CC BY
61
Информация об авторах: 664079, Иркутск, м/р Юбилейный, 100, ИГИУВ, e-mail: piven_dv@mail.ru Пивень Дмитрий Валентинович — заведующий кафедрой, профессор, д.м.н.,
Таевский Борис Владимирович — доцент, к.м.н.,
Морохоев Валентин Иринчеевич — заведующий отделением, к.м.н.
© МЕДВЕДЕВА Т.В., НЕКИПЕЛОВ О.М., НИКИТИНА Е.Г., СКВОРЦОВА Р.Г. — 2010
О НЕОБХОДИМОСТИ ОБЯЗАТЕЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ОБРАЗЦОВ КРОВИ НА ПРИСУТСТВИЕ ВИЧ, ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ ПО ОТНОШЕНИЮ К ГЕПАТИТУ С
Т.В.Медведева1, О.М.Некипелов2, Е.Г. Никитина3, РГ.Скворцова4 ('ГУЗ Иркутский областной клинический консультативно-диагностический центр, гл. врач — к.м.н. И.В.Ушаков; 2ГУЗ Иркутский областной противотуберкулезный диспансер, гл. врач — к.м.н. М.Е. Кощеев;
3ГУЗ Иркутский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями, гл. врач — к.м.н. Ю.К. Плотникова; 4Иркутский государственный институт усовершенствования врачей,
ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах)
Резюме. ВИЧ-положительные больные являются существенным резервуаром для социально значимых вирусных и бактериальных инфекционных заболеваний. Методом ПЦР в режиме реального времени были проверены сыворотки от ВИЧ-позитивных больных на присутствие в них вирусов гепатитов С, В (ВГС, ВГВ) и микобактерий туберкулеза (МБТ). Внелёгочный туберкулез (ВТ) и парентеральные гепатиты в эпидемиологических условиях Иркутска должны быть включены в группу СПИД-индикаторных болезней, и в случае обнаружения у пациента ВГС или ВТ обязательно обследовать его на наличие ВИЧ-инфекции.
Ключевые слова: ПЦР, ВГС, ВГВ, ВИЧ, МБТ.
ON NECESSITY OF OBLIGATORY RESEARCH OF SAMPLES , POSITIVE TO HEPATITIS С, FOR HIV PRESENCE
T.V.Medvedeva1, O.M.Nekipelov2, E.G.Nikitina3Я.О.Скворцова4
(Irkutsk Diagnostics Center, Irkutsk Regional Untituberculous Dispensary, Irkutsk Regional Center of Prevention and Struggle with AIDS and Infectious Diseases, Irkutsk State Institute of Postgraduate Medical Education)
Summary. HIV-positive patients are the essential source for socially significant virus and bacterial infectious diseases. Sera from HIV- positive patients have been studied on presence of viruses of hepatitis C, B (HBV, HCV) and Micobacterium tuberculosis (МВТ) by the method of PCR. Extrapulmonary tuberculosis and parenteral hepatites in epidemiological conditions of Irkutsk should be included in group of AIDS — indicative diseases, and in case of detection of HCV or extrapulmonary tuberculosis in a patient it is necessary to survey him on presence of HIV- infection.
Key words: PCR, HBV, HCV, HIV.
Проблема распространения вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) вызывает обеспокоенность во всем мире. В Иркутской области на начало декабря 2009 г. зарегистрировано больше 30 тыс. случаев. Показатель распространенности ВИЧ-инфекции среди населения Иркутской области составляет 1,2%, при среднем показателе по России 0,35%. В эпидемию ВИЧ-инфекции вовлечены люди всех возрастов, но среди них преобладают лица молодого возраста от 20 до 34 лет.
Н1У-положительные больные являются важным, если не основным резервуаром для многих инфекций. Большая часть людей, живущих с ВИЧ-инфекцией, одновременно является носителями парентеральных вирусных гепатитов вирус гепатита С (ВГС), вирус гепатита В (ВГВ) и микобактерии туберкулеза (МБТ) [6]. Суперинфицирование парентеральными вирусными гепатитами и ВИЧ сегодня широко распространено главным образом потому, что эти вирусы имеют общие пути передачи: внутривенное употребление наркотиков, половой, вертикальный (от инфицированной матери к ребенку), переливание крови. Скомпрометированный иммунитет у ВИЧ-инфицированных способствует присоединению различных инфекций, в том числе, МТБ. Рост заболеваемости туберкулезом в определенной степени связан с эпидемией ВИЧ-инфекции, и чем выше уровень распространенности ВИЧ-инфекции в регионе, тем выше уровень заболеваемости и смертности от туберкулеза.
ВГС, туберкулез (ТВ) и ВИЧ-инфекции являются наиболее серьезными и распространенными инфекциями, вызывающими значительную заболеваемость и смертность [4]. У пациентов со смешанной инфекцией ВИЧ и ВГС ускоряется фиброз печени, растет концентрация РНК ВГС в периферической крови, быстрее развивается конечная стадия заболевания печени.
Цель работы: оценка необходимости проведения обязательного обследования ВИЧ-позитивных боль-
ных — на наличие ВГС, ВГВ и МБТ методом ПЦР и, наоборот, больных ВГС, ВГВ, TB, на наличие ВИЧ-инфекции.
Материалы и методы
Была проведена реципрокная оценка риска суперинфицирования в различных группах больных с помощью статистического метода отношения шансов.
Исследованы образцы нуклеиновых кислот (ДНК, РНК), выделенные из 650-и ВИЧ-позитивных, 86-и ВГБ — позитивных, 694-ех ВГС-позитивных и 562-х МБТ-позитивных образцов крови от пациентов, проживающих на территории Иркутска и Иркутской области. В контрольную группу были включены практически здоровые пациенты Иркутского областного клинического консультативно-диагностического центра. Информация о здоровых пациентах получена с помощью лабораторной информационной системы (ЛИС) ИОККДЦ (http://www.dc.baikal.ru/company/teh/mis/).
Экстракцию РНК и ДНК из удаленных тканей и образцов цельной крови проводили коммерческими наборами «Рибо-Сорб» и «ДНК-Сорб-АМ» (производитель ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора) в соответствии с рекомендациями производителей. ПЦР — идентификацию вирусных инфекций проводили в мультиплексной ПЦР набором реагентов для одновременного выявления РНК ВГС, вируса иммунодефицита человека типа 1 и ДНК ВГВ в клиническом материале с использованием набора «АмплиСенс® HCV/HBV/HIV-FL» с гибридиза-ционной флюоресценцией в режиме «реального времени». Канал FAM\фон использовали для детекцииа ВГС, канал 10Е\фон — для детекции ВИЧ 1, канал ROX\фон — для детекции ВГВ [2]. Диагностику на присутствие МТБ проводили с помощью комплекта реагентов для ПЦР-амплификации ДНК Mycobacterium tuberculosis complex FL c гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». ПЦР-исследования
Таблица 1
Отношение шансов, как показатель вероятности суперинфекции
Фактор риска суперинфекции Отношение шансов
ВИЧ/ВГС 3,8
ВИЧ/ВГВ 0,85
ВИЧ/ТВ 1,2
ВГС/ВИЧ 3,64
ВГВ/ВИЧ 0,9
ТВ/ВИЧ 1,2
проводили на амплификаторе iQ 1Суе1ег фирмы-производителя ВюИ^ (США) с усовершенствованной программой обработки сигналов флюоресценции.
Результаты и обсуждение
Среди 650-и ВИЧ-положительных образцов ВГС был обнаружен у 387, гепатит ВГВ — у 30-и пациентов. Из 694-х образцов ВГС-позитивной плазмы ВИЧ-положительными оказались 387. Из 86-и ВГВ-положительных пациентов ВИЧ-позитивными оказались 30, а из 562-х МБТ-позитивных образцов ВИЧ-положительными оказались 202.
Поскольку частоты перечисленных выше заболеваний в популяциях человека различны и обычно их абсолютные величины относительно невелики, вероятность того, что заболевание одним из них приводит к увеличению вероятности суперинфекции, мы оценивали с помощью статистической процедуры — отношения шансов. В тех случаях, когда отношение шансов существенно выше единицы, можно говорить, что фактор риска увеличивает частоту суперинфекции. В свою очередь, достоверное увеличение частоты суперинфекции означает, что в случае наличия у пациента фактора риска автоматически показана проверка на присутствие данной суперинфекции.
В настоящем исследовании каждый из патогенов (МТБ, ВИЧ, ВГВ и ВГС) последовательно играл роль фактора риска по отношению к остальным патогенам. Для каждой такой пары вычисляли отношение шансов (табл. 1).
Показатель «отношение шансов» — это отношение шансов события в одной группе к шансам события в другой группе или отношение шансов того, что собы-
тие произойдет, к тому, что событие не произойдет. Отношение шансов используется для представления результатов мета — анализов и исследований случай-контроль. Если заболевание очень редкое, то отношение шансов примерно равно относительному риску.
Отношение шансов заболевания ВГС и ВИЧ очень велико. Это заставляет предложить обязательное обследование на наличие одной из этих инфекций при обнаружении другой. Несколько повышенное симметричное отношение шансов совместного заражения ВИЧ и МБТ, по-видимому, отражает социальные особенности, способствующие распространению обеих инфекций. Низкое присутствие гепатита ВГВ у ВИЧ — позитивных больных, в определенной мере, является свидетельством эффективности проводимых профилактических мероприятий в Иркутской области по гепатиту ВГВ [1].
Таким образом, широкое распространение антиретровирусной терапии привело к тому, что сопутствующие инфекции вышли на первый план, стали основной причиной заболеваемости и смертности среди лиц, инфицированных ВИЧ. Поэтому быстрый клинический анализ микс — инфекций важен для таких пациентов [5]. Необходима своевременная лабораторная диагностика инфекционных агентов в максимально возможном объеме с использованием ПЦР, который позволяет определить наличие вируса в первые одну — две недели после заражения, вне зависимости от образования антител [7].
Внелегочный туберкулез и парентеральные гепатиты в эпидемиологических условиях Иркутска должны быть включены в группу СПИД — индикаторных болезней, и, в случае обнаружения у пациента ВГС или ТВ, исследование этих больных на наличие ВИЧ-инфекции обязательно. Вместе с тем, ВИЧ-инфицированным пациентам следует в обязательном порядке обследоваться на все потенциально сопутствующие заболевания. Для этого в обязательный скрининг следует ввести ПЦР — обследование на выявление ВИЧ у всех ВГС, ВГВ и МБТ — положительных пациентов.
ПЦР — диагностику следует также включить в стандарт исследования для обнаружения вирусов у детей первого года жизни, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей [3]. В крови этих детей циркулируют материнские антитела к ВИЧ, поэтому традиционные методы диагностики не дают адекватных результатов. Использование метода ПЦР для обнаружения в биологических образцах вирусных инфекционных агентов и туберкулеза позволит провести адекватную этиологическую диагностику вирусных агентов и значительно улучшить раннюю диагностику туберкулеза.
ЛИТЕРАТУРА
1. Медведева Т.В., Чуланов В.П., Гутникова М.Ю. и др. Молекулярно-генетическая характеристика парентеральных вирусных гепатитов циркулировавших в Иркутской области в 2000-2005 гг. // Сборник научно-практических работ, посвященный 15-летию ЧОМДЦ. — Чита: Арт-Мастер, 2006.- С.154-156.
2. Hsia C.C., Chizhikov V.E., Yang A.X., Selvapandiyan A., еі al. Microarray multiplex assay for the simultaneous detection and discrimination of hepatitis B, hepatitis C, and human immunodeficiency type-1 viruses in human blood samples// Biochem. Biophys. Res. Commun. — 2007. — Vol. 356 (4). — P.1017-1023.
3. Menzies N.A., Homsy J., Chang Pitter J.Y., є! al. Cost-effectiveness of routine rapid human immunodeficiency virus antibody testing before DNA-PCR testing for early diagnosis of infants in resource-limited settings// The Pediatric Infectious Distase J. — 2009. — Vol. 28(9). — P. 819-25.
4. Sirinak C., Kittikraisak W., Pinjeesekikul D., et al. Viral hepatitis and HIV-associated tuberculosis: risk factors and TB treatment outcomes in Thailand // BMC Public Health. — 2008. — Vol. 8. — P245-251.
5. Scherer L.C., Sperhacke R.D., Ruffino-Netto A., Rossetti M.L., et al. Cost-effectiveness analysis of PCR for the rapid diagnosis of pulmonary tuberculosis// BMC Infectious Diseases. — 2009. — Vol. 31, 9(1). — P216-221.
6. Solomon S.S., Hawcroft C.S., Narasimhan P, et al. Comorbidities among HIV- infected injection drug users in Chennai, India // Indian Journal of Medical Research — 2008. — №5 — P 447-452.
7. Sullivan P.S., Hanson D.L., Teshale E.H., et al. Effect of hepatitis C infection on progression of HIV disease and early response to initial antiretroviral therapy// AIDS — 2006. — Vol. 20(8). — P.1171-1179.
Информация об авторах: 664047, Иркутск, ул. Байкальская, 109 ИОККДЦ, отдел лабораторной диагностики, лаборатория молекулярной биологии. Тел. (3952) 211-236, E-mail: med-tv@mail.ru, raisa_skv@mail.ru
Медведева Т.В. — заведующая лабораторией;
Некипелов О.М. — заместитель главного врача по хирургии;
Никитина Е.Г. — врач клинической лабораторной диагностики;
Скворцова Р.Г. — заведующая кафедрой, д.б.н., профессор.
