CC BY
6
© Я. Ф КОТЕНОК. О. Г. ГАВРИЛОВ. 1993 УДК 614.718-078
I.
Я. Ф. Котенок, О. Г. Гаврилов МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБЩЕЙ ОБСЕМЕНЕННОСТИ ВОЗДУХА МИКРОБАМИ
Педагогический институт им. В. И. Ленина, Вятка
Атмосферный воздух является неблагоприятной средой для размножения микроорганизмов. Вместе с тем атмосфера постоянно содержит бактерии различных видов, в том числе и возбудители инфекционных болезней. Микробы поступают в воздушную среду в составе капельных, капельно-ядерных и пылевых аэрозолей, образующихся различными способами (2—4|.
Важным источником бактериальных аэрозолей служат бациллоносители и больные люди, которые при кашле и чихании могут загрязнять воздух не только в жилых помещениях, но и в местах работы, отдыха, в транспорте и т. д. С помощью воздуха мнкробные аэрозоли переносятся на значительные расстояния от места их продуцирования.
Таким образом, контроль за вероятными источниками бактериальных аэрозолей и путями распространения последних может иметь существенное значение в противоэпидемической работе. Однако существующие в настоящее время приборы для определения бактериальной обсемененностн воздуха [5, 6| не обеспечивают получение достаточно достоверных данных. Кроме того, все они могут быть использованы только в стационарных условиях, т. е. при наличии электрической сети и вакуумной системы.
Нами разработана схема и по ней изготовлена модель портативного прибора, названного нами М-15 (модель 15). На рисунке изображен его общий вид. Прибор состоит из генератора аэрозоля в виде сосуда (/) с патрубками (2), расположенными диаметрально противоположно друг другу в верхней части сосуда. Патрубки оборудованы краниками. В нижней части сосуда-генератора по его оси расположен патрубок (3) для слива сорбирующей и смывной жидкостей. В сосуде (/) закреплен сосуд (4) с перфорированным дном (5). В нем также имеются отбойные сетки-барботеры (6, 7) и эжектор (8) с перфорированными стенками, которые сужаются кверху, образуя конус.
Над эжектором (в) расположена насадка (9), закрепленная под перфорированным дном сосуда (II). Насадка (9) и эжектор соединены резиновой трубкой (12). Сосуд (II) заполнен гранулами из нейтрального материала — стекла, стеклокерамики, выполняющими функцию подложки для сорбирования микроорганизмов. В верхней части сосуда (II) имеется осевой патрубок (14) для заливки в прибор сорбирующей жидкости и патрубок (15), соединяющий сосуд (II) с ограничительной камерой (16).
Таблица 1
Результаты бактериологического исследования воздуха, взятого в различных местах города
Место забора воздуха Время исследования Объем пробы воздуха, MJ Число бактерий в 1 ы' воздуха
Вокзал:
1-й этаж 143 000
2-й этаж Август 0,015 36 000
Городской парк Июль 0,015 3000
Маршрутный автобус Август 0,015 144 000
Кинотеатр:
начало сеанса 12 000
середина сеанса Август 0,015 126 000
конец сеанса 230 000
Птицефабрика:
во дворе 285 000
в птичнике Июнь 0,015 340 000
Улица города Июнь 0,015 15 000
Почта > 0,015 26 000
Аптека Июль 0,015 9000
Лекционный зал:
до лекции 12 000
после лекции Октябрь 0,015 150 000
Микробиологическая лаборато-
рия института » 0,015 10 000
В предлагаемой конструкции прибора общая площадь отверстий насадки (9) и эжектора (в) должна быть равна общей площади отверстий входных (2) патрубков.
В приборе М-15 каждая его ступень выполняет определенную функцию: в сосуде (4) формируется высокодисперсная аэрозоль из исследуемого воздуха, сорбирующей жидкости и микрочастиц — носителей бактерий. Верхняя ступень прибора улавливает эту аэрозоль, сорбируя микрочастицы на липкой поверхности гранул и внутренних стенках прибора.
Подготовка прибора к работе. В прибор при закрытых краниках вводят через патрубок (14) 10—12 мл, а в ограничительную камеру — 1,5—2 0,05 % раствора крахмала для образования липкой пленки на поверхностях гранул и внутренних стенках прибора.
Экспериментально установлено, что раствор крахмала в указанной концентрации обладает выраженными сорбирующими свойствами и хорошо смывается с поверхностей прибора вместе с иммобилизованными на них носителями бактерии. Он также индифферентен для выделяемых микробов.
Методика работы с прибором. Перед использованием в опытах прибор стерилизуют в автоклаве при избыточном давлении 2 атм в течение 30—45 мин. В заданном месте для взятия пробы зоздуха открывают входные патрубки (2). К патрубку (17) ограничительной камеры присоединяют шприц, с помощью которого в приборе создают разряжение и прокачивают через него мерное количество исследуемого воздуха. С помощью шприца исследуемый воздух засасывают через входные патрубки (2). Затем он проходит между покрытыми липкой пленкой стенками сосудов (I и 4) и через слой сорбирующей жидкости, содержащейся в сосуде (/).
//— í
Схема портативного прибора М-17 для изоляции бактерий из исследуемого воздуха. Обозначения в тексте.
Таблица 2
Сравнительная характеристика эффективности прибора М-15 и контрольных приборов по изоляции бактерий из воздуха при положительных температурах
Объем пробы воздуха, м3 Температура воздуха, °С Число бактерий в 1 м1 воздуха Состойние питательной среды
1 II III А Б
0,30 21 3000 2700 14 000 _I_ + +
0,45 24 1900 1800 16 000 -+ + +
0,30 23 2500 2400 13 000 — + +
0,30 20 3200 2900 12 000 — + +
0,30 19 4000 3200 18 000 -+ + +
0,40 21 3200 2900 16 000 -+ + +
0,36 23 3100 2700 15 000 — + +
0,45 20 4000 3800 13 000 — + +
0,38 19 3200 3000 17 000 -+ + +
0,45 18 3500 3200 19 000 — + +
Примечание. 1 — отбор воздуха с помощью прибора Кротова; II прибора Речменского, III прибора М-15. Здесь и в табл. 3: А барботекс воздуха, прошедшего через прибор; Б — не прошедшего через прибор.
--рост бактерий не обнаружен, —|- слабый рост, +-I-
обильный рост.
Проходя затем через барботеры (5, 6 и 7), исследуемый воздух образует мелкодисперсный аэрозоль, поток которого сужается в эжекторе (8) и проходит с относительно высокой скоростью через отверстия насадки (9) и днища (10) в сосуд (II), где соприкасается с гранулами (13). При этом на поверхности гранул оседает жидкая фаза аэрозоля, содержащая бактерии, а воздух обратным ходом шприца прогоняется через обе ступени и выбрасывается через входные патрубки. Затем краники закрывают и шприц отсоединяют. Прибор транспортируют в лабораторию для исследования изолированной из воздуха смешанной культуры. При этом сливают через патрубок (3) в мерный стерильный стакан сорбирующую жидкость и с помощью шприца стерильной водой смывают с внутренних поверхностей прибора липкую пленку вместе с сорбированными на ней бактериями. Смывную и слитую с прибора сорбирующие жидкости объединяют и исследуют на содержание бактерий по принятой в бактериологической практике методике. Определив количество бактериальных клеток в 1 мл смывной жидкости, ее объем и количество прошедшего через прибор исследуемого воздуха, можно рассчитать число микробных клеток в единице его объема, т. е получить информацию о степени общей обсемененности бактериями исследуемого воздуха. Для определения эффективности экспериментального прибора мы провели большое количество опытов. При этом воздух брали в разных районах города, учреждениях и в городском парке с помощью шприца Жане1.
Приведенные в табл. I результаты опытов позволяют заключить, что исследованный воздух был чрезвычайно загрязнен бактериями. Особенно большое количество микробов обнаружено в воздухе птицефабрики.
Следует отметить, что полученные нами результаты исследования воздуха с помощью портативного прибора М-15 не согласуются с данными литературы. Например, в учебном
пособии под редакцией С. Я. Любашенко (I] приведены критерии оценки состояния воздуха по уровню содержания в нем бактерий: загрязненным рекомендуется считать воздух помещений в летнее время, содержащий 2500 клеток в I м\ К сожалению, авторы работы не указали методику исследования воздуха. Примерно подобные результаты нами были получены при исследовании воздуха в городском парке (см. табл. 1).
Заключительные опыты по определению эффективности ^ предлагаемого нами прибора и оценки методики его применения были проведены в относительно жестких условиях исследования выполнены в лаборатории. Воздух просасывали через прибор в одном направлении с помощью вакуумного насоса. Контролем служили результаты одновременного его исследования с помощью приборов Кротова и Речменского. По данным литературы [5, 6|, они считаются в настоящее время наиболее эффективными.
Приведенные в табл. 2 результаты исследования позволяют заключить, что вероятность обнаружения бактерий в исследуемом воздухе с помощью прибора М-15 значительно выше, чем с помощью приборов Кротова и Речменского.
Важно, что рекомендуемый нами прибор может быть использован и при отрицательных температурах. В этих опытах используют сорбирующую жидкость, для приготовления 100 мл которой берут 60 мл 0,05 % раствора крахмала и 40 мл нейтрального глицерина. <
В целях определения полноты извлечения бактерий из исследуемого воздуха при отрицательных температурах были проведены опыты по следующей методике: воздух засасывают из внешней среды в лабораторию через обеспложенные прибор и резиновую трубку. В лаборатории его диспергируют через мелкопористый барботер в стерильной питательной среде — 1 % пептонной воде. Одновременно исследуемый воздух барботируют в аналогичной питательной среде без предварительного прохождения через прибор (контроль). Наличие проскоков бактерий через прибор определяют высевом на плотные питательные среды из опытной и контрольной сред после их инкубирования в течение 36 ч при 37 °С.
Объем исследуемого воздуха, выходящего из контрольной и опытной питательных сред в процессе его просасывания, определяют с помощью ротаметра. Приведенные в табл. 2 и 3 результаты опытов характеризуют достаточно высокую эффективность рекомендуемого прибора М-15 по изоляции бактерий из исследуемого воздуха при положительных и отрицательных температурах.
Приведенные выше результаты исследований позволяют заключить, что рекомендуемый портативный прибор М-15 может быть успешно использован при определении общей обсемененности атмосферного воздуха, а также при бактериологическом исследовании воздуха в местах с наличием условий для попадания в него возбудителей отдельных инфекционных заболеваний в микробиологических лабораториях, инфекционных больницах, общественных туалетах и др. Этот при- ^ бор, видимо, можно применять и для определения плотности бактериального аэрозоля при аэрогенной вакцинации сельскохозяйственных животных.
Выводы. 1. Предложена новая модель портативного прибора М-15 для выделения бактерий из воздуха в целях определения общей его обсемененности микробами.
2. Разработана методика использования прибора, обеспечивающая высокий процент обнаружения бактерий в исследуемом воздухе как при положительных, так и при отрицательных температурах.
' Внедрение в бактериологическую практику прибора М-15 потребует изготовления специального для этой цели шприца с большей рабочей емкостью.
Таблица 3
Эффективность прибора М-15 по изоляции бактерий из исследуемого воздуха при отрицательных температурах
Объем пробы воздуха. мл Температура воздуха. Число бактерий в 1 м3 Состояние питательной среды
А Б
0,054 — 18 2100 + +
0,060 -23 1900 - + + +
0,030 —20 2000 + +
0,045 — 17 1000 — + +
0,045 — 15 3000 + +
Л итература
1. Билетова Н. В., Корнелаева Р. П., Кострикина Л. Г. и др. // Санитарная микробиология / Под ред. С. Ю. Любашенко.— М„ 1980.-С. 152.
2. Гончарук Е. И., Широбоков В. П., Салата О. В. // Гиг. и сан,— 1990,—№ 7,— С. 18—20.
3. Зуева Л. П. // Журн. микробиол,— 1986,— № 2,-С. 59-63.
4. Исакова X. И., Влодавец В. В., Колкер И. И. Микробиологические аспекты внутрибольничных инфекций в хирургических стационарах.— Ташкент, 1987,- С. 69—72.
5. Матвеев К. И. Руководство по микробиологической диагностике,— М., 1973,- С. 21—29.
6. Речменский С. С. Очерки экспериментальной аэробиологии,—М.. 1973.- С. 28—30.
Поступила 28.02.92
