CC BY
11
степенью сорбции паров стенками дозатора (хлороформ и бромоформ, бромистый метил и этил, хлорциан и бромциан, спирты, эфиры и т. д.).
При серии наблюдений К может быть выражено следующим образом: (
*—7[ЗбГ- <4>
С помощью описанного дозирующего устройства нами установлены сорбционные свойства, точность метода и минимально определяемая концентрация паров ряда веществ. Критерием надежности метода может служить отсутствие резкого различия между значениями общей ошибки определения вещества в растворах и воздухе. Общая ошибка характеризует также и погрешность определения отдельных концентраций в интервале измеряемых оптических плотностей растворов.
Применение дозатора переменных концентраций не требует термо-статирования, так как расчет ведется по уравнению материального баланса. При этом в течение нескольких дней удается оценить сорбционные возможности поглотителя, показать предел концентраций паров исследуемых веществ и подготовить материалы к установлению чувствительности и точности метода.
N
ЛИТЕРАТУРА. Коллеров Д. К. Метрологические основы газоаналитических измерений. М., 1967. — Комарь Н. П. Руководство по определению промышленных ядов в воздухе. Харьков, 1934. — Перегуд Е. А., Быховская М. С., Терне т Е. В. Быстрые методы определения вредных веществ в воздухе. М., 1970. — Тхоржевский В. П. Автоматический анализ химического состава газов. М., 1969.— Ю д и л е в и ч М. М. и др. Гиг. и сан., 1972, № 8, с. 81.
Поступила 31/Х 1972 года
Обзоры
УДК 616.24-003.662-092:577.23+^)16.24-003.662-08-039.71
Проф. доктор мед. наук Б. Т. Величковский
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ПЕРВИЧНОГО
ПАТОЛОГИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ КРЕМНЕЗЕМА НА МАКРОФАГИ И ПУТИ ИЗЫСКАНИЯ СРЕДСТВ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ СИЛИКОЗА
Институт гигиены труда и профзаболеваний, Свердловск
Начальным пусковым этапом развития силикоза, как известно, является гибель макрофагов, фагоцитировавших пылевые частицы кремнезема. Существует 2 направления исследования причин разрушения клеток пыли: одно из них базируется на успехах субмикроскопической цитологии, другое — на успехах физической химии кремнезема.
На основе совершенствования цитологических методов исследования (фазоконтрастной микрокинематографии, электронной микроскопии и гистохимии) показано, что фагоцитоз уже нескольких пылинок кварца подавляет подвижность макрофагов. В цитоплазме таких клеток лизосомы вскоре оказываются прикрепленными, а затем сливаются с фагосомой, содержащей поглощенные пылинки. Образуется пищеварительная вакуоль или вторичная лизосома, в полость которой изливаются заключенные в первичных лизосомах гидролитические ферменты
{Harrington и Allison). Через некоторое время ферменты диффундиру-,ют по всей цитоплазме кониофага, вызывая его распад и гибель (Allison и соавт.; Comolli). Участие лизосом в процессе разрушения конио-. ' фагов было отмечено еще бельгийским исследователем де Дювом, впервые выделившим лизосомы и продемонстрировавшим их роль в физиологии и патологии клетки. По его мнению, причина заболевания заключается в том, что макрофаги вынуждены поглощать и накапливать в лизосомах чрезмерно большое количество инородных кварцевых частиц, которые они не способны переварить.
Однако изучение участия лизосом в повреждении кониофагов объясняется лишь, как разрушаются клетки под действием пылевых частиц кремнезема, но не проливает свет на то, почему это происходит. Слияние лизосом с фагоцитарной вакуолью и участие ее гидролитических ферментов в разрушении чужеродных частиц являются обычным физиологическим механизмом внутриклеточного переваривания поглощенных веществ. Далеко не все из них расщепляются гидролитическими ферментами лизосом, и тем не менее они не вызывают разрушения клеток. Таким образом, лизосомальная гипотеза патогенеза силикоза сама по себе еще не вскрывает причины фиброгенного действия пыли кремнезема, а лишь конкретизирует точку первоначального приложения его патологического влияния. Вопрос о том, почему под воздействием кремнезема разрушается кониофаг, заменяется вопросом о том, почему разрушается пищеварительная вакуоль, содержащая фагоцитированные пылевые частицы двуокиси кремния.
Второе, физико-химическое, направление исследований, опирающееся на методы адсорбции и инфракрасной спектроскопии поверхностных •соединений, позволило установить, что биологическая агрессивность кремнезема обусловлена наличием на поверхности пылевых частиц свободных силанольных групп. Силанольные группы ( = SiOH) возникают на поверхности излома кремнезема уже в присутствий паров воды, содержащихся в воздухе (С. П. Жданов; Р. Айлер). По физико-химиче-ским свойствам и биолдгическому значению они не равнозначны. Те из них, расстояние между которыми не превышает ЗА, взаимно блокированы водородной связью. Силанольные группы, более далеко отстоящие друг от друга, находятся в свободном состоянии (А. В. Киселев и В. И. Лыгин; Л. Т. Журавлев и соавт.). Они-то главным образом и определяют характерные особенности химии поверхности кремнезема и его фиброгенные свойства. На это указывает то, что химическое замещение свободных силанольных групп лишает кварцевую пыль ее цито-патогенности и предотвращает развитие силикоза (Г. В. Аронова и соавт., 1967, 1969; Б. Т. Величковский, 1969, 1970, 1972).
Вместе с тем расшифровка природы активных центров поверхности кремнезема также лишь приближает нас к пониманию механизма первичного взаимодействия пыли с биосубстратом, но еще не дает однозначного ответа на этот вопрос. Подобным же образом изучение строения белковой молекулы еще не объясняет ее физиологических функций, хотя и создает необходимые предпосылки для этого. Трудность заключается в том, что нельзя механически переносить хорошо известные свойства изолированных функциональных групп обычных химических соединений на макромолекулы, так как последние благодаря большим размерам и, следовательно, большому числу функциональных групп «работают» путем образования определенных пространственных ориен-таций, а также суммации энергии своих активных центров. А кремнезем, как указывал еще Д. И. Менделеев в «Основах химии», тоже можно рассматривать как полимер минерального происхождения. Подобные воззрения нашли подтверждение и развитие в современных теоретических и экспериментальных исследованиях строения кремнезема на основе квантово-механических представлений (В. П. Прянишников).
Каков возможный молекулярный механизм взаимодействия свободных силанольных групп поверхности кремнезема с биосубстратом? Си-ланольные группы способны к образованию водородных связей. Они могут обменивать свой водород на соответствующие катионы, вступая в ионные взаимодействия. С ними связана способность кремнезема при определенных условиях катализировать окнслительно-восстановитель-ные реакции (К. С. Евтропьев и Н. А. Торопов; И. Е. Неймарк и соавт.). Основываясь на указанных свойствах, ряд исследователей высказали несколько гипотез о сущности патологического влияния кремнезема на клетки. Молекулярный механизм первичного патологического влияния кремнезема на макрофаги, по мнению этих авторов, заключается во взаимодействии силанольных групп поверхности пылевой частицы с фос-фолипидами мембраны лизосомы. В результате этого повышается проницаемость последней и лизосомальные гидролитические ферменты проникают в цитоплазму коннофага, вызывая его «самопереваривание» (Allison и соавт.; Stalder; Heppleston, и др.). При этом первоначально полагали, что реакция состоит в замещении иона водорода кремниевой кислоты радикалом белковой молекулы или молекулы фосфолипидов (Harrington и Allison). В дальнейшем было показано, что более вероятным типом взаимодействия поверхности кремнезема с лизосомальной мембраной является соединение за счет водородных связей. Энергия водородных связей, образующихся при контакте кремнезема с фосфо-липидами, выше, чем с белками (Nash и соавт.).
Одна из положительных сторон этой концепции заключается в попытке связать воедино результаты 2 основных направлений изучения цитотоксичности кремнезема. Вместе с тем указанные воззрения основаны на косвенных данных и прежде всего на хорошо известной способности кремниевой кислоты взаимодействовать с другой биологической мембранной системой — оболочкой отмытых эритроцитов, вызывая их гемолиз. Подобное влияние оказывает не только кремниевая кислота, но и практически все нерастворимые кристаллические модификации кремнезема, кроме стншовита (Allison). Для последней высокотемпературной разновидности минерала характерна низкая фиброгенность (Thomas). Она имеет кристаллическую решетку с ячейкой не тетраэд-рического, как остальные разновидности кремнезема, а октаэдрического строения, в связи с чем, по-видимому, в меньшей степени способна к образованию водородных связей (С. М. Стишов и Н. В. Белов). Налицо, таким образом, известный параллелизм между степенью фиброгенности, способности к гемолизу и, вероятно, к образованию водородных связей. В подтверждение этой гипотезы приводятся также данные об ингиби-рующем влиянии на развитие экспериментального силикоза поливинил-пиридин-М-оксида, который, по мнению ряда авторов, стабилизирует лизосомальную мембрану, делая ее устойчивой к патологическому воздействию SiÖ2.
Отсутствие гемолиза эритроцитов у лиц, подвергающихся воздействию кварцевой пыли, по мнению Allison, обусловлено тем, что поверхность пылевых частиц еще в альвеолах и бронхиолах экранируется адсорбированными молекулами растворимых в слизи белков. Во вторичных лизосомах макрофагов под влиянием гидролитических ферментов белковая оболочка разрушается и освободившаяся поверхность пылинок кремнезема взаимодействует с фосфолипидами мембраны. Сложнее обстоит дело с объяснением причин того, почему кремнезем, являющийся инертным в химическом отношении веществом и образующий наиболее стойкие и долговечные минералы земной коры, отличается высокой биологической агрессивностью. В свое время Jäger высказал мнение, что для взаимодействия биологических структур с активными точками гидратированной поверхности пылинки «микроструктуру поверхности кварца, топохимию кварцевой частицы следует считать, по крайней
3 Гигиена н санитария № 5
65
мере, столь же важной, как ее дисперсность и химический состав». Поскольку водородные связи характеризуются не только определенной энергией, но и направленностью взаимодействия, можно предположить, что особая вредность кремнезема обусловлена совпадением реакционно-способных центров на внутриклеточной мембране и поверхности пылевой частицы. Правда, еще до выяснения значения лизосом в распаде кониофагов и даже до открытия самих лизосом было установлено, что фосфат алюминия, образующий кристаллические модификации, подобные кварцу и тримидиту, с теми же расстояниями между активными точками, характеризуется весьма низкой фиброгенностью. Однако идентично ли кремнезему это соединение по таким параметрам, как характер поверхностных химических соединений или же растворимость и, следовательно, динамика элиминации из органов дыхания, осталось неизвестным. Интерес к изучению топохимии кремнезема угас после того, как было показано, что адсорбция белков на пылинках не определяет иммунобиологических механизмов развития заболевания. Между тем значение микроструктуры поверхности частиц S1O2 для разрушения кониофагов нельзя считать выясненным.
Nash и соавт. пытаются объяснить цитотоксичность кремнезема тем, что существует 2 класса веществ, образующих водородные связи. Более многочисленный класс включает акцепторы, такие, как эфиры и кетоны, с активными свободными парами электронов кислорода или азота. Меньший класс составляют доноры, среди которых фенолы и таниновая кислота наиболее важны из входящей в него группы органических соединений, а слабые кремниевая и борная кислоты — из группы неорганических веществ. При этом вещества одного класса (акцепторы) совместимы с живыми клетками, а вещества другой группы (доноры) вызывают их повреждение. Конечно, характер химических реакций, а также механизм преобразования химической энергии в механическую, электрическую или осмотическую работу в конечном итоге определяются квантово-электронной структурой молекул. Однако эта область биофизики разработана еще крайне недостаточно. Поэтому отнесение вещества к тому или иному классу в зависимости от особенностей его электронной структуры само по себе пока еще не раскрывает ни точку приложения, ни механизм его влияния на физиологическое состояние и активность клетки. Недостаточно убедительны также ссылки на поливинилпиридин-Ы-оксид, так как о механизме его ингибирую-щего действия при силикозе нет одинакового мнения. Имеются данные о том, что эффект препарата обусловлен его взаимодействием не с мембранами или другими компонентами клетки, а с поверхностью пылевых частиц (Allison). По-видимому, не только непосредственный контакт с внутриклеточной мембраной может обусловливать патологическое влияние кремнезема на макрофаги. В основе специфических биологических свойств свободной двуокиси кремния может лежать ее воздействие на другие стороны жизнедеятельности клетки.
Свободные силанольные группы, будучи всегда в определенной мере диссоциированными ( = SiOH^ = SiO-+H+), создают вокруг пылевой частицы двойной электрический слой, характерный для коллоидной мицеллы. Наличие внутри вторичной лизосомы такого многозарядного иона, как пылинка кремнезема, приводит к неравномерному распределению электролита по обе стороны полупроницаемой мембраны. Явление это в коллоидной химии получило название доннановского или мем-бранно-осмотического равновесия. Однако активные центры поверхности кремнезема не только в состоянии ионизации оказывают влияние на осмотическое давление внутри вторичной лизосомы. Взаимодействуя за счет водородных связей с окружающими молекулами воды, они создают вокруг пылевой частицы структурновязкий сальватационный слой, характерный для белковой молекулы, что также обусловливает
повышение осмотического давления. Подобного рода осмотическое давление, вызываемое гидрофильными высокомолекулярными веществами, по предложению Шаде, называют онкотическим. Таким образом, происходящее при фагоцитозе частиц кремнезема повышение давления внутри вторичной лнзосомы слагается из суммы онкотнческого давления, зависящего от сальватацин поверхности макроиона, и осмотического давления, обусловленного неравномерным распределением электролита по обе стороны полупроницаемой мембраны.
К каким последствиям в жизнедеятельности клетки это приводит? Прежде всего в клетке активизируются процессы, направленные на восстановление нарушенного осмотического равновесия внутри вторичной лизосомы. Это достигается с помощью осуществляемого мембраной активного транспорта, изменяющего разность (градиент) концентраций ионов, Сахаров, аминокислот и других метаболитов по обе ее стороны. Активный транспорт связан с затратой энергии. Поэтому в кониофагах изменения раньше всего наблюдаются в митохондриях. Когда энергетические ресурсы клетки недостаточны для поддержания осмотического равновесия, происходит нарушение целостности мембраны, вторичной лизосомы со всеми вытекающими отсюда последствиями, тем более что перераспределение электролита касается также всегда имеющихся в водных растворах Н+ и ОН- ионов. Поскольку поверхность макроиона кремнезема заряжена отрицательно, одноименные ОН- ионы выталкиваются, а разноименно заряженные Н+ ионы притягиваются внутрь пищеварительной вакуоли. В результате концентрация водородных ионов в ней повышается. Сдвиг же реакции среды в кислую сторону, по современным представлениям, является одним из наиболее вероятных механизмов перевода гидролитических лизосомальных ферментов из недеятельного в активное состояние.
Однако возникает вопрос: возможно ли с позиций мембранно-осмо-тической концепции патогенеза силикоза объяснить причину особой биологической активности кремнезема. Перераспределение ионов и нарушение осмотического равновесия во вторичной лизосоме способны вызвать любые фагоцитированные коллоиды. Более того, влияние свободной двуокиси кремния на эти процессы менее выражено, чем, например, таких полиэлектролитов, как белки, в связи с тем что на единице поверхности кремнезема имеется меньшее количество ионогенных групп и величина поверхности пылевой частицы меньше поверхности раздела белковой молекулы. Вместе с тем при пиноцитозе белков и других вы-. сокомолекулярных органических соединений происходит их ферментативное расщепление, что ограничивает время нарушения жизнедеятельности клетки. Изменение внутриклеточного осмотического давления при фагоцитозе могут вызвать также неорганические вещества в высокодисперсном коллоидном состоянии. Однако такого рода гетерогенные коллоиды устойчивы только при условии, когда на их поверхности адсорбируются ионы электролита-стабилизатора- Отличительной чертой коллоидных систем этого класса является их высокая чувствительность к изменению концентрации электролита в дисперсионной среде. Поэтому перемещение через мембрану ионов противоположного заряда приводит к нарушению агрегативной устойчивости таких коллоидных частиц. Они теряют двойной электрический слой и выпадают в осадок, в связи с чем также способны привести лишь к временному нарушению процессов жизнедеятельности макрофага.
Показательны в этом отношении экспериментальные исследования Е. Н. Городенской с интратрахеальным введением животным 2% колларгола. Под влиянием этого золя через 2—3 нед в межальвеолярной ткани обнаружены узелки, хорошо отграниченные от окружающей ткани и состоящие из эпителиоидных клеток, лимфоцитов и фибробластов. К концу 1-го месяца большинство узелков начало рассасываться, при-
3*
67
чем в протоплазме эпителиодных клеток появилось большое количество черно-бурых глыбок, представляющих собой выпавшее в осадок серебро. Так как отложение в легких серебра в пылевидном состоянии не вызывает развития узелкового процесса, опыты Е. Н. Городенской свидетельствуют о том, что основную роль в происхождении наблюдавшихся изменений играет физико-химическое состояние вводимого вещества — состояние золя. Вместе с тем агрегативная устойчивость этого неорганического гидрофобного коллоида недостаточна для развития фиброза. Отличительной особенностью развиваемых представлений о механизме вредного биологического действия кремнезема является то, что оно может проявляться только при внутриклеточном положении пылевых частиц.
Необходимо отметить также, что с указанной концепцией согласуется наблюдавшееся рядом авторов повышение интенсивности окислительно-восстановительных процессов в ранний период развития силикоза. Так, Fusco и соавт. обнаружили, что при запылении экспериментальных животных в камере в пресиликотической стадии повышается активность некоторых окислительных ферментов — сукциндегидрогена-зы, сукцин- и цитохром-С-оксидаз. Позднее аналогичные результаты получили Barhad (цит. И. В. Павлова) при ннтратрахеальном введении кремнезема.
Следовательно, цитотоксичность и фиброгенность кремнезема обусловлены тем, что он является твердым полиэлектролитом минерального происхождения, практически нерастворимым и не поддающимся ферментативному расщеплению
Действительно ли, однако, фиброгенные свойства свободной двуокиси кремния обусловлены сходством свойств ее поверхности с полиэлектролитами? Для проверки этого были проведены экспериментальные исследования с классическими образцами подобных соединений — ионообменными смолами. При ннтратрахеальном введении белым крысам по 50 мг порошка ионообменных смол с монофункциональными группами (СООН, NH2 или ОН) установлено развитие в легких выраженных фиброзных изменений (Г. В. Аронова).
Обратимся теперь к вопросу о патогенетической профилактике в терапии силикоза. В настоящее время задержать развитие экспериментального силикоза удается, используя не только поливинилпиридин-N-оксид, но и с помощью ряда других воздействий — физических (УВЧ, УФ-облучение) и химических (стероидные гормоны, щелочные ингаляции, ионы металлов и др.). Одни из них изменяют реакцию организма на воздействие фиброгенного агента и влияют на процессы развития соединительной ткани. Подобным механизмом тормозящего эффекта обладают кортизон, УВЧ, ультрафиолетовые лучи. Другие ингибирую-щие средства, взаимодействуя с пылевыми частицами, блокируют поверхность кремнезема. К числу их относятся алюминий, соединения калия, кальция и цинка (И. И. Шелекетина; Ф. С. Рагольская и Б. Т. Величковский; Н. Г. Буланов; Denny и соавт., и др.).
Такое обилие металлов-ингибиторов не может быть случайным -и должно подчиняться определенным закономерностям. Изучение химических свойств свободных силанольных групп показало, что входящий в их состав водород может быть отнесен к так называемому подвижному или активному водороду, поскольку для него свойственны многие реакции, характерные для кислот, спиртов, аминов и других подобных соединений. Поэтому закономерностью, определяющей степень выра-
1 Изложенные взгляды впервые частично были высказаны более 10 лет назад
(Б. Т. Величковский, 1962), а затем развиты в монографии «Этиология и патогенез си-
ликоза> (1964), написанной совместно с Б. А. Кацнельсоном, и в трудах Всесоюзного симпозиума по патогенезу пневмокониозов.
женности ингибиторных свойств ионов металлов, по-видимому, является их положение в электрохимическом ряду напряжения: 1л, К, Са, Л^, А1, 2п, Сг, Ре, Со, N1, Р1, Н, Ав, Си, Ag.
Способность металла вытеснять подвижный водород из его соединений, в том числе и из силанольных групп (г=5ЮН), при прочих равных условиях тем больше, чем дальше влево от водорода его положение в электрохимическом ряду напряжения. Однако выбор ингибирующего средства при силикозе определяется не только положением металла в электрохимическом ряду напряжения. Имеет значение легкость создания и сохранения повышенной концентрации металла в тканях. С этой точки зрения, для использования в качестве лекарственных средств имеют преимущество те металлы, которые являются микроэлементами. Что касается макроэлементов, таких, как К, Иа, Са и которыми
ткани богаты в обычных условиях жизнедеятельности, то, во-первых, их концентрация не изменяется заметным образом при введении в организм относительно небольшого дополнительного количества, во-вторых, сдвиг концентрации затрудняется существованием специальных биохимических механизмов, регулирующих соотношение этих веществ в клетках. Поэтому макроэлементы в биологическом эксперименте эффективны главным образом тогда, когда они входят в состав самого пылевого микста. В то же время такой микроэлемент, как цинк, эффективен и при подкожном введении (Н. Г. Буланов).
Ионы К, Иа, Са и M.g могут оказаться полезными в солевых растворах, используемых для бурения шпуров с промывкой в зоне вечной мерзлоты. Возможно, что при применении таких растворов отмечается не только пылесмачивающий эффект, но и химическое изменение поверхности пылевых частиц. Этот вопрос заслуживает специального изучения.
ЛИТЕРАТУРА. А й л е р Р. К. Коллоидная химия кремнезема и силикатов. М., 1959.—А р о и о в а Г. В., В е л и ч к о в с к и й Б. Т., Кац нельсон Б. А. и др. Гиг. и сан., 1967,'№ 3, с. 12. — Аронова Г. В., Величко веки и Б. Т. и др. Гиг. труда, 1969, № 5, с. 4.— Аронова Г. В. В кн.: Патогенез пневмокониозов (Труды Всесоюзн. симпозиума). Свердловск, 1970, с. 35. — Буланов Н. Г. Влияние некоторых кофакторов ферментов на развитие экспериментального силикоза. Автореф. дисс. канд. Караганда, 1972. — Величковский Б. Т. В кн.: Борьба с силикозом. М., 1962, т. 5, с. 278. — Величковский Б. Т., Кац нельсон Б. А. Этиология патогенез силикоза. М., 1964. — Величковский Б. Т. В кн.: Патогенез пневмокониозов (Труды Всесоюзн. симпозиума). Свердловск, 1970, с. 3. — Он же. В кн.: Патоморфология силикатов, кварцесодержащих и других материалов, встречающихся в промышленности строительных материалов и строительстве. Л., 1972, с. 9. — Городенская Е. Н. В кн.: Силикоз (Сборник статей). М., 1951, с. 12. — Де Дюв К., В кн.: Живая клетка. М., 1966, с. 205. — Евстропьев К. С., Торопов Н. А. Химия кремния и физическая химия силикатов. М., 1950, —Жданов С. П. Докл. АН СССР, 1958, т. 123, с. 716. — Журавлев Л. Т. и др. Ж. физ. химии, 1965, т. 39, № 2. — Киселев А. В., Л ы г и н В. И. Успехи химии, 1962, т. 31, № 3, с. 351. — К и с е л е в А. В., Я ш и н Я. И. Газо-адсорбционная хроматография. М., 1967. — Неймарк И. Е. и др. В кн.: Природные сорбенты. М., 1967, с. 56. — Павлова И. В. В кн.: Патогенез пневмокониозов (Труды Всесоюзн. симпозиума). Свердловск, 1970. с. 109. — Прянишников В. П. Система кремнезема. Л., 1971. — Рагольская Ф. С., Величковский Б. Т. В кн.: Профессиональные болезни пылевой этиологии. Свердловск, 1968, с. 228. — Сти-шов С. М., Белов Н. В. Докл. АН СССР, 1962, т. 143, с. 951. — Ш е л е к е т и н а И. И. В кн.: Материалы 12-го Пленума Украинок. Республиканск. комиссии по борьбе с силикозом. Киев, 1960, с. 37. — Allison А. С., На rington J. S., Birbeck M., J. exp. Med., 1966, v. 124, p. 141, —Allison A. C., Arch, intern, med., 1971, v. 128, p. 131, —Comolli R„ J. Path., 1967, v. 93, p. 241, —Denny J. J., Robson W. D., Irwin D. A., Canad. med. Ass. J., 1937, v. 37, p. 1. — Fusco M., Guarino A., Mo-1 e R., Folia med. (Napoli), 1961, v. 44, p. 1030. — H a rrington J. S„ Allison A. C.,' Med. d. Lavoro, 1965, v. 56, p. 471. — H e p p 1 e s t o n A. G., Brit. med. Bull., 1969, v. 25, p. 282.—Jäger R. В кн.: Staublungenerkrankungen. Darmstadt, 1950, S. 241.— Nash T. et al. Nature, 1966, v. 210, p. 259. — S t a 1 d e r K. Naturwissenschaften, 1967, Bd 54, S. 648.
Поступила 17/IX 1973 года
