кишечника, свидетельствуют о местном влиянии ПЭПА в этих дозах (3. А. Салмина).
По всем изученным показателям, в том числе по влиянию на гонады, генеративную функцию и развитие потомства, недействующей оказалась доза ПЭПА 0,00025 мг/кг, при суточном водопотреблении соответствующая концентрации 0,005 мг/л.
ЛИТЕРАТУРА. Егорова Г. М., Иванов Н. Г., Саноцкий И. В. — В кн.: Токсикология новых промышленных химических веществ. Вып. 8. М., 1966, с. 33— 36. — Елизарова О. Н., Рязанова Р. А., Булгакова И. А. и др. — В кн.: Методики санитарно-токсикологического эксперимента. М., 1968, с. 49—59. — Салмина 3. А. — «Труды Ленинградского сан.-гиг. мед. ин-та», 1975, т. 111, с. 85— 88. — Шефтель В. О., Цендровская В. А. — «Гиг. и сан.», 1974, №10, с. 66—69. —Шефтель В. О., Ц а м. 3. С., К а л и н и ч е н к о Л. Г. — Там же, № 12, с. 81—82.
Поступила 30/VIII 1976 г.
УДК 612.46-087.5
Кандидаты мед. наук А. А. Ефременко и Б. Я- Варшавский
МОДИФИКАЦИЯ ПРОБЫ С ФЕНОЛОВЫМ КРАСНЫМ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПОЧЕК У КРЫС
Научно-исследовательский институт гигиены морского транспорта, Ленинград
В настоящее время при гигиенических исследованиях для оценки секреторной способности \почечных канальцев широко используется проба с феноловым красным в модификации Н. И. Шуйской и H. М. Карамзиной. Ее авторы предусматривают введение крысам небольшой (1—2 мг) дозы этого вещества. В литературе имеется указание на необходимость применения в опытах на крысах более высоких доз секретируемого вещества (В. М. Брюханов и Г. Ф. Фоменко), однако экспериментальное обоснование доз и описание методики не приводятся. Между тем плохая растворимость фенолового красного в воде является серьезным препятствием к увеличению его дозы в опытах на животных. Использование же в санитар-но-токсикологических исследованиях небольшого количества значительно снижает ценность пробы с феноловым красным, так как при невысокой концентрации секретируемого вещества в крови нагрузка на клетки ка-нальцевого эпителия может оказаться меньше той, которая вызывает полное насыщение секреторной системы почек. С другой стороны, превышение определенного уровня содержания в крови секретируемого вещества может обусловить самодепрессию процесса секреции (Barclay и соавт. ; Eggeton и Habib; Pitts). Следует особо отметить, что достижение полного насыщения секреторной системы почек является чрезвычайно существенным требованием для изучения секреторной функции почечных канал! цев в токсико-гигиенических исследованиях. В противном случае нагрузка на клетки канальцевого эпителия может оказаться меньше той, с которой в состоянии справиться уже имеющая повреждение секреторная система почек, и действия токсического агента (если оно затрагивает секреторно-транспортную систему почек) не будет выявлено.
Исходя из высказанных положений, мы поставили задачу определить оптимальную для изучения секреторной способности почек в условиях санитарно-токсикологического эксперимента дозу вводимого фенолового красного. Для этого на белых крысах-самцах весом 190—210 г прослежено выведение его с мочой. Сначала животным через желудочный зонд давали воду в количестве 2% от массы тела и сразу же вводили внутрибрюшинно феноловый красный в определенной дозе (табл. 1). Животных на 2 ч сажали в клетки, приспособленные для сбора мочи, и в собранных порциях оп-
ределяли количество выделенного фенолового красного. Двухчасовой диурез у крыс составлял от 4 до 8 мл.
Из табл. 1 следует, что с увеличением дозы фенолового красного от 2 до 100 мг соответственно возрастало и количество его, выводимое почками. Процентное соотношение выведенного и введенного фенолового красного постепенно снижалось, находясь на одном уровне для доз 25, 50 и 100 мг. По-видимому, при введении крысам фенолового красного в дозе 25—100 мг полное насыщение секреторно-тран-спортной системы почек сохранялось в течение значительной части периода наблюдения. При дозе 200 мг процентное отношение выведенной из организма краски к введенной резко снизилось. Дальнейшее увеличение дозы привело к еще более заметному нарушению процесса очищения крови от фенолового красного. Доза 300 мг обусловила также задержку диуреза: у 4 из 5 крыс он был 1«—1,5 мл и лишь у 1—4,5 мл. Приведенные данные свидетельствуют о том, что при использовании фенолового красного в дозах более 100 мг возникает самодепрессия секреции.
При введении 30 интактным крысам по 50 мг этого красителя содержание его в двухчасовой порции мочи было равно 17,7±0,51 мг. Этот показатель установлен в опытах на крысах 2 групп •— со средним весом 200 и 325 г соответственно. Животные обеих групп выделяли за 2 ч одинаковое количество фенолового красного.
Доза 50 мг на крысу была выбрана в результате наблюдения за экскрецией этого вещества с мочой. Однако только данные о содержании фенолового красного в крови позволяют с уверенностью назвать оптимальные условия для оценки канальцевой секреции. Известно, что максимальная нагрузка секреторно-транспортной системы почек у человека и собаки достигается при содержании 10—20 мг% фенолового красного в крови (Shannon; Sheehan; Goldring и соавт.).
В связи с этим в дальнейших исследованиях было прослежено содерж-ние фенолового красного в крови по мере очищения ее от введенной в организм краски. С этой целью крысам-самцам весом 200—220 г, которым предварительно дали по 4 мл воды через желудочный зонд, вводили внутри-брюшинно по 50 мг фенолового красного. Спустя 1, 1V2 и 2 ч декапитиро-вали по 5 животных и в плазме крови определяли концентрацию фенолового красного, которая была равна 22,3±3,6, 9,7±0,8 и 3,2±0,1 мг% соответственно.
Как показали результаты опытов, внутрибрюшинное введение 50 мг фенолового красного обеспечивает полное насыщение секреторно-транспортной системы почек в течение первых 1 */2 ч, т. е. большей части периода наблюдения. В связи с этим можно считать, что двухчасовое выделение красителя после его внутрибрюшинного введения в дозе 50 мг является хорошим показателем секреторной способности почечных канальцев.
Полученные данные позволяют обоснованно рекомендовать использовать в санитарно-токсикологических исследованиях для оценки функционального состояния секреторно-транспортной системы почек методику, предусматривающую внутрибрюшинное введение крысам фенолового красного в дозе 50 мг.
Приведем описание используемой нами пробы с феноловым красным. Крысам вводят в желудок воду из расчета 2% от массы тела и сразу же
Таблица 1
Выведение фенолового красного с моч у крыс
Доза фенолового красного Количество выведенного фенолового красного
на крысу, иг %
мг
2 0,9+0,05 45+1,0
5 2,3+0,09 46+1,0
10 4,1+0,13 41+0,5
25 8,4+0,73 34+2,4
50 17,5+1,70 35+3,5
100 34,8+1,94 35+2,3
200 38,8+2,66 19+1,5
300 25,6+5,80 8,5+1.9
Примечание. Приводятся данные полученные у 5 крыс.
внутрибрюшинно 5 мл 1 % раствора фенолового красного (по 50 мг на крысу). Их сажают на 2 ч в обменные клетки и отмечают количество собранной мочи, 1 мл которой разводят до 25 мл. К полученному раствору добавляют 0,2 мл 10% раствора гидрата окиси натрия. На фотоколориметре ФЭК-56М определяют экстинкцию полученного раствора мочи, используя синий фильтр № 4 и кювету 3 мм. Колориметрируют против воды. Расчет ведут по калибровочному графику. Для его построения из 1 % раствора фенолового красного готовят разведения, как указано в табл. 2, и полученный результат умножают на показатель диуреза.
Индикатор феноловый красный, выпускаемый L11осткинским заводом химических реактивов, в воде растворяется плохо. Для приготовления 1% раствора краски следует использовать 0,5% раствор двууглекислого натрия (пищевую соду). Как следует из описания методики, проба с феноловым красным сопровождается введением животным значительного количества жидкости. Поэтому наблюдение за диурезом в процессе осуществления этой пробы позволяет также судить о действии изучаемых токсических веществ на лабильность водовыделительной функции почек.
ЛИТЕРАТУРА. 1. Брюханов В. М., Фоменко Г. Ф. — В кн.: Регуляция функции почек и водносолевого обмена. Вып. 2. Барнаул, 1969, с. 141—145. — ULI у м с к а я Н. И., Карамзина H. М. — В кн.: Методы определения токсичности и опасности химических веществ. М., 1970, с. 199—209. — В а г с 1 а у J. A., Cooke W. T., de M и г а 1 t G. — «Acta med. scand.», 1950, v. 136, p. 267—274. — Eggeton M. G., Habib Y. A. — cj. Physiol. (Lond.)», 1950, v. 110, p. 458—467. — G о I d г i n g W., Chasis H., Ranges H. A. et a. — cj. clin. Invest.», 1940, v. 19, p. 739—750. — Pitts R. F. Physiology of the Kidney and Body Fluids. Chicago, 1963, p. 116—130. — S h a n n о n J. A. — «Am. J. Physiol.», 1935, v. 113, p. 602—606,— Sheehan H. L. — «J. Physiol. (Lond.)», 1936, v. 87, p. 237—243.
Поступила 2/XI 1976 r.
Таблица 2
Растворы фенолового красного для калибровочного графика
№ пробы 1% раствор, мл Дистиллированная вода, мл Феноловый красный, мг
1 1.0 До 25 10
2 0,5 » 25 5
•3 0,4 » 25 4
4 0,3 » 25 3
5 0,2 » 25 2
6 0,1 » 25 1
7 0,05 i 25 0,5
УДК 613.481
Канд. хим. наук В. М. Мельник, канд. мед. наук И. М. Науменко, В. С. Рожко, проф. Д. М. Карпинос, акад. АН УССР Я. Я. Францевич
АВТОМАТИЧЕСКОЕ РЕГУЛИРОВАНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ ПОДОДЕЖНОГО
ПРОСТРАНСТВА
Исследования показали, что электрический обогрев мощностью 60 Вт (комплекс «Пингвин» в сочетании с ватной спецодеждой) при температуре окружающего воздуха —5°С поддерживал под одеждой испытуемого, находящегося в состоянии покоя (энергозатраты 150 ккал/ч), температуру 34,8±0,9°С. При затратах энергии 270 ккал/ч температура под одеждой возрастала на 6,3°С. Для предотвращения перегревания организма электрический обогрев необходимо было отключать. При температуре окружающего воздуха •—10°С температура под одеждой в покое составляла 33,1± ±1,1°С, при работе — 38,6±1,7°С. Аналогичны показатели при использовании тотального обогрева (костюм модели 900, мощность 220 Вт), причем отключать костюм при температуре воздуха —5-=--25°С следует значительно чаще.
Чтобы обеспечить термостатирование пододежного пространства независимо от температуры окружающего воздуха и интенсивности выпол-