CC BY
70
Методы молекулярной цитогенетики для диагностики острого мегакариобластного лейкоза
Е.А. Матвеева1, А.Н. Казакова1, И.И. Калинина1, М.Э. Дубровина1,
Л.В. Байдун2, М.А. Масчан1, Ю.В. Ольшанская1, А.А. Масчан1
ФГБУ ФНКЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева Минздрава России, Москва;
2ФГУ«Российская детская клиническая больница» Минздрава России, Москва
Контакты: Юлия Вячеславовна Ольшанская[email protected]
Острый мегакариобластный лейкоз (ОМЛ М7) — редкое заболевание, характеризующееся плохим ответом на лечение, за исключением варианта с t(l;22) у детей до года. Цитогенетические перестройки при ОМЛМ7 отличаются высокой гетерогенностью. В нашем исследовании мы собрали случаи ОМЛМ7у детей, чтобы определить цитогенетический профиль этого заболевания. За период с сентября 2009 по март 2012 г. нами с помощью методов флуоресцентной in situ гибридизации было исследовано 20 больных ОМЛМ7. Был показан комплексный и гетерогенный характер хромосомных перестроек. Оказалось, что повторяющиеся перестройки практически отсутствуют и цитогенетические маркеры уникальны для каждого пациента. Также обнаружено явление амплификации 19р13, описанное ранее только в миелоидных клеточных линиях.
Ключевые слова: острый мегакариобластный лейкоз, FISH, амплификация, дети
Molecular cytogenetics for acute megakaryocytic leukemia diagnosis
E.A. Matveeva1, A.N. Kazakova1, I.I. Kalinina1, M.E. Dubrovina1,
L.V. Baydun2, M.A. Maschan1, Yu.V. Olshanskaya1, A.A. Maschan1
ID. Rogachev Federal Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology, Moscow;
2Russian Children Clinical Hospital, Moscow
Acute megakaryocytic leukemia (AML M7) — a rare disease characterized by poor treatment response, exceptfor t(I;22) variant in infants. Cytogenetic abnormalities in AML M7 are highly heterogeneous. We collected samples from children with AML M7 to analyze the disease cytogenetic profile. During September 2009 to March 20I2 20AML M7patients was studied using fluorescence in situ hybridization. Complex and heterogeneous chromosomal abnormalities were revealed. It was found that no recurring abnormalities and cytogenetic markers unique to each patients. Also, the I9pI3 amplification described previously only in myeloid cell lines was detected.
Key words: acute megakaryocytic leukemia, FISH, amplification, children
Введение
Острый мегакариобластный лейкоз (ОМКБЛ), М7-вариант согласно French-American-British (FAB) классификации [5] впервые был описан в 1931 г. ОМКБЛ встречается редко как у детей, так и у взрослых: по данным ВОЗ, на его долю приходится менее 5 % [22], хотя у детей частота его может достигать 14 % всех случаев острого миелобластного лейкоза (ОМЛ) [3, 12]. Среди детей с синдромом Дауна на долю М7-варианта приходится от 60 до 93 % случаев ОМЛ [13, 23]. По данным исследовательской группы госпиталя St. Jude (США), 5-летняя бессобы-тийная выживаемость больных М7-вариантом ОМЛ составляет 10 % (против 42 % при других вариантах ОМЛ) [17]. По данным других исследовательских групп, этот показатель несколько выше — 34 % [17] и 22—28 % [4]. Наиболее благоприятным прогнозом с вероятностью долгосрочной выживаемости около 70—83 % пациентов выделяются 2 группы: вариант с хромосомной транслокацией t(1;22), который встречается главным образом у детей первого года жизни, и ОМКБЛ у пациентов с синдромом Дауна [23].
Цитогенетические перестройки при ОМЛ М7 отличаются большой гетерогенностью. Транслокация t(1;22)(p13;q13) в 80 % случаев встречается у детей младше 1 года (медиана возраста — 4 мес) и является единственной перестройкой, патогномоничной для ОМЛ М7. У пациентов с синдромом Дауна t(1;22) встречается редко [6]. В образовании t(1;22)(p13;q13) участвуют гены OTT (1p13) и MAL (22p13), в результате транслокации образуется химерный ген OTT-MAL на деривате 22-й хромосомы [15].
Кроме того, как для детей, так и для взрослых пациентов характерно большое количество неповторяющихся перестроек, как численных, так и структурных. В сравнении с другими вариантами ОМЛ М7-вариант характеризуется высокой частотой сложных комплексных перестроек, достигая, по данным N. Dastugue et al., 94 %. При этом структурные перестройки, как правило, несбалансированные [8]. Среди численных аномалий самыми распространенными являются три-сомия 8, трисомия 21 и трисомия 19 [16].
В нашем исследовании мы проанализировали случаи ОМЛ М7 у детей с целью проанализировать
2 ’201 2
2 ’201 2
цитогенетический профиль этого редкого заболевания. В большинстве случаев ОМКБЛ отсутствуют повторяющиеся молекулярные маркеры, что делает невозможным использовать метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для выявления инициальных клональных перестроек с последующим контролем оценки статуса ремиссии. Поэтому на первый план выходит поиск значимых цитогенетических маркеров.
Метод стандартного кариотипирования не всегда позволяет выявить все инициальные клональные перестройки при этом варианте. Поэтому для подробного описания цитогенетических маркеров мы применили методы многоцветной гибридизации in situ (multicolor FISH, mFISH) и флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) с ДНК-зондами к известным хромосомным перестройкам.
Методы
Костный мозг или периферическая кровь для исследования были взяты до начала химиотерапии у 20 больных, которые получали лечение в различных клиниках России. Материал поступал в лабораторию через несколько часов после забора.
Цитогенетическое исследование проводили на краткосрочных (24 ч) культурах костного мозга (18 случаев) либо периферической крови (2 случая). Кариотипирование выполняли методом G-дифференциального окрашивания [21]. Запись кариотипа проводили в соответствии с Международной цитогенетической номенклатурой (ISCN 2009).
Для исследований методом FISH и mFISH использовали коммерческие зонды согласно инструкции производителей. Исследование методом mFISH проводили на метафазных пластинках с помощью набора для окраски целых хромосом XCyte 24 (MetaSystems). Исследование методом FISH проводили на интерфазных ядрах и метафазных пластинках с помощью олигонуклеотидных зондов Vysis LSI (Abbott Molecular) и MetaSystems XL (MetaSystems). Трисомию 19 и 21 выявляли с помощью зондов Vysis LSI 19p13/19q13 и Vysis LSI 21 соответственно. Перестройки гена MLL и сегмента 3q26 определяли с помощью зонда Vysis LSI MLL и MetaSystems XL EVI1 соответственно. Для выявления аномалий хромосомы 7 использовали зонды Vysis LSI EGFR, Vysis LSI D7S522/CEP7, Vysis LSI D7S486/CEP7, MetaSystems XL -7/del(7q), MetaSystems XL 7q22/7q36. Кроме того, перестройки хромосом 17 и 22 подтверждали с помощью зондов Vysis LSI p53/CEP17 и Vysis LSI EWSR1 соответственно.
Результаты
За период с сентября 2009 по март 2012 г. исследование было выполнено у 20 вновь диагностированных пациентов (13 мальчиков, 7 девочек) с ОМКБЛ в возрасте от 2 месяцев до 12 лет. Диагноз был пос-
тавлен на основании данных морфологического, цитохимического исследований и иммунофенотипиро-вания. Четверо больных были с синдромом Дауна.
Кариотипирование не удалось провести у 7 пациентов. При отсутствии митозов выполняли исследование методом FISH для выявления наиболее часто встречающихся перестроек, описанных в литературе: трисомия 19, 21 и 8, а также перестройки 22q, 7q, 3q, 11q [3, 8, 20]. В результате была подтверждена трисомия 21 у 1 пациента с синдромом Дауна и найдена трисомия 21 как единственная клональная перестройка у 1 больного без синдрома Дауна. У других 5 пациентов каких-либо цитогенетических аномалий методом FISH обнаружено не было.
Стандартное цитогенетическое исследование удалось провести в 13 случаях. В 5 из них выявлен гиперплоидный кариотип со сложными структурными перестройками (см. таблицу, случаи 3—5, 7, 8). У 2 больных определен гипоплоидный карио-тип со сложными структурными перестройками (случаи 1, 2). В 1 случае была найдена перестройка t(1;22)(p13;q13) в составе гиперплоидного клона (случай 12). У 1 больного единственной перестройкой была дополнительная хромосома 3 (случай 6). У 1 из пациентов с синдромом Дауна единственной перестройкой была конституциональная трисомия 21 (случай 11). У 3 пациентов клональных перестроек обнаружено не было (случаи 9, 10, 13). Хромосомные перестройки, найденные методом G-окрашивания, и уточненные кариотипы после применения mFISH и FISH для 13 пациентов суммированы в таблице.
В 5 случаях из 13 в кариотипе присутствовала дополнительная хромосома 19 (случаи 3, 4, 7, 8, 12). Кроме того, в 2 случаях были обнаружены дериваты хромосомы 19 (случаи 1 и 5).
В случае 5 при стандартном кариотипировании была выявлена t(10;11)(p13;q21-23) и маркерная хромосома. При FISH-исследовании с зондом Vysis LSI MLL была исключена перестройка гена MLL, а при исследовании методом mFISH был обнаружен дериват хромосомы 19, похожий на делетированную либо кольцевую хромосому 19 (рис. 1а). При дополнительном исследовании с зондом Vysis LSI 19p13/19q13 обнаружили отсутствие сигналов от 19q13, а весь маркер представлял собой материал p-плеча (регион 19р13; рис. 1б). Данное явление было расценено как амплификация 19р13.
В случае 1 при исследовании методом mFISH была заподозрена так называемая «прыгающая» транслокация ("jumping" translocation) с вовлечением хромосомы 19 (рис. 2а). С помощью зонда Vysis LSI 19p13/19q13 был подтвержден «прыгающий» характер транслокации и обнаружена амплификация участка 19p13. При сравнении результатов mFISH и FISH-исследований, выполненных на одних и тех же метафазных пластинках, было обнаружено, что во всех метафазах присутствует der(15)
Хромосомные перестройки у пациентов с ОМЛМ7
Паци- ент Возраст, мес Кариотип (G-banding) Кариотип (mFISH + FISH)
42~44,ХХ^е1(1)^22)^ег(4Ж1;4)(?^31)Д(2;5)^12-14^13), <1ег(6)(1(4;6)(?;?),-6,1(8;18)(д13;р11.2),1(8;19)(р12;р13), ^8;21)^22^11)Д(9;15;19)^13^11;р13),-14,-18. ієИ t(8;19)amp(19p13)[cp4]/ 42~44ХХ 1466814151819 42,ХХ,+де1(1)(д22),дег(4)1(1;4)(?;д31),1(2;5;19)(д12-14;д13;р13), 1 18 42 44,ХХ,-1+7+,-із,-6с-[8р2О] - ’- ’ 9, дег(6)(1(4;6)(?;?),-6,1(8;18)(д13;р11.2),1(8;21)(д22;д11), + 'таг,тс[ср20] и9;15;19)^13^11;р13),-14,-18.ієИ t(2;5;19)amp(19p13)[1]/ 43,ХХ,+ёе1(1) ^22)^ег(4)^1;4)(?^31)Д(2;5)^12-14^13), ёег(6)(1(4;6)(?;?),-6,1(8;18)(д13;р11.2),1(8;19)(д12;р13), и8;21)^22^11)Д(9;15;19)^13^11;р13),-14,-18. ієИ ^8;19) amp(19p13)[1]
44,У,-Х,1(1;3)(д?21;д?23-26),ёег(2),ёе1(4)(д?), 2 24 -7Д(7;9)?,-13,-15,-17^ег(18),+21с,+2таг[9]/ 44,УД(Х;4)(?^28)Д(Х;9)№1;р21),-7, ёег(13;15)(д21;дир13д?;р12), 2 24 44,У,-Х,ёег(2),ёе1(3)(д?),ёе1(4)(д?), -17Д(17;18)^12^21),+21с[2] -7,-15,-17,ёег(18),+21с,+таг[17]
3 11 51,ХХ,+2,+6 ог +8,+10,+19,+21, +ёег(22) 1(?4д31;22д13)[21] 51,ХХ,+2Д(4;14)(р11^31),+6, 1(7;22)(р15;Ч13),+10,+19,+21[3]
4 9 47,ХУ,-7,ёе1(8)(д22),+19,+таг(г)[35] 47,ХУ,-7, +г(р22?р12д22?) ае1(8)(Ч22),+19[10]
5 57 47,ХХД(10;11)(р13^21-23?), +таг(г?)[13]/46,ХХ[30] 47,XX,t(10;11)(p13;q21-23?),+der(19)(amp 19г13)[3]
6 12 47,ХХ,+3[8]/47,ХХ,+3,геаг^21-26)?[2] 47,ХХ,+3 [2]
7 12 50-51,ХУ,+6,+8,ёег(9),+19,+21,+таг[ср13]/ 46,ХУ[10] 50,XУ,-4,+6,+8,t(9;11;15)(р13;q23;q14),+14,+19,+21[cp4]
8 11 52,ХУ,аег(6)?ааа 6д,+8,+13,+19,+21,+21,+21[5] 52 ,ХУ,аёё 6q,+8,+13,+19,+21,+21,+21[3]
9 49 46,ХУ[20] -
10 12 46,ХХ[17] -
11 2 47,ХУ,+21[25] -
12 10 49-55,ХУ,1(1;22)(р13;д13),+ёег(1)1(1;22) (р13;д13),аёё(3д27),+дег(де1(6)(д25)),+дег(7), + 11,+13,+Б,+17,+19,+21[ср7] 49-55,XУ,t(1;22)(p13;q13),+deг(1)t(1;22)(p13;q13),add(3q27),+deг(de1(6) ^25))^ег(7),+11,+13,+0,+17,+19,+21[ср7]
13 144 46,ХХ[15] -
Примечание. У пациентов № 1—5, 7, 8, 12 со сложными хромосомными перестройками кариотип был значительно уточнен в результате ш¥ШНи ¥ШИ-исследования. У пациентов № 1 и 5 обнаружена амплификация 19р13. У пациента № 11 единственной перестройкой является конституциональная трисомия 21. У пациентов № 9, 10, 13 клональных перестроек не обнаружено.
Й1І1І 1 ї 1 (| 11 ** 1) ІІ І 1 м * н ф атр 19р13
• 9 '*■ яг Я II 11 лр ЧбдО А
•• *# і» _і8_ _М. л*- ■Ъ Ш. 4
11 14 Ц шял »1 II 1 31 » 11 ИГ I* Ш П 1 Т 1Эр13
Рис. 1. Пациентка № 5 (4 года 9мес) с гиперплоидным кариотипом, содержащим і(10;11)(р13'^21-23?) и маркер: а — при исследовании методом шТШНвидно, что маркер (обозначен стрелкой) состоит из материала хромосомы 19; б — маркер представляет собой амплифицированный участок 19р13 (¥ШИ-исследование с зондом Ууяії ЬЗТ 19р13/19д13)
2 ’201 2
2 ’201 2
1* 81 «я It /і 11 1 4 * ¡і ■*•***»* Jt* Щв *
і І Й f Ш 11 11 • / If ф Ф ■' " ■ KA it .S / /* / amp 19p13 *. / 19p13
u и » ш u a '■ MX * * 1« ft 4 * « I» » 11 D If
Рис. 2. Пациентка № 1 (1 год 6мес) с гипоплоидным кариотипом со множественными структурными перестройками: а — при исследовании методом ш¥!8Нвидно, что материал хромосомы 19 присутствует в нескольких деривативных хромосомах (обозначены стрелками); б — в деривативной хромосоме der(5)t(2;5;19)(q12-14;q13;p13amp) содержится амплифицированный участок 19р13 (¥ШН-иссле-
дование с зондом Ууям ЬЗТ 19p13/19q13)
it 4S. ЯІ U «я
І К» f 1 / *1 IA і I H tk Яй
і АЙ lit ft A ftft и 11, И АІ Д А ц
It E If В И If ШШ mm j 1* if т я *
19 » и П If
есть сел7
1J/' Є(Г^
/
есть сеп7 „#
нет 7а31
есть 7q22 -------^ щ
нет 7q36
в
г
Рис. 3. Пациент № 4 (9 мес) с гиперплоидным кариотипом, содержащим кольцевую хромосому: а — исследование методом mFISH показало, что кольцевая хромосома (обозначена стрелкой) состоит из материала хромосомы 7; б — кольцевая хромосома содержит центромеру ир-плечо хромосомы 7(FISH-исследование с зондом Vysis LSIEGFR); в — в кольце имеет место делеция 7q31 (гибридизация с зондом Vysis LSID7S522/ CEP7); г — амплификация участка 7q22 в кольцевой хромосоме (зонд Metasystems XL 7q22/7q36)
t(9;15;19)(q13;q11;?), с которым связывается зонд 19р13. Кроме того, в 5 метафазах из 6 амплифициро-ванный сегмент 19р13 располагается на der(8)t(8;19) (p12;p13amp). В 1 метафазе из 6 этот сегмент находится на der(5)t(2;5;19)(q12-14;q13;p13amp) (рис. 2б). Таким образом, у данного пациента имела место «прыгающая» транслокация и амплификация 19р13.
В одном случае (4) при стандартном кариотипи-ровании была обнаружена крупная кольцевая хромосома. При исследовании методом mFISH оказалось, что она состоит из материала хромосомы 7 (рис. 3а). Дополнительное исследование методом FISH с зондом Vysis LSI EGFR позволило выяснить, что кольцевая хромосома содержит центромеру и р-плечо хромосомы 7 (рис. 3б), а гибридизация с зондами Vysis LSI D7S522/CEP7 и MetaSystems XL 7q22/7q36 показала, что имеет место делеция 7q31 и, по-видимому, амплификация участка 7q22 (рис. 3в, г).
Трисомия 8 была найдена у 2 пациентов (случаи 7 и 8), причем в обоих случаях имел место гиперплоид-ный кариотип (50,XY и 52,XY соответственно).
Трисомия 21, не являющаяся конституциональной, была найдена в 4 случаях с выполненными кариотипами (случаи 3, 7, 8, 12) и у 1 пациента без митозов, причем у пациента 8 присутствовали 3 дополнительные хромосомы 21. У пациентов с синдромом Дауна клональных дополнительных хромосом 21 обнаружено не было.
Обсуждение
Из 13 пациентов с успешно выполненными кариотипами хромосомные аберрации были найдены у 10, что составляет 77 %. Это соотносится с данными Hama et al., где частота выявления аберраций при ОМЛ М7 составила 85 % [12].
Согласно данным литературы, наиболее часто при ОМЛ М7 встречаются численные аномалии — трисомия 8 (18—31 %), трисомия 21 (10,5—43 %), трисомия 19 (9— 21 %) [3, 16, 18]. При этом трисомия 21 ассоциирована именно с детскими случаями ОМЛ М7 и редко встречается у взрослых. В нашем исследовании самой частой аномалией была дополнительная хромосома 19 (25 %). Далее следует трисомия 21 (20 %) (согласно данным A. Hama et al., частота встречаемости этой аномалии составляет 17 % [12]). Встречаемость трисомии 8 в нашем исследовании не превышает 10%. Следует отметить, что она наблюдалась только у пациентов без синдрома Дауна. Это соотносится с публикуемыми данными.
Частота встречаемости t(1;22)(p13;q13) составляет от 3,1 до 33 %, по данным разных исследовательских групп [3, 8]. Эта транслокация была выявлена нами при стандартном цитогенетическом исследовании у 1 пациента (случай 12). Частоту встречаемости этой транслокации у пациентов без митозов оказалось невозможно определить, поскольку для ее обнаружения используется метод ПЦР, который в нашем исследовании не применялся. В литературе описано также частое увеличение числа копий 1q в результате
дупликаций, образования изохромосом и несбалансированных транслокаций (особенно у детей с синдромом Дауна) [12]. В нашем исследовании подобное явление встретилось у 1 пациента без синдрома Дауна.
Частота структурных перестроек с вовлечением 7q в нашем исследовании составила 10 %, что соответствует результатам Athale et al. В этом же исследовании сегмент 11q оказался перестроен в 25 % против 10 %, по нашим данным [3].
Перестройки 3q, согласно данным литературы, встречаются в 6,7 % [8]. Среди наших пациентов реаранжировок 3q, в том числе с вовлечением гена EVI1, обнаружено не было.
Амплификация хромосомных участков и отдельных генов встречается преимущественно при солидных опухолях. При острых лейкозах встречается редко. Тем не менее, хорошо изучено такое явление, как амплификация гена RUNX1 при острых лимфобластных лейкозах (ОЛЛ). Данная перестройка бывает, как правило, единственной в кариотипе и ассоциирована с худшим прогнозом по сравнению с другими цитогенетическими подгруппами ОЛЛ у детей [18]. Более редкими являются случаи амплификации MLL, ETV6, RARa, и они также ассоциированы с плохим прогнозом [2, 7, 20]. Для ОМЛ М7 описана высокая частота увеличения копийности материала q-плеча хромосомы 19 (19q13 gain) при исследовании методом сравнительной геномной гибридизации — 33,3 % (см. [1]). В нашей группе пациентов мы столкнулись с явлением амплификации 19р13. Очевидно, данное событие неслучайно, поскольку частота встречаемости составила 10 %. Кроме того, как уже было упомянуто, трисомия 19 является характерной для ОМЛ М7. Также в литературе была описана амплификация 19р13 в миелоидной клеточной линии NB-4 [19]. Возможно, на хромосоме 19 локализуются гены, ответственные за развитие ОМКБЛ. Согласно данным Rucker et al., амплификация 19р13 коррелирует с высокой экспрессией адгезионных молекул ICAM1 [19]. Они связываются с LFA1 на поверхности Т-клеток и обладают костимулирующим действием при взаимодействии Т-клеточного рецептора с комплексом MHCII. Возможно, именно гиперэкспрессия ICAM1 «отвечает» за плохой прогноз при ОМЛ М7, поскольку ранее было показано, что высокий уровень костимулирующих молекул связан с плохим ответом на лечение при ОМЛ [11].
Переход части хромосомы-«донора» на 2 и более хромосомы-«реципиента» в различных клеточных клонах называют «прыгающей» ("jumping") транслокацией. Данное событие является нечастым; как правило, эти перестройки являются вторичными и сопряжены с плохим прогнозом [14]. В нашей группе наблюдался 1 случай «прыгающей» транслокации — амплифици-рованный сегмент 19р13 перестраивался с хромосомой 8 в преобладающем клоне и с хромосомой 5 в минорном клоне (случай 1). У данного пациента наблюдалось резистентное течение заболевания.
2 ’201 2
2 ’201 2
Кольцевые хромосомы встречаются в 7,4 % острых нелимфобластных лейкозов. Наиболее часто в состав кольцевых хромосом входит хромосома 11 (15 %), далее следуют хромосомы 7 (14 %) и 21 (9 %) [10]. Нам встретился 1 случай образования кольца из хромосомы 7 (случай 4). Как правило, образование кольцевых хромосом сопряжено с неблагоприятным прогнозом. Тем не менее, существует ряд данных о том, что пациенты с кольцевой хромосомой, состоящей из материала хромосомы 7, отличаются более благоприятным прогнозом по сравнению с моносомией 7 [9].
Заключение
Таким образом, проведенное исследование показывает комплексный и гетерогенный характер хромосомных перестроек у детей при таком редком заболевании, как ОМЛ М7. Совместное применение метода стандартного кариотипирования, тБІБИ
и FISH позволяет описать эти аберрации с достаточно высокой точностью. Нами показано также, что при этом заболевании практически отсутствуют повторяющиеся перестройки и цитогенетические маркеры уникальны для каждого пациента. Это особенно важно для мониторинга минимальной остаточной болезни, поскольку выбор молекулярных маркеров затруднен и мониторинг возможно проводить методом FISH на уровне чувствительности ДНК-зондов и, конечно, методом иммунофено-типирования. Наше исследование также выявило воспроизводящийся цитогенетический маркер М7-варианта ОМЛ у детей — амплификацию 19р13, что было ранее описано только в миелоидных клеточных линиях. Этот феномен является неслучайным и требует дальнейшего изучения с целью поиска возможных генов, которые могут принимать участие в патогенезе ОМКБЛ.
Литература
1. Alvarez S., MacGrogan D., Calasanz M.J. et al. Frequent gain of chromosome 19 in megakaryoblastic leukemias detected by comparative genomic hybridization. Genes Chromosomes Cancer 2001;32(3):285—93.
2. Asleson A.D., Morgan V., Smith S. et al. Amplification of the RARA gene in acute myeloid leukemia: significant finding or coincidental observation? Cancer Genet Cytogenet 2010;202(1):33-7.
3. Athale U.H., Razzouk B.I.,
Raimondi S.C. et al. Biology and outcome of childhood acute megakaryoblastic leukemia: a single institution's experience. Blood 2001;97(12):3727—32.
4. Barnard D.R., Alonzo T.A.,
Gerbing R.B. et al. Comparison of childhood myelodysplastic syndrome, AML FAB M6 or M7, CCG 2891: report from the Children's Oncology Group. Pediatr Blood Cancer 2007;49(1):17—22.
5. Bennett J.M., Catovsky D., Daniel M.T. et al. Criteria for the diagnosis of acute leukemia of megakaryocyte lineage (M7).
A report of the French-American-British Cooperative Group. Ann Intern Med 1985;103(3):460—2.
6. Bernstein J., Dastugue N., Haas O.A.
et al. Nineteen cases of the t(1;22)(p13;q13) acute megakaryblastic leukaemia of infants/ children and a review of 39 cases: report from a t(1;22) study group. Leukemia 2000;14(1):216—8.
7. Chae H., Kim M., Lim J. et al. B lymphoblastic leukemia with ETV6 amplification. Cancer Genet Cytogenet 2010;203(2):284-7.
8. Dastugue N., Lafage-Pochitaloff M., Pages M.P. et al. Cytogenetic profile of
childhood and adult megakaryoblastic leukemia (M7): a study of the Groupe Francais de Cytogenetique Hematologique (GFCH). Blood 2002;100(2):618—26.
9. Fujino H., Fujita N., Hamamoto K. et al. Ring/marker chromosome derived from chromosome 7 in childhood acute megakaryoblastic leukemia with monosomy 7. Int J Hematol 2010;92(2):386—90.
10. Gebhart E. Ring chromosomes in human neoplasias. Cytogenet Genome Res 2008;121(3—4):149—73.
11. Graf M., Reif S., Hecht K. et al. High expression of costimulatory molecules correlates with low relapse-free survival probability in acute myeloid leukemia (AML). Ann Hematol 2005;84(5):287—97.
12. Hama A., Muramatsu H., Makishima H. et al. Molecular lesions in childhood and adult acute megakaryoblastic leukaemia.
Br J Haematol 2012;156(3): 316-25.
13. Kudo K., Kojima S., Tabuchi K.
et al. Prospective study of a pirarubicin, intermediate-dose cytarabine, and etoposide regimen in children with Down syndrome and acute myeloid leukemia: the Japanese Childhood AML Cooperative Study Group. J Clin Oncol 2007;25(34): 5442-7.
14. Lizcova L., Zemanova Z., E. Malinova, et al. Jumping translocations in bone marrow cells of pediatric patients
with hematologic malignancies: a rare cytogenetic phenomenon. Cancer Genet 2011;204(6):348—9.
15. Ma Z., Morris S.W., Valentine V. et al. Fusion of two novel genes, RBM15 and MKL1, in the t(1;22)(p13;q13) of acute megakaryoblastic leukemia. Nat Genet 2001;28(3): 220—1.
16. Nimer S.D., MacGrogan D., Jhanwar S. et al. Chromosome 19 abnormalities are commonly seen in AML, M7. Blood 2002;100(10):3838; author reply 3838-9.
17. Reinhardt D., Diekamp S.,
Langebrake C. et al. Acute megakaryoblastic leukemia in children and adolescents, excluding Down's syndrome: improved outcome with intensified induction treatment. Leukemia 2005;19(8):1495—6.
18. Robinson H.M., Harrison C.J., Moorman A.V. et al. Intrachromosomal amplification of chromosome 21 (iAMP21) may arise from a breakage-fusion-bridge cycle. Genes Chromosomes Cancer 2007;46(4):318—26.
19. Rucker F.G., Sander S., Dohner K. et al. Molecular profiling reveals myeloid leukemia cell lines to be faithful model systems characterized by distinct genomic aberrations. Leukemia 2006;20(6):994—1001.
20. Sarova I., Brezinova J., Zemanova Z. et al. Cytogenetic manifestation of chromosome 11 duplication/amplification in acute myeloid leukemia. Cancer Genet Cytogenet 2010;199(2): 121—7.
21. Seabright M. A rapid banding technique for human chromosomes. Lancet 1971;2(7731):971—2.
22. WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues (S.H. Swerdlow, E. Campo, N.L. Harris, E.S. Jaffe, S.A. Pileri, H. Stein, J. Thiele, J.W. Vardiman, eds.), 4th edition, IARC Press, Lyon, 2008.
23. Zwaan M.C., Reinhardt D., Hitzler J. et al. Acute leukemias in children with Down syndrome. Pediatr Clin North Am 2008;55(1):53—70, x.
