CC BY
4
моноклональных антител CD4, CD19 и CD8 проводили на 3-й день после активации лимфоцитов. ФГА увеличил экспрессию маркера активации CD25 на Т-хелперах (CD4+CD25+; 86,6 ± 5,1%), B-клетках (CD19+CD25+; 90,7 ± 3,41%), и Т-цитотоксических лимфоцитах (CD8+CD25+; 87,36 ± 3,35%). Предобработка МКПК микровезикулами с последующей активацией ФГА ин-гибировала экспрессию CD25 среди всех рассматриваемых субпопуляций лимфоцитов: на Т-хелперах (37,56 ± 9,14%), B-клетках (44,93 ± 8,05%) и Т-цитотоксических лимфоцитах (19,96 ± 2,44%).
Полученные нами данные свидетельствуют о том, что МВ-ЦВ МСК проявляют иммуносупрессивную активность на мононуклеарных клетках периферической крови человека. Исследование выполнено за счет средств гранта Российского научного фонда № 21-75-10035, в рамках Программы стратегического академического лидерства Казанского федерального университета (ПРИ0РИТЕТ-2030).
Литература:
1. Pick H., Schmid E.L., Tairi A.P., et al. J.Am. Chem. Soc. 2005. V.
127. P. 2908-2912.
2. Di Trapani M., Bassi G., Midolo M., et al. Sci. Rep. 2016. V. 6. P.
24120.
ДИОПСИД КАК НОСИТЕЛЬ
РЕКОМБИНАНТНОГО BMP-2 ДЛЯ
РАЗРАБОТКИ НОВЫХ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ
РЕГЕНЕРАЦИИ КОСТНОЙ ТКАНИ
И.Н. Булыгина1, 2, Ф.С. Сенатов1, 2,
П.А. Орлова1, А.В. Жулина1, М.С. Попонова1,
Т.М. Грунина1, 3, К.Е. Никитин1, Н.В. Струкова1,
М.С. Генералова1, А.В. Рязанова1, Р.
Чоудхари4, 5, А.В. Громов1, А.С. Карягина1, 3, 6
1 НИЦ эпидемиологии и микробиологии
им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России, Москва, Россия
2 Национальный исследовательский технологический университет «МИСиС», Москва, Россия
3 Всероссийский НИИ сельскохозяйственной биотехнологии Москва, Россия
4 Рижский технический университет, Рига, Латвия
5 Балтийский центр передового опыта в области биоматериалов, Штаб-квартира в Рижском техническом университете, Рига, Латвия
6 НИИ физико-химической биологии
им. А.Н. Белозерского, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: ibulygina@misis.ru
Ключевые слова: силикатная керамика, диопсид, BMP-2.
Создание новых биоматериалов для регенеративной медицины направлено на улучшение свойств существующих материалов и конструкций с целью достижения ускоренной или же более качественной регенерации дефекта. Сверхвысокомолекулярный полиэтилен (СВМПЭ) уже зарекомендовал себя в качестве эффективного материала для реконструкции хряща, обеспечивая поверхность с низким коэффициентом трения. Однако исследования последних лет позволяют использовать пористый СВМПЭ и композиционный материал на основе СВМПЭ с добавлением гидроксиапатита также при регенерации костной ткани [1]. Одним из перспективных направлений в биомедицине является изучение свойств материалов
с альтернативными наполнителями, которые, благодаря своим уникальным характеристикам, могут обеспечить создание новых композиционных материалов с улучшенными свойствами. В качестве возможного наполнителя может рассматриваться диопсид (CaMgSi2O6), демонстрирующий осаждение апатита на поверхности при инкубации в растворе, имитирующем внеклеточную жидкость организма, что делает его многообещающим кандидатом для реконструкции костных дефектов [2]. Помимо этого, диопсид обладает хорошими сорбцион-ными свойствами по отношению к костному морфоге-нетическому белку-2 (BMP-2), использование которого сопряжено с повышением регенеративного потенциала. В настоящей работе на первом этапе был получен диоп-сид с помощью ранее опробованного золь-гель метода с окислительно-восстановительными реакциями с использованием дополнительной стадии механоактива-ции [3]. Полученная фракция представляла собой мезо-пористые микрочастицы диопсида. Далее были получены композиционные материалы на основе СВМПЭ и диоп-сида. Для этого проводилась механоактивация порошков диопсида и СВМПЭ и их смешение с солью в планетарной шаровой мельнице, с последующим термопрессованием и обессоливанием. Полученные пористые композиционные материалы были охарактеризованы посредством сканирующей электронной микроскопии. На последнем этапе была продемонстрирована возможность использования разработанного имплантируемого материала на основе СВМПЭ, диопсида и BMP-2 для регенерации костной ткани на моделях in vivo. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РНФ 22-15-00216.
Литература:
1. Senatov F., Amanbek G., Orlova P. et al. MS&E:C. 2020. V. 111.
P. 110750.
2. Choudhary R., Venkatraman S.K., Bulygina I. et al. MS&E:C.
2021. V. 118. P. 111456.
3. Choudhary R., Venkatraman S.K., Bulygina I. et al. JofACS.
2020. V. 8(3). P. 862-87
НОВЫЕ НЕКОДИРУЮЩИЕ РНК,
АССОЦИИРОВАННЫЕ С ГЛИОЛБЛАСТОМОЙ
О.Ю. Буренина1, Ю.П. Рубцов2,
М.С. Павлюков2, О.Е. Мусатова2, Т.С. Зацепин3,
М.П. Рубцова3, О.А. Донцова1, 3
1 Сколковский институт науки и технологий, Москва, Россия
2 МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
3 Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва, Россия
e-mail: alunit@inbox.ru
Ключевые слова: длинные некодирующие РНК, альтернативный сплайсинг, онкомаркеры, глиобластома.
Некодирующие РНК (нкРНК) — это, как правило, ре-гуляторные молекулы, не подвергающиеся трансляции. Уровень их экспрессии зачастую чувствителен к малейшим изменениям в метаболизме клетки, в том числе обусловленных канцерогенезом. Ассоциированные с тем или иным видом рака днРНК могут быть использованы как специфичные онкомаркеры, а также как мишени для направленной терапии.
Ранее мы охарактеризовали новую печень-специфичную нкРНК HELIS [1], ген которой окружен неизвестными
днРНК, высокоспецифичными для тканей мозга. Мы провели биоинформатический анализ данного локуса и выбрали наиболее перспективные днРНК, активация экспрессии которых наблюдается при глиобластоме, что позволяет рассматривать их как потенциальные онко-маркеры. Нам удалось идентифицировать две новые днРнК LINC1102 и CABR1 в первичных культурах глиом человека [3], максимально приближенных по свойствам к раковым опухолям мозга и сохраняющих низкую степень дифференциации. При этом в обычных имморта-лизованных клеточных линиях экспрессия этих днРНК была на несколько порядков ниже.
Известной особенностью многих днРНК является альтернативный сплайсинг, приводящий к одновременному существованию в клетке нескольких изоформ. В базах данных аннотированы 4 транскрипта для CABR1 и 35 — для LINC1102. С помощью ОТ-кПЦР с парами прайме-ров, комплементарными различным экзонам или местам их соединений мы провели масштабный скрининг возможных транскриптов обеих днРНК, в результате которого оказалось, что ни одна из заявленных изоформ не является полностью верной. Для более точной характеристики CABR1 и LINC1102 мы провели идентификацию их 5'- и 3'- концов методом RACE с последующим секвенированием полученных фрагментов. В результате проделанной работы мы установили преобладающие и минорные изоформы каждой из двух днРНК и определили точные координаты их экзонов, что позволило подобрать наиболее перспективные мишени для направленного нокдауна. Мы также проверили, как направленное снижение экспрессии CABR1 и/или LINC1102 влияет на экспрессию маркеров EMT и стволовых клеток (CD44, CD133, N- и E-кадгеринов). Работа поддержана грантом РФФИ № 21-34-70042 мол_а_мос.
Литература:
1. Burenina O.Y. Lazarevich N.L.et al. J Cancer Res Clin Oncol.
2021. V. 147. P. 49.
2. Kovalenko T.F., Yadav B. et al. Biochimie. 2022. V. 200. P. 131.
БИОМЕДИЦИНСКИЕ ПРИЛОЖЕНИЯ
СЕГНЕТОЭЛЕКТРИЧЕСКИХ ПОЛИМЕРОВ
НА ОСНОВЕ ВИНИЛИДЕНФТОРИДА
В РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
Е.Л. Бурьянская1 2, О.В. Градов1, М.А. Градова1,
Д.А. Киселев2, В.В. Кочервинский3
1 ФИЦ ХФ РАН, Москва, Россия
2 НИТУ МИСиС, Москва, Россия
3 АО «ВНИХТ», Москва, Россия
e-mail: m1707925@edu.misis.ru
Ключевые слова: биосовместимость, сегнетоэлектриче-
ские полимеры, адаптивные биоматериалы
Сегнетоэлектрические полимеры на основе вини-лиденфторида (ВДФ) являются гибкоцепными кристаллизуемыми материалами, относятся к классу электроактивных полимеров и обладают высокими значениями пьезо- и пироотклика. Эти свойства, а также высокая химическая и термическая стабильность и близость значения акустического импеданса к значению такового в биологических тканях обуславливают перспективность использования сегнетоэлектрических полимеров в качестве биомедицинских материалов.
Устройства на основе таких материалов широко используются для регистрации физиологических
сигналов человека: снятия электрокардиограммы, контроля дыхания, измерения температуры тела и пульсовых волн. Сополимеры в виде пленок, волокон, пористых мембран и трехмерных пористых каркасов представляют большой интерес в приложениях тканевой инженерии для регенерации костной, мышечной и нервной ткани. Электроактивные макропористые пленки различной толщины, изготовленные методом спин-коатинга, также могут быть использованы в качестве материалов для создания интеллектуальных каркасов тканевой инженерии [1]. На основе сополимера ВДФ-ТрФЭ изготавливаются композитные покрытия им-плантатов, которые, благодаря высоким остеоиндуктивным свойствам и способности сорбировать стволовые клетки, стимулируют репаративный остеогенез [2].
Биосовместимость полимерных медицинских материалов обеспечивается их химическими и физическими свойствами. В ходе работы были изучены структурно-морфологические, спектральные и электрофизические свойства пленок сополимера винилиденфторида с гек-сафторпропиленом. Фазовый состав материала исследовался с помощью ИК-Фурье спектроскопии. Морфология поверхности пленок была изучена методами атомно-си-ловой микроскопии и сканирующей электронной микроскопии. Получены топографии поверхности пленок, рассчитаны значения среднеквадратичной шероховатости, проведены динамические наблюдения в электронном пучке. Методами силовой микроскопии пьезоотклика изучены пьезоэлектрические свойства материала.
Работа выполнена в рамках государственного задания Министерства науки и высшего образования РФ № FFZE-2022-0009.
Литература:
1. Ferreira A., Silva J., Sencadas V. et. al. Macromol. Mater. Eng.
2010. V. 295. P. 523.
2. Bolbasov E.N., Popkov A.V., Popkov D.A. et. al. Mater. Sci. Eng.
2017. V. 75 P. 207.
ПОВЫШЕНИЕ ГИДРОФИЛЬНОСТИ ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ НА ОСНОВЕ ПОЛИЛАКТИДА
Н.В. Бычков, А.А. Захаревич, Т.Е. Григорьев
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия e-mail: nikita3262@yandex.ru
Ключевые слова: поверхностная модификация, полилак-тид, аминолиз, полимерные матриксы.
Полимерные материалы на основе полилактида привлекают внимание исследователей в различных сферах научной деятельности, в том числе и в регенеративной медицине. Полилактид обладает значительной прочностью, хорошей совместимостью с живыми тканями и не образует токсичных продуктов при деградации в физиологических средах человека. На основе полилактида различными методами получают скаффолды, хирургические соединительные элементы, части кровеносной и опорно-двигательной систем [1].
Несмотря на то, что внедрение в человеческий организм материалов на основе полилактида не вызывает опасных осложнений, существует ряд специфических проблем. Сам полилактид как материал обладает гидрофобными свойствами [2], что усложняет процесс клеточной пролиферации [3], замедляя тем самым восстановление поврежденных и замещаемых тканей после имплантации.
