CC BY
114
№ 1 - 2012 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки
УДК 616.633.96:616.61
НЕКОТОРЫЕ АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОТЕИНУРИИ У БОЛЬНЫХ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ НЕФРОПАТИЕЙ
11 1 2 Е.Г. Степанова , О.Ю. Дорн , Л.А. Руяткина , Г.Е. Яковлева ,
А.В. Ломова1, С.А. Песков1, М.В. Паламарчук1, Е.А. Цикаленко1, Т.В. Аникина1
1ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России (г. Новосибирск)
2ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск)
Методы определения белка в моче с сульфасалициловой кислотой и пирогаллоловым красным выявляют разные по составу и количеству концентрации белков. Исследование общего белка в моче методом с пирогаллоловым красным и микроальбуминурии дают более высокую корреляцию и рекомендуются при обследовании больных с сахарным диабетом.
Ключевые слова: микроальбуминурия, протеинурия, определение белка
с сульфасалициловой кислотой и с пирогаллоловым красным.
Степанова Елена Георгиевна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 346-03-34
Дорн Ольга Юрьевна — ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», е-mail: [email protected]
Паламарчук Марина Валерьевна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», е-mail: [email protected]
Руяткина Людмила Александровна — доктор медицинских наук, профессор кафедры профпатологии и восстановительной медицины ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», е-mail: [email protected]
Яковлева Галина Евгеньевна — кандидат биологических наук, заместитель начальника отдела биохимии ЗАО «Вектор-Бест», контактный телефон: 8 (383) 332-94-44
Ломова Алёна Владимировна — аспирант кафедры профпатологии и восстановительной медицины ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 343-44-25
Цикаленко Елена Александровна — кандидат медицинских наук, ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 346-03-34
Аникина Татьяна Витальевна — ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 346-03-34
Песков Сергей Александрович — доктор медицинских наук, профессор кафедры гигиены и экологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 226-19-25
Физиологическая потеря плазменных белков с мочой определяется фильтрацией их в клубочках и реабсорбцией в проксимальных канальцах. Клубочки почек функционируют как молекулярное сито для белков плазмы, через который проходят белки малой молекулярной массы и задерживаются более крупные. Фильтрация белков зависит также от их количества, формы, заряда. Обычно белки с молекулярной массой свыше 60 кД задерживаются в плазме, а белки с молекулярной массой менее 25 кД практически свободно проходят через базальную мембрану клубочков, а затем реабсорбируются в проксимальных канальцах [2]. Альбумин имеет отрицательный заряд, что препятствует его проникновению в ультрафильтрат. Тем не менее, несмотря на большое количество в плазме крови, в норме альбумин в минимальных количествах содержится в моче [4]. Таким образом, незначительное количество белка в моче можно определить и у здорового человека. Кроме альбумина в норме в моче можно определить незначительное количество глобулинов: уромукоид, ß2-микроглобулин, ретинолсвязывающий белок, свободные лёгкие цепи иммуноглобулинов, преальбумин, орозомукоид, а1-антритрепсин [2]. Многое зависит от метода определения общего белка в моче. В современных лабораториях используют методы количественного определения белка в моче с сульфасалициловой кислотой (ССК) и с пирогаллоловым красным (1 Н К) [1]. При сравнении этих методов обращает на себя внимание существенная разница в нормативах: с ССК «нормальным» считается количество белка в моче до 0,02 г/л, тогда как с ПГК — до 0,12 г/л. Дело в том, что ССК определяет, в основном, альбумин, и общее содержание белка в пробе оказывается заниженным в присутствии глобулинов [5]. Однако белковый спектр мочи, представленный одним альбумином, встречается крайне редко — только при некоторых заболеваниях почек [6]. Белковый спектр мочи в норме и патологии обычно содержит альбумин (А) и глобулин (Г) в соотношении А/Г = 0,6-3,0. Следовательно, для достоверной оценки общей концентрации белков мочи необходим метод, позволяющий определять не только альбумин, но и глобулины. Именно таким является метод с ПГК.
Превышение верхней границы «нормы» общего белка в моче расценивается как протеинурия. Варианты протеинурии могут быть различными по составу белков, что в настоящее время позволяет определить иммунохимический метод и высокочувствительный электрофорез.
Большой интерес представляет микроальбуминурия, появляющаяся при повышении экскреции альбумина. Такое состояние наблюдается при изменениях в клубочках, возникающих у больных сахарным диабетом или артериальной гипертензией. Микроальбуминурия является достаточно ранним признаком нарушения функции клубочков, когда болезнь ещё может поддаваться медикаментозному лечению. Нормальными считаются значения экскреции альбумина с мочой менее 20 мг/л.
Микроальбуминурия определяется иммунохимическим методом как экскреция альбумина с мочой от 20 до 200-300 мг/л утренней мочи [3].
Цель исследования: оценить значимость лабораторных методов для выявления
микропротеинурии у больных диабетической нефропатией.
Материал и методы исследования. Было обследовано 37 пациентов: 6 мужчин
и 31 женщина 36-72 лет с диагнозом диабетическая нефропатия. Длительность заболевания от 1 года до 15 лет. Показатели функционального состояния почек оценивали по уровням креатининемии и креатининурии с пикриновой кислотой, скорости клубочковой фильтрации (СКФ по формуле Кокрофта-Голта).
Определение общей концентрации белка в моче проводилось одновременно двумя методами: ССК-методом, ПГК-методом (набор реагентов «Вектор-Бест», Россия), а также определялась микроальбуминурия иммунотурбидиметрическим методом (набор реагентов «Витал Диагностик СПб.»). Определяемые концентрации белка ССК-методом от 0,022 до 0,6 г/л, ПГК-методом — от 0,003 до 1,9 г/л. Определяемые концентрации альбумина иммунотурбидиметрическим методом — от 20 до 200 мг/л. Статистическая обработка результатов поведена с помощью непараметрических методов программы Statistika (6,0), описательные статистики приведены в формате М ± m (Min, Max). Корреляционные связи оценивали в целом по группе, а также в зависимости от пола.
Результаты. Показатели состояния функции почек составили: креатинин крови 85,1 ± 2,6 мкмоль/л; креатинин мочи 21,3 ± 4,8 ммоль/л; СКФ 95,5 ± 4,2 мл/мин. Параметры протеинурии были следующие: микроальбуминурия 23,5 ± 6,7 мг/л, протеинурия ПГК-методом 0,83 ± 0,46 г/л, протеинурия ССК-методом 0,24 ± 0,12 г/л. Корреляционный анализ выявил достоверные (р < 0,05) корреляционные отношения показателей протеинурии, определенной как ПГК так и ССК методами с креатинином мочи (г = 0,50 и 0,37 соответственно), с микроальбуминурией (г = 0,83 и 0,75 соответственно). При этом достоверные корреляции микроальбуминурии с протеинурией, определённой ПГК-методом, у мужчин был выше (г = 0,94), чем у женщин (г = 0,81 ; р < 0 ,05). В то же время подобные корреляционные связи микроальбуминурии с протеинурией, определённой ССК-методом, у женщин были достоверными, но меньшей силы в сравнении с ПГК-методом (r = 0,76), однако эта достоверность терялась в подгруппе мужчин.
Таким образом, корреляционная связь микроальбуминурии и протеинурии по методу с ПГК выше, чем протеинурии с ССК. Полученные данные позволяют считать, что у части больных при определении концентрации белка в моче ССК-методом не выявляются невысокие концентрации белка в разовых порциях мочи, а значит, не устанавливается диагноз нефропатии и, как следствие, не проводится соответствующая диагнозу реабилитация.
Выводы: ПГК-метод является высокочувствительным тестом для определения
протеинурии. Он позволяет выявлять наличие различных концентраций белка в моче у больных с диабетической нефропатией. Использование других методов определения концентрации белка в моче у больных с данной патологией имеет серьезные ограничения. В частности, ССК-метод может оказаться неэффективным в диагностике глобулиновых протеинурий. Определяя микропротеинурию и микроальбуминурию более чувствительным методом, мы можем диагностировать диабетическую нефропатию на более ранних стадиях, а значит улучшать эффективность лечебно-профилактических мер.
Список литературы
1. Карпищенко А. И. Медицинские лабораторные технологии / А. И. Карпищенко. — СПб. : «Интермедика», 1998. — Т. 1. — 164 с.
2. Козлов А. В. Протеинурия : методы её выделения / А. В. Козлов. — СПб., 2007. — 58 с.
3. Козырева Е. А. Диагностические возможности определения микроальбуминурии / Е. А. Козырева // Клин. лаб. диагностика. — 1994. — № 3. — С. 29.
4. Мухин Н. А. Альбуминурия — маркер поражения почек и риска сердечнососудистых осложнений / Н. А. Мухин, Г. П. Арутюнов, В. В. Фомин // Нефрология. — 2009. — № 1. — С. 12-17.
5. Пупкова В. И. Определение белка в моче и спинномозговой жидкости / В. И. Пупкова, Л. М. Прасолова. — Кольцово, 2005. — 43 с.
6. Johnson C. A. Clinical Practice Guidelines for Chronic Kidney Disease in Adults : Part I / C. A. Johnson [et al.] // Am. Pham. Physician. — 2004. — Sept. 1. — Vol. 70, N 5. — P.869-876.
SOME PRESSING QUESTIONS OF PROTEINURIA RESEARCH AT PATIENTS WITH DIABETIC NEPHROPATHY
11 1 2
Е.G. Stepanova , О.Y. Dorn , L.À. Ruyatkina , G.E. Yakovleva ,
À.V. Lomova1, S.À. Peskov1, M.V. Palamarchuk1, E.À. Tsikalenko1, T.V. Anikina1
1SEIHPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment» (Novosibirsk c.)
2CHSC «Vector-Best» (Novosibirsk c.)
Methods of urine proteins determination by sulfasalicilic acid and pyrogallolic red determine different concentrations and compositions of proteins. Detection of total urine proteins by pyrogallolic red and microalbuminuria is an important and more specific diagnostic tool to recognize kidney glomerular damage for patients with diabetic nephropathy.
Keywords: microalbuminuria, proteinuria, determination urine proteins by sulfasalicilic acid and pyrogallolic red.
About authors:
Stepanova Elena Georgievna — candidate of medical sciences, assistant professor of clinical laboratory diagnostics chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», office number: 8(383) 346-03-34
Dorn Olga Yurevna — assistant of clinical laboratory diagnostics chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», e-mail: [email protected]
Palamarchuk Marina Valerievna — candidate of medical sciences, assistant professor of clinical laboratory diagnostics chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», e-mail: [email protected]
Ruyatkina Lyudmila Aleksandrovna — doctor of medical sciences, professor of professional pathology and regenerative medicine chair SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», e-mail: [email protected]
Jakovleva Galina Evgenievna — candidate of bioscience, deputy manager of biochemistry department of CHSC "Vector-Best", contact phone: 8(383) 332-94-44
Lomova Alena Vladimirovna — PG student of professional pathology and regenerative medicine chair SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», office phone: 8(383) 343-44-25
Tsikalenko Elena Aleksandrovna - candidate of medical sciences, assistant of clinical laboratory diagnostics chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», office phone: 8(383) 346-03-34
Anikina Tatyana Vitalievna — assistant of clinical laboratory diagnostics chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», office phone: 8(383) 34603-34
Peskov Sergey Aleksandrovich — doctor of medical sciences, professor of hygiene and ecology chair at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», office phone: 8(383) 226-19-25
List of the Literature:
1. Karpishchenko A. I. Medical laboratory technologies / A.I. Karpishchenko. — SPb.: «Intermedica», 1998. — V. 1. — 164 P.
2. Kozlov A. V. Proteinuria: methods of its allocation / A. V. Kozlov. — SPb., 2007. — 58 P.
3. Kozyreva Е. A. Diagnostic possibilities of definition of microalbuminuria / E. A. Kozyreva // clinical laboratorial recognition. — 1994. — № 3. — P. 29.
4. Mukhin N. A. Albuminuria —marker of lesion of kidneys and risk of cardiovascular complications / N. A. Mukhin, G. P. Arutyunov, V. V. Fomin // Nephrology. — 2009. — № 1. — P. 12-17.
5. Pupkova V. I. Definition of fiber in urine and spinal liquid / V. I. Pupkova, L. M. Prasolova. — Koltsovo, 2005. — 43 P.
6. Johnson C. A. Clinical Practice Guidelines for Chronic Kidney Disease in Adults : Part I / C. A. Johnson [et al.] // Am. Pham. Physician. — 2004. — Sept. 1. — Vol. 70, N 5. — P.869-876.
