УДК 616.9
О применении иммуноферментного анализа в диагностике ВИЧ-инфекции (собственные наблюдения)
Кулешов И.В., Лин В.Н., Кириуцов А.М., Дядюра О.Н., Степанов Е.В., Виноградова И.Н.
Криворожский кожно-венерологический диспансер
ПРО ЗАСТОСУВАННЯ ИМУНОФЕРМЕН-ТНОГО АНАЛИЗУ В Д1АГНОСТИЦ1 В1Л-1НФЕКЦП (ВЛАСН1 СПОСТЕРЕЖЕННЯ) Кулешов 1.В., Лш В.М., Кiрiуцов О.М., Дядюра О.М., Степанов С.В., Виноградова 1.М.
Проведено клiнiко-епiдемiологiчний аналiз 207 ви-падкiв ВIЛ-iнфекцiï, виявленоТ методом 1ФА.
ON IMMUNE-ENZYME ANALYSIS APPLICATION FOR HIV-INFECTION DIAGNOSTICS (PERSONAL OBSERVATION) Kuleshov I.V., Lin V.N., Kiriutsov A.M., Dyadyura O.I., Stepanov Y.V., Vinogrado-va I.N.
Clinicoepidemiological analysis of 207 cases of HIV-infection detected by the means of immune-enzyme analysis has been carried out.
Украина, по данным ООН и ВОЗ, по состоянию на 2008 г. занимает шестое место в мире и первое место в Европе по распространению эпидемии ВИЧ/СПИДа [1]. Стратегия борьбы с ВИЧ/СПИДом в Украине основывается на признании её одним из приоритетов государственной политики в сфере охраны здоровья и социального развития [1].
Дерматовенерологи находятся на переднем крае борьбы с распространением ВИЧ-инфекции, т. к. значительное количество заболеваний их пациентов являются маркерами этой инфекции. До 92 % ВИЧ-инфицированных страдают поражением кожи; нередки двойные и тройные дерматозы [2]. Учитывая сходный путь передачи инфекции - половой, возможно одновременное или последовательное заражение, помимо ВИЧ, и другими инфекциями, передающимися половым путем (ИППП). Отсюда понятна роль дерматовенеролога в своевременном выявлении ВИЧ-инфекции.
Спектр поражений кожи и слизистых оболочек при ВИЧ-инфекции чрезвычайно широк. Условно можно выделить три основные группы дерматозов [3]: - инфекционные;
- неинфекционные;
- неопластические.
К разнообразной группе ВИЧ-ассоциирован-ных неинфекционных дерматозов относится и псориаз. Первичные проявления или внезапное обострение уже существующего псориаза отмечается у 1-1,3 % ВИЧ-инфицированных [3]. У 60 % ВИЧ-инфицированных встречаются аллергические и токсико-аллергические дерматозы [4]:
- хроническая экзема;
- крапивница;
- полиморфная экссудативная эритема и др.
О. А. Проценко (2007) отмечает, что у ВИЧ-
инфицированных в 75,3 % случаев имеется два и более вида заболеваний кожи; преобладают инфекционные дерматозы (в 92,2 % случаев): микотические, вирусные, пиодермиты [4].
Многочисленными исследованиями доказано, что различные ИППП, особенно те, которые сопровождаются образованием эрозий и язв, способствуют инфицированию ВИЧ [7].
Ряд возбудителей ИППП являются фактором, предрасполагающим к большей вирулентности штаммов ВИЧ:
- при персистирующей хламидийной ин-
фекции часто отмечаются иммунные реакции к общему хламидийному белку теплового шока (HSP-60); предполагается, что его молекулярное сходство с человеческим гомологом может обусловить аутоиммунные процессы;
- при ВИЧ-инфекции C. trachomatis становится кофактором, способствующим, за счет воздействия на иммунную систему, более активному прогрессированию болезни [8];
- ВИЧ при сочетании с урогенитальной ми-коплазменной инфекцией начинает бурно развиваться и проявлять свои вирулентные свойства [9];
- по литературным данным, 18,5 % ВИЧ-инфицированных одновременно страдают сифилисом [10].
К группе риска по ВИЧ-инфекции относятся лица, находящиеся в условиях пенитенциарной системы; необходимость обследования на ВИЧ этого контингента очевидна в связи:
- со значительной численностью спецконтингента в учреждениях исполнения наказания (УИН); в Украине, по состоянию на 01.01.2008 г., их численность составила 149690 человек;
- с более высокой, по сравнению с общей популяцией, ВИЧ-инфицированностью [11].
Лабораторная диагностика ВИЧ/СПИДа основывается на трёх подходах:
- индикация ВИЧ и его компонентов в материале от больных;
- выявление противовирусных антител;
- определение специфических изменений в иммунной системе.
Наибольшее распространение получили методы, базирующиеся на выявлении противовирусных антител.
В большинстве стран наиболее широко используется иммуноферментный анализ (ИФА). Этот метод выгодно отличается относительной технической простотой, доступностью большинства реагентов, возможностью автоматизации практически всех этапов исследования. Метод ИФА, предназначенный для выявления антител к ВИЧ, обладает достаточно высокой специфичностью (до 99 %) и чувствительностью (93-99 %) [12].
Одной из частых причин возникновения ложноположительных результатов - наличие антител к HLA, перекрестно реагирующих при проведении ИФА [12, 13]; существуют и другие причины [13]:
- хронические инфекции;
1-2 (12)' 2009
- аутоиммунные заболевания, в частности, ревматизм;
- онкозаболевания;
- присутствие гаптенов в препаратах ВИЧ, которые неспецифически реагируют с антителами;
- наличие в сыроватке крови больных большого количества липидов и т. д.
В лаборатории КВД с целью диагностики ВИЧ-инфекции осуществляется постановка ИФА с применением унифицированных тест-систем ДС - ИФА - АНТИ - ВИЧ - УНИФ для выявления суммарных антител ^О; ^М и ^А к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в сыроватке крови. Принцип её работы основан на определении антител к ВИЧ за счет взаимодействия с адсорбированными на носителе (иммуносорбент) антигенами ВИЧ. Учет результата (образование комплекса Антиген - Антитело) проводится спектрофотометри-ческим методом.
Цель работы: клинико-эпидемиологиче-ский анализ ВИЧ-позитивных лиц, выявленных в КВД г. Кривой Рог за период февраль 2008 г.- февраль 2009 г.
Материал и методы исследования. За этот период обследовано на ВИЧ-инфекцию 1396 человек. В лаборатории КВД осуществлялось постановка ИФА на ВИЧ с использованием унифицированных тест-систем.
Результаты и их обсуждение. Из общего числа обследованных положительный результат ИФА на ВИЧ зарегистрирован у 220 лиц. ВИЧ-статус подтвержден у 207 лиц (данные референтс-лаборатории Днепропетровского областного центра по профилактике и борьбе со СПИДом); это составило 14,8 % из числа обследованных.
Специфичность метода ИФА для выявления антител к ВИЧ с использованием унифицированных тест-систем составила 94,1 %.
Обследованные ВИЧ-инфицированные разделены на 4 группы:
- 1 группа - 77 (37,2 %) больных, в том числе 43 мужчины (средний возраст - 34 года) и 34 женщины (средний возраст - 34 года), у которых к моменту тестирования на ВИЧ были выявлены ИППП; по диагнозам:
а) моноинфекция выявлена у 69 (89,6 %)
больных, в том числе:
1) сифилис - у 50 (72,5 %);
2) гонорея - у 6 (8,7 %);
3) трихомониаз - у 12 (17,4 %) ;
4) хламидиоз - у 1 больного (1,4 %);
б) микст-инфекция выявлена у 8 (10,4 %) больных, в том числе:
1) гонорея + трихомониаз - у трёх (37,5 %) больных;
2) сифилис + трихомониаз - у двух (25 %) больных;
3) хламидиоз + трихомониаз - у одного больного (12,5 %);
4) сифилис + хламидиоз + трихомониаз - у одного больного (12,5 %);
в) сочетание туберкулеза легких и ИППП выявлено у трёх больных, в том числе:
1) туберкулез легких + сифилис - у двух больных;
2) туберкулез легких + гонорея - у одного больного;
туберкулез - маркер ВИЧ-инфекции; вероятность заболеть туберкулезом у ВИЧ-инфицированных за один год такая, как у незараженных людей за всю жизнь [11, 14];
- 2 группа - 67 (32,4 %) больных, в том числе 23 мужчины (средний возраст - 31 год) и 44 женщины (средний возраст - 29 лет), обратившиеся а КВД самостоятельно с целью обследования на ВИЧ, в том числе:
а) лица, страдающие наркоманией и имевшие в прошлом многочисленные половые связи - 21 (31,3 %);
б) лица, имевшие в прошлом многочисленные случайные половые связи, но не страдающие наркоманией - 37 (55,2 %);
в) половые контакты ВИЧ-инфицированных - 9 (13,4 %);
- 3 группа - 46 (22,2 %) больных с различными дерматозами, в том числе 33 мужчины (средний возраст - 37 лет) и 13 женщин (средний возраст - 37 лет); по нозологиям:
а) псориаз - 10 (21,7 %) больных, в том числе:
1) псориаз распространенный - 7 (70 %);
2) инфильтративный бляшечный - двое (20 %) больных;
3) артропатический - один больной (10 %);
4) псориатическая эритродермия - один больной (10 %);
б) аллергодерматозы - 12 (26,1 %) больных, в том числе:
1) микробная экзема - 7 (58,3 %);
2) атопический дерматит - 2 (16,7 %);
3) почесуха - двое (16,7 %) больных;
4) токсикодермия - один больной (8,3 %);
в) вирусные дерматозы - 7 (15,2 %) больных, в том числе:
1) опоясывающий лишай - 5 (71,4 %);
2) герпес простой пузырьковый - один больной (14,3 %);
3) остроконечные кондиломы - один больной (14,3 %);
г) пиодермиты - 6 (13 %) больных, в том числе:
1) угревая болезнь (конглобатные угри)
- трое (50 %) больных;
2) фурункулез - двое (33,3 %) больных;
3) хроническая язвенная пиодермия -один больной (16,7 %);
д) микозы - трое (6,5 %) больных, в том числе:
1) кандидоз полости рта - двое (66,7 %) больных;
2) рубромикоз - один больной (33,3 %);
- 4 группа - 17 (8,2 %) мужчин (средний возраст - 29 лет), которые находились в учреждении исполнения наказания; сыворотка для исследования доставлена из УИН-80 (Кривой Рог) однократно с целью обследования на ВИЧ этих 17 осужденных.
Из общего числа больных выявлены:
- инфекционные дерматозы - у 16 (34,8 %) больных;
- чесотка - у 5 (10,9 %) больных; по литературным данным, заражение чесоткой в 59 % случаев происходит во время полового контакта [5], причем, по данным ВОЗ, чесотка передается половым путем в 1,5-2 раза чаще, чем сифилис [6];
- красная волчанка - у одного больного (2,2 %);
- каплевидный наркопсориаз - у одного больного (2,2 %);
- саркома Капоши - у одного больного (2,2 %);
- сочетание туберкулеза легких и одного из дерматозов - в двух случаях, в том числе:
1) туберкулез легких + чесотка - у одного больного;
2) туберкулез легких + наркопсориаз - у одного больного.
Выводы
1. Метод ИФА для определения антител к цированных среди больных сифилисом и други-ВИЧ с использованием унифицированных тест- ми ИППП, целесообразно расширить показания систем «ДС - ИФА - АНТИ - ВИЧ - УНИФ» для тестирования на ВИЧ этих категорий боль-обладает достаточно высокой специфичностью ных.
(по нашим данным, - 94,1 %). 3. Учитывая высокий уровень инфицирован-
2. В связи с тем, что у ВИЧ-инфицирован- ности ВИЧ в тюремной популяции, целесооб-ных регистрируется в значительной части слу- разно акцентировать внимание на тестирование чаев разнообразная кожная патология, а так же этого контингента на ВИЧ-инфекцию. учитывая значительное количество ВИЧ-инфи-
ЛИТЕРАТУРА
1. Ломоносова О. А. Проблема В1Л/СН1Д в Укра!ш // Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология. - 2008. - № 1-2 (11). -С. 289.
2. Гяургиева О. А., Корнищева В. Г., Пирятин-ская В. А. Об этиологии язвенных поражений кожи при ВИЧ-инфекции // Вестник дерматологии и венерологии. - 1995. - № 6. -С. 50-51.
3. ВИЧ-инфекция в дерматологической практике (методич. указание). - К.: ЦМС МЗ Украины, 1993. - 63 с.
4. Проценко О. А. Клинико-эпидемиологичес-кий анализ ВИЧ-ассоциированных дерматозов // Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология. - 2007. - № 1-4 (11). -С. 137-139.
5. Соколова Т. В.,Федоровская Р. Ф., Ланге А. Б. Чесотка. - М.: Медицина, 1989. - 54 с.
6. Богданов В. К. Акарюзи // Украшський журнал дерматологи, венерологи, косметологи. - 2008. - № 2 (29). - С. 73.
7. Калюжная Л. Д., Гречанская Л. В. Асощаци шфекцш, що передаються статевим шляхом, у В1Л-шфшованих // Украшський журнал дерматологи, венерологи, косметологи. -2004. - № 1 (12). - С. 78-80.
8. Молочков В.А.,Романеско Г. Ф., БудиловаН.В. К проблеме терапии ранних форм сифилиса // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 1996. - № 6. - С. 46.
9. Мавров И. И. СПИД: опыт, проблемы, перспективы // Дерматология и венерология.
- 1997. - № 1 (3). - С. 13.
10.Борисенко К. К., Зудин Б. И. и др. Сочетание сифилиса и ВИЧ-инфекции // Вестник дерматологии и венерологи. - 1990. - № 1. -С. 72.
11.Ковалева Л. Н., Недужко А. А. Социально-эпидемические аспекты ВИЧ-инфекции и ВИЧ-ассоциированных герпевирусных инфекций в условиях пенитенциарной системы Одесской области // Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология. - 2008. -№ 1-2 (11). - С. 215-220.
12.СПИД: Учебн. пособие / Под ред. В. П. Ши-робокова. - К.: Здоровье, 1988. - С. 153-156.
13.Гирин В. Н., Липкан Г. Н. Порохницкий В. Г. Синдром приобретенного иммунодефицита.
- К.: Здоровье, 1991. - С. 43-54.
14.Мягкова Н. ТЬс/ВИЧ в Украине: проблемы, пути и формы их решения // Новости медицины и фармакологии в Украине. - 2004. -№ 6 (146). - С. 16.
1-2 (12)' 2009
Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология