CC BY
64
HayKOBMM BiCHMK ^tBiBCtKoro Ha^OHa^tHoro yHiBepcMTeTy
BeTepMHapHoi Megw^HM Ta öioTexHO^oriw iMem C.3. I^M^Koro
Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies
ISSN 2518-7554 print ISSN 2518-1327 online
doi: 10.32718/nvlvet8819 http://nvlvet.com.ua
UDC 619:616.056.5-071/084:636.5
Morphological changes in the broiler chickens liver at use of "Karsilin" in conditions of infectious-toxic hepatitis modelling
T.I. Fotina, G.A. Zon, Ye.V. Vashchyk
Sumy National Agrarian University, Sumy, Ukraine
Article info
Received 27.08.2018 Received in revised form
20.09.2018 Accepted 24.09.2018
Sumy National Agrarian University, Gerasim Kondratyev Str., 160, Sumy, 40000, Ukraine. Tel.:+38-050-142-05-57 E-mail: yevgeniavashik@gmail. com
Fotina, T.I., Zon, G.A., Vashchyk, Ye.V. (2018). Morphological changes in the broiler chickens liver at use of "Karsilin" in conditions of infectious-toxic hepatitis modelling. Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies, 20(88), 102-107. doi: 10.32718/nvlvet8819
In poultry farms, at the conditions of rapid intensification of production, a lot of stress factors, such as infectious, technological, fodder, medication and others, act on the bird organism, and the main burden is borne by the liver. Therefore, timely warning and control of liver disease is very important. One of the marker infections with a potent pathogenic toxic effect on the liver and the bird organism as a whole is pseudomonosis. Objective: .study of morphological changes in the liver of broiler chickens at the use of "Karsilin" in the conditions of modeling of infectious-toxic hepatitis for the determination of hepatoprotec-tive action. We conducted a histological examination of the liver of intact chickens (intact control) ; chickens infected with the strain of P. aeruginosa microorganisms (control pathology); chickens, for which the "Karsilin" or Thiotriazolin was used with preventive-therapeutic purposes at infecting P. aeruginosa. Microscopic picture of liver samples infected with P. aeruginosa chicks corresponds to moderately expressed non-specific reactive hepatitis with morphological signs: disorganization of the hepatic beams pattern, hydrocytic and fatty hepatocyte dystrophy, small foci necroses, inflammatory cellular infiltration; proliferative, stagnant processes, perivascular edema and hyperemia in the system of the hepatic triad. The use of "Karsilin" at experimental pseudomonosis reduced the intensity of pathological processes: the severity of hepatocyte dystrophy was less than 71%, and necrotic changes in hepatocytes and violations of the beam pattern were less than 75% compared with the control pathology. Feed supplement "Karsilin" demonstrates hepatoprotective effect, which is expressed by preventing or significantly reducing the intensity of the manifestation of dystrophic, necrotic, infiltrative and proliferative processes in hepatocytes and in the hepatic triad in conditions of infectious-toxic hepatitis caused by the pathological action of P. aeruginosa toxins in the body of chicken broilers. Feed supplement "Karsilin" on the activity of protective and regenerative action is not inferior, and according to many indicators, the comparison preparation Thiotria-zolin prevails.
Key words: "Karsilin", poultry pseudomonosis, infectious-toxic hepatitis, histological examination, hepatoprotective effect, Thiotriazolin, hepatocyte dystrophy, necrosis.
МорфолоНчш змши в печшщ курчат-бройлерiв за застосування "Карсилшу" в умовах моделювання шфекцшно-токсичного гепатиту
Т.1. Фотша, Г.А. Зон, С.В. Ващик
Сумський нацюнальний аграрний ^верситет, м. Суми, Укра'та
На птахофабриках в умовах стршког ттенсифтацп виробництва на оргатзм птиц die багато стрес-факторiв, таких як т-фекцшт, технологiчнi, кормовi, медикаментозн та iншi, при цьому головне навантаження приймае на себе печтка. Тому дуже важливого значення набувае своечасна профилактика захворювань печтки та боротьба з ними. Одтею з маркерних тфекцш з потужною патогенною токсичною дieю на печтку та оргатзм птиц загалом е псевдомоноз. Мета: до^дження морфологiчних змт в печтщ кyрчат-бройлерiв за застосування "Карсилту " в умовах моделювання шфекцшно-токсичного гепатиту для визна-чення гепатопротекторног дп. Проведено гiстологiчне до^дження печтки ттактних курчат (ттактний контроль); курчат, яких тф^вали штамом мiкроорганiзмiв P. aeruginosa (контрольна патологiя); курчат, яким з профтактичнолкувальною метою на фот тфщвання P. aeruginosa вводили "Карсилт" або Тiотрiазолiн. Мтроскотчна картина зразтв печiнки тфжованих
P. aeruginosa курчат за мoрфoлoгiчними ознаками eidnoeidae помарно вираженому неспецифiчному реактивному гепатиту: дезор-гатзащя рисунку печткових балок, гiдрoniчнa та жирова дистрoфiя геnaтoцитiв, дрiбнi фокуси некрозу, запальна клШинна тфи льтращя, nрoлiферaтивнi, застшт процеси, периваскулярний набряк та гinеремiя в системi печтковог трiaди. Застосування "Карсилту " за експериментального псевдомонозу знижувало ттенсивтсть прояву naтoлoгiчних проце^в: виразтсть дистрофи геnaтoцитiв була меншою на 71%, а некротичт змти геnaтoцитiв та порушення балкового рисунку - на 75% noрiвнянo з контрольною naтoлoгieю. Кормова добавка "Карсилш " проявляе гепатопротекторну дю, яка виражаеться запобканням або значним зменшенням iнтенсивнoстi прояву дистрoфiчних, некротичних, тфтьтративних та nрoлiферaтивних явищ в гепатоцитах та в системi печтковог трiaди в умовах тфекцшно-токсичного гепатиту, спричиненого naтoлoгiчнoю дieю токситв P. aeruginosa на оргашзм курчaт-брoйлерiв. Кормова добавка "Карсилш " за активтстю захисноЧ та вiднoвлювaльнo'i ди не поступаеться, а за багатьма показниками переважае препарат noрiвняння Тютриазолт.
Ключовг слова: "Карсилш ", псевдомоноз птищ, шфекцшно-токсичний гепатит, гiстoлoгiчнi до^дження, гепатопротектор-на дiя, Тютриазолт, дистрoфiя геnaтoцитiв, некроз.
Вступ
Стан обм1ну речовин, здоров'я та продуктивное^ птиц напряму залежить вщ виконання ветеринарно-еанггарних вимог утримання, розведення та год1вл1 птиш. На птахофабриках в умовах етр1мко! штенеи-фшацц виробництва на оргашзм птиш д1е багато стрес-фактор1в, таких, як шфекцшш, технолопчш, кормов^ медикаментозн та irnni, при цьому головне навантаження приймае на себе печшка. Це централь-ний орган дезштокеикацй, нейтралiзацil токеишв i 1'х пiдготовки до виведення з органiзму. При хворобах або будь-яких ураженнях даного органу страждае весь оргашзм, шд загрозою здоров'я птицi загалом. Тому дуже важливого значення набувае своечасна профша-ктика захворювань печшки та 1'х лiкуванmя.
З огляду на рiзноманiття негативних факторiв, що дiють на органiзм птицi в цшому i на печiнку зокрема, особливого значення набувають евоечаенi заходи, спрямоваш на регенерацш i захист органу ввд впливу токеинiв. Ниш вчеш з рiзних кра1'н свггу ведуть нау-ковi доелiдження, намагаючись виявити рiзнi речови-ни i 1'х комбшацп, як1 надiйно захищали б печiнку ввд патогенно! ди токеинiв (Kuz'minova et 2014; Sokolov, 2016).
"Карсилш" - це нова комплексна кормова добавка виробництва ТОВ НВФ "БРОВАФАРМА", призначе-на для полшшення метаболiчних процееiв в органiзмi тварин i птицi, пiдвищення резистентности нормаль зацп функцiонування печiнки, полшшення показнишв конвереп корму та загальних показник1в обмiну речовин. Дшчими екладовими речовинами е: карнiтину пдрохлорид - 5,0, еилiмарин - 2,0, беташ - 2,0, холiну хлорид - 1,5, магнш сульфат - 20,0, сорбгт - 25,0, аскорбшова кислота - 6,0 на 100 мл продукту.
Одшею з маркерних шфекцш з потужною патогенною токсичною дiею на печiнку та оргашзм е псевдомоноз, епалахи якого еупроводжуютьея великим ввдходом та вибраковкою птиш, що перехворiла, ви-еоким ввдеотком загибелi ембрiонiв в перюд шкубаци яець. Тому ця iнфекцiя обрана нами для моделювання iнфекцiйно-токеичного гепатиту (Vashchyk, 2009; Zon and Vashchyk, 2011).
Мета: доелвдження морфологiчних змiн в печiнцi курчат-бройлерiв за застосування "Кареилiну" в умовах моделювання шфекцшно-токсичного гепатиту для визначення гепатопротекторно! ди.
Матерiал i методи дослiджень
Для дослiдження було створено 4 групи курчат-6poraepiB (крос Cobb 500) по 5 голiв в кожнiй. Двi дослщт групи, яким задавали "Карсилш" (II гр.) та Тiотрiазолiн (III гр.) на фош експериментально! псев-домонозно! шфекцп, та 2 контрольнi - штактний контроль (IV гр.) i контрольна патологiя (I гр.) - зара-ження курчат без введення будь-яких засобiв. Всi групи курчат утримувались окремо в рiзних клiтках в одному примiщеннi за однакових параметрiв мшрок-лiмату. Годiвлю здiйснювали комбiкормом з одше! парти вiдповiдно вiку, напування - перекип'яченою водою.
Курчатам вiком 14 дiб задавали протягом 10 дiб дослiдну кормову добавку "Карсилш" та класичний гепатопротектор Тютриазолш (дiюча речовина tiazotic acid, виробник ПАТ "Кшвмедпрепарат") у дозi 0,2 мл/кг i 50 мг/кг живо! ваги вiдповiдно. Для моделювання шфекцшно-токсичного гепатиту на 7 добу експерименту внутршньоочеревинно iнфiкували курчат змивом з добово! агарово! культури P. aeruginosa в розведеннi 300 тис. КУО/мл (доза 0,2 мл). Через 3 доби шсля зараження здшснювали забш птицi з метою облшу патологоанатомiчних оз-нак та вщбору зразк1в печiнки для пстолопчного дослiдження.
Патологiчний матерiал фiксували у 10% розчиш нейтрального формалiну, зневоднювали у спиртах зростаючо! концентраци з подальшою заливкою у парафiн. Зрiзи товщиною 4-5 мкм з парафшових блоков отримували на санному мiкротомi МС 2, фарбува-ли для оглядово! мшроскопп гематоксилiном (кислим гемалауном Майера) та еозином (Horalskyi et al., 2015). Мiкроскопiчне вивчення мiкропрепаратiв проводили пiд мшроскопом Granum, мшрофотографуван-ня мiкроскопiчних зображень здiйснювали цифровою видеокамерою Granum DCM 310. Фотознiмки оброб-ляли на комп'ютерi Pentium 2,4 GHz за допомогою програми Toup View.
Для зручносл порiвняння та для бшьшо! об'ективностi отриманих результатiв на фарбованих гематоксилшом та еозином мiкропрепаратах проводили вiзуальну напiвкiлькiсну (бальну) оцшку ступе-ня пошкоджень структури печшки курчат рiзних груп за методом Соколовського. Ошнювали виразнiсть дистрофи гепатоципв, наявнiсть та розповсюдженiсть зон порушення балкового рисунку, некроз клггин, клггинну iнфiльтрацiю судин.
Результати та Ух обговорення
При пстолопчному дослщженш зразшв печшки курчат групи штактного контролю встановлено, що м1кроскошчна будова печшки чпжо виражена, меж1 м1ж печшковими клгтинами збережеш, печшков1 балки добре видно, ядра печшкових клгшн однаково! величини, р1вном1рно забарвлеш.
Структура органу загалом збережена та морфоло-пчш змши ввдсутш. У бшьшосп часточок простежу-
еться рад1альне розмщення печшкових балок навколо центрально! вени. Гепатоцити збер1гають пол1гональ-ну форму, одноядерш, мюцями двоядерш, меж1 м1ж клгтинами чпта, добре простежуються. 1хш ядра пере-важно займають центральне положення. Перисинусо-!дш простори звужеш та майже не простежуються. Ендотел1альш клтшни плосш, щ1льно прилягають до гепатоципв, кшьшсть клгтин Купфера на одиницю площ1 у межах норми. Кашляри пом1рно кровонапов-неш (рис. 1).
Рис. 1. Виражений чгткий рисунок балково! будови тканини печшки умовно здорових курчат штактно! групи. Гематоксилш-еозин, а ><200, бх400
Пстолопчне дослвдження зразшв печшки курчат показуе, що за шфекцшно-токсичного гепатиту, спри-чиненого Р. aeruginosa, деяш ядра гепатоципв не мають чпжо! диференщацп хроматину. У клггинах, розташованих ближче до центральних судин, в1зуаль зуються ознаки шкнозу, рексису та л1зису. Переважна бшьш1сть гепатоципв мае ознаки пдрошчно! дистро-
фи, в деяких зразках - ознаки жирово! дистрофи. В окремих д1лянках виявляеться реакщя псевдоеозино-фшв на наявшсть збудника. Встановлено процес вогнищево! шфшьтрацп за рахунок компактного на-копичення макрофапв, поодиноких л1мфоципв та нейтрофшьних лейкоципв (рис. 2).
Рис. 2. Внутршньочасточковий вогнищевий шф1льтрат з макрофапв, л1мфоципв та нейтрофшв.
Гематоксилш-еозин, а ><200, бх400
Виявлено застшну гшеремш судин з периваскуля-рним набряком, що сввдчить про загальний венозний застш в оргаш. Стшки др1бних судин та жовчно! протоки - набрякла Стан останньо! вказуе на патолопю в бшарно! системи органа (рис. 3).
В потовщених стшках виявлено прол1ферацш макрофапв, в гепатоцитах, розташованих б1ля цих судин - ознаки зернисто! дистрофи, процеав локального та тотального некрозу. В кровоносних катлярах та ве-нулах виявляеться застшна гшерем1я.
а
Рис. 3. Активнi пролiферативнi процеси в етiнцi жовчних протокiв та кровоноених еудин.
Гематоксилш-еозин, а ><200, бх400
Рис. 4. Ддлянка печшки курчати, iнфiкованого P. aeruginosa. Пролiферативнi, заетiйнi процеси, периваекулярний набряк та гiперемiя в зонi печшково! трiади. Гематокеилiн-еозин, а ><200, бх400
Застшш процеси, вiдеутнiеть ядер в клпинах, периваекулярний набряк дрiбних еудин, гiперемiя евщ-чать про реакщю органу на патологiчнi процеси, ви-кликаmi збудником (рис 4).
На фон глибоких диетрофiчних процееiв спосте-рiгаетьея накопичення жовчного пiгменту мiж балками, що зумовлюе попршення видалення бiлiрубiну з органа при його надмiрнiй продукцп (рис. 5).
Мжроскотчна картина зразк1в печiнки шфшова-них P. aeruginosa курчат за морфолопчними ознаками ввдповвдае помiрно вираженому неепецифiчному реактивному гепатиту.
В результат морфологiчного доелiдження зразк1в печшки курчат II доелвдно! групи встановлено, що в 80% зразк1в будова печшки була чгтко виражена, збережена балкова структура: печiнковi балки добре проглядаються, меж1 м1ж печiнковими клиинами збереженi, ядра печiнкових клiтин майже однаково!
величини. Цей стан вважаемо насликом гепатопроте- Рис. 5. д1ЛЯНка печшки курчати. шфпюваного
кторно! дil "Кареилiну" (рие. 6). p. aeruginosa. Накопичення жовчного шгменту
м1ж балками. Гематоксилш-еозин, ><200
а
PHC. 7. Cja6Ka 3anajbHa KjiruHHa iH^ijbrpauia Ta joKajbHa gucTpo^ia renaTonmiB y iH^iKOBaHoro P. aeruginosa Kypnam, ^o oTpuMyBaB "KapcujiH". reMaToKCH^iH-eo3HH, ><400
nepHBacKy^apHHH Ha6paK BigcyTHiä, peaKqia kjItuh Kyn^epa noMipHa. npoji^eparaBHi npouecu - aK b CTiHui ^obhhhx npoToKiB, TaK i b cTiHui kpobohochhx cyguH Tpiagu - He BcTaHoBjeHo (puc. 7).
Ha $orn 3ragaHux hbh^ BuaBjaju o3HaKH gijeHHa kjItuh (gBoagepHi KjiraHu), ^o BKa3ye Ha pereHeparop-Hi npouecu b opraHi (puc. 8).
Phc. 6. 36epe®erncTb 6ajKoBoi 6ygoBu, BigcyTHicTb gncTpo^iHHHx Ta HeKpoTuHHux aBH^ b gijaHui neniHKH iH^iKoBaHoro P. aeruginosa Kypnam 3a 3acTocyBaHHa "KapcHmHy". reMaToKcu^iH-eo3HH, ><200
B 3pa3Kax neniHKH II gocjigHoi rpynu KypnaT 3a 3a-cTocyBaHHa "Kapcramy" BuaBjeHo He3HanHHH npoaB rigponiHHoi Ta ^upoBoi gucTpo^ii, gpi6Hi nooguHoK ^oKycu HeKpo3y Ta 3ohh iH^ijbrpauii jume b 10% 3pa3-
KiB.
Phc. 8. 36epe®eHHa Mop^ojoriHHoi 6ygoBu, npouec gijeHHa kjItuh. reMaToKcujiH-eo3HH, ><200
B III gocjigmn rpyni 3 BuKopucraHHaM TioTpua3oji-Hy 3a iH^iKyBaHHa P. aeruginosa b 70% 3pa3KiB cnocre-pirajaca 36epe®emcTb 6ajKoBoi cTpyKTypu opraHa, BigcyTHicTb a6o oKpeMHH npoaB rigponiHHoi Ta ^upoBoi gucTpo^ii, o3HaK HeKpo3y Ta iH^ijbTpaTHBHux, npoji-^epaTHBHHx npoueciB, ^o BKa3ye Ha 3axucHy Ta BigHoB-jiOBajbHy giro 3aco6y. B pemTi 3pa3KiB neniHKu Kypnar gaHoi rpynu 6yju BuaBjem Bu^eBKa3am Bupa^em o3HaKu ToKcuHHoro BnjuBy Ta naToreHHoi gii P. aeruginosa Ha cTaH neniHKu (puc. 9).
OTpuMaHi pe3yjbTaTu ricTojoriHHoro gocjig^eHHa ouiHeHo 3a cTyneHeM Bupa3HocTi naTOjorwHux o3HaK, nepeBegeHo y uu^poBe Bupa^eHHa 3a 6ajbHoo cucTe-moo. 3acTocyBaHHa "KapcujiHy" 3a eKcnepuMeHTajbHo-ro nceBgoMoHo3y 3Hu®yBajo iHTeHcuBHicTb npoaBy naTojoriHHux npoueciB: Bupa3HicTb gucTpo^ii renaro-uuTiB 6yja MeHmoo Ha 71%, a HeKpoTuHHi 3m1hu rena-TouuTiB Ta nopymeHHa 6ajKoBoro pucyHKy - Ha 75% nopiBHaHo 3 KoHTpojbHoo narojorieo (Ta6j. 1).
Та6^нцн 1
HaniBKijbKicHa ouiHKa Koperyonoro BnjuBy "KapcujiHy" MiKpoopraHi3MaMu P. aeruginosa (6aju), M (Min; max)
ha ctah nenihku kypnar b ymobax ih^ikybahha
03HaKu, 6aju (cepegHa)
rpyna eKcnepuMeHTy Bupa3HicTb gucTpo^ii HeKpoTuHHi 3M1HU nopymeHHa 6ajKo- 3anajbHa iH^rntTpaula,
renaTouuTiB renaTouuTiB Boro pucyHKy noB'a3aHa 3 cyguHaMu
Pseudomonas aeruginosa (I rp.) 2,8 (2;4) 1,6 (1;2) 1,6 (1;2) 2,2 (2;3)
P. aeruginosa + KapcujiH (II rp.) 0,8 (0;2) 0,4 (0;1) 0,4 (0;2) 1,0 (0;2)
P. aeruginosa + TioTpia3ojiH (III rp.) 1,8 (1;3) 0,6 (0;1) 0,6 (0;2) 0,8 (0;2)
iHTaKTHuft KoHTpojb (IV rp.) 0 (0;0) 0 (0;0) 0 (0;0) 0,5 (0;1)
Рис. 9. Явища запально! шфшьтраци (1), дистрофй' (2) та л1зису ядер гепатоципв (3) шфшованого P. aeruginosa курчати, який отримував Тютриазолш. Гематоксилш-еозин, ><400
Анал1з к1льк1сних характеристик, наведених в таблиц! 1, та результапв в1зуального пстолопчного дос-лщження зразшв печшки курчат-бройлер1в в умовах шфекцшно-токсичного гепатиту за експерименталь-ного псевдомонозу пвдтверджуе гепатопротекторну дш "Карсилшу", яка не поступаеться, а за багатьма показниками переважае дш Тютриазол1ну.
Висновки
Застосування "Карсил1ну" за експериментального шфекцшно-токсичного гепатиту, спричиненого пато-лопчною д1ею токсишв P. aeruginosa, забезпечуе обмеження розвитку дистроф1чних, некротичних, шф1льтративних та прол1феративних явищ в структур! печшки.
Бальна нашвшльшсна оцшка корегуючого впливу "Карсил1ну" на стан печшки курчат за шф1кування P. aeruginosa сввдчить, що штенсивнють прояву дистрофи гепатоципв була меншою на 71%, а некротичних змш гепатоципв та порушення балкового рисунку - на 75% пор1вняно з контрольною патолопею.
Отримаш результати дозволяють нам рекоменду-вати кормову добавку "Карсилш" для застосування в птах1вництв1 з метою зменшення токсичного впливу шфекцшних агенпв на функцюнальний стан печшки промислово! птищ.
Перспективы подальших до^джень. Пстолопчне дослвдження гепатопротекторно! дп кормово! добавки "Карсилш" в умовах моделювання медикаментозного гепатиту курчат-бройлер1в.
References
Sokolov, M.N. (2016). O primenenii gepatoprotektorov v pticevodstve. Molodoj uchenyj, 20, 110-113. https://moluch.ru/archive/124/34137 (in Russian).
Kuz'minova, E.V., Semenenko, M.P., Starikova, E.A., Tjapkina, E.V. & Fersunin, A.V. (2014). Perspektivy rasshirenija spektra primenenija gepatoprotektorov v veterinarii. Politematicheskij setevoj jelektronnyj nauchnyj zhurnal Kubanskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta, 102, 787-797. https://cyberleninka.ru/article/n/perspektivy-rasshireniya-spektra-primeneniya-gepatoprotektorov-v-veterinarii (in Russian).
Zon, H.A. & Vashchyk, Ye.V. (2011). Rezultaty histolohichnykh doslidzhen vnutrishnikh orhaniv kur-chat-broileriv pry eksperymentalnomu psevdomonozi. Visnyk Sumskoho NAU, ser. "Veterynarna medytsyna", 1(28), 58-61 http://hdl.handle.net/ 123456789/243 (in Ukrainian).
Vashchyk, Ye.V. (2009). Do vyvchennia mekhanizmiv rozvytku infektsiinoho protsesu pry psevdomonozi ptytsi. Zb. nauk. prats. Kharkivskoi DZVA, ser. "Veterynarni nauky". 20(2,2), 220-224 (in Ukrainian).
Horalskyi, L.P., Khomych, V.T. & Kononskyi, O.I. (2015). Osnovy histolohichnoi tekhniky i morfo-funktsionalni metody doslidzhen u normi ta pry patolohii. Navch. posib. Vyd. 3, vypr. i dopov. Zhy-tomyr: Polissia http://ir.znau.edu.ua/handle/ 123456789/3788 (in Ukrainian).
