CC BY
6
4—5 смен перитонеальной жидкости по сравнению с контрольными животными не наблюдалось. Это можно объяснить постоянным всасыванием его из желудочно-кишечного тракта вследствие снятия интоксикации (выход из комы, уменьшение саливации и бронхореи и т. д.) и улучшением микроциркуляции. Средний клиренс ПД у кроликов составлял 4±0,3 мл/мин, у собак — 8,9±0,5 мл/мин. Концентрация хлорофоса в перитонеальной жидкости у кроликов и собак была примерно одинаковой — от 10 до 15 мг%. Разницу в клиренсах можно объяснить тем, что собакам вводили больший (1 л) объем жидкости, чем кроликам (400 мл).
ГД у собак позволял вывести от 0,8 до 1,5 г хлорофоса и снизить концентрацию его в крови на 20—25% по сравнению с исходной, заметно уменьшая клинику интоксикации. Средний клиренс составлял 42±2,5 мл/мин.
Наиболее выраженным клиническим эффектом обладает ГС активированным углем СКТ-6, который давал возможность за 2 ч гемоперфузии двумя колонками по 1 ч снизить концентрацию хлорофоса в крови на 30—40% и вывести из нее от 1,5 до 2,2 г. Средний клиренс составлял 92,4±3,2 мл/мин. В процессе проведения гемоперфузии через колонки с углем на 20—30-й минуте отмечалось явное улучшение состояния подопытных животных: полностью исчезали бронхорея, гиперсаливация, уменьшались миофибрилляции и др. При проведении ГС у собак не возникала необходимость в консервативном специфическом лечении.
Сравнивая указанные методы ускоренного выведения хлорофоса- 32Р из организма животных в наших исследованиях, можно заметить, что все методы способствуют активному выведению хлорофоса, но эффективность их различна. Наиболее действенной оказалась ГС непокрытым активированным углем СКТ-6 (клиренс был равен 92,4±3,2 мл/мин), а наименее эффективным — ПД (клиренс у собак составлял 8,9±0,5 мл/мин).
Таким образом, полученные экспериментальные данные по применению методов ускоренного выведения при пероральной затравке хлорофосом-32Р животных позволяют рекомендовать эти методы для использования в клинической практике.
Поступила 1/11 1977 г.
УДК 615.8:678.7].032.3
Канд. биол. наук В. И. Антонова, 3. А. Салмина
СОСТОЯНИЕ ФУНКЦИИ ВОСПРОИЗВЕДЕНИЯ ПОТОМСТВА ПРИ ЭНТЕРАЛЬНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ПОЛИЭТИЛЕНПОЛИАМИНА
Полиэтиленполиамин (ПЭПА) широко используется в народном хозяйстве, в частности, в производстве ионообменных смол и синтетического каучука, в качестве отвердителя лаков, битумов и эпоксидных смол. Последние рекомендуются для покрытия резервуаров (хранение соков и вина) и водопроводных труб.
В условиях 6-месячного хронического эксперимента нами изучено влияние ПЭПА на генеративную функцию животных (самцов и самок), а также на развитие их потомства при энтеральном введении водных растворов вещества. Испытывали дозы ПЭПА 0,25 (1-я группа), 0,025 (2-я группа), 0,0025 (3-я группа) и 0,00025 мг/кг (4-я группа), при суточном водопотреб-лении соответствующие концентрациям 5, 0,5, 0,05 и 0,005 мг/л.
Функциональное состояние яичников крыс-самок оценивали по методике О. Н. Елизаровой и соавт., вычисляли частоту появления каждой стадии эстрального цикла, продолжительность всего цикла и число самок с нормальным циклом. У крыс-самцов определяли время активного движения сперматозоидов по методике В. К. Милованова в модификации Г. М. Егоровой и соавт. Одновременно измеряли вес и длину семенников.
Таблица 1
Изменение состояния астрального цикла у самок под влиянием ПЭПА
Число животных,, в опыте Частота появления стадии, % Продолжительность цикла, дни Число самок с нормальный циклом
Условия опыта Группа к доза, мг/кг Общее число проб диэструс проэструс эструс метаэструс
Контроль 12 144 38,1 ±2,5 21,6+1,2 23,8 ±1,6 15,7±0,8 4,8±0,1 12
До введения ПЭПЛ 1-я 2-я 3-я 4-я 11 11 11 11 132 132 132 132 44,6+3,9 38,8+2,0 36,4+1,8 40,2+1,3 19,3+1,9 21,6+1,4 23,2+2,0 20,7±1,0 22,6+3,9 23,2±3,1 25,5+1,2 23,9±2,0 12,8+1,5 16,4+1,8 14,9±1,3 15,2±1,1 5,3+0,7 5,1+0,5 4,9+0,3 5,0±0,9 11 11 11 11
Контроль 12 180 36,1+1,3 22,6+1,6 22,2±1,6 18,6±1,8 5,0+0,2 12
2 мес введения ПЭПЛ 1-я 2-я 3-я 4-я 11 11 11 11 165 165 165 165 49,7+2,7» 62,9+5,4* 55,4+4,5* 40,5±3,1 15,8+1,4* 10,8+2,0* 14,6+1,5* 22,6±2,6 23,6+2,0 20,0+1,6 22,2±1,5 22,0±2,0 10,9+2,0* 6,3+1,3* 7,5+1,1* 14,6±1,3 5,1+0,1 7,8+0,9* 5,4+0,5 5,1 ±0,3 6 4 8 10
Контроль 12 180 36,6+2,0 22,6+1,0 22,0±1,2 18,6±1,2 5,1 ±0,3 11
6 мес введения ПЭПА 1-я 2-я 3-я 4-я 10 11 10 11 150 165 150 165 66,0+6,0* 83,6+4,0* 52,0±4,6* 38,6+3,1 11,3+2,0* 3,6+2,0* 17,3+2,0* 24,2+1,4 18,6+1,2 9,2+2,6* 27,3+4,6 20,6+2,6 4,1 ±2,0* 3,6+1,3* 3,3+1,3* 16,6+2,2 8,5+0,9* 10,3+0,9* 6,0+0,4 5,2+0,4 5 2 5 10
Примечание. Звездочка — различия достоверны (Р<0,05—0,01).
Таблица 2
Показатели репродуктивной функции крыс-самок после хронического воздействия ПЭПА (М±т)
Группа и доза, мг/кг
Условия опыта Показатель контроль 1-я 2-я 3-я 4-я
Отсутствие беременности Число желтых тел на 1 самку Число погибших яйцеклеток до имплантации на 1 самку Число погибших зародышей после имплантации на 1 самку Процент смертности эмбрионов Число плодов на 1 самку Вес 21-дневного эмбриона, г 3 3 6 8 5
Умерщвление на 21-й день беременности 16 (18,7) 13,0+0,90 0,42±0,18 0,28+0,10 5,3 12.3+0,69 3,71+0,10 13 (23,0) 11,0+0,48 2,54+0,58* 0,66+0,20 29,0* 7,8+1,53* 4,00+0,15 16 (37,5) 14,0+1.02 0,40±0,24 5,10+1,24* 39,2* 8,5+0,50* 3,87+0,90 16(50,0) 10.0+0,70* 1,50±0,60* 3,50+0,50* 50,0* 5,0+0,80* 4,16+0,30 16 (31,0) 12,0+1,10 0,16±0,10 0,25+0,12 3,4 11,9+0,70 3,90+0,30
Естественные роды Процент самок, не давших потомства Число новорожденных на 1 самку Вес новорожденного, г Процент крысят, погибших за 1 мес 20,0 7,8+1,45 7,2+0,24 0 40,0 7,0+1,69 5,6+0,19* 10,0 30,0 11,6+1,36* 6,2+0,34* 64,0 50,0 6,6+1,36 5,5+0,43* 25,0 30,0 7,0+1,39 7,0+0,20 0
Примечание. Звездочка — различия достоверны (Р<0,05—0,01); числитель —отсутствие беременности; знаменатель — число оплодотворенных самок; в скобках — процент прохолостов.
По истечении б мес животных спаривали и оценивали их репродуктивную функцию по методам, рекомендованным «Методическими указаниями по установлению порогов действия промышленных ядов на генеративную функцию» (1969). В период беременности самки продолжали подвергаться воздействию ПЭПА. Способность к зачатию оценивали по отношению числа забеременивших к общему числу оплодотворенных крыс. Часть беременных использовали для изучения полноценности потомства. У них учитывали число рожденных крысят, общее состояние, вес в постнаталь-ном периоде и гибель.
Установленные пороговые дозы ПЭПА в хроническом опыте по влиянию на функцию гонад самцов (0,25 мг/кг) и гонад самок (0,0025 мг/кг) указывают на большую чувствительность к веществу самок.
У крыс-самок первых трех групп уже через 3 мес ежедневного введения ПЭПА увеличивалась продолжительность стадии диэструса и сокращалась частота появления проэструса и метаэструса. Значительно возрастала длительность астрального цикла (у отдельных животных она возрастала с 5 до 12 дней) и уменьшалось число самок с нормальным циклом (табл. 1).
У крыс-самцов время активного движения сперматозоидов изменялось лишь после 6-месячной затравки и только у группы, получавшей наибольшую дозу вещества (в подопытной группе длительность движения сперматозоидов 241±18,3 мин при 319±24,6 мин в контроле). Изменений других показателей не зарегистрировано.
В хроническом опыте у спаренных животных, получавших одну и ту же дозу ПЭПА, страдала способность к зачатию (табл. 2). Как видно из табл. 2, у оплодотворенных крыс при естественных родах или при умерщвлении на 21-й день беременности процент самок, не давших потомства, был значительно выше, чем в контрольной группе.
Затравка оплодотворенных крыс ПЭПА также сказывается на течении беременности, внутриутробном и постнатальном развитии крысят.
У умерщвленных беременных самок 1, 2 и 3-й групп установлен большой процент гибели зародышей на разных стадиях развития. При действии ПЭПА наибольшая гибель оплодотворенных яйцеклеток в 1-й группе крыс отмечалась до момента их имплантации, во 2-й •— после имплантации, а в 3-й группе — как в раннюю, так и позднюю стадию развития эмбрионов. Высокая смертность зародышей явилась причиной уменьшения численности плодов в помете (см. табл. 2).
После естественных родов в подопытных группах в первые 2—3 нед после рождения была зарегистрирована гибель значительной части потомства. Новорожденные крысята были меньшего веса, эти различия (25—30%) с контролем сохранились на протяжении 2 мес наблюдения.
Таким образом, ПЭПА при ежедневном поступлении в организм с водой в дозах 0,25, 0,025 и 0,0025 мг/кг, при суточном водопотреблении соответствующим концентрациям 5,0,5 и 0,005 мг/л, которые имеютместо при миграции из покрытий водопроводных труб, оказывает вредное влияние не только на гонады крыс-самцов (В. О. Шефтель и соавт.), но и крыс-самок, а также на репродуктивную функцию животных и эмбриональное и постнатальное развитие потомства.
Причинами возникновения сдвигов в эстральном цикле самок можно считать как непосредственное влияние вещества на гонады, так и возможное нарушение гормонального равновесия. Прерывание беременности и рождение ослабленного потомства, по-видимому, связано не только с действием вещества на развивающийся плод, но и обусловлено общетоксическим действием ПЭПА на беременную самку. На изученных уровнях воздействия у самцов и самок крыс отмечены достоверные изменения со стороны периферической крови и некоторых показателей функции печени. Наряду с этим развившиеся структурные воспалительно-пролифератив-ные изменения в слизистой оболочке желудка и нарушения активности ферментов, локализованных на поверхности слизистой оболочки тонкого
кишечника, свидетельствуют о местном влиянии ПЭПА в этих дозах (3. А. Салмина).
По всем изученным показателям, в том числе по влиянию на гонады, генеративную функцию и развитие потомства, недействующей оказалась доза ПЭПА 0,00025 мг/кг, при суточном водопотреблении соответствующая концентрации 0,005 мг/л.
ЛИТЕРАТУРА. Егорова Г. М., Иванов Н. Г., Саноцкий И. В. — В кн.: Токсикология новых промышленных химических веществ. Вып. 8. М., 1966, с. 33— 36. — Елизарова О. Н., Рязанова Р. А., Булгакова И. А. и др. — В кн.: Методики санитарно-токсикологического эксперимента. М., 1968, с. 49—59. — Салмина 3. А. — «Труды Ленинградского сан.-гиг. мед. ин-та», 1975, т. 111, с. 85— 88. — Шефтель В. О., Цендровская В. А. — «Гиг. и сан.», 1974, №10, с. 66—69. —Шефтель В. О., Ц а м. 3. С., К а л и н и ч е н к о Л. Г. — Там же, № 12, с. 81—82.
Поступила 30/VIII 1976 г.
УДК 612.46-087.6
Кандидаты мед. наук А. А. Ефременко и Б. Я- Варшавский
МОДИФИКАЦИЯ ПРОБЫ С ФЕНОЛОВЫМ КРАСНЫМ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПОЧЕК У КРЫС
Научно-исследовательский институт гигиены морского транспорта, Ленинград
В настоящее время при гигиенических исследованиях для оценки секреторной способности \почечных канальцев широко используется проба с феноловым красным в модификации Н. И. Шуйской и H. М. Карамзиной. Ее авторы предусматривают введение крысам небольшой (1—2 мг) дозы этого вещества. В литературе имеется указание на необходимость применения в опытах на крысах более высоких доз секретируемого вещества (В. М. Брюханов и Г. Ф. Фоменко), однако экспериментальное обоснование доз и описание методики не приводятся. Между тем плохая растворимость фенолового красного в воде является серьезным препятствием к увеличению его дозы в опытах на животных. Использование же в санитар-но-токсикологических исследованиях небольшого количества значительно снижает ценность пробы с феноловым красным, так как при невысокой концентрации секретируемого вещества в крови нагрузка на клетки ка-нальцевого эпителия может оказаться меньше той, которая вызывает полное насыщение секреторной системы почек. С другой стороны, превышение определенного уровня содержания в крови секретируемого вещества может обусловить самодепрессию процесса секреции (Barclay и соавт. ; Eggeton и Habib; Pitts). Следует особо отметить, что достижение полного насыщения секреторной системы почек является чрезвычайно существенным требованием для изучения секреторной функции почечных канал! цев в токсико-гигиенических исследованиях. В противном случае нагрузка на клетки канальцевого эпителия может оказаться меньше той, с которой в состоянии справиться уже имеющая повреждение секреторная система почек, и действия токсического агента (если оно затрагивает секреторно-транспортную систему почек) не будет выявлено.
Исходя из высказанных положений, мы поставили задачу определить оптимальную для изучения секреторной способности почек в условиях санитарно-токсикологического эксперимента дозу вводимого фенолового красного. Для этого на белых крысах-самцах весом 190—210 г прослежено выведение его с мочой. Сначала животным через желудочный зонд давали воду в количестве 2% от массы тела и сразу же вводили внутрибрюшинно феноловый красный в определенной дозе (табл. 1). Животных на 2 ч сажали в клетки, приспособленные для сбора мочи, и в собранных порциях оп-
