CC BY
253. Efficiency of AL-5 antidote at sharp poisonings with synthetic pyrethroids / R.M. Aslanov, R.D. Gareyev, A.G. Malanyeva - Text: direct//Veterinarian. - 2010. - No. 6. - Page 12-14.
4. Hematologic and biochemical indicators of rats at sharp intoxication cyanopyrethroids / K.F. Halikova, A.V. Malanyev, G.R. Yamalova, etc. - Text: direct // Scientific notes of the Kazan state academy of veterinary medicine of N.E. Bauman. - 2019. - T. 239. - No. 3. - Page 223-226.
5. Improvement of a technique of determination of level of an imidakloprid in sterns by method of a highly effective liquid chromatography / D.D.Khayrullin., G.R. Yamalova, K.F. Halikova, etc. -Text: direct // Scientific notes of the Kazan state academy of veterinary medicine of N.E. Bauman. -2017. - No. 3. - Page 154-156.
6. Patomorfologichesky researches of bodies of rats at poisoning tiaklopridy and use of remedies / V.I. Egorov, K.F. Halikova, D.V. Aleev, G.R. Yamalova, E.G. Gubeeva -Text: direct // Veterinarian. - 2017. - No. 3. - Page 35-39.
7. Studying of cytotoxic influence of synthetic in vitro pyrethroids / A.G. Malanyeva, A.V. Malanyev, V.I. Egorov, etc. - Text: direct // Russian magazine of the Problem of veterinary sanitation, hygiene and ecology. - 2015. - No. 2 (14). - Page 92-95.
8. Biomonitoring of the hematological, biochemical and genotoxic effects of the mixture Cypermethrin plus chlorpyrifos applications in bovines / D.M. Ferré et al. - Text: direct // Science of The Total Environment. - 2020. - P. 138058.
9. Cellular Mechanism involved in cypermethrin induced neurotoxicity / H.F. Ali - Text: direct // Records of Pharmaceutical and Biomedical Sciences. - 2020. - T.4. - №. 1. - P. 32-39.
10. Changes in some hematological and biochemical indices of rabbits induced by isoflavones and cypermethrin / M.I. Yousef et al - Text: direct // Toxicology. - 2003. - T. 189. - №. 3. -P. 223-234.
11. Cypermethrin-induced reproductive toxicity in the rat is prevented by resveratrol / P. Sharma, A. U. Huq, R. Singh - Text: direct // Journal of human reproductive sciences. - 2014. - T. 7. -№. 2. - P. 99.
12. Detection of cypermethrin residues in toxicological control objects using gas chromatography-mass spectrometry with solid-phase extraction / I. M. Fitsev, O. V. Shlyamina, A. R. Makaeva, G. R. Nasybullina, A. M. Saifutdinov - Text: direct // IJMPRED. - 2020. - V. 10 (3). - P. 5563-5570.
13. Effect of a beta-cypermethrin and emamectin benzoate pesticide mixture on reproductive toxicity in male mice in a greenhouse environment / Y. Zhang , C. Kong, H. Chi et al. -Text: direct // Toxicology Mechanisms and Methods. - 2020. - №. 30. - P. 100-106.
14. Protective role of isoflavones against the toxic effect of cypermethrin on semen quality and testosterone levels of rabbits / M.I. Yousef, F.M. El-Demerdash, K.S. Al-Salhen - Text: direct // Journal of environmental science and health, part B. - 2003. - T. 38. - №. 4. - P. 463-478.
15. Toxic effect of alpha cypermethrin, an environmental pollutant, on myocardial tissue in male wistar rats / L. Ghazouani et al. - Text: direct // Environmental Science and Pollution Research. -2020. - T. 27. - №. 6. - P. 5709-5717.
УДК 582.28:615.9:636.084:619.579 DOI 10.33632/1998-698Х.2020-5-53-58
МИКРОМИЦЕТЫ СПОСОБСТВУЮЩИЕ ВОЗНИКНОВЕНИЮ ГНОЙНО-НЕКРОТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ КОПЫТЕЦ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Потехина Р.М. - кандидат биологических наук, Хузин Д.А. - доктор ветеринарных наук, Макаев Х.Н. - доктор ветеринарных наук, профессор, Семенов Э.И. - кандидат биологических наук
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», (420075, г. Казань, Научный городок-2, e-mail: [email protected]).
Гнойно-некротические поражения дистальной части конечностей крупного рогатого скота различной степени тяжести возникают вследствии травмирования кожного покрова с последующей контаминацией пораженного участка гноеродными бактериями и микромицетами различных грибов, усугубляющими воспалительный процесс, являются одной из причин снижения продуктивности и устойчивости организма скота к инфекционным болезням. В статье представлены результаты бактериологических и микологических исследований материалов из пораженных участков дистальной части конечностей крупного рогатого скота, проб кормов для животных и почвы с территории животноводческих ферм доставленных из сельхозпредприятий Республики Татарстан, Ставропольского края и Нижегородской области, где регистрировали 30-40% животных с признаками поражения конечностей. Лабораторными исследованиями материала с пораженных конечностей, проб кормов и почвы из обследованных сельхозпредприятий, наряду с возбудителем некробактериоза F.necrophorum выделены стрептококки, стафилококки и микромицеты различных грибов. Изучены патогенность и вирулентность выделенных бактерий, токсигенные свойства изолятов грибов и их роль в возникновении и распространении поражений конечностей скота. На основании полученных результатов исследований сделан вывод, что на ряду с бактериологическими исследованиями материала из пораженных конечностей крупного рогатого скота, проведение систематического мониторинга содержания микромицетов в кормах, почве позволит своевременно и эффективно проводить лечебные и профилактические мероприятия при гнойно-некротических поражениях конечностей различной этиологии.
Ключевые слова: гнойно-некротические поражения конечностей, эпизоотический процесс, бактериологический и микологический анализ биоматериала, бактерии, грибы, пробы кормов и почвы.
Промышленная технология введения скотоводства создала большие трудности, связанные с поддержанием нормального физиологического состояния животных, так как высокоудойные коровы с повышенным обменом веществ реагируют даже на незначительные нарушения условий кормления и качества кормов снижением резистентности организма. При этом проблема полиэтиологичных патологических процессов в организме животных, вызванных нарушением содержания, кормления, ветеринарно-санитарного состояния помещений, санитарного качест-ва кормов обуславливающих иммунодефи-цитное состояние животных, остается актуальным.
Согласно литературным сообщениям, наблюдениям практических специалистов и данные наших многолетних исследований показывают, что на фоне вышеуказанных факторов возникают
различные заболевания, среди которых одно из ведущих мест занимают болезни дистальной части конечностей.
Заболеваемость с признаками гнойно-некротического поражения копытец крупного рогатого скота в условиях крупных комплексов по производству молока доходит до 30-40%, при этом резко снижается продуктивность, воспроизводительные функции и в 35-50% случаях рождаются нежизнеспособные телята [4, 9].
Болезни инфекционной этиологии с признаками гнойно-некротического поражением кожи и тканей конечностей, паренхиматозных и половых органов протекают злокачественно с охватом значительного числа животных [9].
В таких случаях затруднена диагностика из-за многообразия этиологических агентов. Следовательно, только комплексными исследованиями возможно уста-
новить окончательный диагноз и устранить причины заболевания.
Цель исследования - проведение диагностических бактериологических, микологических исследований проб материала с пораженных участков пальцев и копытец (БПК) скота, проб кормов и почвы в обследованных сельхозпредприятиях Республики Татарстан, Ставропольского края и Нижегородской области.
Материал и методы. Исследования проводили в профильных лабораториях ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Исследовали витальные срезы пораженных тканей конечностей, соскобы с копытного рога, пробы кормов и почвы, доставленных из 4-х хозяйств Республики Татарстан, из 2-х хозяйств Нижегородской области и 1-го из Ставропольского края.
Бактериологические исследования 42 проб из пораженных конечностей проводили по общепринятым методикам с исполь-
зованием сред: Китта-Тароци, МПБ, МПА. Патогенные и вирулентные свойства выделенных бактерий определяли с использованием белых мышей и кроликов.
Идентификацию выделенных бакт-рий осуществляли, используя «Определитель бактерий Берджи» [6].
Микологические исследования всех 42 проб с пораженных участков дистальной части конечностей крупного рогатого скота, 16 проб кормов и 14 проб почвы проводили с использованием сред Чапека и Сабура в соответствии с источниками [3, 6, 8] и включали: определение общего числа грибов (ОЧГ), их родовую идентификацию, определение токсичности выделенных изолятов и выявление опасных видов микроскопических грибов. ОЧГ определяли методом посева серийных разведений на плотные питательные среды и последующим подсчетом суммарного количества грибов в 1 г материала по формуле:
X =
1с
0,1^! +0,01*V2 + 0,001^3
(1)
где:
Х - суммарное число грибов, выраженное количеством колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 г продукта;
Ес - сумма колоний на всех чашках, подсчитываемая в посевах всех трех последовательно разведенных взвесей;
V]- объем взвеси 1 (разведение10-1); V- объем взвеси 2 (разведение 10-2); У3 - объем взвеси 3 (разведение 10-3).
Родовую и видовую идентификацию грибов проводили с помощью специальных определителей и атласов [1, 6].
Определение токсичности кормов и выделенных культур грибов определяли на парамециях (Рагатаветт caudatum) и инфузориях, патогенность изолятов проверяли на белых мышах и кроликах, которым вводили внутрибрюшинно суспензию микромицетов. Наблюдение за животными вели в течение от 1 до 3-х суток.
Результаты исследований. Кли-нико-эпизоотологическими исследованиями
поголовья скота в обследованных хозяйствах регистрировали поражения дистальной части конечности крупного рогатого скота у 30 -35 % животных в сельхозпредприятиях Республики Татарстан и Нижегородской области и у 40% животных в хозяйстве Ставропольского края. При осмотре поголовья крупного рогатого скота были обнаружены язвы на коже межкопытной щели, венчика, ссадины и травмы в области путового сустава, у отдельных животных разрушение копытцевого рога в основном тазовых конечностей.
Рисунок 1 - Поражение копытец крупного рогатого скота
При бактериологическом и микологическом исследовании 42 проб биоматериала с пораженных участков дистальной части конечностей и соскобов с рогового башмака копытец животных 7 хозяйств из всех проб выделяли стрептококки, стафилококки, протей и микромицеты грибов рода: Aspergillus; Penicillium; Mucor и Candida. При обследовании рогового башмака копытец животных, откуда в большинстве случаев выделяли микромицеты грибов A. flavus, копытцевый рог легко крошился, а у некоторых регистрировали выпадение рогового башмака.
При подкожным введением суспензии биоматериала белым мышам в область спины и кроликам в область основания уха на месте инъекции на 3-9 сутки образовывался гнойный воспалительный очаг. При этом белые мыши погибали на 4-10 сут, а кролики 9-14 сут опыта. Из гнойно-некротического очага павших животных выделяли вышеуказанные патогенные высоковирулентные микроорганизмы. При исследовании 33 проб от животных из 5 хозяйств, кроме указанных бактерий и грибов, выделяли изоляты возбудителя некробактериоза.
При наличии в биоматериале возбудителя некробактериоза на месте инъекции суспензии на 3-5 сут регистрировали воспалительный очаг с некрозом тканей. В зависимости о пато-генности возбудителя некробактериоза белые мыши гибли на 4-7 сут, а кролики на 9-10 сут. Из очага некроза с места введения суспензии и паренхиматозных органов (с
наличием очага некроза) выделяли чистые культуры возбудителя некро-бактериоза.
При исследовании материала копытного рога коров в хозяйствах Республики Татарстан были выявлены бактерии и микромицеты Aspergillus flavus, A. niger, в Ставропольском крае превалировали грибы рода Candida sp., Penicillium sp., Aspergillus flavus и Mucor sp., в Нижегородской области грибы рода Candida sp., Penicillium cyclopium, Aspergillus flavus, Mucor sp.. В результате исследований, выделенных микромицетов, установили, что на тест-объектах 18,1% образцов показали выраженную токсичность, а 68,4% образцов слабую токсичность. На белых мышах все пробы были нетоксичными, кожная проба на кроликах была положительной с 11,3% образцами.
Следовательно, комплексными бактериологическими и микологическими исследованиями подтверждено участие различных микромицетов грибов при развитии воспалительного гнойно-некротического процесса дистальной части конечностей крупного рогатого скота. С целью определения источников попадания микромицетов грибов на кожно-волосяной покров и организм животных провели отбор и микологические исследования 28 проб кормов и 14 проб почвы из обследованных хозяйств.
Проведенные микологические
исследования показали, что 57,1% проб кормов, доставленных из хозяйств Республики Татарстан, контаминированы грибами рода Mucor, 52,4% - Aspergil-lus,42,8% - Penicillium. Проведенная видовая
идентификация грибов рода Aspergillus показала преобладание в пробах кормов A flavus (81,8%).
В кормах из хозяйств Нижегородской области преобладали изоляты рода Mucor, Penicillium, Aspergillus, в процентном соотно-шении Mucor, составил 68%, Penicillium 24%, а Aspergillus 41%.
В пробах кормов, доставленных из Ставропольского края, выделены изоляты: Mucor sp, Fusarium poe, F. graminearum, при этом полевые изоляты: Mucor- 28% Aspergillus -25% Fusarium poe 49%>.
Общее число грибов, выделенных из кормов, составляло 1,6x10? до 4,9x10s (КОЕ/г корма). В результате исследований кормов на токсичность с использованием тест-объектов (простейших) мышах и кроликов 16,9% образцов показали выраженную токсичность, 13,4% образцов - слабую токсичность.
Микромицеты Mucor sp, A. flavus, A. niger, Penicillium, дрожжевые грибы, Fusarium poe выделенные из образцов почв, взятых из всех хозяйств, были слабо токсичными.
Заключение. Учитывая результаты исследования биоматериала из пораженных конечностей сельскохозяйственных животных, кормов для животных и почвы с территорий ферм сделан вывод, что в основном микромицеты попадают на травмированные копытца с почвы, а на почву из естественных биологических выделений животных.
Таким образом, только систематическое проведение специальных ветеринарно-санитарных профилактических мероприятий, комплексных бактериологических и микологических исследований материала из пораженных конечностей животных и микологический мониторинг кормов для животных и почвы с мест выгона позволяют своевременно предотвращать угрозу развития и распространения гнойно-некротических поражений травмированных поверхностей дистальной части конечностей скота в сельхозпредприятиях.
Литература
1. Болезни пальцев и копытец у коров пути решения проблемы /Хузин, Д.А. - Текст: непосредственный // Молочная промышленность. - 2019. - №3. - С.62-63.
2. Крига, Н. Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. Т. 2: Пер. с англ. / Н. Крига и др.; под редакцией Дж. Хоулта - М.: Мир, 1997. - Т. 1 (в 2 т.) - 482 с. - Текст: непосредственный
3. Кулько, А.Б. Атлас условно - патогенных грибов рода Aspergillus возбудителей бронхолегочных инфекций / А.Б. Кулько. - М.: Новости, 2012. -155 с.
4. Литвинов, М.А. Определитель микроскопических почвенных грибов / М.А. Литвинов. - Л.: Наука, 1967. - 303 с.
5. Методические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике некробактериоза, пальцевого дерматита и болезней копытец крупного рогатого скота незаразной этиологии. - М.: ФГБНУ Росинформагротех, 2017. - 42 с. - Текст: непосредственный
6. Методические указания по выделению и количественному учету микроскопических грибов в кормах, кормовых добавках и сырье для производства кормов. Утв. 14.07.03 г. - М., 2003. - 8 с. -Текст: непосредственный
7. Микологическая оценка кормов в Республике Татарстан / Р.М. Потехина и др. - Текст: непосредственный // Ветеринарный врач. - 2019. - № 1.- С. 19-24.
8. Профилактика заболеваний копытец КРС оптимизацией кормления, ухода и содержания / Хузин, Д.А. - Текст: непосредственный // Ветеринария и кормление. - 2013. - №3. - С.24-25.
9. Этиология, патогенез и меры борьбы с некробактериозом крупного рогатого скота / Х.Н. Макаев и др. - Текст: непосредственный // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2012. - Т.209. - С.202-206.
THE MICROMYCETES PROMOTING EMERGENCE OF GNOYNO-NEKROTICHESKIH
OF DEFEATS OF HOOVES OF CATTLE
Potekhina R.M. is a Candidate of Biology; Huzin D.A. - doctor of veterinary sciences; Makayev H.N. is a doctor of veterinary sciences, professor; Semyonov E.I. - Candidate of Biology
FSBSI "Federal Center Toxicological, Radiation and Biological Safety", (420075, Kazan, Nauchny gorodok-2, e-mail: [email protected])
It is purulent - necrotic defeats of a disteel part of extremities of cattle of varying severity arise owing to traumatizing an integument with the subsequent contamination of an affected area the gnoyerodny bacteria and micromycetes of various mushrooms aggravating inflammatory process are one of the reasons of decrease in efficiency and resistance of an organism of the cattle to infectious diseases. Results of bacteriological and mycologic researches of materials from affected areas of a disteel part of extremities of cattle, tests of forages for animals and the soil from the territory of the livestock farms delivered from agricultural enterprises of the Republic of Tatarstan, Stavropol Krai and the Nizhny Novgorod Region where registered 30-40% of animals with signs of damage of extremities are presented in article. Laboratory researches of material from the affected extremities, tests offorages and the soil from the surveyed agricultural enterprises, along with the causative agent of necrobacillosis F.necrophorum allocated streptococci, staphylococcus and micromycetes of various mushrooms. The pathogenicity and virulence of the allocated bacteria, toksigenny properties of isolates of mushrooms and their role in emergence and distribution of damages of extremities of the cattle are studied. On the basis of the received results of researches the conclusion is drawn that on a row with bacteriological researches of material from the affected extremities of cattle, carrying out systematic monitoring of maintenance of micromycetes in sterns, the soil will allow to hold in due time and effectively medical and preventive events at it is purulent - necrotic damages of extremities of various etiology.
Keywords: it is purulent - necrotic damages of extremities, epizootic process, the bacteriological and mycologic analysis of biomaterial, bacteria, mushrooms, tests of forages and the soil.
References
1. Diseases of fingers and hooves at cows of a solution problem/Huzin, D.A. - The text: direct // Dairy industry. - 2019. - No. 3. - Page 62-63.
2. Kriga, N. Opredelitel of Berdzhi's bacteria. In 2 t. T. 2: The lane with English / N. Kriga, etc.; under the editorial office J. Houlta - M.: World, 1997. - T. 1 (in 2 t.) - 482 pages - the Text: direct
3. Paper bag, A.B. Atlas of opportunistic mushrooms of the sort Aspergillus of causative agents of bronchopulmonary infections / A.B. Kulko. - M.: News, 2012.-155 pages.
4. Litvinov, M.A. Opredelitel of microscopic soil mushrooms / M.A. Litvinov. - L.: Science, 1967. - 303 pages.
5. Methodical recommendations about diagnostics, treatment and prevention of necrobacillosis, manual dermatitis and diseases of hooves of cattle of a noncontagious etiology. - M.: To FGBN Rosinformagrotekh, 2017. - 42 with. - Text: direct
6. Methodical instructions on allocation and quantitative accounting of microscopic mushrooms in sterns, feed additives and raw materials for production of forages. Утв. 14.07.03 there is M., 2003. -8 pages - the Text: direct
7. Mycologic assessment of forages in the Republic of Tatarstan / R.M. Potekhina, etc. - the Text: direct//Veterinarian. - 2019. - No. 1. - Page 19-24.
8. Prevention of diseases of hooves of KRS of optimization of feeding, leaving and contents / Huzin, D.A. - Text: direct//Veterinary science and feeding. - 2013. - No. 3. - Page 24-25.
9. Etiology, pathogenesis and measures of fight against necrobacillosis of cattle / H.N. Makayev, etc. - the Text: direct // Scientific notes of the Kazan state academy of veterinary medicine of N.E. Bauman. - 2012. - T.209. - Page 202-206.
