МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У ПАЦИЕНТОВ С ОЖИРЕНИЕМ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

255

белок Contactin 6 отвечает за рост аксонов, детритогенез и формирование синапсов. Однако его роль в нейрогенезе человека до сих пор остается мало изученной.

Одной из главных проблем изучения патологий, проявляющихся в нарушении умственного развития, является отсутствие модели для реконструкции заболевания. Несмотря на консервативность ранних этапов нейроге-неза у млекопитающих, многие аспекты и клинические проявления невозможно воспроизвести на лабораторных животных. К настоящему моменту, разработаны технологии получения пациент-специфических индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) и их направленной дифференцировки в церебральные органоиды [2], которые позволяют преодолеть подобные ограничения.

Для изучения ранних этапов нейрогенеза были получены церебральные органоиды человека из линий ИПСК, мутантных по гену CNTN6. В AAVS локус этих линий ИПСК внесена генетическая конструкция, позволяющая активировать оверэкспрессию Contactin 6. Обнаружено, что оверэкспрессия белка Contactin 6 в нокаутных по гену CNTN6 органоидах обеспечивает частичное восстановление фенотипа, которое проявляется в виде увеличения количества нейроэпителиальных структур. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 19-2904067 мк) и Министерства науки и высшего образования Российской Федерации (проект № 075-15-2021-1063). Культивирование линий ИПСК проводили на базе ЦКП «Коллекция плюрипотентных культур клеток человека и млекопитающих общебиологического и биомедицинского направления» ИЦиГ СО РАН. Микроскопический анализ проведен на базе ЦКП микроскопического анализа биологических объектов ИЦиГ СО РАН.

Литература:

1. Kashevarova A. et al. Mol Cytogenet. 2014 Dec 31;7(1):97.

2. Lancaster M., Rennen M., Martin CA. et al. Nature 501, 373379 (2013).

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У ПАЦИЕНТОВ С ОЖИРЕНИЕМ

В.И. Чечехин, Н.И. Калинина, В.Ю. Сысоева, К.Ю. Кулебякин, П.А. Тюрин-Кузьмин

Кафедра биохимии и молекулярной медицины факультета фундаментальной медицины МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: мультипотентные мезенхимные стро-мальные клетки, мезенхимные стволовые клетки, норадре-налин, ожирение, артериальная гипертензия, анализ транс-криптома одиночных клеток.

Артериальная гипертензия является одним из самых распространенных сердечно-сосудистых заболеваний в мире и выступает в качестве фактора риска развития множества заболеваний. При этом порядка 60-70% случаев артериальной гипертензии ассоциировано с ожирением. Ожирение приводит к усилению симпатической иннервации, что приводит к повышению артериального давления. Однако не все случаи ожирения приводят к развитию артериальной гипертензии. Контроль функций жировой ткани и ее сосудов осуществляют мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (МСК), популяция которых включает перициты. В качестве модели усиления симпатической

стимуляции мы использовали двукратное добавление но-радреналина с интервалом в 6 часов. Ранее мы показали, что стимуляция МСК в этих условиях приводит к усилению чувствительности клеток к норадреналину. В данной работе мы изучали, как влияет норадреналин на функциональную активность МСК и их способность к контракции.

Используя иммуногистохимическое окрашивание жировой ткани, мы определили, что а1А-АР локализуются не в ГМК и не в эндотелии, а в МСК, располагающихся рядом с симпатическими нервными волокнами. Далее мы показали, что способность к повышению в ответ на действие норадреналина чувствительности клеток к контрактильным сигналам коррелирует с уровнем артериального давления у пациентов с ожирением. Используя анализ транскриптома одиночных клеток, мы показали, что после двукратной стимуляции норадреналином происходит увеличение количества муральных и фибробла-стоподобных клеток. Функциональность наблюдаемых изменений клеток проверяли с помощью модели контракции коллагеновых дисков. При двукратном действии норадре-налина происходит значительное усиление контракции МСК коллагеновых дисков. Используя вестерн-блоттинг, мы установили, что через 6 часов после стимуляции норадреналином в МСК повышается уровень а1А-АР. Используя ПЦР и ингибиторы трансляции и транскрипции, мы показали, что при действии норадреналина происходит увеличение трансляции а1А-АР, но не изменяется уровень мРНК данного белка. Используя ингибиторный анализ, мы показали, что норадреналин повышает а1А-АР через каскад ßS-АР/аденилатциклаза/цАМФ/РКА. При этом иммуноферментный анализ показал, что РКА при действии норадреналина не входит в ядро клетки, а, вероятно, действует на цитоплазматические мишени.

Таким образом, сенситизация а1А-АР в МСК при действии норадреналина запускается сигнальным каскадом ßß-АР/аденилатциклаза/цАМФ/РКА и активацией трансляции, но не транскрипции. При двукратном воздействии норадреналином в МСК увеличивается доля контрактильных муральных и фибробластоподобных клеток. Финансирование: Исследование выполнено при поддержке РНФ в рамках проекта № 21-15-00311.

АНТИАПОПТОТИЧЕСКИЙ БЕЛОК BCL-2 ВЗАИМОЕЙСТВУЕТ С РЕЦЕПТОРОМ IP3R И ВОССТАНАВЛИВАЕТ ЧИСЛО СИНАПТИЧЕСКИХ КОНТАКТОВ В ГИППОКАМПЕ 5FAD МЫШЕЙ С БОЛЕЗНЬЮ АЛЬЦГЕЙМЕРА

М.Е. Чигряй1, А.В. Раковская1,

Д.П. Чернюк1, А.Б. Гордеев1, Е.И. Пчицкая1,

Г. Балтынк2, И.Б. Безпрозванный1, 3

1 Лаборатория молекулярной нейродегенерации, Санкт-Петербургский политехнический Университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

2 Лаборатория молекулярной и клеточной сигнализации, КУ Левена, Левен, Бельгия

3 Отделение физиологии, Юго-Западный медицинский центр штата Юта, Даллас, США

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: болезнь Альцгеймера, апоптоз, рак, аде-ноассоциированные вирусы, Bcl-2, IP3R.

Болезнь Альцгеймера (БА) представляет собой самую распространенную форму деменции. Несмотря на широкую распространенность данного заболевания,

Гены & Клетки XVII, №3, 2022