Научная статья на тему 'Моноклональные антитела и тест-системы для выявления секреторного IgA и свободного секреторного компонента'

Моноклональные антитела и тест-системы для выявления секреторного IgA и свободного секреторного компонента Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
163
26
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Моноклональные антитела и тест-системы для выявления секреторного IgA и свободного секреторного компонента»

тиграх, средний показатель которых составил 1:640, а противостолбнячные антитела— в титрах 1: 1280.

У этих пациентов после второй иммунизации АДС-М анатоксином продуцируются протективные антитела п титрах, способных защитить от дифтерии и столбняка. Л после ревакцинации АДС-М анатоксином отмечается дальнейшее повышение уровня поствакцинального иммунитета, и антитела против этих инфекций обнаруживаются в высоких протсктивных титрах.

Следовательно, вакцинацию взрослого населения с различными аллергическими заболеваниями, особенно улни из групп повышенного риска заражения дифтерией и столбняком, целесообразно осуществлять на фоне медикаментозной терапии, с учетом тяжести течения аллергического заболевания.

Моноклональные антитела и тест-системы для выявления секреторного 1дА и свободного секреторного компонента

Грязева И.В., Климович В. Б.

Центральный научно-исследовательский рентген орадиологический институт М3 РФ Санкт-Петербург

Секреты слизистых оболочек и экзокриниых желез, наряду с секреторным 1цА (б^А), содержат составляющие его молекулы: свободный секреторный компонент (БС) и сывороточный 1”А. Количественные соотношения между тремя указанными компонентами могут изменяться в зависимости от строения и состояния синтезирующих их тканей. Поэтому для выявления каждого из них требуются стандартные и высокоспецифнчные реагенты. На молекуле БС обнаружены 4 антигенные детерминанты (Вгапс12ае» Р., 1975). Две из них (А1 и А2), экспрессированы как на свободном БС, так и на БС, входящем в состав б^А, т. е. являются для них общими. Третья детерминанта (I) скрыта в молекуле б^А, экспрессирована только на свободном БС и, следовательно, специфична для него. Четвертая детерминанта (С)— конформационная. Она экспрессирована наиболее сильно тогда, когда БС связан с молекулой 1цА. Таким образом, антигенная структура БС позволяе т получать антитела, распознающие этот белок либо в свободном состоянии, либо в составе молекулы б1цА.

Целыо настоящей работы было получение моноклональных антител (МКАТ) против БС и отбор среди них реагентов, дискриминирующих свободную и связанную формы этого белка.

Для создания гибридом были использованы лимфоциты мышей, иммунизированных порознь препаратами б^А или изолированного БС. Было получено 28 МКАТ, взаимодействующих с б^А (против детерминант А1 и А2), и 10 МКАТ, реагирующих со свободным БС (против детерминанты 1). Испытания МКАТ в двухде-терминантных системах детекции БС и э^А позволили отобрать реагенты с оптимальным сочетанием свойств,

и на их основе создать две иммуноферментные тест-си-стемы.

Первая из них служит для определения концентрации 51цА. Она включает в себя иммобилизованное на твердой фазе МКАТ, взаимодействующее с антигенной детерминантой. обшей для БС и б1цА (продукт штамма 5Э8). Для выявления фиксированного па твердой фазе б1цА используется меченое пероксидазой МКАТ, специфичное к альфа-цепи. Порог чувствительности выявления ь!цА с помощью данной системы составляет 5 нг/мл.

Вторая тест-система предназначена для определения концентрации свободного БС. На твердой фазе иммобилизовано МКАТ, распознающее только свободный БС (продукт клона 6ВЗ). Для выявления фиксированного па твердой фазе БС используется упомянутое выше МКАТ 5Э8 в виде конъюгата с пероксидазой. Порог детекции свободного БС составляет около 100 нг/мл.

Специфичность и чувствительность иммунофермен-тных тест-систем на основе полученных МКАТ позволяет проводить количественное определение б^А и свободного БС в сыворотке крови и секретах слизистых покровов и экзокриниых желез.

Характер иммунного дисбаланса у коренных жителей Севера России

Евсеева И.В, Добродеева Л.К.

Архангельская Государственная медицинская академия, Архангельский Отдел экологической физиологии человека Института физиологии К'омиНЦ УрО РАН г. Архангельск, Россия

Территория Крайнего Севера России, в том числе Ненецкого Автономного Округа (Н АО), является экологически крайне неблагоприятной, что сказывается на состоянии иммунной системы его жителей.

Современные возможности фенотипирования нмму-нокомпетентных клеток с использованием широкого спектра моноклональных антител СО позволили нам углубить имеющиеся представления о характере иммунных дисбалансов у коренных жителей Севера России. Показатели клеточного и гуморального иммунитета были определены у 90 взрослых ненцев, коренных жителей Ненецкого Автономного Округа, не имевших хронических заболеваний и не предъявлявших жалоб на момент обследования. При сравнении с показателями иммунограммы здоровых русских жителей Архангельской области (Щеголева Л.С., 1996), у ненецких аборигенов в средних числах установлено более низкое содержание лимфоцитов (2,09 х 10 кл/л, р<0,05) — в основном, за счет Т-фракции. Так, уровень клеток-носителей С05'1- составил лишь 0,61x10 кл/л (р<0,01), а клеток-носителей СЭЗ’ — 0,59 х 10 кл/л (р<0,01). Соотношение субпопуляций Т-лимфоцитов у ненецкого населения также отличалось от такового у русских. Отмечено значительно более высокое содержание клеток - носителей СЭ8’ (0,58 х 10 кл/л, р< 0,01) при прак-

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.