553^»— Аграрный вестник Урала № 5 (97), 2012 г.
%%ф
___________________Ветеринария -И*
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ПРИ СОЧЕТАННОМ ОТРАВЛЕНИИ БЕЛЫХ КРЫС ДИОКСИНОМ И КАДМИЯ ХЛОРИДОМ
К. Х. ПАПУНИДИ,
доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий лабораторией тяжелых металлов и синтетических ядов, заместитель директора,
А. В. ИВАНОВ,
доктор биологических наук, профессор, член-корреспондент РАСХН, директор,
И. Р. КАДИКОВ,
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник,
М. Я. ТРЕМАСОВ,
доктор биологических наук, профессор, зав. отделом токсикологии,
Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности
Ключевые слова: диоксин, кадмий, естественная резистентность, сочетанное воздействие, димефос-фон, натрия сульфид, цеолит.
Keywords: dioxine, cadmium, natural resistance, the combined impact of, dimefosfon, sodium sulfide, zeolite.
Широко распространенными загрязнителями биосферы считаются тяжелые металлы, среди которых серьезную опасность представляет кадмий, являющийся одним из наиболее токсичных элементов и относящийся ко второму классу опасности — высокотоксичным веществам [3].
К опасным техногенным загрязнителям окружающей среды относятся диоксины, из которых самым известным и наиболее токсичным является 2,3,7,8-тетрахлордибензо-п-диоксин, по отношению к которому часто применяется термин «диоксин» [1, 5].
Нередко источником образования диоксина и кадмия являются одни и те же процессы, как, например, сжигание промышленных и бытовых отходов, предприятия по производству красок, антисептиков, гербицидов на основе полихлорированных фенолов и др. [2, 4]. Поэтому существует реальная опасность одновременного загрязнения кормов диоксином и кадмием.
Цель и методика исследований.
Целью наших исследований явилось изучение сочетанного действия диоксина и кадмия, поиск и разработка эффективных средств лечения и профилактики отравлений животных, вызванных этими полютантами.
Опыты проведены на 72 крысах, разделенных на 6 групп. Первая группа получала с кормом диоксин в дозе 1/200 ЛД50 (0,3 мкг/кг), вторая группа была подвергнута ежедневной пероральной затравке кадмия хлоридом в дозе 1/20 ЛД50 (9 мг/кг). Третья группа получала одновременно диоксин и кадмия хлорид в вышеуказанных дозах. Четвертая группа наряду с токсикантами получала сорбент цеолит Майнского месторождения Ульяновской области из расчета 1 % к сухому веществу корма, пятая — токсиканты и детоксицирующее средство натрия сульфид (№2 — 9Н20, ГОСТ 2053-77) в дозе 10 мг/кг живой массы, шестая — токсиканты и иммуностимулятор димефосфон в дозе 90 мг/кг, путем выпаивания с питьевой водой. Затравку животных токсикантами и применение лечебных средств проводили в течение 30 дней.
До начала затравки, затем на 10, 20 и 30 сутки путем декапитации проводили убой трех животных из каждой группы и брали кровь для проведения морфологических, биохимических и иммунологических исследований.
48
Фагоцитарную активность нейтрофилов в периферической крови определяли по методике С. А. Кост и М. И. Стенко (1974), а содержания лизоцима в сыворотке крови устанавливали нефелометрическим методом по В. Г. Дорофейчуку (1968).
Содержание кадмия в органах и тканях определяли атомно-абсорбционным методом на «AAC Perken Elmer A Analyst 200».
Результаты исследования.
В первой группе, где крысам давали один диоксин, клинические признаки отравления отсутствовали. Масса тела оставалась на уровне фоновых величин.
Во второй группе, где животные получали кадмий, клинические признаки появились на 11 сутки затравки в виде общего угнетения, вялости, взъерошенности шерстного покрова, снижения аппетита, затрудненного дыхания, у некоторых крыс наблюдалась рвота и диарея. На 19 и 27 сутки пало по одной крысе. Всего из 12 крыс пали 2, выжили 10.
У животных, получавших одновременно диоксин и кадмия хлорид, клинические признаки проявились на 9 день затравки в виде общего угнетения, вялости, взъерошенности шерстного покрова, отказа от корма, слюнотечения, гнойных выделений из глаз и диареи. В дальнейшем у больных животных наблюдались одышка, потеря ориентации при передвижении. Масса тела на 30 сутки снизилась на 25 %. На 13 и 19 день пало по одной крысе, на 21, 22, 24 и 25 сутки — по две крысе. Из 12 крыс пали 10 (83 %).
В четвертой и пятой группах крыс клинические признаки отравления появились на 13-14 сутки в виде угнетения, отказа от корма. У некоторых крыс в дальнейшем развивалась одышка. В группе животных, подвергнутых сочетанной затравке токсикантами и получавших цеолит, на 15, 16, 32 и 35 сутки пало по одной крысе, всего с 15 по 35 день пали 4 крысы. В пятой группе животных, леченных натрия сульфидом, с 23 по
29 сутки также пали 4 крысы.
В шестой группе, получавшей димефосфон, клинические признаки появились на 13-14 сутки в виде угнетения и снижения аппетита. На 16 и 19 сутки пало по одной, на 20 сутки — две крысы.
www. m-avu. narod. ru
535^*^ Аграрный вестник Урала № 5 (97), 2012 г.
Ветеринария
При отравлении белых крыс диоксином количество эритроцитов на 10 и 20 сутки уменьшилось на 15 и 12 %, гемоглобина — на 17 и 19 %. У животных второй группы, получавших кадмий, содержание эритроцитов и гемоглобина к 30 суткам снизилось на 23 и 18 %.
Гематологическими исследованиями установлено, что при одновременном введении диоксина и кадмия хлорида наблюдалось снижение содержания эритроцитов на 20 и 30 сутки на 15 и 29 %, гемоглобина — на 12 и 20 %.
В группе животных, получавших цеолит, количество эритроцитов на 10, 20 и 30 сутки увеличивалось на 59, 66 и 60 %, происходило повышение содержания гемоглобина на 20 сутки на 25 %.
В группе, которая наряду с диоксином и кадмия хлоридом получала натрия сульфид, содержание эритроцитов увеличивалось на 10, 20 и 30 сутки на 66, 62 и 64 %, гемоглобина — на 10, 11 и 12 %.
В шестой группе животных содержание эритроцитов оставалось на уровне фоновой величины. Гемоглобин увеличивался на 10, 20 и 30 сутки на 22, 20 и 19 %. Содержание лейкоцитов уменьшалось на 20 и 30 сутки на 18 и 30 %.
При введении животным 1/200 ЛД50 диоксина количество лейкоцитов уменьшилось на 10 и 20 сутки на 12 и 20 %. Фагоцитарная активность и фагоцитарное число на протяжении всего опыта существенно не изменялись. Фагоцитарный индекс и фагоцитарная емкость на 20 сутки снизились на 11 и 43 % соответственно. Активность лизоцима оставалась в пределах фонового уровня.
У белых крыс, получавших только кадмий, количество лейкоцитов на 20 и 30 сутки уменьшалось на 20 и 31 %, фагоцитарная активность снижалась на 15 и 24,5 %. Фагоцитарное число снизилось на 10, 20 и 30 сутки на 20; 36,5 и 48 %, фагоцитарный индекс — на 13; 22,6 и 27,5 %, фагоцитарная емкость — на 25,7; 47,8 и 63 %, активность лизоцима — на 12,2; 36,3 и 37 %.
У животных, получавших диоксин и кадмий, содержание лейкоцитов уменьшалось на 20 и 30 сут. на 24 и 29 %, фагоцитарная активность на 20 и 30 сутки снижалась на 19 и 20 %, фагоцитарный индекс — на 22 и 23 %, фагоцитарное число - на 38 и 39 %. Фагоцитарная емкость снижалась на 10, 20 и 30 сутки на 23,7; 51,7 и 56,5 %. Активность лизоцима на 20 и 30 сут. уменьшалась на 12 и 26 %.
Применение лекарственных средств не оказывало существенного влияния на показатели фагоцитоза. В четвертой группе количество лейкоцитов уменьшалось на 20 и 30 день исследования на 32 и 29 %, фагоцитарная активность снижалась на 10, 20 и 30 сутки на 31, 33 и 34 %, фагоцитарный индекс — на 18, 39 и 39 %, фагоцитарное число — на 47, 62 и 62 %, фагоцитарная емкость — на 37, 72 и 71 %. Активность лизоцима на 20 и 30 сутки снизилась на 44 и 57 %.
В пятой группе количество лейкоцитов уменьшалось
снижение фагоцитарной активности наблюдалось на 20 сутки — на 39 %. На 10, 20 и 30 сутки происходило снижение фагоцитарного числа на 25, 71 и 70 %, фагоцитарная емкость уменьшалась в эти же сроки исследования на 63, 82 и 84 %.
У животных, которым с токсикантами давали диме-фосфон, содержание лейкоцитов уменьшалось на 20 и 30 сутки на 18 и 30 %, фагоцитарная активность снижалась на 10, 20 и 30 сутки на 23, 28 и 22 %, фагоцитарное число — на 38, 45 и 46 %, фагоцитарный индекс — на 20, 14 и 11 %, фагоцитарная емкость — на 39, 46 и 58 %.
При затравке белых крыс кадмия хлоридом и диоксином содержание металла на 10, 20 и 30 сутки увеличивалось: в печени — в 35, 44 и 77 раз, в почках — в 35, 98 и 103 раза, в сердце — в 49, 60 и 73 раза, в костях — в 33, 37 и 39 раз, в мышцах — в 27, 90 и 95 раз.
При отравлении животных токсикантами и применении цеолита отмечалось менее выраженное накопление кадмия в органах. Так, у белых крыс, получавших цеолит, содержание кадмия было ниже в печени в 2-5 раз, в почках — в 1,5-2 раза, в мышцах — в 1,5-3 раза по сравнению с животными, не получавшими минеральную подкормку.
Применение натрия сульфида также снижало содержание кадмия в органах отравленных крыс по сравнению с нелеченными животными: в печени — в 1,5-7 раз, в почках — в 1,5-2 раза. Концентрация кадмия в сердце, костях и мышцах у леченных натрия сульфидом животных существенно не отличалась от таковой у нелеченных белых крыс.
При применении димефосфона на 10, 20 и 30 сутки содержание кадмия в печени отравленных животных увеличивалось в 10, 44 и 45 раз, в почках — в 26, 27 и 22 раза, в сердце — в 68, 57 и 39 раз, в костях — в 30, 52 и 30 раз по сравнению с интактными животными.
Выводы.
Сочетанное пероральное поступление диоксина и кадмия хлорида в организм белых крыс в течение
30 суток в дозах 1/200 ЛД50 и 1/20 ЛД50 живой массы вызывает потенцирование токсического эффекта, характеризующееся общим угнетением, взъерошенно-стью шерстного покрова, отказом от корма, снижением массы тела, потерей ориентации при передвижении с последующей гибелью 83 % белых крыс при 100 %-й выживаемости животных при раздельном воздействии токсикантов.
Проведена оценка лечебной эффективности цеолита, натрия сульфида и димефосфона, установлено более выраженное лечебное действие сорбента при отравлении белых крыс диоксином и кадмием. Ежедневное применение цеолита с кормом (1 %) при сочетанном отравлении животных диоксином и кадмия хлоридом способствует ускорению нормализации клинических, гематологических и биохимических показателей, естественной резистентности и иммунобиологической реактивности организма.
на 23, 17 и 33 % на 10, 20 и 30 сутки. Максимальное
Литература
1. Иванов А. В., Тремасов М. Я. О проблеме диоксинов // Ветеринарный врач. 2009. № 1. С. 5-7.
2. Кадиков И. Р., Вафин И. Ф. Сочетанное действие диоксина и кадмия хлорида на животных // Актуальные проблемы сельского хозяйства науки и практики в современных условиях и пути их решения : материалы Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых. Казань, 2009. С. 381-383.
3. Папуниди К. Х., Шкуратова И. А. Техногенное загрязнение окружающей среды как фактор заболеваемости животных // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2005. № 6. С. 80.
4. Трегер Ю. А., Розанов В. Н. Источники образования диоксинов // Диоксины—супертоксиканты 21 века. М., 1997. С. 25-40.
5. Федоров Л. А. Диоксины как экологическая опасность: Ретроспектива и перспективы. М. : Наука, 1993. С. 35-40.
ммм.т-эчи. пэгоб. ги
49