CC BY
12
кожи, связанные с фотосенсибилизацией кожи под влиянием масел входящих в состав пасты.
В целях оздоровления условий труда рабочих, занятых на пропитке, были разработаны следующие мероприятия: просеивание антисептиков, их взвешивание, а также хранение должны проводиться в специальных помещениях. Засыпку порошкообразных антисептиков, размешивание пасты следует производить в респираторах. Приемка и хранение хими катов в бумажных пакетах не допускаются. Не допускается также разливание масел и рассыпание антисептиков на почву. Очень важной яв ляется механизация повертывания шпал при их обмазке. При свертывании пунктов очаги разлитой суперобмазки рассыпанных антисептиков на почве следует ликвидировать засыпкой их землей.
Рабочие должны быть обеспечены комплектом спецодежды: брезентовыми и суконными костюмами, обувью, рукавицами, шлемами и респираторами.
Шпалопропиточные пункты следует обеспечить кладовой и сушилкой для хранения и сушки спецодежды, а также оборудовать душевыми и умывальниками. Рабочие должны регулярно получать мыло.
Проверочные обследования показали, что имевшие место санитарные недостатки на пунктах устранены и условия труда значительно улучшены. Этому содействовали также изданные в июне 1946 г. главным санитарным инспектором железнодорожного транспорта и центральным управлением пути Министерства путей сообщения «Правила по производственной санитарии и технике безопасности для пунктов пропитки шпал диффузионным методом». \
Ю. И. РУБИНШТЕЙН и Л. г. ЛЯСС
Об этиологии алиментарно-токсической алейкии (септической ангины)
Из отдела пищевой гигиены Института питания Академии медицинских наук СССР
Эпидемиологическими обследованиями установлено, что причиной заболевания алиментарно-токсической алейкией является употребление в пищу продуктов переработки перезимовавшего под снегом зерна (хлеба, лепешек, каши и др.). Однако вопрос о происхождении токсических веществ в перезимовавших злаках и их природа не находили до настоящего времени убедительного разрешения.
Можно считать доказанным наличие на перезимовавших злаках ряда токсичных грибков. Достижением последнего времени является установление их действия на гемопоэз некоторых лабораторных жи вотных.
Первые убедительные данные были получены Саркисовым, которому при кормлении кошек культурой Fusarium sporotrichioides на зерне удалось получить у них лейкопению и некоторые изменения, сходные с явлениями алиментарнс|-токсической алейкии.
На основании работ Саркисова и наших данных можно считать, что кошки являются подходящим экспериментальным животным для изучения заболеваний, связанных с нарушением гемопоэза. Однако «а кошках не удается получить весь симптомокомплекс алиментарно-токсической алейкии. Клиническая картина, сроки инкубации, а также легальная доза токсического материала для кошек отличаются от таковых при заболевании человека. После предварительных экспериментов на морских свинках и кошках мы провели опыты на обезьянах.
Работы по этиологии алиментарно'-токсической алейкии ведутся нами в течение ряда лет в различных направлениях (Рубинштейн, Лясс, Кер-бер). Целью настоящей статьи является сообщение о результатах воспроизведения алиментарно-токсической алейкии на обезьянах при кормлении их выделенной из перезимовавшего токсического проса культурой грибка Fusarium sporotrichioides.
Культура грибка Fusarium sporotrichioides, с которой проводились описываемые ниже опыты, выделена нами из перезимовавшего токсичного зерна, вызвавшего семейное заболевание. Образцы зерна были изъяты и доставлены проф. В. В. Ефремовым.
Нами изучаются ферментативные свойства различных штаммов Fusarium. Следует отметить, что описываемый штамм Fusarium sporotrichioides обладает резко выраженными липолитическими свойствами.
При испытании токсичности свежевыделенной культуры занесением эфирного экстракта из зерна, зараженного этим грибком, на кожу кролика неизменно получалась резко положительная реакция с образованием некрозов, твердой корки, кровоизлияний и очень медленным заживлением.
В опытах всегда применялось просо, зараженное Fusarium sporotrichioides. После нагревания и умерщвления культуры зерно высушивалось; для скармливания применялось высушенное зерно.
Опыты на обезьянах
Первый опыт на обезьяне-самке, весом 6,5 кг породы Макак-Резус по кличке «Прима» был проведен в Москве в августе—октябре 1946 г. Обезьяна содержалась в помещении лаборатории в высокой клетке с полочками. Пищевой рацион ее был достаточным как по калорийности, так и в отношений витаминов. Для маскировки экспериментального зерна (иначе она не съедала его) приходилось запекать его в аладьи, вносить в перья зеленого лука, ломтики бананов, кусочки дыни и т. д. Таким образом, ежедневно обезьяна съедала «е более 0,3—2 г зараженного зерна, а всего в продолжение опыта съела 60 г.
Клиническая картина. С первых дней кормления отмечалась рвота и понос. На 34-й день на лице появились петехии, >на 60-й день — резкие подкожные геморрагии на обеих передних и задних конечностях, на груди и животе. Начиная с 36-го дня, появилось кровотечение из десен, которое не останавливалось до смерти, то несколько затихая, то вновь усиливаясь. На 62-й день было отмечено маточное кровотечение, также не прекратившееся до гибели животного. Обезьяна погибла на 70-й день. Общее состояние обезьяны в последние дни жизни было очень тяжелым: у нее было полное отсутствие аппетита, она пила с большим трудом, сидела неподвижно, согнувшись в характерной позе, не реагировала на окружающее, много спала днем; отмечено резкое похудание, отечность лица, цианоз.
Гематологические данные. Кровь бралась для анализа из пальца или хвоста через каждые 2—3 дня. В табл. 1 приведены выдержки из протокольных записей, характеризующие изменения крови в продолжение опыта.
Со стороны лейкоцитов отмечаются две небольшие волны подъема, падение их числа на 40-й день (до 2 800 в 1 мм3) и снижение до 1 000 накануне смерти. Отмечался резкий агранулоцитоз: начиная с 61-го дня, число нейтрофилов снизилось до 24%, затем, постепенно падая, дошло до 1%. Число лимфоцитов относительно возрастало и поднялось до 93%. Накануне смерти формула крози следующая: э. 1%, п. 1%, с. 1%, лимф. 93%, мон. 4%. Отмечалось наличие эндотелиальных клеток.
Таблица 1. Кровь обезьяны „Прима" при кормлении зерном, зараженным
Fusarium Sporotrichioides
Фи РМУЛ КО ВИ Н % Тромбо-
День от Гемогло- Эритро- Лейко-
начала бин циты лимф. циты
копмле- |>Ш В ®/о (в ты: ) циты э. П. с. мон. (в тыс.)
0 78 5 4Г0 10 400 7 1 49 37 6 258
10-й 80 6 860 19 000 7 1 60 23 9 310
2Р-й 70 4 700 7 50Э 3 1 67 19 10 60
40-й 60 380) 2 800 6 2 '6 34 2 56
61-й 69 5 000 4 40 ' 4 3 24 61 8 5
64-й 31 2 840 2 ЬО 2 2 28 64 4 0
69-й 21 1 700 1 ООО 1 1 1 93 4 0
70 й Обезьян а п зла
Со стороны красной крови изменения наступили позднее, что часто отмечается при этом заболевании у людей. На 64-й день число эритроцитов упало до 2 340 000 и содержание гемоглобина — до 31%>; за два дня до смерти эритроцитов 1 700 000, гемоглобина 21%. Отмечен ани-зоцитоз, пойкилоцитоз.
Появление клеток раздражения (начиная с 49-го дня) и нормобла-стов (с 45-го дня) свидетельствует о ненормальностях в кроветворении и о поражении костного мозга.
Число тромбоцитов на 28-й день упало до 60 000, на 61-й день— до 5 000, а за 6 дней до смерти тромбоциты исчезли окончательно.
Таким образом, со стороны крови можно отметить: резкую лейкопению, агранулоцитоз, резкую анемию, атромбию.
Патологоан атомическое вскрытие (И. С. Дергачев) показало следующее. Упитанность хорошая, мышечная система — норма. Слизистая пищеварительного тракта бледная, без видимых на-глаз изменений. На слизистой десен очаговые кровоизлияния. Слизистая дыхательных путей и легких бледная. Отмечается дряблость миокарда и печени. Печень буроватооерого цвета. Почки бледные. Слизистая матки кровянистого цвета, в полости ее сгусток крови. Обширные кровоизлияния в клетчатке задней поверхности плеча и в области бедер. Костный мозг бедренных костей жировой (диафиз и эпифиз). Костный мозг грудины и ребер красный, негиперплазированный. В отпечатке из костного мозга грудины, взятого при вскрытии, отсутствовали клетки миэлоидного ряда и мегакариоциты. В небольшом количестве можно лишь отметить наличие клеток лимфоидного ряда и эритробластов.
Микроскопические исследования показали: наличие геморрагического диатеза, некротические явления и отсутствие кроветворения как красной, так и белой крови. Явления геморрагического диатеза отмечаются в эндокарде, слизистой желудка, имеются мелкие очажки свежих кровоизлияний в надпочечниках. В костном мозгу встречаются очаговые свежие кровоизлияния и очаги серозного пропитывания ткани костного мозга. Некротические явления отмечаются в тканях миндалин и в печени. В одном из участков миндалин имеется очаг некроза в соединительной ткани подслизистой на довольно значительном протяжении с почти полным отсутствием клеточной реакции вокруг. По периферии очага весьма скудная клеточная инфильтрация, состоящая преимущественно из круглых клеток; сегментированных лейкоцитов нет. В печени свежие очаги некрозов без клеточной реакции.
Костный мозг в одном препарате жирный с полным отсутствием •очагов кроветворения. В других препаратах выраженные явления аплазии
костного мозга, который по преимуществу жирный. Лишь местами ветре чаются очажки, содержащие 'клеточные элементы, представляющие собой ретикзлярные клетки и мелкие круглые клетки типа лимфоидных. Попадаются лишь единичные клетки белого и красного ряда.
Полученные положительные результаты по клинике, картине крови и патологогистологнческим изменениям дали нам основание для подтверждения этих данных повторным экспериментом еще на одной обезьяне.
Второй опыт, аналогичный первому, проводился на Сухумской био станции Академии медицинских наук СССР в феврале—марте 1947 г Обезьяна по кличке «Луара» породы Мака^-Лапундра, самка, 7 лет 2 месяцев, весом б кг содержалась в изоляторе. Пищевой рацион ее был обычным для сухумского питомника: хлеб, каши, яйца, мандарины, яб лок«, орехи, конфеты, печенье, подсолнухи. Зараженное зерно о размолотом виде давалось ежедневно в количестве 1,5—2 г в виде водной болтушки с сахаром. Кормление производилось путем вливания раство ра. Обезьяна отказывалась от этого кормления, сопротивлялась, вслед ствие чего приходилось принимать насильственные меры. При таких условиях удавалось скармливать ей все необходимое количество ежедневно в течение 23 дней. С 24-го дня, ввиду тяжелого состояния, ей прекратили давать экспериментальное зерно. Несмотря на это, состоя ние ее резко ухудшалось, и она погибла «а 33-й день от начала опыта, съев в течение опыта 40 г зерна, зараженного культурой Fusarium sporotrichioides.
Клиническая картина. На 3-й день были отмечены местные явления (в виде ожогов) на губах и по всей слизистой рта. На 21-й день появилось кровотечение из десен нижней челюсти, в последующем резко прогрессировавшее (непрерывные струи крови); затем язвы и гнойники на деснах. На 27-й день на внутренних поверхностях обеих верхних конечностей появилось небольшое количество мелких кровоизлияний (пе техий), а накануне смерти — явления резко выраженного геморрагического диатеза на обеих ногах в виде различных кровоизлияний багрово синего цвета. За весь опытный период обезьяна потеряла в весе 0,5 кг Температура не превышала 37,4° (измерение производилось ежедневно). За два дня до смерти отмечалось полное отсутствие аппетита, резкая слабость, характерное согнутое положение, почти полное отсутствие дви жений, шаткая походка, отсутствие реакции на окружающее. В последующие два дня эти явления были выражены в еще большей степени.
Таблица 2. Кровь обезьяны „.Гуара" при »оголении зерном, зараженным
Fusarium sporotrichioides
Форм\'.га кпов 1 в % Тромбо-
День от Гемо- Эритро- Лейко-
начала глобин цит лимф. циты
кормле- (В %) цит ы 9- П. с. мон. (в тыс.)
ния (в тыс.)
0 78 5600 14F00 1 2 64 26 7 400
7-й 80 5 7iU 20000 1 13 54 24 8 420
12-й 72 4 800 17 £03 1 3 72 20 4 ЗОо
17-й _ 6 700 1 1 68 28 2 —
21-й 65 4 60 20 000 1 4 89 5 1 64
25 й 60 4 460 1 • 0J 0 4 37 52 7 40
29-й 50 3670 201 0 2 1 91 6 55
31-й 45 3 50Э 200 0 0 2 90 8 42
33-й 40 2 800 200 —- — —
■г!'-:.; Обезьяна пала
Гематологические данные. Кровь для исследования бралась из уха ежедневно натощак. В табл. 2 представлены данные 9 дней исследования, отражающие характерные изменения.
Белая акровь. Снижение лейкоцитов до 6 700 в 1 ¡мм3 было отмечено на 17-й день, резкое падение до 100 в 1 мм3 — на 25-й день; в дальнейшем лейкопения прогрессировала. В течение недели продолжалась алейкия (400—200); в день смерти количество лейкоцитов—200 в 1 мм'. Гемограмма показала резкий агранулоцитоз: падение нейтрофилов началось с 25-го дня <37°/с); постепенно их количество снижалось и достигло за два дня до смерти 2%. Накануне и в день смерти в мазках попадались лишь единичные лимфоциты и сосчитать формулу не представлялось возможным даже при исследовании нескольких параллельных мазков. За два дня до смерти формула была следующая: э. 0%, п. 0%, с. 2%, лимф. 90%, мон. 8э/о, т. е. данные, весьма близкие к тем, которые мы имели у первой опытной обезьяны.
Красная кровь. Падение эритроцитов и снижение 'гемоглобина начались с 29-го дня (НЬ—50%, эритроцитов—3 670 000 в 1 мм3). В дальнейшем отмечалось последующее снижение, и в день смерти можно было отметить анемию (НЬ—40%, эритроцитов — 2 800 000 в 1 мм3). Качественные изменения эритроцитов выразились в появлении анизоцитоза, пойкилоцитоза.
Тромбопения. Падение тромбоцитов до 64 000 было отмечено на 21-й день и к 31-му дню снизилось до 42 000. Повышение РОЭ было значительным: 72 мм в час (исходное 2 мм).
Таким образом, и у второй обезьяны были отмечены значительные нарушения гемопоэза, давшие несколько иную гематологическую картину, чем это было у первой обезьяны, а именно более резкое нарушение лейкопоэза и несколько менее сильное — эритропоэза. Функции тромбо-поэза были также значительно нарушены.
Патологоанатомическое вскрытие (А. Н. Сергеев). Резкое изъязвление кишечника, количество язвенных участков более десяти. Просвет слепой кишки содержит кровянистый сгусток. Костный мозг бедра (нижней его трети) и голени (верхней части) яркожелтого цвета, жидковатый. Костный мозг грудины и позвонков красный. В области обеих икроножных мышц подкожная 'клетчатка отечная, с очагами кровоизлияний.
Микроскопические данные показали изменения в органах, характерные для алиментарно-токсической алейкии: на коже участки некрозов подкожной клетчатки с оседанием микробов. На языке поверхностные эрозии За счет некроза эпителия, в сосудах собственно кожи стаз. Анемия слизистой глотки. В лимфатических железах и окружающей клетчатке обширные некрозы коры железы с колоссальным количеством •микробов. Некроз слизистой, подслизистой и мышечного слоя тонкого кишечника с массовыми кровоизлияниями. Мутное набухание печени, некроз и некробиоз печеночных клеток. Костный мозг (эпифиз) жировой, в отдельных местах мелкие островки ничтожных размеров, состоящие главным образом из лимфоидных клеток.
Из изложенного видно, что клиническая картина, инкубационный период и сроки появления характерных симптомов у обеих обезьян близки к таковым при алиментарно-токсической алейкии человека. Резкие гематологические изменения, нарушения всей системы гемопоэза, секционные данные и патологогистологические изменения соответствуют таковым у человека.
У первой обезьяны изменения со стороны миндалин с отсутствием клеточной реакции напоминают то, что описано Давыдовским в работе о патогенезе септической ангины. Различные сроки наступления отдельных стадий, более поздние у обезьяны «Примы» и более быстрые у
«Луары», связаны, повидимому, с тем, что первая ежедневно получала меньшее количество зараженного зерна и без столь строгого соблюде ния дозировки. Вторая обезьяна в силу более благоприятных технических условий проведения опыта в Сухумской биостанции получала регулярно одинаковое количество токсического зерна. Совершенно понятно, что и гематологические сдвиги, и патологогисгологические изменения 'несколько отличны в обоих случаях, что связано, очевидно, с индивидуальными особенностями животных. Но как у первой так и у второй обезьяны они являются характерными для алиментарно-токсической алейкии.
В нашем распоряжении на Сухумской биостанции имелись еще две обезьяны, у которых в процессе опыта выявился туберкулез, вследствие чего нам не удалось провести опыта до конца. Одна из них погибла от милиарного туберкулеза; у второй опыт был прекращен после обнаружения в области живота свища с наличием туберкулезных палочек; у обеих обезьян уже в первые дни кормления были отмечены явления, характерные для первой стадии заболевания алиментарно-токсической алейкией (ожоги на слизистой рта, стоматит, гингивит). У одной из них количество лейкоцитов упало до 600 в 1 мм3, число тромбоцитов снизилось до 60 ООО (исходное количество 390 ООО). Эти обезьяны .исключаются нами при оценке полученных данных. Однако •можно предположить, что токсический агент нашего грибка спровоцировал дремлющую туберкулезную инфекцию вследствие падения количества лейкоцитов и нарушения резистентности организма. Отмечаем, что до опыта обе эти обезьяны были обследованы клинически, рентгеноскопически, гематологически, и признаков туберкулеза у них не было обнаружено.
Изложенные экспериментальные данные дают нам основание считать доказанной роль грибка Fusarium sporotrichioides как продуцента специфического миэлотоксического вещества, вызывающего появление заболеваний алиментарно-токсической алейкией.
Выводы
1. Выделенный из перезимовавшего токсичного проса грибок Fusarium sporotrichioides образует при выращивании на просе миэло-токсические вещества.
2. В экспериментах на обезьянах путем кормления их просом, зараженным токсичной культурой Fusarium sporotrichioides, получены основные симптомы алиментарно-токсической алейкии по клинике я полностью по гематологическим и патологогистологическим данным.
3. Установлен фактор биологического происхождения, обусловливающий глубокое нарушение гемопоэза и называемый нами микомиэло-токсическим фактором.
