CC BY
43
Статья
бляшки, что объясняется активным иммуноцитопоэзом у молодых нерп. В центрах размножения лимфоидных узелков и в межузелковой зоне имеется высокое содержание деструктивно измененных клеток - почти У доли всех клеток (табл).
У нерп в функционально активных центрах размножения лимфоидных узелков число молодых форм клеток практически одинаково (по 20%). Однако у взрослых нерп значительно (в 1,8 раза) преобладает число бластов (табл.). По сравнению с молодыми, у взрослых нерп в центрах размножения узелков преобладает число клеток с картинами митозов, малых лимфоцитов и плазматических клеток (табл.). При этом деструкция клеток здесь в 1,7 раза меньше, чем у молодых нерп. В куполе лимфоидных узелков у взрослых особей отмечено более высокое накопление лимфоцитов (малых и средних лимфоцитов). У молодых нерп лимфоциты составляют 55,9%, у взрослых нерп - 71,4% от числа всех клеток лимфоидного ряда. Но у взрослых нерп, по сравнению с молодыми, в куполе узелков резко снижается число зрелых и незрелых плазматических клеток (в 2 раза и в 6,7 раз, соответственно). В куполе лимфоидных узелков исчезают клетки с митозами, в 3 раза меньше выявлено макрофагов и вдвое меньше содержание деструктивных клеток по сравнению с молодыми животными (табл.). В диффузной лимфоидной ткани межузелко-вой зоны лимфоидной бляшки наиболее выраженные возрастные различия касаются содержания плазматических клеток. Их число у нерп от 2-3 лет к 8 годам увеличивается в 2,1 раза. При этом с возрастом в 2,3 раза растет доля антителпродуцирующих клеток (плазмоцитов). Наряду с этим у взрослых особей в диффузной лимфоидной ткани межузелковой зоны нет клеток с митозами и бластов, а содержание макрофагов в 1.8 раза меньше, чем у молодых нерп. В межузелковой зоне лимфоидных бляшек с возрастом отмечается тенденция к усилению деструктивных процессов у лимфоидной ткани.
Обсуждение. У байкальских нерп в стенках подвздошной кишки групповые лимфоидные бляшки представляют собой скопления функционально активных лимфоидных узелков с обширными центрами размножения. Наличие высокоактивных центров размножения в лимфоидных узелках говорит об активной трансформации здесь В-клеток, регулирующих гуморальный иммунитет [1, 6-7]. Это часто объясняется особенностями питания, наличием паразитарных инвазий, химическим составом воды и пр., что в комплексе может вести к антигенным воздействиям на лимфоидную ткань пищеварительной системы [3-4, 8]. Отличительным признаком в морфологии лимфоидных бляшек у нерп, является развитие плотного соединительно-тканного каркаса вокруг лимфоидных узелков, развитие которого, по мнению ряда авторов, объясняется влиянием температурного режима на их организм (холодных вод) [4]. Отмечено также слабое развитие межузелковой зоны в лимфоидных бляшках у молодых особей и появление типичной обширной межузелковой зоны у взрослых. Рост площади межузелковой зоны у половозрелых нерп говорит о развитии с возрастом Т-зависимой зоны, зоны локализации лимфоцитов, регулирующих клеточный иммунитет [1].
Выявленные возрастные изменения в микротопографии лимфоидных бляшек у нерп соответствуют возрастным изменениям иммунных органов у ряда животных (крыс, мышей, кролика) и человека [8, 9]. Морфологические изменения характеризуются снижением числа лимфоидных узелков в лимфоидных бляшках, разрастанием соединительной ткани в стенках кишки, склерозировании кровеносных сосудов с возрастом. Возрастная перестройка цитоархитектоники лимфоидных образований в лимфоидной бляшке у нерп проявляется в снижении пролиферативной и макрофагальной активности клеток в куполе лимфоидных узелков и в диффузной лимфоидной ткани (в межузелковой зоне), с возрастом в лимфоидных бляшках усиливаются процессы местного созревания антителпродуцирующих плазматических клеток в центрах размножения узелков и в диффузной лимфоидной ткани. Рост числа плазматических клеток в лимфоидной бляшке у нерп является проявлением возрастной компенсаторноприспособительной реакции, поддерживающей активные процессы иммуногенеза в стенках пищеварительной системы [1, 8].
Изучение структурной организации пейеровых бляшек у байкальских нерп выявило типичные черты их микротопографии. Для нерп характерно наличие в лимфоидной бляшке крупных лимфоидных узелков с резко расширенными центрами размножения, окруженных узкой мантией и развитым соединительнотканным каркасом вокруг лимфоидных узелков. Отмечено слабое
развитие межузелковой зоны у молодых нерп. Выявленные возрастные изменения в цитоархитектонике лимфоидных образований лимфоидных бляшек сходны с подобными изменениями у других животных и человека. Полученные результаты исследования цитоархитектоники лимфоидной ткани в лимфоидных бляшках у байкальских нерп могут служить основанием при моделировании экологической обстановки и определения иммунотоксичности при воздействии техногенных и природных факторов.
Литература
1. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика.- М.: Медицина, 1976.- 336 с.
2. Галактионов В.Г. Иммунология.- М.: Изд. Моск. универ.- 1998.- 479 с.
3. Сапин М.Р., Никитюк Д.Б. Иммунная система, стресс и иммунодефицит.- М., АПП Джангар, 2000.- 184 с.
4. Кондратьева И.А., Киташова А А. // Иммунология.-2002.- № 2.- С. 97-101.
5. Стефанов С.Б. // Цитология.- 1974.- № 11.- С. 1439.
6. Gray D. // Res. Immunol.- 1991.- № 3.- P. 236-242.
7. Liu Y-J. et al. // Immunol. Today.- 1992.- № 1.- P. 17-21.
8. Сапин М.Р. Иммунные структуры пищеварительной ис-темы.- М.: Медицина, 1987.- 224 с.
9. Григоренко Д.Е. Динамика возрастных изменений микроструктуры лимфоидной бляшки человека / В сб. Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии.- М., 2004.- С. 89-91.
THE STRUTURAL ORGANIZATION OF GROUP LYMPHOID NODULES (PEYER' S NODULES) IN BAIKAL NERPA
D.E. GRIGORENKO, M.R. SAPIN Summary
The microstructure of the lymphoid (Peyer's) nodule of iliac intestine was studied in young and grown-up Baikal Nerpas. It was revealed typical indications of the microtopography of the lymphoid nodule of Nerpas connected with special features of their environment. Age changes in the morphology and cytoarchitectonics of the structural formation of the lymphoid nodule of Nerpa are similar to another animals and a man. Quantitative indicators of cytoarchitec-tonic of the lymphoid tissue in lymphoid nodule of Nerpa may be used in simulating of an ecological situation and in determination of immu-notoxisity under the influence of industrial and natural factors.
Key words: lymphoid nodule, baikal nerpa
УДК 611.018
МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНОЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ
Д.Е. ГРИГОРЕНКО*, М.Р. САПИН*, А.М ХРЕБТОВСКИЙ**
Введение. В настоящее время внимание исследователей приковано к проблеме заболевания печени различной этиологии. Несмотря на обилие работ, посвященных механизмам влияния пораженной печени на иммуногенную реактивность организма [1-4], в литературе нет данных по морфо-функциональному состоянию лимфатических узлов, непосредственно принимающих лимфу от печени. Необходимость подобных исследований диктуется выявлением характера изменений в цитоархитектонике структурных компонентов лимфатических узлов, приводящим к проявлению вторичных иммунодефицитных состояний. Исходя из этого, цель нашей работы заключалась в изучении структурной организации регионарных печеночных лимфатических узлов у крыс при моделировании острого гепатита в отдаленные сроки после введения четыреххлористого углерода (ССЬ^.
* НИИ морфологии человека РАМН, Москва, ул. Цюрупы д.3, тел. (095)128-57-15; факс(095)120-80-65
** ММА им. И.М.Сеченова, 103009, ул. Моховая, 11. Тел (095)203-52-70
Д.Е. Григоренко, М.Р. Сапин, А.М. Хребтовский
Материал и методы исследования. Работа выполнена на половозрелых, беспородных крысах-самцах. Основная группа -(ОГ) крысы, которым в течение 4-х недель 2 раза в неделю в желудок вводили масляный раствор ССЬ,4 в дозе 0,1 мл/кг массы тела. Для усиления действия ССЬ,4 животные в качестве питья употребляли 5% водный раствор спирта. Контрольная группа (КГ) - животные, которые также в течение 4-х недель в качестве питья получали 5% водный раствор спирта. По окончании эксперимента эвтаназию крыс проводили методом декапитации с помощью гильотины. Последствия воздействия ССЬ4 изучали через 1, 2, 4 и 7 недель после прекращения введения токсического вещества (по 7 крыс в группе). Печеночные лимфатические узлы крыс после препарирования фиксированы в 10% формалине и проведены по традиционной гистологической методике (по спиртам восходящей концентрации) и заливали в парафин. На парафиновых срезах толщиной 4-5 мкм, окрашенных гематоксилином-эозином и азурП-эозином, изучен количественный (в %) и качественный состав цитоархитектоники структурных компонентов печеночных лимфатических узлов. На единице площади гистологического среза лимфатических узлов в 880 мкм2, по методу С.Б. Стефанова [5] рассчитано распределение клеточного состава (14 видов клеток) в центрах размножения и в мантии лимфоидных узелков, в паракортикальной зоне, в мякотных тяжах, в краевых и мозговых синусах. Проведена статобработка цифрового материала. Достоверность различий сравниваемых групп с контролем учитывали при Р<0,05.
Результаты исследования. В КГ крыс после употребления 5% водного раствора спирта в течение 4-х недель в печеночных лимфатических узлах под тонкой капсулой просматривается неравномерной ширины краевой (подкапсульный) синус. В краевом синусе в притекающей к лимфоузлу лимфе плотность клеток на единице площади гистологического среза (в 880 мкм2) варьируется от 20 клеток в расширенных участках синуса до 47 клеток над лимфоидными узелками (табл. 1). В органе четко дифференцируются корковое и мозговое вещество. В корковом веществе видны только крупные лимфоидные узелки с центрами размножения, окруженные плотными мантийными зонами, что характеризует высокую функциональную активность лимфатических узлов [6]. Плотность клеток в центрах размножения лимфоидных узелков на 27,4 клетки меньше, чем плотность клеток в мантии. Под лимфоидными узелками просматривается паракор-тикальная зона с неравномерной частотой распределения клеток, которая в разных участках органа варьируется от 67 до 89 клеток, составляя, в среднем, 76,6 клеток. На гистологических срезах мозговое вещество, занимающее более У площади лимфатического узла, отличается от коркового вещества низкой плотностью клеток. В мякотных тяжах плотность клеток на 25 шт. меньше, чем в мантии, и на 18,8 меньше, чем в паракортикальной зоне. Мякотные тяжи обозначены береговыми клетками. В КГ между мякотными тяжами видны участки мозговых синусов, частота распределения клеток в которых на 17,6 клетки меньше, чем в мякотных тяжах. Выраженность мозговых синусов объясняется
содержанием в них светлых ретикулярных клеток (~40%) и деструктивно измененных клеток (~20%).
В КГ в печеночных лимфатических узлах наибольшая плотность распределения клеток отмечена в мантии лимфоидных узелков и в паракортикальной зоне (82,8 и 76,6 клеток), что связано с максимальным накоплением здесь лимфоцитов, составляющих, соответственно, 70,77% и 77,28% (табл. 2). В КГ в центрах размножения лимфоидных узелков, в паракортикальной зоне и в мякотных тяжах выявлены клетки с картинами митозов -от 0,26% в паракортикальной зоне до 2,52% в центрах размножения. Во всех структурных зонах лимфатического узла, за исключением синусов (краевых и мозговых), представлены бласты, максимальное содержание которых отмечено в центрах размножения лимфоидных узелков (4,33%) и менее всего их - в пара-кортикальной зоне (0,26%). Содержание этих клеток (бластов и митотически делящихся клеток) свидетельствует об активном лимфоцитопоэзе в лимфатических узлах у животных контрольной группы [7]. Выявлено, что у крыс КГ только в мякотных тяжах лимфатических узлов выявлено максимальное накопление плазматических клеток (28,03%). Среди этих клеток преобладает содержание зрелых антителопродуцирующих плазматических клеток, которых в 1,9 раза больше, чем их незрелых форм (плаз-моцитов - 18,34%, плазмобластов - 9,69%). В других структурных зонах органа плазматические клетки - единичные (в мантии, паракортикальной зоне и в мозговых синусах - от 0,24% до 1,0%) и они не выявлены в центрах размножения и в краевом синусе. В краевом и в мозговых синусах, т.е. в поступающей и оттекающей лимфе из лимфатического узла, по сравнению с другими зонами органа, отмечена минимальная плотность распределения клеток (32-40 клеток). При этом здесь выявлено максимальное содержание деструктивно измененных клеток (17-19%) и макрофагов (9-12%), что говорит об активной транспортной и утилизирующей функции лимфатических узлов у животных КГ [7-8].
У животных ОГ после действия ССЬ^ по сравнению с КГ, в печеночных лимфатических узлах в 1,5-2 раза уменьшается число лимфоидных узелков с центрами размножения. На протяжении всех сроков эксперимента (1-7 недель), по сравнению с КГ, площадь паракортикальной зоны резко увеличена. Здесь отмечается большое количество расширенных кровеносных сосудов, просвет которых заполнен клетками. В отличие от КГ, в ОГ мозговое вещество в лимфатических узлах резко оттеснено к воротам узла и составляет менее У площади органа Выявлено, что в разные сроки эксперимента плотность распределения клеток в структурных компонентах лимфатического узла изменяется неравномерно. По сравнению с КГ, одновременное уменьшение плотности клеток во всех зонах лимфатического узла отмечается только на 4-й неделе опыта (табл. 1). В наибольшей степени снижение плотности клеток отмечено в мантии, в паракортикальной зоне и в мякотных тяжах (на 23,2-29,4 клеток) и менее всего - в мозговых и краевых синусах (на 10,6 и 13,0 клеток). При этом только в мякотных тяжах плотность клеток последовательно уменьшается от 1-й к 4-й неделе опыта, по сравнению с КГ, на 23,2 клеток. Через 7 недель во всех структурных компонентах органа отмечается рост плотности клеток, приближающийся к показателям КГ. На гистологических срезах паренхима лимфатического узла, в отличие от КГ, инфильтрирована слившимися, крупными и мелкими макрофагами с клеточным детритом. Появление таких макрофагов в органах иммунной системы связано с развитием компенсаторных процессов в организме при различных эндо- и экзогенных воздействиях [9-11].
При введении ССЬ4 в организм животных ОГ выявлена четкая динамика в усилении деструктивных процессов во всех зонах лимфатического узла. По сравнению с КГ, в паракорти-кальной зоне и в мякотных тяжах число деструктивно измененных клеток увеличивается к 7-й неделе опыта в максимальной степени, соответственно, в 3,6 раза и в 2,1 раза. В других структурных компонентах органа содержание этих клеток увеличивается практически в равной степени - в 1,4-1,8 раза. Наряду с усилением деструкции, в лимфатическом узле с 1-й по 4-ю неделю неравномерно увеличивается содержание макрофагов, в том числе крупных сливных макрофагов. Но к 7-й неделе опыта макрофагальная активность клеток падает в центрах размножения, в мантии узелков, в мякотных тяжах, где число макрофагов
Таблица 1
Плотность распределения клеток на единице площади гистологического среза (880 мкм2) в структурных компонентах печеночных лимфатических узлов крыс в отдаленные сроки после введения ССЬ4 (в дозе 0,1 мл/кг)
Сроки эксперимента
КГ 1неделя 2 неделя 4 неделя 7 неделя
Центр размножения 55,4 ± 3,67 (50-60) 51,2±3,61 (47-58) 51,6 ± 4,02 (41-60) 37,8 ± 3,27 (32-41) 54,2 ± 4,47 (51-60)
Мантия 82,8 ± 7,31* (73-88) 77,8±5,34* (73-82) 79,0 ± 5,33* (72-82) 53,4 ± ,92* (50 -58) 74,8 ± 6,77* (67-82)
Паракорти-кальная зона 76,6 ± 5,1 * (67-89) 78,6±5,67* (74-89) 72,8 ± 5,23* (67-80) 50,6 ± 4,92* (45-59) 73,0 ± 6,2 * (67-78)
Мякотные тяжи 57,8 ± 3,62 (52-64) 49,6±3,32 (45-54) 46,0 ± 3,66 (44-49) 34,6 ± 2,96 (31-37) 53,0 ± 5,11 (48-55)
Мозговые синусы 40,2±3,67 * (38-46) 40,2±2,02* (34-45) 43,8 ± 3,13* (35-49) 29,6 ± 3,01* (28-33) 35,2 ± 3,27* (26-47)
Краевые синусы 32,8 ± 2,7 * (20-47) 29,4±2,86* (25-32) 26,2 ± 2,09* (18-32) 19,8 ± 2,22* (13-29) 34,6 ± 3,52* (26-42)
Обозначения : в скобках ( ) - показатели значений колебания признака (минимум -максимум ); * - значения достоверны по сравнению с контролем при р < 0,05.
Д.Е. Григоренко, М.Р. Сапин, А.М. Хребтовский
приближаются к значениям КГ (табл. 2). Исключение составляют мозговые синусы, здесь число макрофагов увеличивается от 9,4% в контроле до 15,3% к 7 неделе опыта.
Таблица 2
Клеточный состав печеночных лимфатических узлов крыс КГ и после введения ССЬ4 в концентрации 0,1 мл/кг
Структурные компоненты лимфатического узла
Центр размножения Мантия Паракортик. зона Мякотные тяжи Мозговые синусы Краевые синусы
Бласты
К 4,33±0,47 0,96±0,13 0,26±0,08 1,04±0,21 0 0
1 3,91±0,49 0 0,51 ±0,21 0,40±0,12* 0 0
2 4,26±0,52 0,76±0,13 0,55±0,25 0 0 0
4 15,34±1,6* 0,75±0,17 0,40±0,09 0 0 0
7 0,37±0,11 * 0,53±0,12* 0 0 0 0
Большие лимс оциты
К 19,5±1,56 7,49±0,72 6,53±0,71 2,77±0,32 1,99±0,2 1,8±0,2
1 17,18±1,80 4,88±0,50* 5,60±0,60 2,02±0,22 2,49±0,3 2,7±0,3*
2 16,27±1,70* 5,56±0,60* 7,69±0,80 3,91 ±0,50* 0,9±0,15* 5,3±0,6*
4 13,23±1,40* 5,62±0,60 5,53±0,60 3,47±0,40* 2,7±0,3* 0
7 2,21 ±0,30* 4,27±0,60* 2,46±0,30* 1,51 ±0,20* 1, 1 ±0,2* 0
Лимфоциты (малые и средние лимфоциты)
К 41,88±1,70 70,77±2,30 77,30±3,10 35,90±1,70 31,2±2,3 47,55±1,8
1 37,89±2,30 67,09±1,70* 67,43±2,20* 33,06±1,80 36,3±1,7* 66,7±1,9*
2 40,69±1,90 77,72±1,80* 65,11 ±1,90* 26,95±1,40* 46,1±2,1 * 45,03±2,3
4 23,80±1,20* 70,03±3,40 64,42±3,70* 21,3 8±1,60* 20,9±1,8* 48,48±2,6
7 58,66±3,50* 76,20±3,70 70,13±3,60* 35,09±1,80 41,5±2,8* 49,70±2,9
Незрелые плазматические клетки (плазмобласты)
К 0 0,24±0,09 0,26±0,09 9,69±0,99 0,5±0,1 0
1 0,39±0,09 1,28±0,21 * 0,51±0,10* 8,06±0,94 3,5±0,4* 0
2 1,16±0,22* 0 0,27±0,11 14,76±1,41 * 0,5±0,1 0
4 0 0 0,40±0,11 12,14±1,33 * 2,0±0,3* 0
7 0,37±0,12 0 0,27±0,12 9,81±1,03 0 0
Зрелые плазматические клетки (плазмоциты)
К 0 0 0 18,34±1,61 0,5±0,1 0
1 0 0,51±0,12 0,51 ±0,10 17,74±1,70 0,99±0,1* 0
2 0 0 0 22,17±2,03 0,45±0,1 0
4 0,53±0,12 0 0 26,58±2,46* 0,7±0,19 0
7 0 0 0 11,32±1,26* 0 0
Гранулоцитарные лейкоциты (нейтрофилы и эозинофилы)
К 0 0 0 0 0 0,6±0,1
1 0 0 0,25 ±0,11 2,00±0,15 3,57±0,5 0
2 0 0 0 2,16±0,19 0,45±0,1 0,76±0,1
4 0 0 0 0,5 8±0,13 0 0
7 0 0 0 1,13±0,43 0 0
Клетки с картинами митозов
К 2,52±0,29 0 0,26±0,05 0,69±0,12 0 0
1 2,73±0,29 0 0 0,40±0,12 0 0
2 3,49±0,42* 0 0 0 0 0
4 1,05±0,21* 0 0 0 0 0
7 0 0 0 0 0 0
Макрофаги
К 6,50±0,70 0,72±0,13 1,83±0,19 4,15±0,42 9,5±0,95 12,2±1,07
1 8,20±0,87 2,57±0,31 * 4,5 8±0,51 * 6,05±0,63* 9,95±1,1 2,0±0,11*
2 5,04±0,53 1,77±0,20* 6,04±0,63* 6,52±0,72* 12,78±1,3 8,4±0,92*
4 7,41±0,82 2,62±0,33* 5,53±0,57* 8,67±0,87* 17,6±1,7* 8,1 ±0,97*
7 7,01±0,87 0,80±0,11 3,83±0,42* 4,15±0,62 15,3±1,7* 1,2±0,25*
Деструктивно измененные и разрушенные клетки
К 10,83±1,11 5,80±0,50 4,44±0,59 9,69±0,71 19,9±1,7 17,07±1,7
1 18,75±1,91 * 8,22±0,90* 7,89±0,82* 16,53±1,60* 17,9±1,7 5,44±0,6*
2 10,85±1,11 7,59±0,82* 9,89±1,01 * 14,78±1,41 * 24,6±2,36* 11,5±1,2*
4 24,86±2,49* 10,86±1,22* 11,86±1,21 * 14,45±1,46* 35,1 ±3,56* 26,3±27*
7 19,56±2,02* 9,62±1,03* 15,89±1,55 * 20,3 8±2,11 * 28,4±2,9* 30,6±3,3*
Обозначения: * -
значения достоверны по сравнению с контролем при р<0,05. В первой колонке цифры 1, 2, 4, 7 - недели, К - контроль
При общем усилении деструкции клеток в органе содержание лимфоцитов (малых и средних лимфоцитов) в структурных зонах изменяется неравномерно. Наиболее выраженное и последовательное снижение числа лимфоцитов (малых и средних) отмечено в паракортикальной зоне, где с 1-й по 4-ю недели опыта количество лимфоцитов уменьшается на 12,88%, по сравнению с контролем. При этом к 7-й неделе опыта число лимфоцитов в паракортикальной зоне увеличивается, оставаясь меньше значений КГ на 6,17%. В мякотных тяжах уменьшение числа лимфоцитов отмечено только на 2-й и 4-й неделях опыта (на 8,9514,62%) и к 7-й неделе их число увеличивается до показателей
КГ. Но в центрах размножения лимфоидных узелков и в мозговых синусах к 7-й неделе опыта число лимфоцитов растет, превышая показатели КГ на 16,78% и на 10,27%, соответственно, отмечается неоднозначная реакция центрального (тимуса) и периферического (селезенки) органов иммунной системы при экспериментальном гепатите. Рост числа лимфоцитов в структурных зонах печеночного лимфоузла к 7-й неделе опыта согласуется с итогами др. исследований, где отмечено морфологическое восстановление лимфоидных структур в селезенке через 3 сут. при экспериментальном гепатите [1, 4]. В тимусе к 3-м суткам опыта выраженность инволютивных изменений нарастает. В отдаленный период после интоксикации печени восстановление уровня лимфоцитов идет лишь в периферических органах иммунной системы, поддерживая иммунологическую реактивность на уровне, нужном для сохранения гомеостаза при остром гепатите.
В результате воздействия СС14 во всех зонах печеночного лимфатического узла не было клеток с картинами митозов. Исключение - центры размножения лимфоидных узелков, где число таких клеток уменьшается через 4 недели в 2,4 раза, по сравнению с контролем, и эти клетки исчезают к 7-й неделе опыта. В структурах лимфатического узла в опыте выявлено и резкое уменьшение молодых форм клеток (больших лимфоцитов). К 7-й неделе опыта число этих клеток снижено, по сравнению с контролем, в центрах размножения лимфоидных узелков в 8,8 раза, в паракортикальной зоне - в 2,6 раза. В других зонах органа отмечено равное уменьшение в содержании больших лимфоцитов (в 1,7-1,8 раза). Содержание бластов на протяжении всех сроков опыта в центрах размножения, в мантии лимфоидных узелков и в паракортикальной зоне меняется неравномерно. Однако к 7-й неделе опыта, в сравнении с контролем, число бластов в центрах размножения и в мантии узелков уменьшается, соответственно, в 11,7 раза и в 1,8 раза, а в паракортикальной зоне бласты исчезают (табл. 2). В др зонах органа бластных форм клеток нет.
Характерным признаком для печеночных лимфатических узлов является преобладание в мякотных тяжах и зонах созревания и накопления плазматических клеток зрелых антителопродуцирующих плазматических клеток [7]. В контроле в мякотных тяжах число плазмоцитов в 1,8 раза больше, чем плазмобластов. Такое соотношение клеток сохраняется и в ОГ. Содержание плазмо-цитов в мякотных тяжах достоверно растет на 2-й и 4-й неделях опыта (в 1,4 раза) и резко уменьшается к 7-й неделе опыта, оставаясь меньше, чем в контроле в 1,6 раза. В мозговых синусах уровень плазмоцитов на протяжении 1-4 недель опыта достоверно не изменяется в сравнении с контролем, но исчезают к 7-й неделе опыта. В паракор-тикальной зоне незрелые плазматические клетки присутствуют на всех этапах эксперимента, но по сравнению с КГ не выявлено четкой динамики в их содержании (различия не достоверны). Отметим появление плазмобластов в ОГ (через 1, 2 и 7 недель) в центрах размножения лимфоидных узелков, которые не были выявлены в КГ, что является признаком компенсаторной реакции в органе в условиях действия ССІ4. После введения ССІ4 в зонах лимфатического узла (кроме лимфоидных узелков) появляются сегментоядерные лейкоциты, эозинофилы. В мякотных тяжах эти клетки присутствуют на протяжении всех сроков опыта (табл.2), это - проявление аллергической реакции при токсическом действии агента [4].
Исследование отдаленных последствий после воздействия ССІ4 на организм животных (с 1-й по 7-ю недели) позволяет установить морфологические изменения и перестройку цитоархитектоники в структурных зонах регионарного печеночного
Статья
лимфатического узла. На протяжении всех сроков опыта в лимфатическом узле вдвое уменьшено число лимфоидных узелков с центрами размножения, расширена паракортикальная зона, сокращена площадь мозгового вещества, а также резко снижается плотность распределения клеток во всех зонах органа. Спустя 7 недель после введения CCL4 в структурных зонах печеночных лимфатических узлов идет четкое подавление функции лимфоци-топоэза и бласттрансформации клеток (исчезают клетки с картинами митозов и бласты) и угнетается созревание антителпроду-цирующих (зрелых) плазматических клеток. Нарушения в структурной организации и в соотношении популяции лимфоидных клеток в печеночных лимфоузлах через 7 недель после введения CCL4 говорят о развитии иммунодефицитного состояния.
Литература
1. Прокопенко Л.Г. и др. // Патол. физиол. и эксперим. терапия.- 1983.- № 5.- С. 59-63.
2. Ялукова С.Л., Иванов Л.Н. // Тез. докл. Второго Рос. Конгр.по патофизиол. с междунар. участием.- М., 2000.- С. 138.
3. Евченко Е.В. и др. // Морфол. ведомости (приложение).-М.-Берлин, 2004.- № 1-2.- С. 36.
4. Обернихин С.С. Морфо-функциональные изменения органов иммунной системы при конканавалин А-индуцированном гепатите: Автореф. дис... к.м.н.- М., 2005.- 26 с.
5. Стефанов С.Б. // Цитол.- 1974.- Т.16, № 5.- С. 785-787.
6. Gray D. // Res. Immunol.- 1991.- Vol. 142.- P. 236-242.
7. Сапин М.Р., Никитюк Д.Б. Иммунная система, стресс и иммунодефицит.- М.: АПП Джангар, 2000.- 184 с.
8. Бородин Ю.И. и др. // II съезд лимфологов России: Тез. докл.- СПбГУ, 2005.- С. 39-41.
9. Ковалевский Г.Г. Очерки иммуноморфологии.- Новосибирск: НГУ, 1976.- 266 с.
10. Вылков И.Н. Патология лимфатических узлов.- София: Медицина и физкультура, 1980.- 248 с.
11. Григоренко Д.Е. // Архив анат., гистол. и эмбриол.-1991.- Т. 101, № 7.- С. 9-13.
THE MORPHOFUNCTIONAL STATE OF LIVER’S LYMPHOID NODULES AT EXPERIMENTAL HEPATITIS
D.E. GRIGORENKO, M.R. SAPIN, A.M. KHREBTOVSKY
Summary
It was studied the far-off effect (1-7 weeks) of the influence of CCl4 on regional liver’s lymphoid nodules at rats with simulating hepatitis. It was established the depression of lymphocitopoesis, the supression of blasttransformation and maturing of antibodyproducing cells in structure zones of liver’s lymphoid nodule after 7 weeks. The sharp violation in correlation of lymphoid cells in liver’s lymphoid nodules shows the development of immunodificitis at animals 7 weeks later after finishing CCl4 influence.
Key words: influence of CCl4, lymphocitopoesis
УДК 616-002.151
СОСТОЯНИЕ НЕКОТОРЫХ СИСТЕМ АНТИЭНДОТОКСИНОВОЙ ЗАЩИТЫ У БОЛЬНЫХ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКОЙ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ
С.Г. НЕХАЕВ*
Среди многочисленных проявлений инфекционных заболеваний в настоящее время все большее внимание исследователей привлекает синдром интоксикации (СИ). Обладая типичным спектром клинических проявлений, интоксикационный синдром во многом наиболее точно характеризует течение инфекционного процесса и зачастую определяет исход заболевания [1-2]. Тем не менее, механизм его развития до настоящего времени не полностью расшифрован. В настоящее время не вызывает сомнений,
* 300012, Тула, ул. Болдина,128. Тульский государственный университет, кафедра пропедевтики внутренних болезней
что пусковым фактором в развитии СИ являются эндотоксины (ЭТ), по химической природе представляющие собой липополи-сахариды [3]. У больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом ЭТ в больших количествах освобождаются при взаимодействии возбудителя с эндотелием мелких сосудов (арте-риол, венул, капилляров), а также, но в значительно меньших дозах поступают в системный кровоток из кишечника. Проведенные in vitro исследования [4] и клинические наблюдения убедительно показали вовлеченность в патофизиологические процессы интоксикации практически всех органов и систем организма. Причиной этого служил чрезвычайно спектр биологической активности ЭТ. Но мультисистемость изменений при системной эндотоксинемии не является только следствием непосредственного взаимодействия липополисахаридов с различными органами и системами организма. Свое влияние на них ЭТ может оказывать и опосредованно, через систему эндогенных медиаторов.
Характер взаимодействия возбудителя и макроорганизма определяется не только типом и дозой поступившего токсина, но и выраженностью ответной реакции организма [5]. Ответная реакция организма является одним из наиболее филогенетически древних защитно-адаптационных механизмов в ответ на воздействие экзо- и эндо- чужеродных агентов. Суммируя все вышеизложенное, СИ можно охарактеризовать как эволюционно выработанный универсальный способ взаимодействия макро- и микроорганизмов, имеющий многоступенчатую организацию и однотипные проявления в клинике инфекционных заболеваний.
Реализация СИ ведется на локальном и системном уровнях [6]. Локальная фаза инициируется взаимодействием ЭТ с гуморальными и клеточными (полиморфноядерными лейкоцитами -ПМЯЛ) системами организма, что ведет к реализации их эффек-торного потенциала и сопровождается выделением ряда биоактивных эндогенных медиаторов липидной (простагландин, про-стациклин, тромбоксан, лейкотриены, тромбоцит-активирующий фактор) и белковой природы (интерлейкин, интерферон, опухо-ленекротизирующий фактор). Поступая в системный кровоток, эти медиаторы меняют функциональное состояние большинства органов и систем организма, играя роль индуктора системной фазы СИ. Неизбежность реализации СИ на системном уровне легко понять, если рассмотреть эту проблему с позиций теории функциональных систем (ФС), предложенной П.К.Анохиным [7]. В основу этой теории положена концепция об организации посредством морфо-функциональных связей взаимозависимых между собой комплексов органов и систем, имеющих свое функциональное назначение и взаимодействующих с другими ФС организма. В этом случае органы и ткани являются элементами ФС организма, выполняя свою роль во взаимосвязи с другими структурно-функциональными единицами системы. Исходя из положений этой теории, любое экзо- или эндогенное воздействие на один или ряд элементов ФС выводит из равновесия всю систему, оказывает влияние и на жизнедеятельность других ФС организма. Именно по таким принципам развивается СИ. Проникнув в организм ЭТ на пути реализации своих патофизиологических эффектов встречает ряд защитных систем, среди которых видное место отводится антиэндотоксиновым системам [8].
Изучение эндотоксинсвязывающих систем организма является одной из самых актуальных проблем современной науки, так как эти системы являются одним из самых эффективных защитных барьеров на пути развития системой эндотоксинемии и выступают в роли модулятора реализации широкого спектра биоэффектов ЭТ, инициируя манифестацию СИ на локальном и системном уровнях. Липополисахариды являются амфиопатиче-ской молекулой, вследствие чего наблюдается достаточно быстрое их связывание при поступлении в кровоток с природными антиэндотоксиновыми системами. В организме имеется множество систем, осуществляющих глубокоэшелонированную защиту от ЭТ. Наиболее мощными из них являются эндотоксинсвязываю-щие системы крови. Основную эндотоксинсвязывающую популяцию клеток крови представляют ПМЯЛ [9-11]. При этом постоянно поступающий в низких концентрациях ЭТ обеспечивает состояние физиологической системной эндотоксинемии, поддерживая систему ПМЯЛ в состоянии физиологического тонуса [12]. Связавшись с нейтрофилами, липополисахариды не имеют возможности реализовать свои патофизиологические эффекты, проникая в свободном виде в органы и ткани организма.
При превышении концентрацией ЭТ в системном кровотоке физиологического порога липополисахариды могут модифициро-
