CC BY
11Высокотехнологическая медицинская помощь: онкология, гематология, трансплантология и иммунология, анестезиология и реаниматология
IN VITRO МОДЕЛЬ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ФУНКЦИЙ ЦИС-РЕГУЛЯТОРНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ ГЕНА POU5F1
Ермакова В.В., Кузьмин А.А.
Институт цитологии Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия Научный руководитель: Томилин А.Н., член.-корр. РАН, д-р биол. наук, профессор
Эмбриональные стволовые клетки или индуцированные плюрипотентные клетки (ЭСК и иПСК) способны к неограниченному самообновлению и дифференцировке во все типы клеток в организме человека. Они обладают большим потенциалом для клеточной терапии неизлечимых в настоящее время заболеваний, включая нервные дегенеративные заболевания и сердечную недостаточность. На данный момент их применение в терапии ограничено по ряду причин, таких как: иммуногенность и геномная нестабильность. Продукт гена Pou5f1 - белок Oct4 является основным фактором поддержания плюрипотентного состояния клеток, но его экспрессия в дифференцированных клетках организма приводит к канцерогенезу и аномалиям эмбрионального развития. Однако ген Pou5f1 расположен в области кластера высокой плотностью генов, активно экспрессирующихся в неплюрипотентных клетках, что потенциально повышает вероятность снятия запрета на его экспрессию.
Мы предположили, что ген Pou5f1 имеет функции помимо кодирования его белкового продукта. По ряду признаков промотор гена Pou5f1 может являться эПромотором, то есть способен проявлять энхансерную активность.
При создании in vitro модели для изучения промотора Pou5f1 мы осуществили биаллельную делецию промотора Pou5f1 в ЭСК мыши и внедрили 9.8-тпн фрагмента гена Pou5f1 в локус с постоянной экспрессией Rosa26. Это позволило сохранить их плюрипотентные свойства. В качестве контрольных линий мы решили использовать клетки с нокаутом Pou5f1, структурно сохраненным промотором и первым экзоном и вставкой экзогенного Pou5f1 в Rosa26 (ЭСК Pou5f1-/-Rosa26Pou5f1/+), а также клетки с делецией промотора и первого экзона только на одной из аллелей локуса дикого типа (ЭСК Pou5fPox/ü).
Перенос одной копии гена Pou5f1 с минимальным набором энхансеров, необходимых для его экспресии, в эктопическое положение сохранил способность ЭСК Pou5f1NÜ Rosa26Pou5f1/+ экспрессировать основные маркеры плюрипотент-ности и поддерживать самообновление культуры. Сравнивая эту линию с контрольными ЭСК Pou5f1flox/flox и Pou5f1flox/A, мы наблюдали нарушение перехода клеток в «наивное», а затем и в «праймированное» состояние плюрипотентности из-за дисрегуляции работы гена Pou5f1, которая привела к нарушению сначала
Ранее было показано, что переход ПСК из «наивного» состояния в «праймированное» обусловлен прежде всего переключением активности проксимального и дистального энхансеров. Однако теперь встает вопрос о том, какие еще изменения структуры генома вовлечены в регуляцию гена Pou5f1. Выяснить это позволит полногеномный анализ экспрессии генов RNA-seq и Capture Hi-C.
МУТАЦИЯ В ГЕНЕ BRCA2 ПРИ ОПУХОЛИ КЛАЦКИНА Камалова М.А., Голубева С.А.
Московский научно-исследовательский онкологический институт имени П.А Гзрцена, Москва, Россия Научный руководитель: Пайчадзе А.А., канд. мед. наук
Актуальность. Опухоль Клацкина представляет собой злокачественное новообразование внепеченочных желчных протоков и составляет на сегодняшний день от 50 до 70 % всех холангиокарцином.
Описание случая. В сентябре 2012 года по данным ирригоскопии был установлен диагноз экзофитный рак сигмовидной кишки. 23.10.2012г проведено хирургическое лечение в объеме резекции сигмовидной кишки. ПГИ: низкодиф-ференцированная аденокарцинома, в одном из 5 л/у метастаз опухоли, установлен патоморфологический диагноз pT3N1M0. На онкологическом консилиум рекомендовано проведение 12 курсов ПХТ по схеме mFOLFOX6. С 11.2012 г. по 06.2013 г. проведено 12 курсов АПХТ по схеме mFOLFOX6. При контрольном обследовании в мае 2015 года, данных за рецидив рака сигмовидной кишки не получено, однако выявлено новообразование общего печеночного протока. Для дообследования обратилась в поликлинику МНИОИ им.П.А.Герцена. В ходе дообследования выявлена опухоль Клацкина
Высокотехнологическая медицинская помощь: онкология, гематология, трансплантология и иммунология, анестезиология и реаниматология
с местным интрапаренхиматозным распространением. Консультирована в отделении абдоминальной онкологии. 30.06.15 в медицинском центре «АССУТА РАМАТ А-ХАЯЛЬ» выполнена открытая биопсия одного из л/у, расположенных над правой печеночной артерией. Морфологическое заключение: муцинозная аденокарцинома, с высокой степенью вероятности холангиокарцинома. Рекомендовано проведение лекарственного лечения по схеме гемцитабин+оксалиплатин.
С 07.15 по 08.15 проведено 4 курса ПХТ по схеме гемцитабин + оксалиплатин. По результатам контрольного комплексного обследования (Израиль) - стабилизация процесса. Рекомендовано проведение ПХТ (еще 3 курса) по прежней схеме. С 09.2015 по 10.2015 проведены 5-8 курсы ПХТ: гемцитабин 1000 мг/м2 в/в в 1-й и 8-й дни + оксалиплатин 100 мг/м2 в/в в 1-й день каждые 3 недели. При обследовании в 11.2015 (Израиль) отмечена отрицательная динамика процесса в виде увеличения в размерах первичного очага. Рекомендовано продолжить ПХТ по измененной схеме. С 11.2015 по 12.2015 - проведено 2 курса ПХТ по схеме цисплатин+капецитабин. По результатам контрольного обследования от января 2016 г.: прогрессирование. Пациентка обсуждена на онкологическом консилиуме (в медицинском центе «АССУТА» Израиль) принято решение о проведение ХЛТ на очаг в печени и парааортальные лимфоузлы 50,4 Грей/28 фракций на фоне приема препарата капецитабин (31.01.2016-09.03.2016). Учитывая отсутствие резервов лекарственного лечения, пациентке было рекомендовано проведение полного геномного секвенирования генома (NGS). По результатам NGS было получено наличие мутаций, имеющие клиническую значимость: мутации в гене BRCA2, микро-сателлитная нестабильность. 06.2016 у пациентки выявлено прогрессирование заболевания. Учитывая MSI-H статус опухоли предложена терапия препаратом пембролизумаб. С 06.2016 по 08.2018 года пациентке проведено суммарно 26 курсов иммунотерапии. Далее пациентка находилась под строгим динамическим наблюдением. В апреле 2022 года при контрольном обследовании у пациентки отмечена отрицательная динамика. По результатам пункционной биопсии биопсии поджелудочной железы: цитограмма умереннодифференцированной аденокарциномы. С 06.2022 г. по 08.2022 г. проведено 3 курса иммунотерапии пембролизумабом. При контрольном обследовании от 08.2022г.: прогрессирование.
С 29.08.22 г. по 05.09.22 г. в условиях ОКМЛ№1 выполнено дренирование брюшной полости и проведена консервативная терапия. В связи с прогрессированием на иммунотерапии рекомендована смена терапии на схему гемцитабин+кар-боплатин. Принимая во внимание результаты полного геномного секвенирования, после проведения лекарственного лечения препаратами платины, появилась возможность проведения поддерживающей терапии препаратом олапариб.
С 06.09.22 г. по 12.22 г.проведено 6 курсов ПХТ по запланированной схеме лечения. По результатам промежуточного контроля после 3-го курса лекарственного лечения: стабилизация.С января 2023г пациентка находится на поддерживающей терапии препаратом олапариб.
Исследование продолжается.
Вывод: исследование полного геномного секвенирования открывает новые возможности лекарственного лечения, позволяет индивидуализировать лечебную тактику, увеличивает резервы противоопухолевой терапии.
ОСОБЕННОСТИ ВАРИАНТОВ АНАТОМИЧЕСКОГО СТРОЕНИЯ ПУТЕЙ ОТТОКА ОТ ПЕЧЕНИ, ПИЩЕВОДА И ЖЕЛУДКА ПРИ ВЫПОЛНЕНИИ ОПЕРАЦИИ TIPS С ЭМБОЛИЗАЦИЕЙ ВЕН ЖЕЛУДКА
Калинин Д.С., Михайлов И.И., Данильчук Н.О., Минкин А.С., Шарма Сиддхарт
Ростовский государственный медицинский университет, Ростов-на-Дону, Россия Научные руководители: Сапронова Н.Г., д-р. мед. наук, доцент, Косовцев Е.В., канд. мед. наук
Целью работы стало изучение путей оттока от печени при портальной гипертензии (ПГ) цирротического генеза с целью дополнения информативности предоперационного планирования оперативного вмешательства и улучшения результатов выполнения операции TIPS.
Материалы и методы. Основой для проведения данного анатомического исследования послужили серии компьютерных спленопортограмм, выполненных у 188 больных с ПГ, вызванной циррозом печени (ЦП), находившихся под наблюдением в период с 2010 по 2019 г. Они были получены в результате выполнения мультиспиральной компьютерной томографии (МСКТ) брюшной полости с использованием сосудистого режима, обеспечившего получение качественной пор-тальновенозной фазы.
Результаты. В 65 % была обнаружена классическая (проксимальная) анатомия правой печеночной вены, то есть главный ствол был образован на стыке двух притоков в плоскости между правой передней и задней секциями печени. Сегменты печени V и VIII в обычном варианте дренируются переднемедиальным притоком, а задний нижний приток дренирует сегмент VI. Эти притоки соединяются, образуя главный ствол правой печеночной вены (ППВ), также известный как верхний ствол ППВ, который затем направляется вверх к нижней полой вене (НПВ). Рассыпной (дистальный) тип строения ППВ был установлен у 35 % пациентов и включал наличие дополнительных притоков ППВ. Они были представлены либо в виде постоянного притока, дренирующего сегмент VII, иногда называемого правой поверхностной веной, последовательно присоединяющегося к верхниму стволу ППВ на его заднебоковой стороне; либо четко выраженного среднего притока ППВ дренирующего нижний VI сегмент печени. Также, одним из вариантов ангиоархитектоники, могло быть наличие дорсальной вены, дренирующей заднюю часть VIII сегмента, соединяющаяся с медиальной частью верхнего ствола ППВ.
