CC BY
27
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Внутренние болезни
© Коллектив авторов, 2020 УДК 616-006.446.8
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15006 ISSN - 2073-8137
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МУТАЦИЙ В ГЕНАХ ASXL1, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, ТР53 И WT1 У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ МИЕЛОИДНЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ ЗРЕЛОГО ВОЗРАСТА
А. В. Виноградов 1 2, А. В. Резайкин 2, С. В. Сазонов 2' 3, А. Г. Сергеев 2, М. Ю. Капитонова 4
1 Министерство здравоохранения Свердловской области, Екатеринбург, Российская Федерация
2 Уральский государственный медицинский университет, Екатеринбург, Российская Федерация
3 Институт медицинских клеточных технологий, Екатеринбург, Российская Федерация
4 Университет Sarawak (UNIMAS), Малайзия
MOLECULAR GENETIC ANALISYS OF ASXL1,
FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 AND WT1 MUTATIONS
IN ACUTE MYELOID LEUKEMIA PATIENTS 45-60 YEARS OLD
Vinogradov A. V. 1 2, Rezaykin A. V. 2, Sazonov S. V. 2' 3, Sergeev A. G. 2, Kapitonova М. Yu. 4
1 Sverdlovsk Regional Ministry of Health, Ekaterinburg, Russian Federation
2 Ural State Medical University, Ekaterinburg, Russian Federation
3 Institute of Medical Cell Technology, Ekaterinburg, Russian Federation
4 University Malaysia Sarawak (UNIMAS), Malaysia
ORiGiNAL RESEARCH
Internal diseases
Изучали характеристики мутаций генов ASXL1, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 и WT1 у 55 больных острыми миелоид-ными лейкозами зрелого возраста (45-60 лет), проходивших лечение в гематологическом отделении с 2008 по 2018 г. Морфологические подтипы ОМЛ по FAB-классификации были следующими: M0 - 2, M1 - 3, M2 - 21, М3 - 9, M4 - 13, М4эо - 1, M5 - 1, M6 - 3, M7 - 1, острый гибридный лейкоз (миело/лимфобластный) - 1. Исследование точечных мутаций проводили методом прямого автоматического секвенирования. По данным цитогенетического и ПЦР-обследования преобладали пациенты с промежуточным (30,9 %) и неблагоприятным (29,1 %) прогнозом ОМЛ. Молекулярно-генети-ческое исследование позволило в 36,4 % случаев выявить скрытые патогенетически и прогностически значимые мутации. Наибольшая частота установлена для мутаций в экзоне 12 гена NPM1 (22,9 %), частота клинически значимых мутаций в остальных генах не превышала 12,5 %. Множественные генетические повреждения определялись в 10,9 % проб, при этом наиболее часто обнаруживались сочетания инсерций в гене NPM1 с внутренними тандемными дупликациями FLT3. По результатам прямого секвенирования прогноз ОМЛ был уточнен у 18,2 % больных. Благоприятный прогноз общей выживаемости установлен в 16,4 % случаев, промежуточный - в 27,3 %, неблагоприятный - в 34,5 %. В 21,8 % наблюдений осуществить генетическую стратификацию пациентов не удалось. Основной технологией лечения ОМЛ у больных в возрасте 45-60 лет, с учетом их молекулярно-генетических характеристик, является интенсивная индукционная полихимиотерапия с аллогенной трансплантацией стволовых кроветворных клеток в первой ремиссии.
Ключевые слова: острый миелоидный лейкоз, мутации, зрелый возраст, прямое секвенирование
The spectrum of ASXL1, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 and WT1 genes mutations was studied in 55 middle aged patients (pts) with acute myeloid leukemia (AML) treated in hematological department since 2008 till 2018. Morphology of AML according to FAB-classification was as follows: M0 - 2, M1 - 3, M2 - 21, М3 - 9, M4 - 13, M4eo - 1, M5 - 1, M6 - 3, M7 - 1, AHL (myelo/lymphoblastic) - 1. Mutations were detected using automatic direct sequencing technique. The frequency of mutations in investigated proto- and antioncogenes was 36.7 %, including 2 cases (25.0 %) with favorable cytogenetics, 7 cases (23.8 %) with unfavorable cytogenetics, 9 cases (22.2 %) with normal karyotype and 2 cases (14.3 %) with unspecified cytogenetics. The frequency of mutations in NPM1 gene exons 9-12 was 22.9 %, NRAS gene exons 1-4 -12.5 %, FLT3 gene exons 12-15 and 19-21 - 11.5 %, ASXL1 gene exons 12-13 - 11.1 %, KIT gene exons 7-12 and 16-19 -6.5 %, WT1 gene exons 6-9 - 6.1 %, TP53 gene exons 4-11 - 2.6 %. Multiple genetic lesions were detected in 10.9 % specimens (usually NPM1 and FLT3 point mutations co-occurrence). As a result, detection of cryptic gene mutations was helped to clarify the prognostic stratification of AML in 18.2 % cases. Favorable prognosis of overall survival was established in 9 cases (16.4 %), intermediate - 15 (27.3 %), adverse -19 (34.5 %), unspecified -12 (21.8 %). These results indicate the priority of intensive induction polychemotherapy and allogenic bone marrow transplantation in the first remission as the main therapeutic technology in AML at the age of 45-60 years old.
Keywords: acute myeloid leukemia, mutations, middle age, direct sequencing
МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
2020. Т. 15. № 1
medical news of north caucasus
2020. Vоl. 15. Iss. 1
Для цитирования: Виноградов А. В., Резайкин А. В., Сазонов С. В., Сергеев А. Г., Капитонова М. Ю. МОЛЕКУ-ЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МУТАЦИЙ В ГЕНАХ ASXL1, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 И WT1 У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ МИЕЛОИДНЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ ЗРЕЛОГО ВОЗРАСТА. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2020;15(1):32-36. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15006
For citation: Vinogradov A. V., Rezaykin A. V., Sazonov S. V., Sergeev S. V., Kapitonova M. Yu. MOLECULAR GENETIC ANALISYS OF ASXL1, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 AND WT1 MUTATIONS IN ACUTE MYELOID LEUKEMIA PATIENTS 45-60 YEARS OLD. Medical News of North Caucasus. 2020;15(1):32-36. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15006 (In Russ.)
ДИ - доверительный интервал
кДНК - комплементарная дизоксирибонуклеиновая кислота ОМЛ - острый миелоидный лейкоз ПЦР - полимеразная цепная реакция РНК - рибонуклеиновая кислота
ITD - внутренняя тандемная дупликация NA - not available (исследование не проводилось) WT - wild type (дикий тип, кодирующая последовательность соответствует референсной)
Онкогенез острых миелоидных лейкозов (ОМЛ) обусловлен возникновением мутаций в ключевых прото- и антионкогенах генома кроветворных клеток-предшественниц и коррелирует с возрастом заболевших. Наиболее часто при ОМЛ взрослых мутируют гены FLT3 (до 40 %), NPM1 (30-40 %), DNMT3A (30-35 %), NRAS (до 20 %), WT1 (10-15 %) и ТР53 (до 10 %) [1, 2]. Установлено, что для злокачественной трансформации гемопоэтической клетки может быть достаточно одного мутагенного события (так называемой «драйверной» мутации, например, в гене MLL), однако наряду с этим в лейкемических клетках могут выявляться случайные генетические изменения, возникающие на фоне геномной нестабильности и не играющие роли в лейкозоге-незе [1, 3]. Все это затрудняет широкое внедрение молекулярно-генетической диагностики ОМЛ в практическом здравоохранении, хотя в международной классификации миелоидных опухолей идентификация ряда генных и хромосомных мутаций рассматривается как важный прогностический фактор при планировании лечения больных с использованием высокодозной, таргетной химиотерапии и аллогенной трансплантации стволовых кроветворных клеток [4].
Цель исследования - проанализировать частоту и спектр мутаций ключевых протоонкогенов и антионкогенов у больных острыми миелоидными лейкозами зрелого возраста.
Материал и методы. В исследование включены 55 больных ОМЛ в возрасте от 45 до 60 лет, проходивших лечение в гематологическом отделении Свердловской областной клинической больницы № 1 с 2008 по 2018 г. Среди пациентов было 26 женщин (47,3 %) и 29 мужчин (52,7 %), средний возраст составил 53,5±1,0 год.
Диагноз ОМЛ устанавливали в соответствии с международными рекомендациями: на основании клинического анализа крови, цитологического и цитохимического анализа аспирата костного мозга, им-мунофенотипирования. Выполняли трепанобиопсию крыла подвздошной кости с последующим проведением гистологического и иммуногистохимического анализа [4, 5]. Морфологический вариант лейкоза определяли в соответствии с FAB-классификацией [6]. В соответствии с ней в исследуемой группе с подтипом М0 наблюдались двое пациентов, М1 - 3, М2 -21 (в т.ч. М2эо и М2базо - по одному), М3 - 9, М4 - 13, М4эо - 1, М5 - 1, М6 - 3, М7 - 1, острый гибридный лейкоз (миело/лимфобластный) - 1.
Во всех случаях для уточнения генетических характеристик опухоли проводили цитогенетическое и/ или молекулярно-генетическое исследование - ПЦР
в реальном времени на аномалии t(8;21)(q22;q22), t(9;22)(q24;q11), аберрации сегмента 11q23, t(15;17) (q22;q11), inv(16)(p13;q22). В результате больные распределялись в следующие подгруппы: транслокация t(8;21)(q22;q22), транслокация t(15;17)(q22;q11), инверсия inv(l6)(p13;q22), хромосомные аберрации сегмента 11q23, прочие структурные аберрации хромосом, анеуплоидии, комплексные хромосомные мутации, диплоидия (нормальный кариотип). Если вариант генетического повреждения методами ци-тогенетики и ПЦР уточнить не удавалось, пациенты стратифицировались как ОМЛ с неуточненным генетическим вариантом [7].
Исследование скрытых генных мутаций проводили методом прямого секвенирования в пробах периферической крови и костного мозга, содержащих лейкозные бласты в количестве не менее чем 1000/ мкл на автоматических генетических анализаторах ABI Prism 310 и 3130 Genetic Analyzer. Всего на наличие точечных мутаций в кодирующих последовательностях экзонов 12-15 и 19-21 гена FLT3 протестированы 52 пробы, экзонов 4-11 гена ТР53 - 38, экзонов 9-12 гена NPM1 - 35, экзонов 6-9 гена WT1 - 33, экзонов 1-4 гена NRAS - 32, экзонов 7-12 и 16-19 гена KIT - 31, экзонов 12-13 гена ASXL1 - 9. Более подробно методы детекции мутаций охарактеризованы нами в предшествующих публикациях [7].
Статистическую обработку полученных средних частот генетических событий проводили с использованием доверительных интервалов на основе биномиального распределения [5, 7].
Результаты и обсуждение. Показано, что наиболее частым типом хромосомных мутаций в исследуемой группе являлись специфические хромосомные аберрации, ассоциированные с благоприятным прогнозом (14,5 %, n=8, при 95 % ДИ от 7,6 до 26,2 %), в том числе транслокация t(15;17)(q22;q11) - 5 случаев (9,1 %, при 95 % ДИ от 4,0 до 19,6 %), инверсия inv(16) (p13;q22) - 2 (3,6 %, при 95 % ДИ от 1,0 до 12,3 %), транслокация t(8;21)(q22;q22) - 1 (1,8 %, при 95 % ДИ от 0,3 до 9,6 %). Специфические хромосомные мутации, ассоциированные с неблагоприятным прогнозом, были выявлены в двух пробах (3,6 %, при 95 % ДИ от 1,0 до 12,3 %). Комплексные (две и более) аберрации хромосом обнаружены в 7 образцах (12,7 %, при 95 % ДИ от 6,3 до 24,0 %) и включали, как правило, количественные и структурные аномалии. Нормальный кариотип (диплоидия) лейкозных клеток определялся в 30,9 % случаев (n=17, при 95 % ДИ от 20,3 до 44,0 %). В целом по результатам цито-генетического анализа благоприятный прогноз общей выживаемости установлен 8 пациентам (14,5 %, при 95 % ДИ от 7,6 до 26,2 %), промежуточный - 17 (30,9 %, при 95 % ДИ от 20,3 до 44,0 %), неблагопри-
оригинальные исследования
Внутренние болезни
oRiGiNAL REsEARcH
Internal diseases
ятный - 16 (29,1 %, при 95 % ДИ от 18,8 до 42,2 %). В 14 случаях (25,5 %, при 95 % ДИ от 15,8 до 38,4 %) выявить генетические аномалии методами G-banding и ПЦР в реальном времени не удалось из-за низкой митотической активности лейкозных клеток и недостаточного количества кДНК соответственно [7].
Значимые для онкогенеза ОМЛ генетические аномалии гена FLT3 обнаружены в 6 пробах (11,5 %, при 95 % ДИ от 5,4 до 22,9 %) при морфологических вариантах М2, М3, М4 и М6. Среди них в пяти случаях (9,6 %, при 95 % ДИ от 4,2 до 20,6 %) выявлялись внутренние тандемные дупликации (ITD) и инсерции в юкстамембранном и киназных доменах, в одном -несинонимичная трансверсия с. 2522 A>T (1,9 %, при 95 % ДИ от 0,3 до 10,1 %). В четырех пробах (при ОМЛ М2, М3, М4) определялись полиморфные однонукле-отидные замены с. 1683 A>G (7,7 % при 95 % Ди от 3,0 до 18,2 %), не влиявшие на структуру кодируемого белка. Сочетание FLT3 ITD с точечными мутациями в других генах зафиксировано в трех наблюдениях (табл.1). Во всех них наряду с FLT3 ITD определялись инсерции в экзоне 12 гена NPM1, а в одном наблюдении (ОМЛ М6) - еще и трансверсия с. 1621 А>С в гене KIT. При проведении программной химиотерапии ци-тарабином в сочетании с антрациклинами мутации в гене FLT3 обусловливали неблагоприятный прогноз ОМЛ.
Тетрануклеотидные инсерции типа А в экзоне 12 гена NPM1 были выявлены в 8 пробах при морфологических подтипах ОМЛ М2, М4, М5 и М6 (22,9 %, при 95 % ДИ от 12,1 до 39,1 %). Наряду с ними в указанных биообразцах также выявлялись функционально значимые изменения в других исследованных генах, в том числе ITD и несинонимичная замена с. 2522 А>Т в гене FLT3, трансверсия с. 1621 А>С в гене KIT, делеция в гене WT1 (табл. 1). Статистический расчет показал, что сочетание мутаций генов NPM1 и FLT3 являлось неслучайным генетическим событием и обусловливало ухудшение прогноза общей выживаемости при NPM1-позитивных ОМЛ [5, 7].
Таблица 1
Характеристика ОМЛ с множественными генными мутациями
Подтип по FAB Цито-генетика Характеристика выявленных мутаций
ASXL1 FLT3 KIT NPM1 NRAS WT1
М0 46, XX, del(5) (q13), del(15) (q21) n. Del 17552007 WT WT WT с. 181 C>A WT
М2 Дипло-идия NA* с. 2522 A>T с. 1638 A>G Инсерция типа А WT WT
М2 46, ХХ, t(8;21) NA WT n. Del 15291774 NA с. 38 G>A WT
М4 Дипло-идия NA ITD WT Инсер - ция типа А NA NA
M5 Дипло-идия NA WT WT Инсер - ция типа А WT n. Del 14821565
М6 Дипло-идия NA ITD с. 1621 А>С, с. 2586G>C Инсер - ция типа А WT WT
*NA - not available (исследование не проводилось).
Структурные изменения в экзонах 7-12 и 1619 гена KlT были обнаружены в 5 пробах (16,1 %,
при 95 % ДИ от 7,1 до 32,6 %). Среди них в 3 образцах определялась несинонимичная однонуклеотид-ная замена с. 1621 А>С в сочетании с синонимичной трансверсией с. 2586 G>C, по одному наблюдению -делеция (n. Del 1529-1774) и несинонимичная тран-зиция с. 2394 С>Т. В двух пробах, при ОМЛ М2 и М6, наряду с мутациями в гене KIT определялись патогенетически значимые криптические мутации в других генах (соответственно NRAS и FLT3 ITD в сочетании с инсерцией типа А в гене NPM1) (табл. 1). При этом, по некоторым данным [8, 9], трансверсия с. 1621 А>С является полиморфным аллелем гена KIT, не играющим роли в онкогенезе ОМЛ.
Точечные мутации в гене NRAS выявлены в четырех пробах (12,5 %, при 95 % ДИ от 5,0 до 28,1 %) при морфологических вариантах ОМЛ М0, М2 и М7. Они были представлены соответственно заменами нуклеотидов в позициях c.181 С>А, с. 38 G>A (в обоих случаях при ОМЛ М2) и с. 182 А>С кодирующей последовательности. В двух случаях, при ОМЛ М0 и М2, определялись также функционально значимые генетические аномалии в генах ASXL1 и KIT (табл. 1). Во всех наблюдениях выявление мутаций в гене NRAS ассоциировалось с неэффективностью курсов индукции либо смертью в ремиссии и было связано с неблагоприятным прогнозом общей выживаемости.
Среди 9 проб, обследованных на мутации экзонов 12-13 гена ASXL1 в одном случае (11,1 %, при 95 % ДИ от 2,0 до 43,5 %) была обнаружена делеция (n. Del 1755-2007) при ОМЛ М0 с кариотипом 46, ХХ, del(5) (q13), del(15)(q21) и несинонимичной трансверсией с.181 С>А в гене NRAS. Клинически указанное наблюдение ассоциировалось с неблагоприятным прогнозом: была зафиксирована первичная резистентность ОМЛ, срок наблюдения не превышал 3 месяцев.
Изменения в кодирующей последовательности гена WT1 выявлены в двух биообразцах при морфологических вариантах ОМЛ М2 и М5 (6,1 %, при 95 % ДИ от 1,7 до 19,7 %) и были представлены делецией (n. Del 1482-1565). При этом в обеих пробах определялось сочетание экспрессии транскрипционных вариантов A и D гена WT1. При ОМЛ М5 в указанной пробе определялась также инсерция типа А в гене NPM1 (табл. 1).
В гене TP53 клинически значимая мутация определялась в одном наблюдении (2,6 %, при 95 % ДИ от 0,5 до 13,4 %) при ОМЛ М2эо с комплексными хромосомными аберрациями. Она была представлена несинонимичной транзицией с. 569 C>G (экзон 6), приводившей к замене аминокислотных остатков p. 190 P>R в ДНК-связывающем домене белка. В указанном случае отмечалась первичная резистентность ОМЛ к стандартной и высокодозной химиотерапии, общая продолжительность наблюдения не превышала 12 месяцев. Несинонимичная нуклеотидная замена с. 215 C>G, являющаяся, согласно [7, 10], полиморфным аллельным вариантом и обусловливавшая замену аминокислотных остатков p.72 P>R в белке р53, определялась в 32 пробах (84,2 %, при 95 % ДИ от 69,6 до 92,5 %). Кодирующая последовательность гена ТР53 дикого типа, соответствующая референс-ной NM_000546, определялась в пяти наблюдениях (13,2 %, при 95 % ДИ от 5,8 до 27,4 %).
Таким образом, скрытые патогенетически значимые мутации в исследуемых прото- и антиоонкогенах у больных ОМЛ зрелого возраста были выявлены в 20 пробах (36,4 %, при 95 % ДИ от 25,0 до 49,6 %), что превышало аналогичную частоту генетических аномалий, определявшихся при ОМЛ в возрасте 1545 лет и 75 лет и старше [10] (табл. 2). В подгруппе
МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
2020. Т. 15. № 1
MEDicAL NEws of NoRTH cAucAsus
2020. Vоl. 15. Iss. 1
ОМЛ в возрасте 45-60 лет с нормальным кариотипом частота скрытых генных мутаций составила 52,9 % (п=9, при 95 % ДИ от 30,9 до 73,8 %), с аберрантными - 37,5 % (п=9, при 95 % ДИ от 21,2 до 57,3 %), с неуточненным - 14,3 % (п=2, при 95 % ДИ от 4,0 до 40,0 %). Последнее, по-видимому, коррелирует с количественными и качественными характеристиками представленного биоматериала [7].
Таблица 2
Частота выявления скрытых генетических аномалий при ОМЛ в зависимости от возраста обследуемых
С максимальной частотой в исследуемой группе определялись функционально значимые мутации в гене NPM1 (22,9 %) (табл. 2), что было несколько выше, чем при ОМЛ в возрасте 15-45 лет и 75 лет и старше. Имеющие патогенетическое значение при ОМЛ мутации в генах KIT (за исключением трансверсии с.1621А>С) и NRAS определялись у больных ОМЛ в возрасте 45-60 лет с частотами 6,5 % и 12,5 % соответственно, что было сопоставимо с результатами предыдущих исследований. Мутации в антионкогене TP53 в исследуемой выборке выявлялись с частотой 2,6 %, что занимало промежуточное значение относительно ранее исследованных групп ОМЛ в возрасте 15-45 лет и 75 лет и старше (табл. 2).
Множественные мутации в исследованных про-то- и антионкогенах определялись у шести больных ОМЛ зрелого возраста (10,9 % при 95 % ДИ от 5,1 до 21,8 %) (табл. 1). Из них в 4 случаях при ОМЛ с дипло-идией определялись инсерции типа А в гене NPM1 в сочетании с мутациями в гене FLT3 (3 случая - замена с. 2522 A>T при М2, ITD при М4 и М5) и делецией в гене WT1 (n. Del 1482-1565 при М5). При ОМЛ М0 с кариотипом 46, XX, del(5)(q13), del(15)(q21) одновременно определялись замена с. 181 С>А в гене NRAS и делеция n. Del 1755-2007 ASXL1. Еще в одной пробе при ОМЛ М2 с t(8;21) определялись замена с. 38 G>A в гене NRAS и делеция n. Del 1529-1774 в гене KIT.
Литература/References
1. Metzeler K. H., Herold T., Rothenberg-Thurle M., Amler S., Sauerland M. C. [et al.]. Spectrum and prognostic relevance of driver gene mutations in acute myeloid leukemia. Blood. 2016;128(5):686-698.
https://doi.org/10.1182/blood-2016-01-693879
2. Shlush L. I., Zandi S., Itzkovitz S., Schuh A. C. Aging, clonal hematopoiesis and preleukemia: not just bad luck? Intern. J. Hematol. 2015;102:513-522. https://doi.org/10.1007/s12185-015-1870-5
3. Abelson S., Collor G., Ng S. W. K., Vassiliou G. S., Shlush L. I. Prediction of acute myeloid leukaemia risk
В исследованной группе больных ОМЛ зрелого возраста преобладали пациенты неблагоприятного и промежуточного цитогенетического прогнозов (29,1 % и 30,9 % соответственно). Однако дополнительно выполненное исследование биоматериала методом прямого автоматического секвенирования позволило обнаружить скрытые клинически значимые мутации, в том числе в 2 случаях (25,0 %) - в подгруппе благоприятного, в девяти (52,9 %) - промежуточного, семи (43,8 %) - неблагоприятного прогноза. Помимо этого, в двух случаях (14,3 %) определялись значимые мутации в пробах от больных, по результатам цитогенетического и ПЦР-исследования уточнить прогноз у которых не удалось. В результате прогностическая стратификация ОМЛ ухудшалась у 6 обследуемых из подгрупп благоприятного, промежуточного и неуточненного прогнозов. В четырех случаях обнаруживалась изолированная инсерция в экзоне 12 гена NPM1, соответственно прогноз ОМЛ улучшался. Во всех остальных наблюдениях прогностическая стратификация больных не менялась, так как выявленные хромосомные аберрации уже были ассоциированы с неблагоприятным прогнозом, либо при нормальном кариотипе определялись одновременно скрытые мутации, ассоциированные как с благоприятным, так и неблагоприятным прогнозом общей выживаемости. В целом, с учетом результатов дополнительного исследования методом прямого автоматического секвенирования, благоприятный прогноз общей выживаемости установлен в 9 наблюдениях (16,4 %, при 95 % ДИ от 8,9 до 28,3 %), промежуточный - в 15 (27,3 %, при 95 % ДИ от 17,3 до 40,2 %), неблагоприятный - в 19 (34,5 %, при 95 % ДИ от 23,4 до 47,7 %), неуточненный - в 12 (21,8 %, при 95 % ДИ от 12,9 до 34,4 %).
Выводы
1. Общая частота выявления патогенетически значимых криптических мутаций в генах ASXL1, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, ТР53 и WT1 у больных ОМЛ в возрасте 45-60 лет составляла 36,4 %.
2. С максимальной частотой у больных ОМЛ в возрасте 45-60 лет определялись мутации в гене NPM1 (22,9 %), частота клинически значимых мутаций в остальных исследованных генах не превышала 12,5 %.
3. Множественные мутации прото- и антионкогенов при ОМЛ в возрасте 45-60 лет определялись в 10,9 % случаев, при этом наиболее часто сочетались мутации в генах NPM1 и FLT3.
4. Применение прямого автоматического секве-нирования позволило охарактеризовать прогноз общей выживаемости у 18,2 % больных ОМЛ со скрытыми генными мутациями ASXL1, FLT3, NPM1, NRAS, TP53 и WT1. Однако улучшение прогноза отмечалось только при выявлении изолированных инсерций в гене NPM1, во всех остальных наблюдениях он ухудшался или оставался неизменным.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
in healthy individuals. Nature. 2018;559(7714):400-404. https://doi.org/10.1038/s41586-018-0317-6
4. Arber D. A., Orazi A., Hasserjian R., Thiele J., Borowitz M. J. [et al.]. The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood. 2016;127(20):2391-2405. https://doi.org/10.1182/blood-2016-03-643544
5. Виноградов А. В., Резайкин А. В., Салахов Д. Р. Сравнительный анализ результатов типирования молекулярных повреждений гена NPM1 при острых миелоидных лейкозах с использованием прямого автоматического секвенирования и иммуногистохимиче-
Исследуемая группа Частота мутаций в исследованных генах, %
ASXL1 FLT3 KIT NPM1 NRAS TP53 WT1
ОМЛ, возраст 15-45 лет [11] NA 21,9 10,0 10,7 13,0 0,0 11,1
ОМЛ, возраст 45-60 лет 11,1 11,5 6,5 22,9 12,5 2,6 6,1
ОМЛ, возраст от 75 лет и старше [12] NA* 11,1 NA 16,7 NA 20,0 NA
*NA - not available (исследование не проводилось).
оригинальные исследования
Внутренние болезни
oRiGiNAL REsEARcH
Internal diseases
ского метода. Вестник Уральской медицинской академической науки. 2013;(4):124-127. [Vinogradov A. V., Rezaykin A. V., Salakhov D. R. Sravnitelnyy analiz rezultatov tipirovaniya molekulyarnykh povrezhdeniy gena NPM1 pri ostrykh miyeloidnykh leykozakh s ispolzovaniyem pryamogo avtomaticheskogo sekvenirovaniya i immunogistokhimicheskogo metoda. Vestnik Uralskoy meditsinskoy akademicheskoy nauki. - Bulletin of the Ural Medical Academic Science. 2013;(4):124-127. (In Russ.)].
6. Walter R. B., Othus M., Löwenberg B., Erba H. P., Estey E. H. Empiric definition of eligibility criteria for clinical trials in relapsed/refractory acute myeloid leukemia: Analysis of 1.892 patients from HOVON/SAKK and SWOG. Haematologica. 2015;100(10):e409-e411. https://doi.org/10.3324/haematol.2015.130013
7. Виноградов А. В., Резайкин А. В., Изотов Д. В., Сергеев А. Г. Применение технологии прямого автоматического секвенирования для детекции мутаций генов ASXL1, DNMT3A, FLT3, KIT, NRAS, TP53 и WT1 при острых миелоидных лейкозах с неуточненным кариотипом. Вестник Уральской медицинской академической науки. 2016;(4):38-51. [Vinogradov A. V., Rezaykin A. V., Izotov D. V., Sergeyev A. G. Primeneniye tekhnologii pryamogo avtomaticheskogo sekvenirovaniya dlya detektsii mutatsiy genov ASXL1, DNMT3A, FLT3, KIT, NRAS, TP53 i WT1 pri ostrykh miyeloidnykh
leykozakh s neutochnennym kariotipom. Vestnik Uralskoy meditsinskoy akademicheskoy nauki. - Bulletin of the Ural Medical Academic Science. 2016;(4):38-51. (In Russ.)].
8. Szatkowski D., Hellmann A. The overexpression of KIT proto-oncogene in acute leukemic cells is not necessarily caused by the gene mutation. Acta Haematologica. 2015;133(1):116-123. https://doi.org/10.1159/000360214
9. Heldin C. H., Lennartsson J. Structural and functional properties of platelet-derived growth factor and stem cell factor receptors. Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 2013;5(8):a009100. https://doi.org/10.1101/cshperspect.a009100
10. Виноградов А. В., Резайкин А. В., Сазонов С. В., Сергеев А. Г. Клинико-патогенетическая характеристика мутаций генов DNMT3A, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 и WT1 у больных острыми миелоидными лейкозами в возрастной группе 15-45 лет. Гены и клетки. 2018;14(3):70-74. [Vinogradov A. V., Rezaykin A. V., Sazonov S. V., Sergeyev A. G. Kliniko-patogeneticheskaya kharakteristika mutatsiy genov DNMT3A, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 i WT1 u bolnykh ostrymi miyeloidnymi leykozami v vozrastnoy gruppe 15-45 let. Geny i kletki. -Genes and cells. 2018;14(3):70-74. (In Russ.)]. https://doi.org/10.22138/2500-0918-2018-15-3-384-392
Сведения об авторах:
Виноградов Александр Владимирович, кандидат медицинских наук, главный специалист отдела организации медицинской помощи взрослому населению, врач-гематолог; тел.: 89089093135; e-mail: a.vinogradov@egov66.ru
Резайкин Алексей Васильевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры медицинской физики, математики и информатики; тел.: 89126785460; e-mail: alexrez@usma.ru
Сазонов Сергей Владимирович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой гистологии, цитологии и эмбриологии; тел.: 89122439164; e-mail: sazonov@usma.ru,
Сергеев Александр Григорьевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии; тел.: 89126862914; e-mail: sergeev@usma.ru
Капитонова Марина Юрьевна, доктор медицинских наук, профессор кафедры фундаментальных медицинских наук; тел.: +6017-6243699; e-mail: kmarina@unimas.my
© Е. И. Андреева, 2020 УДК 616.33-008.28
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2020.15007 ISSN - 2073-8137
ВЛИЯНИЕ САХАРОСНИЖАЮЩЕЙ ТЕРАПИИ НА КАЧЕСТВО ЖИЗНИ ПАЦИЕНТОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА НА ФОНЕ ГАСТРОЗЗОФАГЕАЛЬНОЙ РЕФЛЮКСНОЙ БОЛЕЗНИ И ОЖИРЕНИЯ
Е. И. Андреева
Ставропольский государственный медицинский университет, Российская Федерация
EFFECT OF GLUCOSE-LOWERING THERAPY
ON QUALITY OF LIFE IN PATIENTS WITH DIABETES MELLITUS TYPE 2,
GASTROESOPHAGEAL REFLUXE DISEASE AND OBESITY
Andreeva E. I.
Stavropol State Medical University, Russian Federation
Влияние терапии на показатели качества жизни при помощи опросника SF-36 изучено у 200 больных ГЭРБ, в том числе в сочетании с ожирением и сахарным диабетом 2 типа. Пациенты были разделены на 4 группы. Группу I составили больные сахарным диабетом 2 типа в сочетании с ожирением и ГЭРБ, получавшие метформин. В группу II были включены пациенты с сахарным диабетом 2 типа в сочетании с ожирением и ГЭРБ, принимавшие эксенатид.
