CC BY
4
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 3 - P. 64-67
УДК: 616.36-091.8:617-089 DOI: 10.24412/1609-2163-2023-3-64-67 EDN HJOIWY ||jj||
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РЕПАРАТИВНОЙ РЕГЕНЕРАЦИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ КРОВОТОЧАЩИХ РАН ПЕЧЕНИ С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА ХИРУРГИЧЕСКОГО ГЕМОСТАЗА
Ю.А. ПАРХИСЕНКО*, А.К. ВОРОНЦОВ**, Е.Ф. ЧЕРЕДНИКОВ*, С.В. БАРАННИКОВ*, А.В. ЧЕРНЫХ*, А.В. КЛИМАШЕВИЧ***, А.А. БЕЗАЛТЫННЫХ**, В.П. ТРОШИН****
*Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко, ул. Студенческая, д. 10, г. Воронеж, 394036, Россия **Смоленский государственный медицинский университет, ул. Крупской, д. 28, г. Смоленск, 214019, Россия ***Московский клинический научно-исследовательский центр имени А.С. Логинова,
Шоссе Энтузиастов, д. 86, Москва, 111123, Россия ****Брянская городская больница №1, ул. Камозина, д. 11, г. Брянск, 241035, Россия
Аннотация. Цель исследования - разработать эффективный метод оперативного гемостаза обширных повреждений печени и дать морфологическую оценку репаративной регенерации моделированных ран печени у свиней. Материалы и методы исследования. Экспериментальные исследования проведены на 36 здоровых лабораторных животных - свинья породы «Крупная белая». Всем животным воспроизводилась экспериментальная модель кровоточащей раны печени. Хирургический гемостаз ран печени в опытной группе животных производили путем тампонирования раны гемостатической салфеткой Сур-гитамп с последующей аппликацией сорбента Молселект G-50 и пакетированием медиальной левой доли печени полоской полипропиленового сетчатого протеза (Патент на изобретение РФ №2674874). В контрольной группе гемостаз экспериментальных ран печени осуществляли путем прошивания раны П-образным швом. Оценку результатов исследования проводили по изучению времени гемостаза, а также оценки особенностей репаративной регенерации печени в зоне повреждения в опытной и контрольной группах. Результаты и их обсуждение. В опытной группе животных время остановки экспериментального кровотечения из ран печени при применении комбинированной методики хирургического гемостаза составило 315.0 (306.0-328.0) сек. В контрольной группе остановка кровотечения происходила на 435.0 (421.0-445.0) сек (Р<0.0001). При этом в контроле при наложении П-образных гемостатических швов из мест каждого вкола иглы наблюдалось подтекание крови, что обусловило большее время гемостаза в контрольной группе по сравнению с опытной. Морфологические исследования биопсийного материала из ран печени показали, что лечение экспериментальных кровоточащих ран печени с применением гемостатика Сургитамп и сорбента Молселект G-50 способствует ускорению процессов регенерации печени, при отсутствии морфологических признаков прогрессирования воспаления или повреждающего действия этих препаратов на ткань печени во всех сроках наблюдения. Заключение. Применение нового способа хирургического гемостаза кровоточащих ран печени путем применения гемостатического средства Сургитамп в комбинации с порошкообразным сорбентом Молселект G-50 и пакетированием доли печени полосками пропиленового протеза позволяет обеспечить надежный гемостаз и улучшает процессы регенерации печени в зоне травматического повреждения.
Ключевые слова: травма печени, хирургический гемостаз, гранулированные сорбенты, пакетирование печени.
MORPHOLOGICAL ASSESSMENT OF REPARATIVE REGENERATION OF EXPERIMENTAL BLEEDING LIVER WOUNDS USING THE METHOD OF SURGICAL HEMOSTASIS
YU.A. PARKHISENKO*, A.K. VORONTSOV**, E.F. CHEREDNIKOV*, S.V. BARANNIKOV*, A.V. CHERNYKH*, A.V. KLIMASHEVICH***, A.A. BEZALTYNNYKH**, V.P. TROSHIN****
*N.N. Burdenko Voronezh State Medical University, Studentskaya str., 10, Voronezh, 394036, Russia "Smolensk State Medical University, Krupskaya str., 28, Smolensk, 214019, Russia ***A.S. Loginov Moscow Clinical Scientific Center, Department of Health of Moscow, Highway Enthusiasts, 86, Moscow, 111123, Russia ****Bryansk City Hospital №1, Kamozina str., 11, Bryansk, 241035, Russia
Abstract. The aim of the study was to develop an effective method of operative hemostasis of extensive liver injuries and to give a morphological assessment of the reparative regeneration of simulated liver wounds in pigs. Materials and methods. Experimental studies were conducted on 36 healthy laboratory animals - the Large white pig. An experimental model of a bleeding liver wound was reproduced to all animals. Surgical hemostasis of liver wounds in the experimental group of animals was performed by tamponing the wound with a hemostatic Surgitamp napkin, followed by application of Molselect G-50 sorbent and packaging of the medial left lobe of the liver with a strip of polypropylene mesh prosthesis (Patent RF 2674874). In the control group, hemostasis of experimental liver wounds was carried out by stitching the wound with a U-shaped suture. The evaluation of the results of the study was carried out by studying the time of hemostasis, as well as evaluating the features of reparative regeneration of the liver in the area of damage in the experimental and control groups. The results of the study and their discussion. In the experimental group of animals, the time to stop experimental bleeding from liver wounds when using the combined technique of surgical hemostasis was 315.0 (306.0-328.0) sec. In the control group, bleeding stopped at 435.0(421.0-445.0) sec (P<0.0001). At the same time, in the control, when applying U-shaped
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 3 - P. 64-67
hemostatic sutures from the places of each needle injection, blood leakage was observed, which caused a longer hemostasis time in the control group compared to the experimental one. Morphological studies of biopsy material from liver wounds have shown that the treatment of experimental bleeding liver wounds with the use of Surgitamp hemostatic and Molselect G-50 sorbent accelerates the processes of liver regeneration, in the absence of morphological signs of progression of inflammation or the damaging effect of these drugs on liver tissue at all follow-up periods. Conclusion. The use of a new method of surgical hemostasis of bleeding liver wounds by using the hemostatic agent Surgitamp in combination with the powdered sorbent Molselect G-50 and packing the liver lobe with strips of propylene prosthesis allows for reliable.
Keywords: liver injury, surgical hemostasis, granular sorbents, liver packaging.
Введение. При травмах живота повреждение печени является наиболее частой причиной внутри-брюшных кровотечений [3]. При обширных ранах печени у больных с нестабильной гемодинамикой для остановки кровотечения хирурги часто применяют метод пакетирования печени марлевыми салфетками. Однако, этот способ носит временный характер, через 2-3 суток этих пациентов оперируют повторно - производят окончательную остановку кровотечения [1,2,6].
Поиск новых медицинских средств, совершенствование более эффективных и патогенетически обоснованных способов хирургического гемостаза при обширных ранах печени является актуальной задачей современной неотложной хирургии [4,5,7].
Цель исследования - разработать эффективный метод оперативного гемостаза обширных повреждений печени и дать морфологическую оценку репаративной регенерации моделированных ран печени у свиней.
Материал и методы исследования. Экспериментальные исследования на лабораторных животных проведены на базе вивария Брянского государственного аграрного университета. При проведении исследования строго соблюдалось законодательство в сфере охраны животных, принимающих участие в проведении научных исследований: Европейская конвенция по защите экспериментальных животных 86/609 ЕЕС, Европейская Конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (Страсбург, 18.03.1986, ETS № 123). Все исследования проведены под контролем Этического комитета ВГМУ им. Н.Н. Бурденко: Протокол №8 от 28 ноября 2019 года. Для эксперимента были отобраны 36 здоровых свиньи породы «Крупная белая», возрастом 3 месяца каждая и массой 17.5 (16.9-18.0) кг.
Всем животным под внутримышечной анестезией (Стресснил (40 мг/мл) - 1 мг/кг массы тела животного, Ветранквил 1.0% - 1.0 мл) проводилась срединная лапаротомия. Далее каждой свинье воспроизводилась экспериментальная кровоточащая рана печени. Для этого медиальную левую долю печени свиньи помещали на подставку-столик. На расстоянии 25 см от поверхности медиальной левой доли печени крепился металлический груз массой 130 г. При готовности нить, фиксирующая груз, пережигалась пламенем факела и груз падал в вертикальном направлении, ударяясь о диафрагмальную поверхность медиальной левой доли печени, что приводило к формированию
экспериментальной кровоточащей раны печени: рана печени размером 6.0*4.0*2.5 см, глубиной 4.0 см, с неровными краями и активным паренхиматозным кровотечением из раны.
Все лабораторные животные были разделены на две равнозначные экспериментальные группы: опытную («=18) и контрольную (n=18). Остановку кровоточащих ран печени у животных опытной группы производили путем тампонирования раны гемостатической салфеткой Сургитамп (рис. 1А), с последующей аппликацией сорбента Молселект G-50 (рис. 1Б). Каждый случай гемостаза в опытной группе животных заканчивался обертыванием медиальной левой доли печени полоской полипропиленового сетчатого протеза, который натягивался и концы его сшивались (Патент на изобретение РФ №2674874), что приводило к компрессии паренхимы печени в зоне повреждения и окончательной остановке кровотечения (рис. 1В*).
В контрольной группе гемостаз экспериментальных ран печени осуществляли путем прошивания раны П-образным швом (Нить - ПГА 3.0).
Оценку результатов экспериментального исследования проводили по показателю времени остановки экспериментального кровотечения, определяемого электронным секундомером. С целью изучения особенностей репаративной регенерации печени в зоне экспериментальных ран печени животным на 7, 14 и 28 сутки эксперимента производилась ре-лапаротомия с целью забора тканей печени для последующего морфологического изучения.
Для проведения гистологических исследований блок тканей медиальной левой доли печени фиксировали в 10%-м растворе нейтрального формалина. Обезвоживание тканей проводили в этиловом спирте возрастающей концентрации, после чего заливали в парафин. Срезы ткани печени толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилин-эозином, пикрофукси-ном по Ван-Гизону, Сириусом красным на выявление коллагеновых волокон.
Статистическую обработку результатов исследования проводили в программе Stata SE 14.2 (StataCorp., TX, USA). Тест Шапиро-Уилка использовался для оценки нормальности распределения признака в группах исследования, далее рассчитывались стандартные описательные статистики: среднее (М), ошибка среднего (m); медиана (Me), нижний (01) и верхний (03) квартиль. Представление результатов иссле-
* Рисунки данной статьи представлен на обложке 2
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2023 - Т. 30, № 3 - С. 64-67 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 3 - P. 64-67
дований произведено в виде М±т для групп с нормальным распределением и Ме(01-03) для групп с ненормальным распределением. Оценку значимости различий (Р) производили с использованием критериев: Г-критерия Стьюдента, ^-критерия Манна-Витни, Фишера, 7-кригерия с поправкой Йетса.
Результаты и их обсуждение. При анализе результатов экспериментального исследования установлено, что в опытной группе время остановки экспериментального кровотечения из ран печени при применении комбинированной методики хирургического гемостаза с тампонированием раны марлей Сургитамп с последующей аппликаций сорбента Молселект О- 50 и пакетированием полосками полипропиленового сетчатого протеза составило 315.0 (306.0-328.0) сек. При этом было отмечено, что после тампонирования раны марлей Сургитамп и внесения Молселект 0-50 на кровоточащую поверхность раны сорбент сразу активно пропитывался кровью, увеличивался в объеме, превращаясь гидрогель, пропитанный кровью. Использование гемоста-тической марли способствовало усилению гемоста-тического эффекта и сокращению времени гемостаза. Обертывание и фиксация доли печени полоской полипропиленового протеза способствовало дополнительной компрессии кровоточащей раны и окончательной остановке кровотечения.
В контрольной группе остановка кровотечения происходила на 435.0 (421.0-445.0) сек (Р<0.0001). При этом в контроле при наложении П-образных гемостатических швов из мест каждого вкола иглы наблюдалось подтекание крови, что обусловило большее время гемостаза в контрольной группе по сравнению с опытной.
Морфологическое исследование материала лабораторных животных на 7-ые сутки эксперимента показало, что в опытной группе повреждение паренхиматозных элементов печени свиней привело к развитию выраженной полиморфноклеточной воспалительной реакции с примесью большого числа макрофагов, вокруг зон повреждения наблюдалось формирование молодой соединительной ткани. У животных контрольной группы преобладали картины глубокого повреждения ткани с разной степени выраженности воспалительной реакцией. Микроскопически определялась незрелая грануляционная ткань с полнокровными сосудами и беспорядочно расположенными фибробластами.
На 14 сутки эксперимента у лабораторных животных опытной группы морфологически в ткани печени уже не наблюдались очаги некрозов гепато-цитов и выраженное демаркационное воспаление. Микроскопически определялись участки молодой соединительной ткани, граничащей с сохранными дольками печени. Воспалительная инфильтрация имела неравномерную выраженность и была представлена гигантскими клетками по типу клеток
«инородных тел». В целом морфологические изменения в опытной группе демонстрировали выраженные процессы формирование соединительнотканного рубца (рис. 2А). У животных контрольной группы на 14 сутки исследования наблюдалась созревающая соединительная ткань в зоне формирования рубца, воспалительная инфильтрация была выражена неравномерно, встречались гигантские клетки. В гепатоцитах наблюдались дистрофические изменения разной степени выраженности, представленные белковой дистрофией (рис. 2Б).
На 28 сутки эксперимента в опытной группе наблюдались сформированные соединительнотканные рубцы в тех участках, где были нанесены раны. Сохранная ткань печени была с явлениями неравномерно выраженной белковой дистрофии, очагами пролиферации гепатоцитов (рис. 3А). В контрольной группе животных в эти же сроки исследования в зонах нанесения повреждений наблюдалась молодая соединительная ткань с выраженным полнокровием сосудов и воспалительной инфильтрацией, местами с примесью гигантских клеток по типу «клеток инородных тел» (рис. 3Б).
Таким образом, морфологические данные свидетельствуют, что лечение экспериментальных кровоточащих ран печени с применением гемостатика Сургитамп и сорбента Молселект G-50 способствует ускорению процессов регенерации печени. При этом было отмечено, что в процессе лечения опытных ран явлений прогрессирования воспаления или повреждающего действия этих препаратов на ткань печени во всех сроках наблюдения выявлено не было.
Заключение. Экспериментальные исследования способа хирургического гемостаза в лечении травматических кровоточащих ран печени путем применения гемостатического средства Сургитамп в комбинации с порошкообразным Молселект G-50 и пакетированием полосками пропиленового протеза показали не только его возможность обеспечивать надежный гемостаз, но и стимулировать процессы регенерации печени.
Конфликт интересов
Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов связанных с публикацией настоящей статьи.
Литература / References
1. Бондарев Г.А., Липатов В.А., Северинов Д.А., Саакян А.Р. Интраоперационная тактика местного хирургического гемостаза при травмах и плановых операциях на паренхиматозных органах брюшной полости. Вестник экспериментальной и клинической хирургии. 2020. Т. 13, №3. С. 268-278 / Bondarev GA, Lipatov VA, Severinov DA, Saakyan AR. Intraoperatsionnaya taktika mestnogo khirurgicheskogo gemostaza pri travmakh i planovykh operatsiyakh na parenkhimatoznykh organakh bryushnoy polosti [Intraoperative Tactics of Local Surgical Hemostasis in Injuries and Planned Operations on the Parenchymal Organs of the Abdominal Cavity]. Vestnik eksperimental'noj i klinicheskoj hirurgii. 2020;13(3):268-78. Russian.
2. Евтихов А.В., Любивый Е.Д., Ким В.Л. Клинические наблюдения тяжелых травматических повреждений печен //
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 3 - P. 64-67
Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2020. №7. С. 89-92 / Evtihov AV, Lyubivyj ED, Kim VL. Klinicheskie nablyudeniya tyazhelykh travmaticheskikh povrezhdeniy pechen [Clinical observations of severe traumatic liver injuries]. Hirurgiya. Zhurnal im. N.I. Pirogova. 2020;7:89-92. Russian.
3. Затевахин И.И., Кириенко А.И., Сажин А.В. Неотложная абдоминальная хирургия: Методическое руководство для практикующего врача. Москва: ООО «Медицинское информационное агентство», 2018. 488 с. / Zatevahin II, Kirienko AI, Sazhin AV. Neotlozhnaya abdominal'naya khirurgiya: Metodicheskoe rukovodstvo dlya praktikuyushchego vracha [Emergency abdominal surgery: A methodological guide for a practicing physician]. Moscow: OOO «Medicinskoe informacionnoe agentstvo»; 2018. Russian.
4. Чередников Е.Ф., Баранников С.В., Банин И.Н., Юзефович И.С., Малеев Ю.В., Шкурина И.А., Маслова В.А. Экспериментальное изучение влияния современных порошкообразных гемостатических средств на систему регуляции агрегатного состояния крови с использованием пьезоэлектрической тромбоэластографии // Вестник новых медицинских технологий. 2021. №4. C. 30-34. DOI: 10.24412/16092163-2021-4-30-34 // Cherednikov EF, Barannikov SV, Banin IN, Yuzefo-vich IS, Maleev YuV, Shkurina IA, Maslova VA. Eksperimental'noe izuchenie vliyaniya sovremennykh poroshkoobraznykh gemostaticheskikh sredstv na sistemu regulyatsii agregatnogo sostoyaniya krovi s ispol'zovaniem p'ezoelektricheskoy tromboelastografii [Experimental study of the influence of modern powdered hemostatic agents on the regulation system of aggregate state of blood using piezoelectric thrombo-elastography]. Journal of New Medical Technologies. 2021;4:30-34. DOI: 10.24412/1609-2163-2021-4-30-34. Russian.
5. Чередников Е.Ф., Баранников С.В., Малеев Ю.В., Фурсов К.О., Литовкина Т.Е., Закурдаев Е.И. Экспериментальное обоснование применения биологически активного дренирующего сор-
бента и обогащенной тромбоцитами плазмы в лечении кровоточащих дефектов желудка // Вестник новых медицинских технологий. 2017. Т. 24, №2. С. 114-118. DOI: 10.12737/article_ 5947d23009b834.05709342 / CHerednikov EF, Barannikov SV, Ma-leev YUV, Fursov KO, Litovkina TE, Zakurdaev EI. Eksperimental'noe obosnovanie primeneniya biologicheski aktivnogo dreniruyushchego sorbenta i obogashchennoy trombotsitami plazmy v lechenii krovoto-chashchikh defektov zheludka [Experimental substantiation of the use of biologically active draining sorbent and platelet-enriched plasma in the treatment of bleeding stomach defects]. Journal of New Medical Technologies.2017;2:114-8. DOI: 10.12737/article_
5947d2 3009b834.05 709342. Russian.
6. Adnan S.M., Anderson R.G., Madurska M.J., McNeill C.J., Jansen J.O., Morrison J.J. Outcomes following abdominal trauma in Scotland // Eur J Trauma Emerg Surg. 2021. Vol. 47, N6. P. 1713-1719 / Adnan SM, Anderson RG, Madurska MJ, McNeill CJ, Jansen JO, Morrison JJ. Outcomes following abdominal trauma in Scotland. Eur J Trauma Emerg Surg. 2021;47(6):1713-9.
7. Vorontsov A.K., Parkhisenko Yu.A., Cherednikov E.F., Barannikov S.V., Mehantjeva L.E., Yuzefovich I.S., Bezaltynnykh A.A., Ovsyan-nikov E.S. Experimental Evaluation of Hemostatic Agents and Powdered Sorbent Effectiveness on the Dynamics of Blood Aggregate State Regulation using the Method of Thromboelastography // International Journal of Biomedicine. 2022. Vol. 12, N2. P. 289-292 / Vorontsov AK, Parkhisenko YuA, Cherednikov EF, Barannikov SV, Mehantjeva LE, Yuzefovich IS, Bezaltynnykh AA, Ovsyannikov ES. Experimental Evaluation of Hemostatic Agents and Powdered Sorbent Effectiveness on the Dynamics of Blood Aggregate State Regulation using the Method of Thromboelastography. International Journal of Biomedicine. 2022;12(2):289-92.
Библиографическая ссылка:
Пархисенко Ю.А., Воронцов А.К., Чередников Е.Ф., Баранников С.В., Черных А.В., Климашевич А.В., Безалтынных А.А., Трошин В.П. Морфологическая оценка репаративной регенерации экспериментальных кровоточащих ран печени с применением метода хирургического гемостаза // Вестник новых медицинских технологий. 2023. №3. С. 64-67. DOI: 10.24412/16092163-2023-3-64-67. EDN HJOIWY.
Bibliographic reference:
Parkhisenko YuA, Vorontsov AK, Cherednikov EF, Barannikov SV, Chernykh AV, Klimashevich AV, Bezaltynnykh AA, Troshin VP. Mor-fologicheskaya otsenka reparativnoy regeneratsii eksperimental'nykh krovotochashchikh ran pecheni s primeneniem metoda khirur-gicheskogo gemostaza [Morphological assessment of reparative regeneration of experimental bleeding liver wounds using the method of surgical hemostasis]. Journal of New Medical Technologies. 2023;3:64-67. DOI: 10.24412/1609-2163-2023-3-64-67. EDN HJOIWY. Russian.
