Морфологічні та функціональні особливості сперматозоїдів зумовлені етаноловою інтоксикацією в експерименті Текст научной статьи по специальности «Животноводство и молочное дело»

© Грицуляк Б. В., Грицуляк В. Б., Долинко Н. П., Спаська А. М.

УДК 616. 681:547. 262:599. 23

Грицуляк Б. В., Грицуляк В. Б., Долинко Н. П., Спаська А. М.

М0РФ0Л0Г1ЧН1 ТА ФУНКЦ10НАЛЬН1 0С0БЛИВ0СТ1 СПЕРМАТ0301Д1В

ЗУМ0ВЛЕН1 ЕТАН0Л0В0Ю 1НТ0КСИКАЦ1СЮ В ЕКСПЕРИМЕНТ1

ДВНЗ «Прикарпатський нацюнальний ушверситет ¡меш Василя Стефаника»

(м. lвано-Франк¡вськ)

Дана публка^я е фрагментом НДР кафедри анатоми i ф1з1олог11 людини та тварин ДВНЗ «При-карпатський нацюнальний унiверситет iменi Василя Стефаника» «Морфофункцюнальний стан крово-носного русла i тканинних елементiв чоловiчоI ста-тево! залози в умовах впливу патогенних факторiв», № державно! реeстрацiI 0105U009082.

Вступ. За даними статистики частка чоловiчо-го фактора у неплщному шлюбi займае 30 % [2,7]. Зважаючи на цю обстановку в останн роки значно зросла ктькють дослщжень, присвячених вивчен-ню морфолопчних i функцiональних особливостей сперматозоIдiв [5,6]. Це пояснюеться також ш-тенсивним розвитком репродуктивних технологiй та використанням донорських сперматозо'^в [1]. Враховуючи ц обставини, метою даного доотджен-ня було виявити вплив етанолово! Ытоксикацп на сперматозощи.

Мета дослiдження - виявити характер морфолопчних та функцюнальних змш сперматозоIдiв, зу-мовлених етаноловою штоксикащею в експериментi.

0б'ект i методи дослiдження. Дослiдження проведенi на 42 статевозрiлих лабораторних щурах масою 180-200 г. Утримання i манiпуляцiI з тварина-ми здмснювали вiдповiдно до положення «Загальнi етичн принципи над тваринами», затвердженого 1 Нацюнальним конгресом з бiоетики (2001). Kомiсi-ею з питань бюетики Прикарпатського нацюнально-го унiверситету iменi Василя Стефаника порушень морально-етичних норм при проведены науково-дослiдноI роботи не виявлено (протокол №4 вщ 30.12.2014 р.). Пщцослщним тваринам внутрш-ньошлунково вводили 30 % розчин етанолу з роз-рахунку 2 мл на 100 г маси тта протягом 7, 14, 21 та 28 дiб. Сперматозо!ди забирали iз хвостово! час-тини над'яечка. Визначали !х концентрацiю, вiдсоток патолопчних форм та рухливiсть за загальноприй-нятими методиками [7]. Контролем служили Ытак-тнi тварини вiдповiдного вку. Статистичний аналiз проводили за допомогою комп'ютерно! системи STATISTIKA for Windows®. Застосовували непараме-тричнii методи з використанням критерт Манна -У^нк Рiзницю вважали достовiрною при р< 0,05.

neonila.d@i.ua

Результати дослiджень та Тх обговорення.

Нами встановлено, що на 7 добу експерименту ктькють сперматозо'|дв зменшуеться до (64,70 ± 1,5) млн проти (67,50 ± 3,60) млн. / мл у контрольна групi тварин. Спостертаеться тенденцiя до подальшого зниження ктькос^ сперматозоi,дiв в еякулятi алкого-лiзованих тварин у наступнi термiни (14 i 21 доба), а на 28 добу дослщу цей показник становить (56,20 ± 2,30) млн / мл, що становить 83,58 % вщ ктькос^ сперма-тозо',дв еякуляту контрольно! групи тварин.

Привертае до себе увагу той факт, що в еякуля^ алкоголiзованих тварин достовiрно (80 % до 65 %) на юнець дослiду зменшуеться число живих форм сперматозо',дв.

Нами показано, що в умовах проведеного дослщу зростае ктькють патолопчних форм сперма-тозо',дв до 38 % проти 23 % сперматозо',дв в ея-кулятi контрольно! групи тварин. Встановлено, що найбтьш частою патолопею з боку статевих клггин е такi змiни !х головки: вщсутнють акросоми, маленька головка, подвоена головка. Загальна кiлькiсть таких клггин зросла з 11,2 % у контролi до 18,5 % на юнець дослщу. Щодо морфологi! джгутика, то у алкоголiзо-ваних тварин на 28 добу дослщу патолопя промiжно! частини джгутика сперматозо!дiв зросла з 5,7 % до 8,6 %. Значно вищою виявилась в цих умовах патолопя основно! частини джгутика сперматозо'^в, яка становить 12,5 % проти 7,2 % у контролг

Важливими е отримаы нами даы щодо функцiо-нально! здатностi сперматозо!дiв в умовах етанолово! штоксикаци тварин. Так, на 28 добу експерименту загальна рухливють статевих кгмтин (нормокiнезiя) зменшилась до 65,6 ± 3,12 % проти 81,37 ± 4,21% в еякуля^ контрольних тварин, що становить рiзницю у 15,77 %. В цих умовах значно зменшилась ктькють сперматозо'^в (19,72 ± 2,38 % проти 29,23 ± 3,45 %) у контролi зi швидким, прогресивним рухом, що становить рiзницю в 9,51 %.

Також, на 14,81% в еякуля^ знизилась ктькють сперматозо'^в з повтьним поступальним рухом (гiпокiнезiя) та на 11,27 % зросло число нерухомих сперматозо'^в (акiнезiя).

Отже, за нашими даними та спостереженнями шших дослiдникiв [3,4] концентрацiя сперматозо'^в

в 1 мл еякуляту алкогол1зованих тварин, пор1внюючи з контролем знизилась, у середньому, на 11, 3 %. В цих умовах на 14,6 % зросла юльюсть патолопчних форм сперматозо1д1в. При цьому ц змши стосують-ся, насамперед, головок та основно! частини джгу-тика. На те, що найбiльш вразливими до рiзних чин-никiв цих частин сперматозо'|дв йдеться у роботах шших дослiдникiв [5,6]. Oтриманi нами результати свщчать, що етанолова Ытоксика^я може мати не-гативний вплив на пенетруючу здатнють спермато-зо'|дв щодо яйцеклiтини, а патологiя джгутика пору-шуе !х рухову активнють [1].

Oтриманi нами результати щодо морфологи сперматозо'|дв та !х юнезисграми у алкоголiзованих тварин пiдтверджують негативний вплив етанолу

на сперматогенез, що може негативно вплинути на репродуктивну здатнють чолов^в i спричинити не-плiднiсть у шлюбi [3,4].

Висновки.

1. Aномальнi форми сперматозоIдiв виявлен як в еякулятi алкоголiзованих тварин, так i у контролi, але рiзниця мiж ними становить 15 %.

2. Загальна рухливiсть сперматозо'|дв в еяку-лятi алкоголiзованих тварин на 21, 37 % нижча, як у контрольна групк

Перспективи подальших дослщжень. Отри-манi нами результати впливу етанолу на структурно- функцюнальы властивост сперматозоIдiв послужать моделлю для корекци сперматогенезу фитопрепаратами.

^¡TepaTypa

1. Bomko M. I. laöopaTopHe AocniA^eHHH eflKynrny b nporH03i ycniwHocTi UMKniB flPT npM HonoBiHiM HenniAHocTi / M. I. Bom-ko, I. C. HopHOKynbCbKMM // yponorrn. - 2013. - № 2 (65). - C. 52-53.

2. rpnuynnK 5. B. XapaKTep Mop<£o<£yHKuioHanbHMx 3MiH b cnepMaT030iAax nicna TpaBMM aeHKa / 5. B. rpMuynaK, B. 5. TpM-uynnK, H. n. ÄonMHKO // BicHMK npoöneM öionorii i MeAMUMHM. - 2014. - Bun. 4, Tom 2 (114). - C. 220-223.

3. rprnuynflK 5. B. ricTO-Ta ynbTpacTpyKTypHi 3MiHM b aeHKy ^ypiB 3 xpoHiHHoro anKoronbHoro iHTOKcuKauiero / 5. B. rprnuynflK, B. 5. rprnuynflK, M. 5. nacTyx, H. n. flonuHKO // CBiT MeAMUMHM Ta 6ionorii. - 2014. - № 2 (44). - C. 114-117.

4. napx0MeHK0 IO. H. XapaKTepHbie MeTaöonMHecKMe HapyweHMa b TKaHax Kpbic, Bbi3BaHHbie AnMTenbHbM npueMOM anKorona / O. M. napx0MeHK0, 5. B. ÄaHHeHKO, C. O., nunuHyK // yKp. öioxiM. xypHan. - 2007. - № 3. - C. 62-68.

5. HopHOKynbcbKMM I. C. Mop<£o<£yHKuioHanbHi ocoönMBocTi HonoBiHMx eaKynbOBaHMx cnepMaT030i'AiB b HopMi Ta npM HenniAHocTi / I. C. HopHOKynbcbKMM, O. 5. HaMKOBcbKMM, M. I. Bomko, C. B. 5a3uneBMH // CBiT MeAMUMHM i öionorii. -2013. - № 4 (42). - C. 52-53.

6. HopHOKynbcbKMM I. C. KpMTepi'i ouiHKM noTeHuiany HonoBiHoi ^epTMnbHocTi / I. C. HopHOKynbKMM // yKpai'HcbKMM MeAMHHMM HaconMc. - 2013. - № 4 (96). - C. 154-158.

7. HMcTflKOBa E. 6. BnnMB cTpecy Ha HonoBiHi cTaTeBi KniTMHM pi3HMx cTaAiM po3BMHeHHa Ta ix 3an.niAHioBa.nbHy 3AaTHicTb / 6. E. HMcTflKOBa, B. M. 3onoTyxiHa // npoön. eHAOKpMH. naTonorii. - 2007. - № 1. - C. 63-69.

8. Schill W. B. Andrology for the Clinician / W. B. Schill, F. N Comhaire, T. B. Hargreave. - Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 2011. - 800 s.

УДК 616. 681:547. 262:599. 23

М0РФ0Л0Г1ЧН1 ТА ФУНКЦЮНАЛЬН1 0С0БЛИВ0СТ1 СПЕРМАТ030Щ1В ЗУМ0ВЛЕН1 ЕТАН0Л0-ВОЮ 1НТ0КСИКАЦ16Ю В ЕКСПЕРИМЕНТ1

Грицуляк Б. В., Грицуляк В. Б., Долинко Н. П., Спаська А. М.

Резюме. Нами встановлено, що тривала (28 дiб) алкоголiзацiя тварин призводила до зменшення кть-костi сперматозо'|дв в еякулятi на 16,42 %. В цих умовах на 15 % зменшилась ктькють живих сперматозо'|дв. При цьому значно зросла (з 23 % до 38 %)юлькють патолопчних форм сперматозо'|дв.

Загальна рухливють сперматозоIдiв, в даних умовах експерименту знизилась iз 73,0 % до 52,0 %. При цьому число сперматозо'|дв зi швидким рухом в еякулят зменшилась до 9,7 % проти 19,2 % у контролт При-вертае до себе увагу зростання майже у два рази юлькост нерухомих форм сперматозоIдiв.

Ключов1 слова: яечко, сперматозо!ди, етанол.

УДК 616. 681:547. 262:599. 23

М0РФ0Л0ГИЧЕСКИЕ И ФУНКЦИ0НАЛЬНЫЕ 0С0БЕНН0СТИ СПЕРМАТ030ИД0В 0БУСЛ0ВЛЕННЫЕ ЭТАН0Л0В0Й ИНТ0КСИКАЦИЕЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Грицуляк Б. В., Грицуляк В. Б., Долинко Н. П., Спасская А. М.

Резюме. Нами установлено, что длительная (28 суток) алкоголизация животных приводила к уменьшению количества сперматозоидов в эякуляте на 16,42 %. В этих условиях на 15 % уменьшилось количество живых сперматозоидов. При этом значительно возросло (с 23 % до 38 %) количество патологических форм сперматозоидов.

Общая подвижность сперматозоидов, которая в данных условиях эксперимента снизилась с 73,0 % до 52.0 %. При этом число сперматозоидов с быстрым движением в эякуляте уменьшилось до 9,7 % против 19,2 % в контроле. Обращает на себя внимание рост почти в два раза количества неподвижных форм сперматозоидов.

Ключевые слова: яичко, сперматозоиды, этанол.

UDC 616. 681: 547. 262: 599. 23

Morphological and Functional Features of Spermatozoa Caused by Experimental Ethanol Intoxication

Grytsuliak B. V., Grytsuliak V. B., Dolynko N. P., Spaska A. M.

Abstract. According to statistics, part of male factor infertility in marriage takes 30 %. In view of this fact, in recent years the number of studies devoted to the study of morphological and functional characteristics of sperm increased. This is also due to the intensive reproductive technologies development and the use of donor sperm. Considering these circumstances, purpose of this study was to determine the influence of ethanol intoxication on spermatogenesis.

Objects and methods. Studies performed on 42 mature laboratory rats weighting 180-200 g. Maintenance and manipulations with animals were done in accordance with the provisions of the ''General ethical principles of experiments on animals'' approved by 1st National Congress of Bioethics (2001). Commission on Bioethics of Precarpathian National University named after Vasyl Stefanyk has not detected any violations of ethical standards in the conduction of research (report №4 from 30.12.2014). Experimental animals were administered intragastric 30 % ethanol solution at the rate of 2 ml per 100 g body weight for 7,14, 21 and 28 days. Sperm was taken from the epididymis tail. We determined spermatozoa concentration, percentage of abnormal forms and motility by conventional methods. As a control group served intact animals of the same age. Statistical analysis performed using the computer program STATISTICA for Windows®. Applied nonparametric methods using the Mann-Whitney test. The difference was considered reliable at p < 0.05.

Results and discussion. We show that under the conditions of the experiment conducted by increasing the number of pathological forms of spermatozoa to 38 % compared to 23 % of sperm in the ejaculate control group animals. Found that the most common disorders of the reproductive cells are such changes in their heads: no acrosome, a small head, head twice. The total number of cells increased from 11,2 % in the control to 18,5 % at the end of the experiment. Regarding the morphology of flagellum, in alkoholizsm animals on day 28 of the experiment pathology of intermediate sperm flagellum increased from 5.7 % to 8.6 %. Significantly higher was in these circumstances pathology of primary sperm flagellum, which is 12,5 % versus 7,2 % in the control.

Also important are our findings on functional capacity of spermatozoa in terms of ethanol intoxication animals. So, on day 28 of the experiment the total mobility gametes (normokineziya) decreased to 65.6 + 3.12 % vs. 81.37 + 4.21% in the ejaculate control animals, representing 15.77 % of the difference. In these conditions significantly decreased sperm count (19.72 + 2.38 % vs. 29.23 + 3.45 %) in control with fast, progressive movement, which is 9.51 % difference.

Also, 14.81 % in the ejaculate sperm count decreased slow forward movement (hypokinesia) and 11.27 % increased the number of fixed spermatozoa (akinesia). Prospects for the further research. Our results on the impact of ethanol on the structural and functional features of sperm will serve as a model for medical correction of spermatogenesis using phytotherapy.

Keywords: testis, spermatozoa, ethanol.

Рецензент - проф. Мщенко I. В.

Стаття надшшла 09. 03. 2015 р.