CC BY
73
структурных компонентов, что свидетельствует о прекращении поступления токсинов и микробных антител из первичного очага.
Литература
1Автандилов, Г.Г. Медицинская морфометрия /
Г.Г.Автандилов.- М: Медицина, 1990.- 384 с.
2.Глаголев, А.А. Геометрический метод количественного анализа ашрегатов под микроскопом / А.А. Глаголев.- Львов: Госгеолитиздат, 1941.- 82 с.
3. Завадский, Н.В. Острое воспаление среднего уха: этиология, патогенез и лечение / Н.В.Завадский // Вестник оториноларингологии.- 2000.- №6.- С.4-7
4. Косяков, С.Я. Средние отиты и их осложнения / С.Я.Косяков, А.Г.Атанесян // Consilium medicum.- 2007.- Т.9.-№10.- С.57-64.
5. Шайхова, Х. Э. Морфология регионарных лимфатических узлов при лимфотропной терапии острого среднего отита [Текст] / Х.Э. Шайхова, А.М. Хакимов, В.А. Хорошаев // Вестник оториноларингологии.- 1999.- № 2.- С.8-10
6. Янов, Ю.К. Этиопатогенетическая терапия острых средних отитов / Ю.К. Янов, С.В. Рязанцев // Consilium medicum.-2005.- №4.- С.290-297.
7. Tilney N.L. Paherns of lymphatic drainage in adult laboratory rat / N.L. Tilney // J. Anat.- 1971.- Vol. 109, №3.- Р. 363-383
8. Heikkenen, T. Importance of Respiratory Viruses in Acute Otitis Media / T. Heikkenen, T. Chonmaitree // Clinical Microbiology Reviews.- 2003.- Vol.-16.- №2.- p.230-241.
MORPHOFUNCTIONAL STATE OF THE LYMPHATIC SYSTEM OF THE MIDDLE EAR WITH EXPERIMENTAL ACUTE OTITIS MEDIAE AND REGIONAL LYMPHOTROPIC TREATMENT
S.Y.KROTOV, I.N.PUTALOVA, Y.A.KROTOV, A.V.PAVLOV
Omsk State Medical Academy BIHOR «Regional clinical hospital»
35 immunodeficient Wistar male rats were inoculated by substance S.aureus into the middle ear to model acute otitis. We examined the response of regional lymth nodes of intact animals under induced middle ear inflamation to traditional and regional lympho-tropic treatment. Animals undergone lymphotropic therapy showed an earlier elimination of infection within the tympanic cavity and complete recovery of regional lymph nodes' structural units.
Key words: acute otitis media, lymphotropic treatment.
УДК: 611.341:616-001.28/.29
МОДИФИЦИРУЮЩИЕ ЭФФЕКТЫ ОТДАЛЕННЫХ ПОСЛЕДСТВИЙ Г-ОБЛУЧЕНИЯ В ДИАПАЗОНЕ МАЛЫХ ДОЗ
В.В. ШИШКИНА, З.А. ВОРОНЦОВА*
Проведено исследование слизистой оболочки тощей кишки, где наиболее активно происходят процессы метаболизма, реализующие местный гомеостаз ответной реакцией иммунного звена субэпите-лиального слоя во взаимодействии с эпителием после однократного и фракционированного у-облучения в отдаленные сроки. Отдаленные пострадиационные биоэффекты у-излучения в диапазоне малых доз характеризуются активизацией лимфоидного аппарата, информирующего о неблагополучии гомеостаза на фоне энзимопатии эн-тероцитов слизистой оболочки тощей кишки.
Ключевые слова: тощая кишка, энзимопатия, иммунный аппарат, малые дозы у-облучения.
Обзор данных о воздействии ионизирующей радиации на биологические объекты показывает необходимость использования интегративного подхода в исследовании отклика системы на облучение. Согласно классическим представлениям в радиобиологии эффективность одного и того же вида излучения зависит от режима его реализации при одинаково поглощенной дозе, кратности и продолжительности экспозиции. Однако, эти закономерности не всегда соответствуют и нет аргументированных доказательств и специальных исследований, что усложняет интерпретацию радиобиологических эффектов в сравнительном аспекте При этом с достоверностью доказано, что структурные и ультраструк-турные особенности изменений соответствуют характеру и сте-
пени определенных функциональных и биохимических процессов. В облученном организме выявляется комплекс динамически изменяющихся во времени показателей в зависимости от мощности, дозы и реабилитационного периода облучения. Изменения барьерно-защитных функций слизистой оболочки кишки создают условия для нарушения метаболизма и обменных процессов, вызывающих пищевую толерантность формированием адаптивного иммунного ответа, направленного на элиминацию модифицированного «своего» в реакциях на у-облучение. Неспецифические закономерности реакций иммунного аппарата при длительных пострадиационных нарушениях позволяет выявить достаточно грубые дефекты, которые могут быть условной основой для клинической интерпретации иммунопатогенеза, установления диагноза, прогноза [1]. Динамичность модифицирующих эффектов ионизирующей радиации диапазона малых, подпорого-вых доз у-облучения освещена недостаточно в современной литературе на уровне тощей кишки - одного из самых активных отделов в плане метаболизма и несмотря на достижения, заметны явные противоречия в трактовке полученных данных. В связи с этим высказывается позиция совершенствования и фундаментальности исследований в этой области, имеющих наибольший потенциал с точки зрения снижения неопределенностей оценок риска, особенно при облучении малыми дозами [3].
Представленные экспериментальные исследования касались тощей кишки, где с наибольшей выраженностью происходят процессы пристеночного, мембранного и внутриклеточного пищеварения, реализующие местный гомеостаз ответной реакцией клеточных популяций на уровне слизистой оболочки, в условиях отдаленных пострадиационных последствий воздействия у-облучения в диапазоне малых доз.
Материалы и методы исследования. Экспериментальная модель представлена белыми половоззрелыми беспородными крысами-самцами с начальным возрастом 4 месяца в количестве 162. Животные испытывали общее однократное и фракционированное (пятикратное) у-облучение со спектром 1,2 МЭв на установке «Хизотрон» (60Со). При фракционированном облучении суммарная доза была распределена в течение пяти суток. Мощность дозы составила 50 сГр/ч. в диапазоне доз 10;20;50 и 100 сГр с потрадиационным периодом наблюдения 365 и 545 суток. При оценке радиационной опасности отдаленных последствий была рассчитана эквивалентная доза для тощей кишки, измеряемая в зивертах (Зв). В соответствии с планом эксперимента было сформировано 18 групп животных, в том числе возрастной контроль. Эвтаназию экспериментальных и контрольных животных осуществляли путем декапитации в один и тот же промежуток времени, натощак. Для исследования был извлечен фрагмент проксимального участка тощей кишки, размером 1,3-1,5 см. Часть фрагментов замораживали с формированием блоков с заливкой в Kilik, чтобы при изготовлении криостатных срезов на одном предметном стекле был контрольный и экспериментальный материал. На срезах толщиной 10 мкм проводили гистохимические реакции, определяющие функциональность эпителиального пласта по степени активности мембранного и внутриклеточного пищеварения, а также всасывания веществ, определяющих резистентность слизистой оболочки. Щелочную фосфатазу (ЩФ) определяли в щеточной каемке столбчатых энтероцитов средней и верхней трети ворсинок, а в криптах она отсутствует. Кислая фосфатаза (КФ) распределялась в эпителии ворсинок и крипт супрануклеар-ной зоны. При окраске толуидиновым синим в собственном слое слизистой оболочки подсчитывали общее число тучных клеток (ОЧТК) (х1000), располагающихся в соединительной ткани вблизи базальной мембраны эпителия, и тучные клетки, мигрировавшие в эпителиальный пласт (МТК), участвующие в регуляции тканевого гомеостаза высвобождением ряда биологически активных веществ, преимущественно гепарина и гистамина, и быстро реагирующих на различные радиационные воздействия. Используя окраску основной коричневый с докраской гематоксилином по Шубичу М.Г., подсчитывали морфофункциональные типы тучных клеток (ТК). Качественную и количественную характеристику проводили по светооптической плотности распределения ферментов с использованием программы Image J с микропрепаратов каждой крысы на установке OPTICA Serie DM-15&20, снабженной цифровой видеофотокамерой. Учитывая, что тонкая кишка является первичным органом иммунной нейтрализации антигенов как на уровне эпителиального пласта и субэпителиаль-ного слоя, был проведен анализ блуждающих клеток собственной
пластинки слизистой оболочки. Проникшие в эпителиальный пласт мигранты способны вступать в контакт с эпителиоцитами, опосредованно поддерживая функциональность пласта и регуляцию процессов обновления [2]. Лимфоциты подсчитывали при окраске по Романовскому-Гимза в модификации Лилли.
Результаты и их обсуждение. Морфометрия светооптической плотности распределения ферментов ЩФ и КФ столбчатых энтероцитов показала ее снижение в хронодинамике пострадиационных сроков наблюдения и возрастанием дозы у-облучения, независимо от кратности применения, констатирующая пролонгированный модифицирующий эффект. После
однократного у-облучения при гистохимическом исследовании эпителия тощей кишки было обнаружено снижение светооптической плотности ферментов ЩФ и КФ столбчатых энтероцитов в хронодинамике пострадиационных сроков наблюдения и диапазоне возрастающих малых доз, независимо от кратности их применения с пролонгированным эффектом. Причем, необходимо отметить, что устойчивая
гиперчувствительность фермента КФ столбчатых энтероцитов наблюдалась к однократному у-облучению, а КФ и ЩФ к фракционированному, что является важным критерием, констатирующим метаболическую дисфункцию, индуцирующую модификацию иммунного статуса слизистой оболочки.
Спустя 365 суток после однократного применения в диапазоне малых доз у-облучения наблюдалось повышение миграции лимфоцитов в эпителиальный пласт на фоне возрастания их числа в строме (р<0,05). Необходимо отметить появление М-клеток в эпителии при дозе 0,1 Зв и скопление лимфоцитов в виде бляшек в слизистой и подслизистой оболочках. Видимо их наличие характеризуется активным трансцеллюлярным транспортом антигенов из просвета кишки к лимфоидной ткани. При фракционированном у-облучении в дозе 0,5 и 1 Зв наблюдалось синхронное повышение лимфоцитов в пласте и строме, однако при дозе 1 Зв их содержание преобладало в пласте (р<0,05).
Через 545 суток миграционная активность лимфоцитов заметно активизировалась независимо от дозы у-облучения и кратности ее использования. Эпителиальный пласт и строма были плотно инфильтрированы, причем число лимфоцитов преобладало в пласте. При фракционированном облучении эпителий был меньше инфильтрирован, но возрастающая динамика изменений имела прямую зависимость от дозы.
Таким образом, реакция лимфоидной ткани ассоциированной с тощей кишкой информировала о неблагополучии гомеостаза снижением ферментативной активности эпителия, индуцируя защитные механизмы повышенной миграцией лимфоцитов в хронодинамике отдаленных последствий после однократного у-облучения в диапазоне малых доз. Необходимо отметить особенности пролонгированных изменений слизистой оболочки тощей кишки в зависимости от реабилитационного периода наблюдения, определяющих напряжение иммунного звена спустя 365 суток, особенно при дозе 0,1 Зв при однократном ее использовании, появлением М-клеток, констатирующих метапластический эффект.
Тучные клетки субэпителиального слоя спустя 365 суток изменяли активность возрастанием дегрануляции независимо от дозы, а спустя 545 суток к ним присоединились вакуолизирован-
ные ТК, количественно подчеркивая чувствительность к дозе у-облучения 0,1 Зв, спустя 365 суток к дозе 0,2 Зв, а доза 0,5 Зв вызывала возрастание неактивных ТК. В хронодинамике эксперимента после фракционированного у-облучения перераспределение морфофункциональных типов ТК не имело определенной закономерности по срокам наблюдения и диапазона доз. Необходимо отметить отдаленный радиопротективный характер реакции ТК после у-облучения в дозе 0,5 Зв спустя 545 суток повышением дегрануляции с высвобождением гепарина (рис.).
Выводы. Отдаленные пострадиационные биоэффекты у-облучения в диапазоне малых доз характеризуются активизацией лимфоидного аппарата, информирующего о неблагополучии гомеостаза на фоне энзимопатии энтероцитов слизистой оболочки тощей кишки.
Литература
1. Дисбиоз кишечника. Руководство по диагностике и лечению. 2-е изд., испр. и доп./под ред. Е.И. Ткаченко, А.Н. Суворова.- С-Пб.: ИнформМед, 2009. - 276 с., ил.
2. Бабаева, А.Г. Роль лимфоцитов в оперативном изменении программы развития тканей / А.Г. Бабаева, Н.М. Геворкян, Е.А. Зотиков.- М.: Издательство РАМН, 2009. 108 с.
3. Профессиональный риск. Теория и практика расчета: монография/ под ред. А.Г. Хрупачева, А. А. Хадарцева. - Тула:
изд-во ТулГУ, 2011. - 330 с.
MODIFYING EFFECTS OF LONG-TERM EFFECTS
y-irradiation in the low dose range
Z.A. VORONTSOVA, V.V. SHISHKIN
Voronezh State Medical Academy named after NN Burdenko Health Ministry of Russian Federation, department of Histology
The study of the jejunum mucous membrane, where the most active metabolic processes take place, which implementing a local homeostasis through response of the immune part of subepithelial layer in conjunction with the epithelium after single and fractionated y-irradiation at a remote period. Long-term postradiation bioeffects y-radiation in the range of low doses are characterized by activation of the lymphoid apparatus, informing about the troubles of homeostasis in the background of the jejunum mucous membrane of enterocytes enzimopaty.
Key words: jejunum, enzimopaty, immune apparatus, small doses of y-irradiation.
УДК: 611.441+611.814.1]:616-001.28/.29
ЭФФЕКТЫ КОМБИНИРОВАННЫХ РАДИАЦИОННЫХ ФАКТОРОВ В ИЕРАРХИЧНОСТИ ИХ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ПРОЯВЛЕНИЙ НА УРОВНЕ ЭНДОКРИННОГО ЗВЕНА
В.В.ЛОГАЧЕВА, З. А.ВОРОНЦОВА*
В эксперименте проведено исследование морфофункционального состояния крупноклеточных ядер гипоталамуса и щитовидной железы в условиях комбинированного воздействия электромагнитного и ионизирующего излучения. Сопряженные изменения в ПВЯ и щитовидной железе констатировали согласованность взаимодействия спустя 1,7 часа, при комбинации ЭМИ и у-облучения в дозе 10 Гр в остальные сроки наблюдалась гетерохронность и гетерогенность динамики.
Ключевые слова: гипоталамус, щитовидная железа, электромагнитное излучения, у-облучение.
Интенсивность радиобиологических исследований не угасает. Это обусловлено дальнейшим развитием атомной энергетики, применением радиоактивных материалов в промышленности, медицине, науке, что способствует расширению круга лиц, имеющих профессиональный контакт с источниками радиации. Несмотря на улучшение радиационной обстановки спустя 25 лет после аварии на Чернобыльской АЭС в результате автореабилитации радиационный фон несколько улучшился , однако до 95% дозы ионизирующего облучения ионизирующей радиации насе-
Рис. Применение в диапазоне малых доз у-облучения
