CC BY
81Вестник защиты растений, ,3, 2006 3
УДК 632.95.024.2
МЕТОДЫ ОЦЕНКИ ДЕЙСТВИЯ ИНСЕКТИЦИДОВ НА ЧЛЕНИСТОНОГИХ Г.И.Сухорученко, В.И.Долженко, К.В.Новожилов
Всероссийский НИИ защиты растений, Санкт-Петербург
Рассматриваются различные методы изучения действия инсектицидов на вредные и полезные виды членистоногих агробиоценозов. Показано, что на современном этапе развития химического метода сохраняют свое значение стандартные лабораторные токсикологические методы исследований, но меняется математический аппарат анализа получаемых результатов. Учитывая изменения в последнее десятилетие концептуальных требований к формированию ассортимента и экотоксикологическим параметрам пестицидов нового поколения, все большее значение приобретают физиолого-биохимические, генетические и экологические методы, позволяющие оценивать изменения, происходящие в популяциях членистоногих под влиянием инсектицидов и акарицидов. Подчеркивается необходимость внесения изменений в методы полевой оценки пестицидов с учетом международных стандартов. Обсуждается перспектива компьютерного моделирования при решении ряда вопросов, связанных с изучением действия пестицидов на вредные и полезные организмы в агробиоценозах.
Химический метод защиты растений остается важным элементом современных систем управления вредными видами на обозримый период времени в результате произошедшей в течение последних десятилетий последовательной экологизации ассортимента пестицидов, способов и тактики их использования. Это стало возможным благодаря познанию закономерностей действия пестицидов на основные компоненты агроценозов (объекты борьбы, защищаемые растения, энтомофагов и опылителей, почвенную биоту) и изучению их поведения в окружающей среде с помощью токсикологических, экологических, биохимических и ряда других методов, разработанных для этих целей. Эти методы совершенствовались по мере развития представлений о взаимодействии пестицидов с различными объектами агроценозов и оснащенности не только науки по защите растений, но и связанных с ней биологических наук.
Наиболее широко при изучении инсектицидов используются стандартные токсикологические методы, позволяющие оценивать чувствительность различных видов членистоногих к токсикантам органического синтеза или микробиологического происхождения в лабораторных и полевых условиях. Прежде всего, это методы первичного скрининга вновь синтезированных соединений на биологическую активность, основанные на определении чувствительности разводимых в
лаборатории тест-объектов к набору доз изучаемых веществ при разных способах обработки (опрыскивание групп подопытных объектов или топикальное нанесение на отдельных особей, подсадка на обработанный корм и др.). Они были разработаны еще в 60 гг. прошлого столетия (Гар, 1963), достаточно стандартизированы и остаются востребованными до настоящего времени, хотя совершенствовались приемы математико-статистического анализа опытных данных, позволяющие разрабатывать математические модели смертности подопытных членистоногих с помощью компьютерной техники. Это позволяет решать вопросы, требующие выполнения большого объема исследований, например, при разработке синергистов, потенцирующих токсичность соединений, мало эффективных для отдельных видов членистоногих или теряющих эффективность препаратов из-за развития к ним резистентности. Так, использование для расчета критериев токсичности соединений регрессионного анализа с помощью компьютерной программы на основе математического пакета MathCAD позволяет определять оптимальное соотношение действующих веществ токсиканта и си-нергиста в двухкомпонентных композициях, обеспечивающих проявление необходимой смертности вредителя (Васильева, Зубанов, 2004). Например, в борьбе с резистентной к карбаматам популяцией
паутинного клеща концентрация фосфо-рорганического синергиста БД-6 должна составлять 0.0067% для получения 9095% смертности от мезурола в концентрации 0.0028%, (рис. 1).
Рис. 1. Семейство изоквант смертности обыкновенного паутинного клеща
от совместного действия мезурола (Х^ и синергиста БД-6 (Х2)
Методы полевого изучения средств борьбы с вредителями растений основаны на оценке биологической эффективности выделившихся при первичном скрининге соединений в полевых опытах или препаратов новых химических классов в отношении экономически значимых видов на различных культурах. Эти методы постоянно совершенствуются с учетом международных требований, предъявляемых к оценке пестицидов, технологий их применения, биологических особенностей новых вредных видов. В сборнике "Методические указания по регистрационным испытаниям инсектицидов, акарицидов, мол-люскоцидов и родентицидов в сельском хозяйстве" (2004) приведены 104 методики, целенаправленное использование которых позволяет проводить оценку новых средств борьбы с вредителями на 16 сельскохозяйственных культурах в различных агроклиматических зонах в сравнении с применяемыми в практике препаратами, разрабатывать регламенты их эффективного и экологически малоопасного применения (способа, сроков и кратности обработок, доз внесения, сроков ожидания и выхода для проведения работ). Сформированный с использованием этих методик ассортимент инсектицидов и ака-рицидов представлен в 2005 г. 164 препа-
Вестник защиты растений, ,3, 2006 ратами на основе 54 действующих веществ из 12 химических классов (табл. 1).
Таблица 1. Ассортимент инсектицидов и ака-рицидов, разрешенных к применению в РФ _(2005 г.)_
Химический класс Действующие вещества Препараты
Неорганические
соединения
Пиретроиды 2 6
ФОС 13 55
Карбаматы 8 42
Фенилпиразолы 3 9
Нереистоксины 1 4
Неоникотиноиды 1 1
Бензоилмочевины 4 15
Галогенпроизводные 4 4
Серосодержащие 2 2
Тетразинпроиз-
водные 2 2
Хиназолины 1 1
Бактериальные
препараты 1 1
Смесевые 7 15
препараты 5 7
Всего 54 164
Наряду с традиционными инсектицидами и акарицидами из классов ФОС и пиретроидов в него включены представители классов бензоилмочевин, фенилпи-разолов, неоникотиноидов, аналогов не-реистоксинов, микробиологических препаратов на основе продуктов жизнедеятельности актиномицетов и др. Большинство этих пестицидов используется в низких нормах расхода (0.2-0.4 кг/га), они выпускаются в более экологичных препаративных формах (концентраты суспензий, текучие пасты, воднораство-римые и воднодиспергируемые гранулы), быстро разлагаются в природной среде до нетоксичных метаболитов. Это сказалось на значительном улучшении по сравнению с началом 1990-х гг. ряда эколого-токсикологических характеристик современного ассортимента. Так, снизились значения таких важных показателей, как средневзвешенная норма расхода действующего вещества с 1.55 кг до 311 г на га и, соответственно, токсическая нагрузка (число ЛД50 пестицида для теплокровных на гектар). Изме-
Вестник защиты растений, ,3, 2006 нился класс опасности препаратов с 1.7 (опасные соединения) до 3.0 (средне-опасные соединения). Наглядно эти из-
менения иллюстрированы на примере формирования ассортимента акарицидов (табл. 2).
Таблица 2. Экотоксикологическая характеристика препаратов для борьбы с саранчовыми
Препараты
Действующее вещество
Норма расхода препара- д.в., та, кг/га г/га
ЛД50 мг/кг Токсическая (средняя ораль- нагрузка, мг ная для крыс) д.в./га ЛД50
Фосфорорганические соединения
Диметоат 1.0-2.0 400-800 307.5 1301-2602 Хлорпирифос_0.5_248_1Í9_1664
Би-58 Новый КЭ (400 г/л) Дурсбан КЭ (480 г/л)
Пиретроиды
Бета-циперметрин 0.5-0.6 25-30 172 145-174 Лямбда-цигалотрин 0.1-0.4 5-7.5_675_74-111
Кинмикс КЭ (50 г/л) Каратэ КЭ (50 г/л)
Конфидор ВК (200 г/л) Моспилан РП (200 г/л)
Неоникотиноиды Имидаклоприд 0.05-0.075 10-15 450 Ацетамиприд 0.06-0.07 12-14_181.5
22-33 66-77
Адонис КЭ (40 г/л)
Фенилпиразолы
Фипронил
0.1
4
100
40
Димилин СП (250 г/кг) Димилин ОФ-6 МС (60 г/л) для УМО
Бензоилмочевины 0.05
Дифлубензурон
0.2
12.5
>4640
3
Возможности более углубленной оценки действия пестицидов на членистоногих значительно увеличиваются с использованием таких экологических методов исследований, как К-факторный анализ смертности преимагинальных стадий их развития (Варли и др., 1978) и демографических таблиц размножения (Birch, 1948). В отличие от токсикологических методов, рассматривающих один показатель - гибель объекта от определенной дозы токсиканта на протяжении 1-3 недель, при применении сопряженных таблиц смертности-выживания на фоне применения пестицидов оцениваются такие популяционные показатели членистоногих, как длительность их пререпродуктивного периода, долевой показатель выживания, чистая скорость размножения, биотический потенциал и др. Исследования, выполненные с помощью этих методов на хлопчатнике, показали, что используемые в борьбе с хлопковой совкой инсектициды вызывают значительное угнетение всех популяционных характеристик вредителя, что сказывалось на его численности в ряде поколений после обработки (Сухорученко и др., 1987; Сухо-рученко, Викар, 1988).
Разная степень угнетения популяции хлопковой совки инсектицидами из раз-
ных химических классов (пиретроиды > тиодан > ФОС) (табл. 3) учитывалась при их включении в сезонную систему чередования пестицидов. Максимальное использование токсических свойств препаратов позволяло сокращать кратность обработок за счет отказа от применения инсектицидов против третьей генерации вредителя (Сухорученко, 1991).
Таблица 3. Демографическая характеристика популяции Heliothis armígera Hbn. с полей, обработанных и необработанных _инсектицидами_
Варианты
Генерации
Параметры популяции
R0
Т
Тиодан 2 9.32 44.5 0.0503
3* 0 0 0
Не обработано 2 37.30 33.5 0.1090
3* 51.58 41.4 0.0950
Фозалон 1 95.94 39.4 0.1168
2* 24.98 34.5 0.0935
Не обработано 1 101.40 36.3 0.1261
2* 102.71 34.2 0.1362
*Дочерняя генерация.
Учитывая возросшее экономическое значение хлопковой совки как вредителя кукурузы и других культур в СевероКавказском регионе и ЦЧЗ РФ в послед-
rm
нее десятилетие, необходимо использовать перечисленные методы исследований для анализа состояния ее популяций на разных культурах с учетом интенсивности применения средств защиты растений.
В связи с разработкой систем управления популяциями вредных видов в аг-робиоценозах, в т.ч. с использованием пестицидов, важно знать степень их опасности для полезных членистоногих. Исследования, выполненные в 1980-х гг., позволили модифицировать ряд лабораторных токсикологических методов применительно к полезным членистоногим (Зильберминц, Петрушов, 1984; Толстова и др., 1984) и на основании данных, полученных с помощью этих методов в аг-роценозах плодового сада и хлопчатника, разработать систему экспертной оценки пестицидов по показателю степени опасности для зоофагов (Новожилов, Сухору-ченко, 1997). Предлагаемая система включает в себя 4 последовательных этапа исследований в лабораторных, ла-бораторно-полевых и полевых условиях и позволяет определять степень опасности пестицида для многих видов зоофагов (кокцинеллид, хризопид, хищных клопов антокорид, мирид и набид, сир-фид и др.) в соответствии с интегральной 4-балльной оценочной шкалой (табл. 4). Такой методический подход позволил выделить из ассортимента инсектицидов конца 1980-х - начала 1990-х гг. ряд малоопасных для энтомофагов инсектицидов (гардона, золон, дилор, требон, адмирал) и акарицидов (неорон, омайт, деми-тан), перспективных для систем интегрированной защиты различных культур. Например, оценка инсектицидов, применяемых в борьбе с табачной белокрылкой на хлопчатнике в Туркмении в 1990-х гг., показала (Сухорученко и др., 1997), что к
Вестник защиты растений, ,3, 2006 числу малоопасных препаратов может быть отнесен адмирал, среднеопасных -пегас и опасных - данитол (табл. 5). В современном ассортименте малой опасностью для хищного клеща фитосейулюса характеризуются неоникотиноиды кон-фидор и актара, авермектины и спиносин спинТор, что позволяет сочетать их с выпуском акарифага в единой системе обработок культур закрытого грунта против тлей, трипсов и обыкновенного паутинного клеща (Долженко и др., 2004, 2004а).
Таблица 4. Шкалы степени опасности пестицидов для полезных членистоногих на разных _этапах оценки_
Показатели
Шкала опасности
Балл
Степень
Лабораторная оценка
Уровень смертности после обработки производственной концентрацией до 10% 1 Не опасен
11-50% 2 Малоопасен
51-70% 4 Среднеопасен
больше 70% 8 Опасен
Число СК50 пестицида для зоофага на га 0.001-1 1 Не опасен 1.001-10 2 Малоопасен 10.001-100 4 Среднеопасен больше 100_8_Опасен
Лабораторно-полевая оценка
Уровень смертности после подсадки на растения, обработанные производственной концентрацией пестицида до 10% за 3-е суток 1 Не опасен
11-20% за 7 суток 2 Малоопасен
21-50% за 14 суток 4 Среднеопасен
> 50% за 21 сутки 8 Опасен
Производственная оценка
Скорость восстановления энтомофагом исходной численности за 7 дней 1 Не опасен
за 14 дней 2 Малоопасен
за 15-21 дней 4 Среднеопасен
за 28 дней 8 Опасен
Таблица 5. Степень опасности инсектицидов, рекомендованных в борьбе с вредителями на хлопчатнике, для теплокровных и энтомофагов
Инсектициды Число СК50 для зоофагов на га и балл опасности Число дней для восстановления зоофагами численности после обработки и балл опасности Сумма оценочных баллов* по 2 показателям
Адмирал 100 КЭ 1 (1 балл*) 7 (1 балл) 2
Данитол 100 КЭ 479 (8 балл) 28 (8 балл) 16
Пегас 500 СК 4 (2 балла) 17 (4 балла) 6
*2 балла - не опасен, 3-4 - малоопасен, 5-8 - среднеопасен, 9-16 баллов - опасен (табл. 4).
Вестник защиты растений, ,3, 2006
Обязательным условием эффективного и экологически малоопасного применения пестицидов является своевременное выявление темпов и направленности микроэволюционных преобразований популяций членистоногих под влиянием пестицидов, примером которых является резистентность. Методы мониторинга резистентности членистоногих к пестицидам базируются на представлении о том, что для популяций любого вида живых организмов характерна внутрипопуляци-онная генетическая изменчивость или полиморфизм. Она проявляется в ряде четко различимых дискретных (качественных) морфологических (морфотип), физиологических (экотип), биохимических (хемотип) или белковых (протеотип) аспектов фенотипа и отражает внутривидовую морфогенетическую дифференциацию, которая представляет собой выработанный в эволюции механизм адаптации к меняющимся условиям среды (Конарев, 2001).
В связи с этим для мониторинга резистентности используют различные фено-генетические методы, среди которых наибольшее признание в мире получили токсикологические методы, позволяющие определять изменения степени чувствительности членистоногих к токсикантам в зависимости от соотношения в их популяциях особей резистентных и чувствительных генотипов. Эти методы очень информативны и позволяют определять ряд параметров резистентности, для вычисления которых в мировой практике широко используют методы пробит-анализа различной степени сложности, позволяющие анализировать данные токсикологических опытов. Наиболее доступный из них - графический метод про-бит-анализа Миллера-Тейнтера, при использовании которого на оси абсцисс прямоугольной системы координат откладывают логарифмы использованных в опыте концентраций препарата, а на оси ординат - смертность объекта в виде условных единиц "пробитов" (Мониторинг резистентности..., 2004). Далее строят график (рис. 2), с помощью которого определяют такие универсальные парамет-
7
ры резистентности, как СК50 и СК95 (концентрации токсикантов, вызывающие 50 и 95% смертность особей данной популяции), "диагностическая концентрация" (ДК) и показатель резистентности (ПР). Рис. 2. Схема графического определения ос-
новных параметров резистентности ДК - концентрация препарата для диагностики числа устойчивых особей в популяции (равна 2СК.95 для чувствительной популяции); Р-уровень наклона линии смертности - показатель гетерогенности популяции = а3-а1 = а4-а2
Диагностическая концентрация (ДК) препарата подбирается с таким расчетом, чтобы обеспечить 100% гибель особей природной чувствительности, и она в два раза превышает определенное в опыте значение СК95. Все особи, выжившие после такой обработки, считаются потенциально резистентными. Применение ДК позволяет обнаружить таких особей задолго до того, как они накопятся в количестве, вызывающем сдвиг среднего уровня резистентности популяции (величины СК50).
Важным показателем развития резистентности является угол наклона про-бит-линии. Чем он меньше, тем горизонтальнее лежит линия гибели, тем больший диапазон концентраций она захватывает и тем гетерогеннее популяция по признаку резистентности. Уменьшение угла наклона линии регрессии анализируемой популяции по сравнению с этим показателем для чувствительной популяции и смещение прямой к оси абсцисс свидетельствуют о направленности процесса в популяции в сторону развития
резистентности к изучаемому токсиканту.
Определение ПР вредителя к какому-либо пестициду целесообразно проводить в том случае, когда в тестируемой выборке с помощью ДК обнаружено не менее 20% резистентных к нему особей, так как меньшая их доля мало сказывается на среднем уровне резистентности популяции или величине СК5о. Эту величину, как и величину СК95, определяют в серийном токсикологическом опыте, в основе которого лежит изучение реакции вредителя на серию концентраций какого-либо пестицида от минимальной, вызывающей гибель 5-10% нормальных чувствительных особей до максимальной, при использовании которой гибнет 90% особей и более. ПР характеризуется отношением CK5o чувствительной (необрабатываемой) популяции к CK5o исследуемой популяции. Однако установленное значение ПР само по себе не содержит информации о целесообразности применения инсектицида в производственных условиях, так как не ясно, насколько снижается эффективность при данной его величине. Более информативен в этом отношении индекс токсичности (ИТ) - показатель различия значений СК95 инсектицида с его производственной концентрацией (ПК). В тех случаях, когда ИТ меньше 1, препарат можно использовать в системе защиты культуры, если он превышает 1, то использование препарата следует прекратить.
Другая, более сложная и точная обработка данных токсикологических исследований может быть проведена методом пробит-анализа по Финни (Finney, 1947) с использованием разработанных компьютерных моделей (Долженко и др., 2002; Васильева, Зубанов, 2004).
В настоящее время в нашей стране издано 37 стандартных токсикологических методик выявления резистентности в популяциях насекомых и клещей, которые позволяют получать в сжатые сроки информацию о чувствительности или развитии резистентности у членистоногих к применяемым препаратам в пределах одного хозяйства, района или зоны возделывания той или иной культу-
Вестник защиты растений, ,3, 2006 ры (Мониторинг резистентности..., 2004).
Познание биохимических и молеку-лярно-генетических основ резистентности позволило разработать в последние годы методы индикации не просто частоты встречаемости резистентных генотипов, а хемотипов, то есть генотипов с определенными биохимическими механизмами изменчивости (амплифицированная карбоксилэстераза, измененная мишень действия, kdr-фактор), являющихся маркерами резистентности у персиковой тли Myzus persicae Shulz. (Field, Foster, 2002; Foster et al., 2002) и ряда других вредителей. В лаборатории экотоксико-логии ВИЗР разработан электрофорети-ческий метод выявления резистентных хемотипов обыкновенного паутинного клеща, основанный на определении в электрофоретическом спектре эстераз-ных фракций самок резистентных к ака-рицидам линий высокоактивной фракции карбоксилэстеразы Е4, по сравнению с самками чувствительных линий (Сундуков, Тулаева, 2005).
Предлагается также использовать в качестве диагностирующего признака ДНК-маркеры, то есть протеотипы, для мониторинга резистентности в популяциях членистоногих. Например, такие методы разрабатываются для мониторинга резистентности к инсектицидам, в частности к пиретроидам, в популяциях колорадского жука (Hawthorn, 2001; Киль, Гронин, 2005). Однако эти методы требуют определенных знаний и навыков в исследовании резистентности, а также соответствующей технической оснащенности.
В связи с возросшим антропогенным воздействием на агроэкосистемы в популяциях многих видов членистоногих, особенно адвентивных, активно протекают микроэволюционные процессы. Отслеживание этих процессов важно для разработки экологически малоопасной защиты растений. Для изучения этих преобразований в популяциях видов, обладающих выраженным популяционным полиморфизмом по внешним морфологическим признакам отдельных особей (колорадский жук, вредная черепашка), предлагается использовать морфофенетические
Вестник защиты растений, 3, 2006 визуальные методы (Вилкова и др., 2004, 2005; Фасулати, 2005). Так, сравнительный анализ фенотипической структуры популяций колорадского жука из разных точек его ареала проводят путем определения в выборках имаго частоты встречаемости каждой из 9 морф, отличающихся типами рисунка переднеспинки (Фасулати, 1985, 1987) (рис. 3) и вычисляют долю (%) каждой морфы в выборке.
ЛРИЗНАКИ (ФЕНЫ): Пятна А иВ слиты -- фен А8 Несимметричный рисунок -- фен (АВ) Пятна А и В отделены - фен В
Точка Р ярко выражена -- фен Р т 1Г 2 • V * 3
Точка Р слабо выражена -- фен (Р) 1Г <р) * х 4 1ПГ * * 5 * V СР) * # 6
Точка Р нет -- фен (-) ТГ С-) № 7 ЛГ\Г # 8 V (-) Я 9
Рис. 3. Основные фенотипы рисунка центральной части переднеспинки колорадского жука (Фасулати, 1985)
При этом рядом исследователей установлено, что резистентные к инсектицидам особи маркируются 3 и, частично, 6 типами рисунка пронотума, так как увеличение частот их встречаемости в выборках коррелирует с ростом показателей резистентности к наиболее интенсивно применяемым пиретроидным и фосфорорганическим препаратам (Бень-ковская и др., 2000; Король, 2000; Васильева и др., 2002, 2005). Получены количественные показатели этого процесса. Так, увеличение в структуре популяций колорадского жука доли морфы 3 до 2040% и более по сравнению с нормой 517% и доли морфы 6 до 25%-45% (норма 20-36%) свидетельствует о формировании резистентности к инсектицидам и необходимости ограничения их использования или исключения из системы борьбы (Васильева и др., 2004).
В настоящее время в России широко дебатируется проблема использования трансгенных растений для борьбы с вре-
дителями сельскохозяйственных культур, в частности с колорадским жуком. Исследованиями показано, что В1-трансгенный картофель вызывает глубокое угнетение жизнедеятельности личинок и имаго как чувствительных, так и резистентных к пиретроидам популяций вредителя (Сухорученко и др., 2005).
В то же время установлена возможность отбора В1-трансгенным картофелем в популяциях насекомого морф имаго с 3 и 6 типами рисунка переднеспин-ки, связанных с развитием резистентности колорадского жука к пиретроидам, и одновременно выявлено снижение чувствительности к битоксибациллину в резистентных к пиретроидам популяциях колорадского жука. Эти факты свидетельствуют о возможности адаптации вредителя как к В1-трансгенному картофелю, так и микробиологическим препаратам типа битоксибациллина в полевых условиях. Специалистами ВИЗР, ВНИИФ, ВНИИБЗР и Центра "Биоинженерия" РАН подготовлены "Методические рекомендации по индикации и мониторингу процессов адаптации колорадского жука к генетически модифицированным сортам картофеля" (Павлюшин и др., 2005).
В них обобщены методы физиолого-биохимических, экологических и токсикологических исследований поведения и жизнеспособности вредителя на В1-трансгенном картофеле. Эти методы позволяют вести наблюдения и прогнозировать скорость формирования резистентных популяций колорадского жука к В1-токсину модифицированных сортов после их внедрения и широкого использования в сельскохозяйственном производстве.
В итоге необходимо отметить, что классические токсикологические методы не утрачивают своего значения при изучении действия пестицидов на членистоногих в агробиоценозах. Однако в связи с перспективами вступления России в ВТО возникает необходимость гармонизации методик полевой оценки пестицидов при регистрационных испытаниях с методиками ЕОЗР. По-видимому, придется отказаться от производственных опытов и проводить только деляночные испытания
на собственных полигонах с обязательным уничтожением получаемой на них сельскохозяйственной продукции. Более того, в будущем необходимо переходить на компьютерное моделирование, которое, возможно, заменит трудоемкие исследования по установлению регламентов применения пестицидов на сельскохозяйственных культурах. Особенно это касается оценки аналоговых препаратов известных действующих веществ.
Несомненно, роль математического
Вестник защиты растений, ,3, 2006 моделирования возрастает и в связи с необходимостью расчета экологического риска пестицидов, например, при оценке их действия на полезную биоту, процессов формирования к ним резистентности или их влияния на консортные взаимодействия в агробиоценозах. Все большее значение будет приобретать использование морфогенетических методов для изучения формообразовательных процессов у членистоногих под влиянием токсикантов разной химической природы.
Беньковская Г.В., Новицкая О.П., Леонтьева Т.Л., Николенко А.Г. Селектируемые вола-тоном фены колорадского жука. /Матер. 9-го совещания "Современное состояние проблемы резистентности вредителей, возбудителей болезней и сорняков к пестицидам в России и сопредельных странах на рубеже XXI века". СПб, 2000, с.84.
Васильева Т.И., Фасулати С.Р., Шевченко Н.М., Злотин А.З. Фенотипическая структура популяций колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say (Coleoptera: Chrysomedae) как показатель развития их резистентности к пиретроидным инсектицидам. /Тезисы докладов XII съезда Русского энтомол. общества. СПб, 2002, с.55-56.
Васильева Т.И., Зубанов Е.А. Методические рекомендации "Оценка инсектоакари-цидной и синергистической активности фос-форорганических и других химических соединений". СПб, 2004, 29 с.
Васильева Т.И., Иванова Г.П., Сухорученко Г.И., Иванов С.Г., Шевченко Н.М. Изменения фенотипической структуры популяций колорадского жука под влиянием пиретроидов и других факторов. /Матер. междунар. научно-практич. конфер. "Химический метод защиты растений. Состояние и перспектива повышения экологической безопасности". СПб, 2004, с.43-45.
Васильева Т.И., Иванова Г.П., Иванов С.Г., Зверев А.А. Изменения фенотипической структуры популяций колорадского жука от интенсивности применения инсектицидов. /Матер. Второго съезда по защите растений "Фитосанитарное оздоровление экосистем". Симпозиум "Резистентность вредных организмов к пестицидам". СПб, 2005, с.14-15.
Варли Дж.К., Градуэлл Дж.Р., Хассел М.П. Экология популяций насекомых. М., Колос, 1978, с.100-117.
Вилкова Н.А., Сухорученко Г.И., Фасулати
С.Р., Нефедова Л.И. Фенотипическая структура популяций вредной черепашки в ареале вида и особенности ее адаптивной изменчивости под влиянием антропогенных факторов. /Матер. междунар. научно-практич. конфер. "Химический метод защиты растений. Состояние и перспектива повышения экологической безопасности". СПб, 2004, с.45-48.
Вилкова Н.А., Сухорученко Г.И., Фасулати С.Р. Стратегия защиты сельскохозяйственных растений от адвентивных видов насекомых фитофагов на примере колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say (Coleoptera, Chrisomelidae. /Вестник защиты растений, 3, 2005, с.1-14.
Гар К.А. Методы испытания токсичности и эффективности инсектицидов. М., 1963, 288 с.
Долженко В.И., Махоткин А.Г., Зверев А.А., Сухорученко Г.И., Вошедский Н.Н., Ма-хоткин М.А. Региональная система мониторинга резистентности вредителей к пестицидам на примере вредной черепашки (методическое руководство). М., ФГНУ Росинформаг-ротех, 2002, 35 с.
Долженко В.И., Иванова Г.П., Буркова Л.А., Белых Е.Б. Экологически малопасные технологии применения неоникотиноидных инсектицидов на овощных культурах. /Матер. междунар. научно-практич. конфер. "Химический метод защиты растений. Состояние и перспектива повышения экологической безопасности". СПб, 2004, с.93-95.
Долженко В.И., Иванова Г.П., Кривая О.Е., Белых Е.Б., Великань В.С. Перспективы применения спинтора для защиты овощных и декоративных культур от вредителей. /Матер. международ. научно-практич. конфер. "Химический метод защиты растений. Состояние и перспектива повышения экологической безопасности". СПб, 2004а, с.95-97.
Зильберминц И.В., Петрушов А.З. Методи-
Вестник защиты растений, ,3, 2006
11
ки определения чувствительности и устойчивости энтомофагов к пестицидам. Хищные клещи. /Методические указания по определению устойчивости вредителей, болезней сельскохозяйственных культур и энтомофагов к пестицидам, М., ВАСХНИЛ, 1984, с.42-47.
Конарев В.Г. Проблемы вида и генома в эволюции и селекции. /Морфогенез и моле-кулярно-биологический анализ растений. СПб, 2001, с.232-239.
Король Т.С. Чувствительность феноморф имаго колорадского жука к инсектицидам в Киевской области. /Матер. 9-го совещания "Современное состояние проблемы резистентности вредителей, возбудителей болезней и сорняков к пестицидам в России и сопредельных странах на рубеже XXI века". СПб, 2000, с.85.
Киль В.И., Гронин В.В. Генетический полиморфизм популяций колорадского жука, различающихся чувствительностью к трансгенному картофелю. /Матер. Второго съезда по защите растений "Фитосанитарное оздоровление экосистем". Симпозиум "Резистентность вредных организмов к пестицидам". СПб, 2005, с.33-34.
Методические указания по регистрационным испытаниям инсектицидов, акарицидов, моллюскоцидов и родентицидов в сельском хозяйстве. /Ред. Долженко В.И., Сухорученко Г.И., Танского В.И., Бурова В.Н. и др., СПб, 2004, 363 с.
Мониторинг резистентности к пестицидам в популяциях вредных членистоногих (Методические указания). /Ред. Сухорученко Г.И., Долженко В.И., СПб, 2004, 129 с.
Новожилов К.В., Сухорученко Г.И. Методические принципы оценки степени опасности инсектоакарицидов для полезных членистоногих. /Тр. Всероссийского съезда по защите растений. СПб, 1997, с.281-286.
Павлюшин В.А., Вилкова Н.А., Сухоручен-ко Г.И., Фасулати С.Р., Надыкта В.Д., Исмаи-лов В.Я., Яковлева И.Н. Методические рекомендации по индикации и мониторингу процессов адаптации колорадского жука к генетически модифицированным сортам картофеля. СПб, 2005, 48 с.
Сундуков О.В., Тулаева И.А. Биохимический тест на наличие резистентности к фос-форорганическим и пиретроидным акарици-дам у обыкновенного паутинного клеща. /Матер. Второго съезда по защите растений "Фитосанитарное оздоровление экосистем". Симпозиум "Резистентность вредных организмов к пестицидам". СПб, 2005, с.60-61.
Сухорученко Г.И., Митрофанов В.В., Викар Е.В. Сравнительная оценка факторов смерт-
ности хлопковой совки на фоне инсектицидов разных химических групп. /Сб. научных трудов "Проблемы избирательности действия инсектицидов и акарицидов и ее значение в защите растений". Л., 1986, с.121-127.
Сухорученко Г.И., Викар Е.В. Влияние инсектицидов на изменчивость популяционных характеристик хлопковой совки. /Сб. научных трудов "Изменчивость насекомых вредителей в условиях научно-технического прогресса в сельском хозяйстве". Л., 1988, с.102-108.
Сухорученко Г.И. Система преодоления резистентности в популяциях вредителей хлопчатника. /Сб. научных трудов "Резистентность вредителей сельскохозяйственных культур к пестицидам и ее преодоление". М., Агропромиздат, 1991, с.140-155.
Сухорученко Г.И., Великань В.С., Миронов В.Г., Евдокарова Т.Г. Хлопковая белокрылка Bemisia tabaci Genn. (Homoptera, Alegrodidae) - новый вредитель хлопчатника в Туркмении. III. Ассортимент средств борьбы. /Энтомол. обозрение, 76, 2, 1997, с.278-289.
Толстова Ю.С., Сухорученко Г.И., Яковлева И.Н. Методики определения чувствительности и устойчивости энтомофагов к пестицидам. Хищные и паразитические насекомые. /Методические указания по определению устойчивости вредителей, болезней сельскохозяйственных культур и энтомофагов к пестицидам. М., ВАСХНИЛ, 1984, с.48-54.
Фасулати С.Р. Полиморфизм и популяци-онная структура колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say (Coleoptera: Chrysomedae) в европейкой части СССР. /Экология, 6, 1985, с.50-56.
Фасулати С.Р. Внутривидовая структура колорадского жука Leptinotarsa decemlineata Say (Coleoptera: Chrysomedae) и популяцион-но-биологические аспекты устойчивости к нему сортов картофеля. Автореф. канд. дисс. Л., 1987, 20 с.
Фасулати С.Р. Внутривидовая изменчивость и роль антропогенных факторов микроэволюции у вредной черепашки. /Матер. Второго съезда по защите растений "Фитосани-тарное оздоровление экосистем". Симпозиум "Резистентность вредных организмов к пестицидам". СПб, 2005, с.75-77.
Birch L.C. The intrinsic rate of natural increase of an insect population. /J. Anim. Ecol., 16, 1, 1948, p.15-26.
Field L.M., Foster S.P. Amplified esterase genes and their relationship with other insecticide resistance mechanism in English field populations of the aphid, Myzus percicae (Sulzer). /Pest Management Science, 58, 9, 2002, p.889-894.
Finney D.J. Probit analisis a statistical treatment of the
12
Вестник защиты растений, 3, 2006
sigmoid response curve. Cambridge Univ. Press, 1947.
Foster S.P., Harrington R., Dewar A.M., Denholm I., Devonshire A.L. Temporal and spatial dynamics of insecticide resistance in Myzus percicae (Hemiptera: Aphididae). /Pest Management Science, 58, 9, 2002,
p.895-907.
Hawthorn D.J. AFLP-based genetic linkage map of the Colorado potato beetle Leptinotarsa decemlineata: sex chromosomes and a pyrethroid resistance candidate gene. /Genetics, 158, 2001, p.695-700.
METHODS OF THE ESTIMATION OF INSECTICIDE INFLUENCE ON ARTHROPODS G.I.Sukhoruchenko, V.I.Dolzhenko, K.V.Novozhilov Standard laboratory and field toxicological research methods of the estimation of insecticide influence on arthropods keep their value at the present stage of chemical control method development, but the mathematical device of the analysis of received results changes. Considering recent changes in conceptual requirements to formation of the assortment of ecologically safe pesticides of new generation, the physiological and biochemical, genetic and ecological methods have the increasing value, allowing fuller estimation of arthropod population disturbance under the influence of chemical control means. The necessity of modification of field methods for estimation of pesticides is emphasized in view of the international standards. The prospects of computer modeling are discussed at the solving some questions regarding the study of pesticide influence on harmful and beneficial organisms in agricultural ecosystems.
