CC BY
3
254
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
В данной работе моделировалась гиперлипидемия у кроликов и изучалось изменение адипогенного потенциала их жировой ткани в культуре, с использованием аутологичных гиперлипидных сывороток взрослых животных с целью выявить значимость воздействия системных организменных факторов на адипогенез.
Забор материала производили с соблюдением биоэтических норм. Кроликам делали внутривенные инъекции липидсодержащей эмульсии 21 день по 1 мл/кг, последний забор сыворотки проводили спустя 1,5 месяца после формирования гиперлипидемии. Культивирование экс-плантов проводили в среде ОМБМ с высоким содержанием глюкозы и добавлением аутологичных сывороток кроликов на разных сроках гиперлипидемии. Оценивали миграцию и пролиферацию адипоцитов из эксплантов, а также способность к накоплению липидов под действием инсулина.
Клетки от экспериментального животного при культивировании с аутологичной сывороткой, полученной до гиперлипидемии, отвечали на стимуляцию инсулином ускорением пролиферации клеток и в малой степени — накоплением жировых капель. Если использовалась сыворотка, полученная в ходе эксперимента с этим же животным, накопление липидов становилось быстрым и выраженным.
Клетки интактного кролика пролиферируют сильнее в сравнении с клетками животного, которое уже побывало в эксперименте, однако самая активная пролиферация отмечалась при культивировании с аутологичной сывороткой, собранной спустя 1,5 месяца от формирования экспериментальной гиперлипидемии. В данном эксперименте отмечались самый плотный застил клеток с потерей контактного торможения и наибольшее количество делящихся клеток.
Гиперлипидемическая модель животного в данной работе показала, что ответ жировой ткани меняется не только в ходе гиперлипидемии, но и сохраняется после нормализации транспорта липидов в такой клеточной популяции. Также и плазма крови, нормальная по содержанию липидов, сохраняет системные факторы адипоге-неза и остается способной стимулировать его в клетках нормальной ткани в культуральных условиях.
гиперэкспресиия bcl-2k17d при помощи aav-вектора снижает число амилоидных бляшек в мозге 5fad мышей с болезнью альцгеймера
Д.П. Чернюк1, М.И. Полозова1, Е.И. Пчицкая1, Г. Балтынк2, И.Б. Безпрозванный1, 3
1 Лаборатория молекулярной нейродегенерации, Санкт-Петербургский политехнический Университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Лаборатория молекулярной и клеточной сигнализации, КУ Левена, Левен, Бельгия
3 Отделение физиологии, Юго-Западный медицинский центр штата Юта, Даллас, США
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: болезнь Альцгеймера, аденоассоции-рованные вирусы, Bcl-2, кальциевый сигналинг, IP3R, RyR, 5FAD, амилоидные бляшки.
Одно из самых распространенных нейродегенератив-ных заболеваний — болезнь Альцгеймера (БА), является самой частой причиной развития деменции. По одной из гипотез патогенеза БА причиной заболевания может
служить продуцируемый в нейронах токсичный бета-амилоид. По другой гипотезе к гибели нейронов приводит неправильная регуляция ионов кальция [1]. Нейроны очень чувствительны к внутриклеточному Ca2+ гомеостазу, поэтому даже самые малые аномалии в Са2+ сигнализации могут привести к разрушительным последствия в течение длительного периода времени.
Последние исследования показали, что экспрессия белков семейства Bcl-2 ингибирует активность IP3R1 [2] и RyR2 [3], которые являются основными каналами выхода Ca2+ из эндоплазматического ретикулума (ЭР) во внутриклеточное пространство. Таким образом, мы предположили, что гиперэкспрессия белков Bcl-2 может оказать положительный эффект на дисрегуляцию Ca2+ гомеоста-за при патологии БА. Чтобы проверить данную теорию in vivo мы использовали аденоассоциированные вирусы для экспрессии белков Bcl-2 в СА1 область гиппокампа 5FAD мышиной модели БА на ранних стадиях развития болезни. Для того, чтобы оценить важность специфичной ассоциации с IP3R1 или RyR2, экспрессировалась также и мутантная форма Bcl-2K17D. Мы произвели проверку взаимодействия белков Bcl-2 и Bcl-2K17D с IP3R1 и RyR2 в гиппокампе 5FAD мышей при помощи метода ко-иммунопреципитации. Результаты подтвердили, что белок Bcl-2 взаимодействует с IP3R1 и RyR2, а Bcl-2K17D связывается только с RyR2. Далее был проанализирован эффект двух форм Bcl-2 на число амилоидных бляшек в мозге 5FAD мышей. Данные показали, что гиперэкспрессия белка Bcl-2 не снижает числа амилоидных бляшек в мозге 5FAD мышей, в то время как Bcl-2K17D значительно сокращает число бляшек.
Резюмируя, мы можем сделать предположение, что на 5FAD мышиной модели БА ингибирование только RyR2-зависимого кальциевого выхода из ЭР приводит к большему терапевтическому эффекту, нежели блокировка и RyR2, и IP3R1 каналов. Обнаруженные нами особенности сигнального Ca2+ пути в нейронах при патологии БА являются перспективной мишенью для дальнейшего поиска терапии БА. Поддержано РНФ № 20-45-01004
Литература:
1. Bezprozvanny, I. (2009). Trends Mol Med 15(3): 89-100.
2. Rong, Y. P., et al. (2008). Mol Cell 31(2): 255-265.
3. Vervliet, T., et al. (2014). J Cell Sci 127(Pt 12): 2782-2792.
изучение морфологических изменений церебральных органоидов человека при оверэкспрессии белка contactin 6
С.А. Чечеткина1, А.М. Юнусова2, И.Е. Пристяжнюк2, Т.А. Шнайдер2
1 Новосибирский государственный университет, Новосибирск, Россия
2 ФИЦ ИЦиГ СО РАН, Новосибирск, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: умственная отсталость, церебральные органоиды человека, Contactin 6.
Развитие головного мозга человека представляет собой последовательный многоэтапный процесс, в котором любые отклонения могут приводить к расстройству интеллектуальных функций. Нарушения нейрогенеза представляют разнородную группу заболеваний. Одной из встречающихся патологий является умственная отсталость, ассоциированная с мутациями в гене CNTN6 [1]. У млекопитающих
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
