«PABISORB» PREPARATION THERAUPEVTIC AND PROPHYLACTIC ACTIVITY AT COLIBACTERIOUSIS AND EXTERNAL y -IRRADIATED ANIMALS
Nizamov R.N., Yusupov R.Kh., Ivanov A.A., Setdekov R.A., Gaynullin R.R.,
Yusupov R.R.
Summary
The performed investigation showed that Escherichia -based infection along with radiogenic stress is characterized with infection process aggravation accompanied by summing pathogen affecting factors (additive affect) having hemotoxic, oxidation effect, apoptotic destruction of immunocompetent and hemogoethic cells, lack of antioxidant security system thus causing higher death rate by exposure to two pathogen kinds.
Parenteral and oral application of the "Pabisort" composite preparation based on polyclonal antibodies (poliglobulins), beekeeping products, probiotic microorganism metabolites and mineral sorbent resulted in modification of radiation and biological exposure with increased survival rate of animals both infected with escherichiosis and radiation sickness by inhibiting pathogen hematotoxic, oxidating, apoptotic and immunotoxic effect.
УДК 619.636.4.57.087.1.636.92
МОРФОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МИТОХОНДРИЙ БЕЛОЙ ПУЛЬПЫ СЕЛЕЗЕНКИ СВИНЕЙ И КРОЛИКОВ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ТОКСИКАНТАМИ И НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ
ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
Осянин К.А. - к.б.н.; Папуниди К.Х. - д.вн., профессор; Саитов В.Р. - к.вн.;
Сальникова М.М. - к.б.н. Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности,
г. Казань, тел.: (843) 273-53-49
Ключевые слова: диоксин, ацетат свинца, димефосфон, лимфоциты, ультраструктура, митохондрии.
Keywords: dioxin, lead acetate, dimephosphone, lymphocytes, ultrastructure, mitochondria.
Морфофункциональное состояние лимфоидных органов, является важным аспектом в решении проблемы защиты организма животных, в том числе от токсического воздействия. Селезёнка является основным источником циркулирующих лимфоцитов, что в значительной степени определяет иммунный статус организма. В свою очередь среди компартментов эукариотической клетки митохондрии занимают особое
положение, так как синтезируют АТФ и, по сути, являются универсальным источником энергии. Поэтому морфофункциональное состояние данных органелл во многом определяет метаболические процессы организма.
Целью наших исследований явилась оценка морфометрических параметров митохондрий клеток (лимфоцитов) белой пульпы селезенки свиней и кроликов при воздействии диоксина, ацетата свинца, раздельно, сочетано и на фоне применения цеолита и димефосфона.
Материалы и методы. Опыты проведены на поросятах и кроликах.
В эксперименте на свиньях животных разделили по принципу аналогов на 8 групп по 3 головы в каждой. Продолжительность эксперимента - 45 дней. Первая группа являлась биологическим контролем и получала обычный суточный рацион. Животных второй группы подвергали ежедневной пероральной затравке 2,3,7,8-тетрахлордибензо-пара-диоксином (ТХДД) в дозе 1/400 от ЛД50 (15 мкг/кг м.т.), третьей -1/600 от ЛД50 (10 мкг/кг м.т.), четвертой - 1/800 от ЛД50 (7,5 мкг/кг м.т.). Животные пятой группы ежедневно потребляли Т-2 токсин, полученный в лаборатории микотоксинов ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Токсин задавали в дозе 2 ПДК или 1/300 от ЛД50 (0,2 мг/кг корма/сут). Животных шестой группы подвергали ежедневной сочетанной затравке 2,3,7,8-ТХДД в дозе 15 мкг/кг м.т., что соответствует 1/400 от ЛД50 и Т-2 токсином на уровне 2 ПДК, седьмой сочетано - ТХДД в дозе 7,5 мкг/кг м.т. (1/800 от ЛД50) и Т-2 токсином в дозе 2 ПДК. Восьмой группе поросят наряду с токсикантами (ТХДД в дозе 1/400 от ЛД50 и Т-2 токсином в дозе 2 ПДК) выпаивали 15%-ный раствор димефосфона в дозе 90 мг/кг м.т. (0,6 мл/кг) и задавали цеолит Майнского месторождения Ульяновской области из расчета 2% от рациона.
На кроликах исследовали 6 групп. Первая - служила биологическим контролем и получала обычный суточный рацион. Второй - задавали 2,3,7,8-ТХДД т.е. диоксин в дозе 1/200 ЛД50 (0,15 мкг/кг), третьей - ацетат свинца в дозе 1/10 ЛД50 (65 мг/кг), четвертая группа - совместно (сочетано) получала диоксин и ацетат свинца в вышеперечисленных дозах, пятая - сочетано диоксин, ацетат свинца (в вышеуказанных дозировках) и цеолит Майнского месторождения Ульяновской области в дозе 300 мг/кг массы тела, шестая (сочетанная) группа наряду с токсикантами и сорбентом (в дозировках указанных выше) получала димефосфон в дозе 90 мг/кг массы тела.
Для электронно-микроскопических исследований, поросят и кроликов выводили из эксперимента в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием лабораторных животных». Из каждой группы на 45 день у поросят и на 40-й день у кроликов после затравки брали образцы тканей паренхимы селезенки. Подготовка отобранного материала проводилась по классической схеме, принятой в электронной микроскопии [1]. Материал
фиксировали в 1%-ном растворе глутарового альдегида на 0,1М фосфатном буфере (РН 7,4) в течение 12 часов. Постфиксацию проводили в 2%-ном растворе четырехокиси осмия на том же буфере 2 часа. После дегидратации в спиртах и ацетоне кусочки ткани заключали в смесь эпоновых смол. Ультратонкие срезы просматривали в электронном микроскопе JEM - 100CX.
Морфометрический анализ митохондрий проводился на микрофотографиях участков белой пульпы с помощью программ AxioVision Rel. 4.8 (Carl Zeiss), ACDSee Pro v.6, количество митохондрий считали на 100 мкм2.
Результаты исследования. С целью сравнения, различных популяций, митохондрий клеток белой пульпы селезенки, контрольных и опытных групп поросят и кроликов провели подсчет различных типов митохондрий на микрофотографиях в пересчете на 1 мкм площади среза. По ультраструктурным характеристикам все митохондрии были разделены на три типа:
1. нормальные - пластинчатые кристы заполняют профиль органеллы, матрикс средней электронной плотности;
2. митохондрии с отклонениями от нормы - округлая форма, электронносветлая центральная часть матрикса, короткие кристы располагаются по периферии, сохраняется целостность мембран;
3. митохондрии с паталогическими признаками - разрывы наружной и/или внутренней мембраны;
Сопоставляя эти показатели, провели подсчет количества митохондрий на микроснимках на единицу площади среза. Данные представлены на рис. 1 и 2.
Кролики. Результаты исследования и морфометрический анализ митохондрий белой пульпы селезенки показал, диоксин в дозе 0,15 мкг/кг м.т. в большей степени, чем ацетат свинца в дозе 65 мг/кг м.т. нарушает структуру мембран митохондрий, вероятно, это связано с запуском механизма перекисного окисления липидов (ПОЛ).
В группе кроликов получавших сочетано (в тех же дозах) диоксин и ацетат свинца практически отсутствуют митохондрии 1 группы и преобладают митохондрии с отклонениями от нормы, что приводит к дефициту биоэнергии в клетки и свидетельствует о потенциированном эффекте экотоксикантов. Из представленной диаграммы видно, что наибольшее количество «нормальных» митохондрий (более чем в два раза по сравнению с контролем) и почти полное отсутствие митохондрий 3 типа наблюдается в группе животных получавших диоксин, ацетат свинца, цеолит и димефосфон, что явно свидетельствует о ярко выраженном мембраностабилизирующем и репаративном действии димефосфона.
им
- * т ш I I ■ I
Рис. 1. Морфометрический анализ митохондрий белой пульпы селезенки контрольной и опытных групп кроликов. 1, 2, 3 - типы митохондрий. На оси абсцисс представлены группы животных, на оси ординат - процентное отношение каждого типа митохондрий от общего количества
митохондрий.
Свиньи. Результаты исследования и морфометрический анализ митохондрий белой пульпы селезенки свиней показал, что апробированные дозы диоксина в меньшей степени нарушают структуру митохондрий, чем экотоксиканты апробированные на кроликах. Из представленной диаграммы видно, что сдвиг в сторону увеличения по количеству митохондрии с паталогическими признаками обнаруживается лишь в группах диоксин 1/400 (самая высокая дозировка диоксина), Т-2 токсин и 1/400+Т-2, имеют сходные показатели.
Из представленной диаграммы видно, что в группах диоксин 1/800 и 1/800+Т-2 количество «нормальных» митохондрий остается на уровне контрольной группы, но при этом увеличивается доля митохондрий 3-й группы с патологическими характеристиками, что вероятно приводит к некоторому недостатку энергетического ресурса клеток. В группе диоксин 1/400+Т-2 токсин+лечение количество митохондрий 3 группы меньше, чем во всех группах свиней, которые получали затравку токсикантов, но больше чем в контрольной группе. Эти факты характеризуют защитный эффект цеолита и димефосфона.
3 ■ 2 ■ 1
Рис. 2. Морфометрический анализ митохондрий белой пульпы селезенки контрольной и опытных групп свиней. 1, 2, 3 - типы митохондрий. На оси абсцисс представлены группы животных, на оси ординат - процентное отношение каждого типа митохондрий от общего количества
митохондрий.
Выводы. Митохондрии является показателем биоэнергетического баланса клеток. Митохондриальные дисфункции можно отнести к неспецифическим патологическим процессам, вызванными различными патогенными факторами, которые приводят в конечном итоге к тканевой гипоксии. Морфометрический анализ изменений ультраструктуры митохондрий в отличие от описательного метода [2], можно использовать для объективной оценки структурно-функционального состояния клеток, тканей и организма в целом.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Иванов, А.В. Методические рекомендации по электронно-микроскопическим исследованиям биологических объектов / А.В. Иванов, А. А. Иванов, А.Н. Чернов, М.М. Сальникова, В.Р. Саитов, И.Ф. Рахматуллин, Е.Л. Матвеева // М.: «Росинформагротех». - 2011. 67 с. 2. Непомнящих, Л.М. Морфометрический и стереологический анализ миокарда. Тканевая и ультраструктурная организация / Л.М. Непомнящих, Е.Л. Лушникова, Л.В. Колесникова, Д.Е. Семенов и др. // Методические рекомендации по морфологии // Новосибирск, 1984. - 156 с.
МОРФОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МИТОХОНДРИЙ БЕЛОЙ ПУЛЬПЫ СЕЛЕЗЕНКИ СВИНЕЙ И КРОЛИКОВ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ТОКСИКАНТАМИ И НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
Осянин К.А., Папуниди К.Х., Сайтов В.Р., Сальникова М.М.
Резюме
В статье представлены результаты морфометрического анализа, состояния митохондрий белой пульпы селезенки свиней и кроликов при воздействии ряда токсинов, в том числе на фоне лекарственных средств.
MORPHOMETRIC EVALUATION OF WHITE PULP MITOCHONDRIA OF SWINE AND RABBITS SPLEEN AT TOXICATION AND USING THERAPEUTICALS
Osyanin K.A., Papunidi K.H., Saitov V.R., Salnikova M.M.
Summary
The article provides the results of morphometrical analyses of white pulp mitochondria of swine and rabbits spleen at exposure to a number of toxins and including the cases of using therapeuticals.
УДК 619:616.28-028:636.7:579.62
БАКТЕРИОЦЕНОЗ НАРУЖНОГО СЛУХОВОГО ПРОХОДА У СОБАК ПРИ ОТИТАХ В УСЛОВИЯХ МЕГАПОЛИСА
Плешакова В.И. - д.в.н., профессор, зав. кафедрой; Лоренгель Т.И. - к.в.н., ст. преподаватель; Мачалова Ж.Г. - аспирант
Омский государственнывй аграрный университет имени П. А. Столыпина
тел.: 8 (3812) 25-05-19
Ключевые слова: собаки, наружный слуховой проход, отит, бактериоценоз, сезонность, порода.
Keywords: dogs, external ear, otitis, microorganisms, properties, bacteriocenosis, seasonality, breed.
В последние годы наблюдается рост числа заболеваний слухового прохода у собак, которые представляют серьезную проблему, при этом доминируют наружные отиты. По данным ряда авторов они являются наиболее распространенной патологией в популяции собак в условиях крупных городов. Данная патология приносит значительный экономический ущерб служебному и декоративному собаководству, который складывается из снижения слуха, вплоть до потери, порчи