CC BY
15
DOI: 10.24412/2074-5036-2023-1-20-24 УДК: 616-094:576.895.122
Ключевые слова: хасстилезия, скрябинотрема, морфология, яйца, алтайский горный баран, сибирский горный козел Key words: Hasstilesia, Skrjabinotrema, morphology, eggs, Altai argali, Siberian ibex
хЛогинова О. А., 2Белова Л. М., 2Чупрак Д. И.
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЯИЦ HASSTILESIA OVIS (TREMATODA: HASSTILESIIDAE)
MORPHOLOGICAL CHARACTERIZATION OF EGGS OF HASSTILESIA OVIS (TREMATODA: HASSTILESIIDAE)
'ФГБУН «Институт проблем экологии и эволюции им. А. Н. Северцова РАН» Адрес: 119071, Россия, Москва, Ленинский пр., д. 33
1Institute of Problems of Ecology and Evolution named after A. N. Severtsov, RAS Address: 119071, Russia, Moscow, 33, Leninsky Prospect 2ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины» Адрес: 196084, Россия, Санкт-Петербург, ул. Черниговская, д. 5
2Saint Petersburg State University of Veterinary Medicine Address: 196084, Russia, Saint-Petersburg, 5, Chernigovskaya
Логинова Ольга Александровна, канд. вет. наук, и. о. научного сотрудника Лаборатории систематики и эволюции паразитов Центра паразитологии, loginova_spb@bk.ru
Loginova Olga Aleksandrovna, PhD (Vet. Sci.), Acting Researcher of Laboratory of Parasite Systematics and Evolution of the Center for Parasitology, loginova_spb@bk.ru Белова Лариса Михайловна, доктор биол. наук, заведующая кафедрой паразитологии им. В. Л. Якимова, larissabelova2010@yandex.ru Belova Larisa Mikhailovna, Dr. Habil. (Biol. Sci.), Head of the Dept. of Parasitology, larissabelova2010@yandex.ru Чупрак Дарья Игоревна, аспирант кафедры паразитологии им. В. Л. Якимова, darya.chuprak@mail.ru Chuprak Daria Igorevna, PhD student of the Dept. of Parasitology, darya.chuprak@mail.ru
Аннотация. В работе представлена текстовая и графическая (фотоснимки) характеристика морфологии яиц зоопаразитической трематоды Hasstilesia ovis (Orloff, Erschoff et Badanin,1934). Яйца были получены в результате овоскопии смешанной выборки фекалий алтайских горных баранов (Ovis ammon ammon) и сибирских горных козлов (Capra sibirica). Яйца H. ovis имеют размеры 0,024-0,036 х 0,016-0,020 мм. У них гладкая оболочка, выпуклая крышечка и небольшой прозрачный штифтик на противоположном полюсе. Внутри можно рассмотреть сформированного мирацидия. Яйца асимметричные, но это заметно не во всех проекциях. Необходимо отличать яйца H. ovis от яиц Dicrocoelium. Последние имеют более насыщенную коричневую окраску и напоминают кедровые орешки в скорлупе, тогда как яйца H. ovis по цвету ближе к зрелым желудям. Кроме того, яйца дикроцелия больше по размеру, а у мирацидия дикроцелия в яйце видны два зернистых шара, которых нет у мирацидия хасстилезии.
Summary. The paper presents textual and graphical (micrographs) characterization of the morphology of the eggs of the zooparasitic trematode Hasstilesia ovis (Orloff, Erschoff et Badanin, 1934). The eggs were obtained via ovoscopy of the mixed sample set of feces of Altai argali (Ovis ammon ammon) and Siberian ibex (Capra sibirica). H. ovis eggs measure 0.0240.036* 0.016-0.020 mm. They have smooth egg membrane, a convex operculum, and small transparent pin at the opposite pole. Inside one can see the developed miracidium. The eggs are asymmetrical, but this is not noticeable in all projections. H. ovis eggs must be distinguished from Dicrocoelium eggs. The latter have darker brown color and resemble inshell pine nuts, while H. ovis eggs are closer in color to ripe acorns. In addition, Dicrocoelium eggs are larger in size, and Dicrocoelium's miracidium inside the egg shows two granular balls, which Hasstilesia s miracidium lacks.
Введение
Хасстилезия - это микроскопическая (около 1 мм) зоопаразитическая трематода с непростой судьбой. Под сказанным авторы подразумевают не сложную биологию гельминта, а совокупность противоречивых сведений, публикуемых о нем в отечественной научной литературе. Работая с фиксированными трематодами из тон-
кого кишечника овец, советские гельминтологи И. В. Орлов, В. С. Ершов и Н. В. Баданин в 1934 году описали новый род с единственным типовым видом, который назвали Skrjabinotrema ovis и вместе с известным ранее родом На881Ив81а поместили в подсемейство Hasstilesiinae [15]. А в 1954 году И. С. Касьянов опубликовал расшифровку жизненного цикла овечьей скрябинотремы, где фи-
Рис. 1. Яйца трематоды Hasstilesia ovis, сфотографированные при разном увеличении объективов: А - 4; Е - то же, увеличено; Б - 10; Ж - то же, увеличено; В - 20; З - то же, увеличено; Г - 40; И - то же, увеличено; Д, К - 100 (с масляной иммерсией). Световая микроскопия, светлое поле, деление шкалы = 0,03 мм. Оперкулярный полюс яиц обращен наверх.
гурируют дефинитивный, промежуточный и дополнительный хозяева [6]. Однако впоследствии Е. В. Гвоздев и Т. Н. Соболева (при изучении живых трематод) установили отсутствие морфологических отличий между родами Skrjabinotrema и Hasstilesia. Таким образом, в 1973 году трематоду переименовали в Hasstilesia ovis (Ог1ой, ЕгеЛойГ et Badanin,1934), оставив название Skrjabinotrema в качестве младшего синонима [2]. Более того, оказалось, что и в описании жизненного цикла допущены ошибки: в сведениях И. С. Касьянова, вероятнее всего, речь идет не об овечьей хассти-лезии, а о брахилаймах грызунов (Brachylaimus aequans) [2].
С тех пор хасстилезию (и вызываемый ею хасстилезиоз) стали упоминать в тематической литературе. Хотя в некоторые издания она не попала вообще, как, например, в «Гельминтозы животных» 1975 года [1]. Очевидно, что в трудах, опубликованных до 1973 года, мы увидим название '^^аЫпо^ета ovis,, [3, 7, 11, 12]. Тем не менее, старое название продолжает встречаться и после. На это посетовали Б. П. Всеволодов и Т. Н. Соболева в своей статье 1981 года [2], где сочли необходимым повторно прояснить таксономическое положение возбудителя и его жизненный цикл (включающий только дефинитивного и промежуточного хозяев). Однако и этого оказалось недостаточно. Устаревшее название не просто не исчезло со страниц определителей и
учебников, но и стало соседствовать с валидным названием, породив такие курьезы, как описания и скрябинотрематоза (с ошибочным циклом развития), и хасстилезиоза в одной и той же книге, как например, в изданиях, выпущенных в 2010 [5] и 2019 годах [8]. Причем, в учебном пособии 2019 года Skrjabinotrema подросла в длину и ширину по сравнению с Hasstilesia. Отдельного упоминания заслуживает работа 2021 года [9], где во вкладке с рисунками яиц трематод овец помещены изображения яиц H. ovis под названием Skrjabinema (sic!) ovis, то есть, в путаницу добавили еще и оксиуриду овец, тоже названную в честь К. И. Скрябина. Стоит ли говорить, что в упомянутых трудах используются такие
Рис. 2. Яйца трематоды Hasstilesia ovis, сфотографированные в разных режимах освещения: А - светлое поле; Б - фазовый контраст; В - темное поле. Световая микроскопия, увеличение объектива 40, деление шкалы = 0,0125 мм, масштаб единый. Оперкулярный полюс яиц обращен наверх.
термины как «скрябинотрематоз» [3, 7, 12, 13], «скрябинетремотоз» [5], «скрябинотремоз» [2], «хасстилезиоз» [8, 9, 10], «хастилезиоз» [13] и пр. Противоречивые сведения опубликованы и в отношении диагностических процедур. Одни авторы рекомендуют использовать флотационную копроовоскопию [7], другие - седиментацион-ную [3, 8, 9, 10].
На сегодняшний день известно, что H. ovis паразитирует (вероятно, только в Евразии) у домашних овец (Ovis aries) и коз (Capra hircus), архаров/аргали/горных баранов (Ovis ammon) [2-13, 15] и двугорбых верблюдов (Camelus bactrianus) [14]. Есть основания полагать, что спектр дефинитивных хозяев еще шире и включает, как минимум, домашних коров (Bos taurus) и сибирских горных козлов (Capra sibirica). Очевидно, что необходимы дополнительные исследования в этом направлении. И если мы говорим о прижизненных неинвазивных методах, то это, прежде всего, копроовоскопия. Между тем, в научной литературе представлены только два полноценных изображения яиц H. ovis: черно-белый рисунок пары яиц, выполненный описателями вида в 1934 году [12, 15] и аналоговый (пленочный) цветной фотоснимок одного яйца (по-видимому, из фиксированной особи, с погибшим мирацидием), опубликованный в 2001 [4]. Как справедливо отметил П. А. Поляков: «Из всех яиц гельминтов они самые маленькие. <...> Под микроскопом часть из яиц может выглядеть совершенно симметричными, если они лежат "плашмя", т. е., утолщенной стороной вниз (или вверх). При таком положении "кры-
Рис. 3. Яйца трематоды Hasstilesia ovis, лежащие под разными углами: А - фронтальная проекция, видна крышечка и широкий штифтик; Б - фронтальная проекция, видна крышечка и узкий штифтик; В - фронтальная проекция, крышечка и штифтик не видны; Г -латеральная проекция, видна крышечка и широкий штифтик; Д - латеральная проекция, виден узкий штифтик, крышечка не видна; Е - латеральная проекция, крышечка и штифтик не видны. Световая микроскопия, светлое поле, увеличение объектива 100 (с масляной иммерсией), деление шкалы = 0,03 мм, масштаб единый. Оперкулярный полюс яиц обращен наверх.
шечка" незаметна» [11]. Крайне малые размеры яиц И. ovis и их сложная морфология затрудняют их идентификацию при проведении исследований. Осознавая это, мы сочли своим долгом повысить осведомленность ветеринарных врачей
Рис. 4. Яйца гельминтов жвачных: 1 - Nematodirus sp.; 2 - Paramphistomum sp.; 3 - Fasciola sp.; 4 - яйцо строн-гилидного типа; 5 - Trichuris sp.; 6 - Moniezia expansa; 7 - Dicrocoelium sp.; 8 - Hasstilesia ovis. Световая микроскопия, светлое поле, увеличение объектива 40, размерные значения приведены в мкм, масштаб единый. Оперкулярный полюс яиц трематод (2, 3, 7, 8) обращен наверх. Яйца под номерами 1, 4, 5, 6 получены флотационным методом овоскопии по Дарлингу, яйца 2, 3, 7, 8 получены седиментационным методом последовательных промываний.
и биологов об этой трематоде. Поэтому целью нашей работы стало обнародование референс-ных изображений яиц H. ovis.
Материалы и методы
Яйца H. ovis были получены в результате овоскопии смешанной выборки фекалий алтайских горных баранов (O. a. ammon) и сибирских горных козлов (C. sibirica). Фекалии были собраны Национальном парке «Сайлюгемский» (Кош-Агачский район Республики Алтай, Россия) в 2021 году. Материал доставили в Лабораторию по изучению паразитарных болезней на базе кафедры паразитологии им. В. Л. Якимова ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины» и в Лабораторию систематики и эволюции паразитов Центра паразитологии ФГБУН «Институт проблем экологии и эволюции им. А. Н. Северцова РАН». Яйца обнаружили методом седиментационной копроовоскопии путем последовательных промываний. Представленные фотоснимки получили при помощи цифровой зеркальной фотокамеры 5D Mark II (Canon, Япония), соединенной со световым микроскопом Микмед-6 (ЛОМО, Россия) посредством оптико-механического адаптера (ЛОМО, Россия). Определение линейных размеров яиц проводили по полученным фотоснимкам в программе Figi/ImageJ (National Institutes of Health, США) в режиме Straight Line с предварительной калибровкой по объект-микрометру ОМП (ЛОМО, Россия). Для съемки использовали объективы с увеличением 4, 10, 20, 40 и 100 (в последнем случае - с добавлением синтетического иммерсионного масла). Врéменные микропрепараты просматривали в режиме светлого и темного поля, а также с использованием фазового контраста. Фотографии яиц других гельминтов были получены авторами при копроовоскопии овец, коз, благородных (Cervus elaphus) и северных оленей (Rangifer tarandus) в период с 2020 по 2022 годы.
Результаты исследований
Яйца трематоды H. ovis, сфотографированные при разном увеличении объективов, представлены на рисунке 1. Внешний вид яиц, сфотографированных в режиме светлого, темного поля и фазового контраста, представлен на рисунке 2. Яйца, лежащие под разными углами, представлены на рисунке 3. Изображения различных яиц гельминтов, паразитирующих у жвачных, включая яйцо H. ovis, представлены на рисунке 4 в едином масштабе.
Обсуждение результатов
То, что мы видим, зависит от того, как мы смотрим. В частности, необходимо помнить, что при просмотре микропрепаратов под иммерсией яйца подвергаются некоторому давлению объектива, поэтому могут выглядеть шире, чем при просмотре на более низком увеличении. Мы не рекомендуем осуществлять микроскопию при увеличении объектива ниже десятикратного (поскольку велик риск пропустить мелкие яйца хасстилезии), но и оно традиционно используется лишь для навигации по препарату. Объективы с двадцатикратным увеличением редко применяются в рутинной ветеринарной практике, поэтому для диагностики оптимальным можно считать сорокакратное увеличение объектива, подкрепляемое, при необходимости иммерсионной микроскопией на масляном (OIL) объективе с увеличением 100. Как видно из приведенных снимков, яйца H. ovis имеют размеры 0,0240,036 х 0,016-0,020 мм. У них гладкая оболочка, выпуклая крышечка и небольшой прозрачный штифтик на полюсе, противоположном оперку-лярному. Внутри можно рассмотреть сформированного мирацидия. Яйца асимметричные, но это заметно не во всех проекциях, поэтому можно предложить аккуратно подтолкнуть пальцем покровное стекло на временном микропрепарате, чтобы яйцо изменило положение. В плане дифференциальной диагностики необходимо отличать яйца H. ovis от яиц Dicrocoelium. Последние имеют более насыщенную коричневую окраску и напоминают кедровые орешки в скорлупе, тогда как яйца H. ovis по цвету ближе к зрелым желудям. Кроме того, яйца дикроцелия больше по размеру, а у мирацидия дикроцелия в яйце видны два зернистых шара, которых нет у мирацидия хасстилезии.
Заключение
Таким образом, представленная текстовая и графическая характеристика яиц зоопаразитиче-ской трематоды H. ovis может позволить ветеринарным специалистам и биологам уверенно диагностировать этого гельминта при проведении копроовоскопических исследований.
Благодарности
Авторы выражают благодарность Алексею Олеговичу Кужлекову, научному сотруднику отдела науки, туризма и рекреационной деятельности ФГБУ «Национальный парк "Сайлюгемский"» (Республика Алтай, Россия) за помощь в получении материала и Владимиру Сергеевичу Тури-цину, кандидату биологических наук, доценту
кафедры водных биоресурсов и аквакультуры ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный аграрный университет» (Санкт-Петербург (г. Пушкин), Россия) за помощь в идентификации яиц трематоды.
Список литературы
1. Васильев А. А. Гельминтозы животных (Профилактика и лечение) / А. А. Васильев. М.: Россельхозиздат, 1975. 109 с.
2. Всеволодов Б. П. Морфобиологические особенности Hasstilesia ovis (Trematoda: Brachylaimidae) и вызываемые ею патоморфологические изменения в кишечнике овцы / Б. П. Всеволодов, Т. Н. Соболева // Паразитология. 1981. № ХУ(5). С. 415-420.
3. Гельминтозы жвачных животных / под ред. Е. Е. Шу-маковича. М.: Колос, 1968. С. 91-93.
4. Дифференциальная диагностика гельминтозов по морфологической структуре яиц и личинок возбудителей / А. А. Черепанов, А. С. Москвин, Г. А. Котельников [и др.]. М.: Колос, 2001. С. 15.
5. Иллюстрационный материал к учебно-методическому пособию «Паразитология и инвазионные болезни животных» / В. В. Кибакин, О. И. Щербак, Е. В. Янглачева. Красноярск: Красноярский ГАУ, 2010. 94 с.
6. Касьянов И. С. Расшифровка биологического цикла трематоды Skrjabinotrema ovis (Brachylaemidae) / И. С. Касьянов // Труды института ветеринарии Казанского филиала ВАСХНИЛ. Казань, 1953. Т. 7. С. 233-257.
7. Краткий курс паразитологии домашних животных / под общ. ред. К. И. Скрябина. M.: Гос. изд-во сельскохозяйственной литературы, 1950. С. 236-237.
8. Лапытов Д. Г. Паразитология и инвазионные болезни жвачных животных: учебное пособие / Д. Г. Лапытов, Р. Р. Ти-мербаева, E. Г. Кириллов. СПб.: Лань, 2019. С. 116-119.
9. Лутфуллин M. X. Ветеринарная гельминтология: учебное пособие для СПО / M. X. Лутфуллин, Д. Г. Лапытов, M. Д. Корнишина. СПб.: Лань, 2021. 304 с.
10. Паразитология и инвазионные болезни животных / M. Ш. Акбаев, А. А. Водянов, Н. E. Косминков [и др.]. M.: Колос, 1998. С. 106-110.
11. Поляков П. А. Прижизненная дифференциальная диагностика стронгилятозов пищеварительного тракта жвачных по инвазионным личинкам: дис. ... канд. вет. наук: 1.5.17 / П. А. Поляков; ВИГ им. ак К. И. Скрябина. M., 1953. С. 131-133.
12. Скрябин К. И. Основы трематодологии: Трематоды животных и человека. Т. II / К. И. Скрябин. M.: Изд-во Академии наук СССР, 1948. С. 295-303.
13. Тетерин В. И. Диагностика гельминтозов животных: учебное пособие / В. И. Тетерин, И. А. Кравченко. СПб.: Лань, 2020. С. 112.
14. Guowu Zh. Occurrence of gastrointestinal parasites in camels in the Tianshan Mountains pastoral area in China / Zh. Guowu, Zh. Kai, W. Xifeng [et al.] // Journal of Veterinary Research. 2020. Vol. 64. Issue 4. P. 509-515.
15. Orloff I. V. Eine neue Trematoden - Krankheit der Schafe, hervorgerufen durch Skrjabinotrema ovis nov. sp. (Fam. Brachylaemidae Dollfus, 1931) / I. V. Orloff, V. S. Erschoff, N. V. Badanin // Wiener Tierärztliche Monatsschrift. 1934. Bd. 21, H. 11. P. 321-326.
■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■¡■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■а
I КАК ОФОРМИТЬ ПОДПИСКУ НА ЖУРНАЛ? I
ее А. Через подписной каталог |
| Индекс в каталоге «Газеты. Журналы» Агентства «Роспечать» - 33184 |
| Б. Через редакцию журнала |
| Банковские реквизиты для оплаты подписки |
| по безналичному расчету для юридических лиц: |
§ ЧОУДПО «Институт Ветеринарной Биологии» |
| ИНН 7802196720 КПП 781301001 X
| Р/с 40703810400000000022 в АО «Горбанк», г. Санкт-Петербург |
| К/с 30101810200000000814 БИК 044030814 |
| В поле «Назначение платежа» указать: |
| «Предоплата за подписку на журнал «Актуальные вопросы |
| ветеринарной биологии» на 2023 г. согласно инф. письму б/н =
| от 03.09.18 г. НДС не облагается. Адрес подписки: ...» |
| Стоимость редакционной подписки на 2023 год: =
| 2400 рублей. |
e Адрес редакции: Санкт-Петербург, ул. Ораниенбаумская, 3-Б. =
¡ Т./ф. (812) 232-55-92, т. 927-55-92. ¡
I E-mail: virclin@mail.ru; www.invetbio.spb.ru |
..............................................................................................................................................................................ivn*
