШт. Определение каждой пробы проводилось в пяти повторностях. Оценку результата биотеста дают по реакции гибели инфузорий. При выживаемости инфузорий от 70 до 100 % корм определяется как нетоксичный, в остальных случаях -слаботоксичный или токсичный. Безопасным следует считать корм, определенный как нетоксичный при одновременном параллельном
исследовании ацетонового и водного экстрактов.
Арбитражные методы
биотестирования токсичности кормов ставятся параллельно на кроликах (кожная проба) и на мышах (острый опыт). Токсичность исследуемых кормов определяется как по дермонекротическому воздействию на кожу кролика, токсических веществ, так и их воздействие на пищеварительную систему теплокровных животных. Результат определяют по совокупности реакций в обоих методах: корм нетоксичный (нетоксичен в обоих тестах), корм токсичный (токсичен хотя бы в одном тесте).
Определение общей токсичности кормов в опыте на мышах состояло из извлечения токсических веществ из комбикормов ацетоном и введение экстракта однократно в желудок белым мышам. Наблюдение за мышами велось в течение 3 суток, не ограничивая их в кормах и воде. При отсутствии падежа производили эвтаназию животных путем усыпления диэтиловым эфиром с последующим патологоанатомическим исследованием внутренних органов.
Было сформировано 3 группы мышей по 5 голов в каждой. Животным первой и второй групп вводили через рот в желудок по 0,5 см3 выпаренных остатков ацетоновых экстрактов комбикормов для рыб. Третьей группе в качестве
контрольного испытания 5 мышам вводили растительное масло.
Учет результатов анализа. Корм нетоксичный, если все мыши живы, а при вскрытии убитых мышей
патологоанатомических изменений
внутренних органов не обнаружено. При этом корм считался токсичным, если отмечался падеж мышей, а при вскрытии павших и убитых животных устанавливали воспалительные и дегенеративные изменения паренхиматозных органов.
Токсичность кормов на кролике устанавливалось путем двукратного нанесения с интервалом в сутки на выстриженные участки кожи кролика исследуемых экстрактов комбикормов. В качестве контроля использовали оголенный участок кожи, на который не наносили экстракт. С целью предупреждения слизывания экстракта, нанесенного на кожу, на шею кролика надевали воротник, который снимали не ранее чем через 3 суток после первого нанесения экстракта.
Наблюдение за реакцией начинали на следующий день после повторного нанесения экстракта и продолжали в течение 3 суток.
Токсичность исследуемых кормов определяли по наличию воспалительных процессов в области нанесенных экстрактов.
Результат исследований.
Скрининговый метод определения общей токсичности в экстрактах комбикормов устанавливали по выживаемости инфузорий Stylonychia шуШт через 1 ч экспозиции в ацетоновой и водной вытяжке исследуемых продуктов.
Степень токсичности исследуемых образцов комбикормов определяли по таблице 1.
Результаты оценки общей токсичности кормов на тест-культуре в ацетоновых экстрактах исследуемых кормов представлены в таблице 2.
Результаты оценки общей токсичности кормов на тест-культуре в водных экстрактах исследуемых кормов представлены в таблице 3.
Степень токсичности исследуемого продукта Выживаемость инфузорий, %
Нетоксичный 70-100
Слаботоксичный 40-90
Токсичный 0-39
Таблица 2 - Результаты исследований выживаемости инфузорий 81у1опусЫа шуШш в
ацетоновых экстрактах комбикормов
Наименование пробы Номер повторяемости Количество инфузорий в начале опыта, штук Количество инфузорий через 1 ч, штук Выживаемость, % Средняя выживаемость, %
1 25 6 24
Комбикорм № 3854 2 25 5 20
3 25 7 28 24
4 25 6 24
5 25 6 24
1 25 6 24
Комбикорм № 4056 2 25 5 20
3 25 6 24 23
4 25 6 24
5 25 6 24
Таблица 3 - Результаты исследований выживаемости инфузорий ^1у1опусЫа шуШш в водных
экстрактах комбикормов
Наименование пробы Номер повторяемости Количество инфузорий в начале опыта, штук Количество инфузорий через 1 ч, штук Выживаемость, % Средняя выживаемость, %
1 25 19 76
Комбикорм № 3854 2 25 20 80
3 25 18 72 76
4 25 19 76
5 25 19 76
1 25 18 72
Комбикорм № 4056 2 25 19 76
3 25 17 68 72
4 25 18 72
5 25 18 72
Данные таблицы 2 показывают, что пробы комбикорма имеют токсичность 76 и 77 % в ацетоновых экстрактах при выживаемости инфузорий 24 и 23 % соответственно. При исследовании в водных экстрактах токсичность составляет 24 и 28 % при выживаемости инфузорий 76 и 72 % соответственно.
В результате проведенных исследований общей токсичности кормов
установлено, что ацетоновые экстракты комбикорма обладают токсичностью по отношению к тест-культуре. Водные экстракты комбикорма не оказывали отрицательного действия на Stylonychia шуШш.
Проведенные исследования
показали, что при пероральном введении ацетоновых экстрактов комбикорма у опытных групп мышей на 3 сутки
эксперимента наблюдалось угнетение, снижение двигательной активности и аппетита, взъерошенность и тусклость шерстного покрова, а также была отмечена гибель двух животных в обеих группах.
При диагностическом вскрытии опытных мышей установлено
геморрагическое воспаление слизистой желудка, множественные кровоизлияния и истончение тонкого отдела кишечника, увеличение печени с изменением цвета до
песочного оттенка. При осмотре органов желудочно-кишечного тракта контрольных мышей патологических изменений не обнаружено.
Изменения в макроскопической картине тонкого отдела кишечника и желудка мышей по группам представлены на рисунках 1 и 2.
Изменения в макроскопической картине печени мышей представлены на рисунке 3.
А В С
Рисунок 1 - Тонкий отдел кишечника (А - контроль, В и С - опыт)
А В С
Рисунок 2 - Желудок (А - контроль, В и С - опыт)
А В С
Рисунок 3 - Печень (А-контроль, В и С - опыт)
Завершающий этап в исследовании определении дермонекротического
общей токсичности кормов заключался в действия ацетоновых экстрактов
комбикорма на кожу кролика посредством двукратного накожного нанесения с интервалом в 1 сутки. На выстриженную поверхность тела в области лопатки и бедра с правой стороны наносили опытные экстракты комбикорма, а с левой в качестве контроля - подсолнечное масло.
В результате проведенного опыта на
3 сутки исследований установлено, что на кожном покрове при использовании ацетоновой вытяжки выявлена гиперемия, отечность, болезненность. При
контрольном нанесении подсолнечного масла на кожу кролика патологических изменений не выявлено.
Рисунок 4 - Кожная проба на кролике (контроль)
Рисунок 5 - Кожная проба на кролике (опыт)
Заключение. Таким образом, в результате проведенных исследований на общую токсичность двух проб комбикорма для рыб, поступивших в ИЦ ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», путем биотестирования на простейших и лабораторных животных, установлено их токсическое действие. На основании полученных данных можно утверждать, что данные корма являются недоброкачественными и использованию не подлежат.
ЛИТЕРАТУРА:
1. ГОСТ 31674-2012 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье.
Методы определения общей токсичности. -М.: Стандартинформ, 2012. - 72 с.
2. ГОСТ 10385-2014 Межгосударственный стандарт. Комбикорма для рыб. Общие технические условия. - М.: Стандартинформ., 2016. - 26 с.
3. Егоров, В. И. Сочетанный Т-2 и дельтаметрин токсикоз / В. И. Егоров, Г. Г. Галяутдинова, А. В. Иванов // Иммунопатология, аллергология, инфектология. - 2010. - № 1. - С. 190-192.
4. Егоров, В. И. Современные пестициды для защиты животных и
растений / В. И. Егоров, Н. Н. Жестков, Г. Г. Галяутдинова // Сборник докладов международной научно-практической конференции «Биотехнология:
токсикологическая, радиационная и биологическая безопасность» (к 50-летию со дня образования ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»). - Казань, 2010. - С. 49-53.
5. Маланьев, А. В. Токсикологическая оценка кормов из Республики Мордовия на наличие пестицидов и азотсодержащих соединений / А. В. Маланьев, Д. В. Алеев, Г. Г. Галяутдинова, В. И. Егоров, Е. Н. Иванов // Ветеринарный врач. - 2019. - № 2. - С. 43-49.
6. Сагдеева, З. Х. Оценка общей
токсичности кормов из Рязанской области / З. Х. Сагдеева, Н. Н. Мишина // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства. - 2018. - № 20. - С. 357-360.
7. Сагдеева, З. Х. Оценка общей токсичности кормов, поступивших из районов Республики Татарстан
/ З. Х. Сагдеева, Н. Н. Мишина, А. И. Никитин // Актуальные проблемы ветеринарной медицины. Материалы м еждународной научно-практической к о нф еренции, посвященной 90-летию со дня рождения профессора В.А. Киршина. -Казань, 2018. - С. 176-180.
ОБ ИССЛЕДОВАНИЯХ КОРМОВ НА ОБЩУЮ ТОКСИЧНОСТЬ В ИСПЫТАТЕЛЬНОМ
ЦЕНТРЕ ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»
Галяутдинова Г.Г., Валиев А.Р., Сагдеева З.Х., Шлямина О.В.
Резюме
Общая токсичность кормов - обязательный показатель безопасности, утвержденный в РФ для большинства видов кормов и кормовых добавок. Исследования на общую токсичность кормов, поступивших в ИЦ ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», проводят методами биотестирования на простейших (экспресс-метод), мышах (острый опыт) и кроликах (кожная проба) по ГОСТ 31674-2012 «Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения общей токсичности». В процессе анализа поступивших кормов выявлено два положительных результата в комбикорме для рыб, которые показали токсичность, как на простейших, так и при постановке биопробы на лабораторных животных.
ABOUT STUDIES OF FOOD FOR GENERAL TOXICITY IN THE TESTING CENTER OF
THE FSBSI «FCTRBS-RRVI»
Galyautdinova G.G., Valiev A.R., Sagdeeva Z.Kh., Shlyamina O.V.
Summary
The general toxicity of feed is a mandatory safety indicator approved in the Russian Federation for most types of feed and feed additives. Studies on the general toxicity of feed received at the Testing Center (TC) of the Federal State Budgetary Scientific Institution "FCTRBS-RRVI" are carried out by biotesting methods on protozoa (express method), on mice (acute experiment) and on rabbits (skin test) in accordance with GOST 31674-2012 " Feed, compound feed, compound feed raw materials. Methods for determination of general toxicity ". In the process of analyzing the received feed, two positive results were revealed in feed for fish, which showed toxicity, both in protozoa and on laboratory animals.
