Репко Е.В.
к.вет.наук, кафедра терапии и клинической диагностики, Академия биоресурсов и природопользования Крымского федерального университета им. В.И. Вернадского
МЕТАБОЛИЧЕСКИЙ ПРОФИЛЬ ПРИ ГЕПАТОДИСТРОФИИ И МОЧЕКИСЛОМ ДИАТЕЗЕ У КУР ЯИЧНЫХ КРОССОВ
Аннотация
В статье приведены результаты исследований с целью изучения показателей метаболического профиля в сыворотке крови кур-несушек в зависимости от возраста и периода яйценоскости. Проведенные исследования показывают, что у кур параллельно развиваются две патологии: гепатодистрофия и мочекислый диатез. Установлена
корреляция между отдельными показателями обоих заболеваний, экспериментально обоснована их диагностическая информативность. Ключевые слова: гепатодистрофия, мочекислый диатез, диспротеинемия, гиперферментемия, мочевая кислота, общие липиды
Summary
The article presents the results of research on the metabolic profile parameters in serum of laying hens, depending on the age and period of egg production. Studies have shown that laying-hens are developing in parallel two pathologies: hepatodystrophy and urine acide diathesis. The correlation between the individual performance of both diseases, experimentally proved their diagnostic informative.
Keywords: hepatodystrophy, urine acid diathesis, disproteinemia,
hyperenzymemia, uric acid, total lipids
Обеспечение высокого уровня метаболических процессов у кур-несушек при интенсивном использовании их генетического потенциала невозможно без организации полноценного кормления [1,5]. Дисбаланс
рационов по питательным и биологически активным веществам, нарушение режима кормления и структуры рациона, игнорирование физиологического состояния и фазы яйценоскости приводят не только к снижению продуктивности, но и к развитию болезней, вызванных нарушением обмена веществ [2, 30; 3, 711].
Современными исследованиями установлено, что при нарушении метаболизма часто имеет место сочетанная патология, когда при поражении одного органа или нарушения метаболизма возникают осложнения, которые приводят к распространению патологического процесса на другие органы и системы организма, усугубляя развитие болезни [4,14; 5,125]. Поэтому важным является изучение состояния метаболизма у кур разного возраста и его изменения при патологии печени и почек.
С целью выявления изменений метаболического профиля крови кур-несушек в возрастной динамике проведены клинико-экспериментальные исследования на курах-несушках кросса Хай-Лайн разного возраста (170-465 суток) птицефабрики АООО «Южная-Холдинг», Симферопольского района Республики Крым.
В результате изучения показателей, характеризующих метаболический профиль у кур разного возраста, установлено, что содержание общего белка в сыворотке крови несушек имеет выраженную возрастную динамику (табл. 1). У кур 170-суточного возраста его содержание составляло 51,0 ± 1,2 г / л, 242 - 61,8 ± 2,15 (р <0,01), в 309 - 63,0 ± 1,37 (р < 0,001) и в 465-суточном возрасте - 59,0 ± 0,74 г/л.
Увеличение его в период яйцекладки является физиологическим и свидетельствует об интенсификации белоксинтезирующей функции печени. Учитывая результаты расчетов среднего квадратического отклонения, установлено, что уровень общего белка выходит за пределы лимитов нормы у 10-20% кур. Лимиты относительного содержания альбуминов характеризовались стабильностью и были в пределах 24,0-35,0 %, а средний показатель достоверно меньше (р <0,05) только у кур 309-суточного возраста
(25,4 ± 0 ,95%). Отклонение от рассчитанных показателей нормы обнаружены у 20% кур в возрасте 170 и 242 суток, 23,3% - в 465- и 30% - 309-суточных несушек. Диспротеинемия, вызванная гипоальбуминемией, является
следствием нарушения белоксинтезирующей функции печени. Такой вывод подтверждается положительным коэффициентом корреляции между альбуминами и цинк-сульфатным тестом у несушек в возрасте 309 и 465 суток (г=0,593 и г=0,482). Коллоидная устойчивость белков сыворотки крови снижается, поэтому на реакцию преципитации тратится менее 1,6 мл раствора цинка сульфата в 20-25% кур разного возраста (табл. 1).
Таблица 1
Динамика показателей белкового и пуринового обменов у кур 170 - 465-суточного возраста (M ± m; n = 80)
Показатель 170 суток 242 суток 309 суток 465 суток
Общий белок, г/л 51,0 ± 1,20 61,8 ± 2,15 ** 63,0 ± 1,37 *** 59,0 ± 0,74 ***
Альбумины, в проц. 30,0 ± 1,51 29,8 ± 1,47 25,4 ± 0,95 * 28,0 ± 0,50
Г лобулины, в проц. 70,0 ± 1,50 70,2 ± 1,47 74,6 ± 0,95 72,0 ± 0,49
Белковый коэффициент 0,46 ± 0,04 0,46 ± 0,05 0,34 ± 0,02 * 0,39 ± 0,01
Печеночная проба, мл 1,68 ± 0,05 1,65 ± 0,05 1,60 ± 0,01 1,55 ± 0,01 *
Мочевая кислота, ммоль / л 0,56 ± 0,09 0,65 ± 0,07 0,66 ± 0,02 0,46 ± 0,02
АЛТ, Ед / л 47,1 ± 0,84 46,2 ± 0,65 40,8 ± 2,71 * 18,0 ± 0,12 ***
АсАТ, Ед / л 15,3 ± 1,72 13,5 ± 1,31 12,4 ± 0,38 27,1 ± 0,50 ***
ГГТП, Ед / л 27,6 ± 2,51 48,4 ± 4,72 ** 42,4 ± 1,95 *** 37,8 ± 3,10 *
Примечание. *-p<0,05; **-p<0,01; ***-p<0,001 - относительно кур 170-дневного возраста.
Одним из конечных продуктов обмена пуриновых оснований нуклеопротеидов у кур является мочевая кислота. По результатам исследований в сыворотке крови кур разного возраста содержание мочевой кислоты находилось в пределах 0,21-1,12 ммоль/л и было больше максимальной нормы (0,48 ммоль/л) у 60% кур 170-суточного (0,56 ± 0,09 ммоль/л), 70% - 242 (0,65 ± 0,07), 80% - 309 (0,66 ± 0,02) и 46,7% - 465-суточного возраста (0,46 ± 0,02 ммоль/л; табл. 1). Анализом индивидуальных показателей установили, что высокий уровень мочевой кислоты в сыворотке крови у большинства исследованной птицы сочетался с гипоальбуминемией,
что свидетельствует о поражении почек. Уровень мочевой кислоты растет при мочекислом диатезе и является специфическим показателем патологии.
В цитоплазме и органеллах гепатоцитов сосредоточено более 1000 ферментов. Большинство из них не имеют органной специфичности, но их активность, в частности АлАТ и АсАТ, повышается на ранних стадиях поражения печени [6,73;7,323]. Анализ возрастной динамики активности АлАТ свидетельствует, что у кур 170 и 242-суточного возраста лимиты колебаний примерно одинаковы (табл. 1), а средний показатель достоверно не отличается (47,1 ± 0,84 и 46,2 ± 0,65 Ед/л), но количество несушек с показателями, превышающими максимальную норму, увеличивается с 10 до 20%. У кур возрастом 309 суток активность АлАТ имеет выраженную тенденцию к снижению (40,8 ± 2,71 Ед/л; p<0,05), а гиперферментемия установлена у 30% поголовья. В следующей возрастной группе (465 суток) выявлено значительное снижение активности АлАТ, по сравнению с первой группой в 2,62, третьей (возраст - 309 суток) - 2,27 раза, но количество кур с гиперферментемиею уменьшилась до 26,7%. Активность другого цитолитического фермента - АсАТ значительно ниже (табл. 1). Средняя активность фермента у кур 170, 242 и 309-дневного возраста имеет тенденцию к снижению, но разница не достигает достоверности. У кур 465-суточного возраста активность фермента увеличивается до 27,1 ± 0,50 Ед/л, превышая в 2,18 раза показатель предыдущей группы. Гиперферментемия установлена у 26,7 % кур-несушек - несколько меньше, чем у птиц 309дневного возраста (30%). Выведение АлАТ и АсАТ в кровь происходит вследствие нарушения внутренней структуры гепатоцитов и повышение проницаемости клеточных мембран. Активность у-глутамилтранспептидазы (ГГТП) у кур 170-суточного возраста находится в пределах 14,0-54,0 Ед/л, в следующих возрастных группах растет, соответственно, в 1,75; 1,54 и 1,97 раза (p <0,01; p <0,001 и p <0,05). За пределы максимально расчетных данных (M±25) выходит 10-15% проб, что свидетельствует о развитии внутрипеченочного холестаза.
Печень принимает активное участие в обмене липидов, поэтому его нарушение является одним из критериев поражения гепатоцитов. Состояние липидного обмена изучали по содержанию в сыворотке крови кур-несушек общих липидов, фосфолипидов, триацилглицеролов и в-липопротеинов (табл. 2).
Таблица 1
Возрастная динамика показателей обмена липидов у кур-несушек
Показатель 170 суток 242 суток 309 суток 465 суток
Общие липиды, г/л 17,4 ± 2,73 25,1 ± 4,34 26,3 ± 1,49 ** 24,2 ± 0,53 *
Триацилглицеролов, ммоль/л 10,0 ± 0,56 11,9 ± 1,41 17,0 ± 1,48 *** 20,5 ± 0,34 ***
в-липопротеины, г/л 4,5 ± 0,15 4,7 ± 0,17 10,6 ± 0,73 *** 6,1 ± 0,24 ***
Фосфолипиды, ммоль/л 4,5 ± 0,49 5,7 ± 0,27* 15,1 ± 0,65 *** 11,9 ± 0,34 ***
Примечание. *-p <0,05; **-p <0,01; ***-p <0,001 - относительно кур 170-суточного возраста.
Уровень общих липидов характеризовался тенденцией к увеличению с возрастом птицы и колебался в пределах от 17,4 ± 2,73 до 26,3 ± 1,49 г/л. Гиперлипидемию установили у 10% кур в возрасте 170 суток, 20% - 242, 309 и 465 суток. У птиц старших возрастных групп этот показатель был достоверно больше к группе несушек в возрасте 170 суток (табл. 2).
Одновременно у несушек 242-465-суточного возраста установлено увеличение уровня общих триацилглицеролов в сыворотке крови, среднее значение которых составило 11 ,9 ± 1,41, 17,0 ± 1,48 и 20,5 ± 0,34 ммоль/л против 10,0 ± 0,56 ммоль/л в группе кур возрастом 170 суток (табл. 2). Гипертриглицеролемия обнаружена у 10% несушек возрастом 170 и 309 суток и у 16,7% - 465 суток. Ее диагностируют при холестазе, жировой гепатодистрофии, билиарном циррозе и болезней почек [8,88;9].
Анализ фосфолипидов в сыворотке крови несушек указывает на то, что с возрастом их уровень достоверно увеличивался с 4,5 ± 0,49 до 15,1 ± 0,65 ммоль/л (p <0,001) в 309- и 11,9 ± 0,34 ммоль/л (p <0,001) - в 465-суточном возрасте. Рост концентрации фосфолипидов выше физиологических пределов
в сыворотке крови характерен для гепатодистрофии и гломерулонефрита [1,353]. У 5% кур 309- и 10% - 465-суточного возраста установили пониженное содержание фосфолипидов в сыворотке крови, что может быть вызвано использованием их на построение яичного желтка.
Уровень в-липопротеинов у кур в возрасте 170 и 242 суток стабильный (табл. 2). Наиболее выраженные изменения у несушек 309-суточного возраста (10,6 ± 0,73 г/л; p <0,001).
Проведенные исследования показывают, что у кур параллельно развиваются две патологии: гепатодистрофия и мочекислый диатез.
Критериями патологии печени являются следующие показатели: гипер- (в 170- и 242-дневного возраста) или гипопротеинемия (309 и 465 суток), гипоальбуминемия (20-30% кур), положительная цинк-сульфатная
(печеночная) проба (20-25% ), повышенная активность АсАТ (20-30%) и АлАТ (10-30% кур), ГГТП (10-15%), билирубинемия (100%). Менее информативны показатели обмена липидов. Чаще всего изменяется содержание общих липидов (10-20%). Таким образом, все перечисленные показатели можно отнести к критериям метаболического синдрома при развитии патологии печени. Параллельно установлено развитие мочекислого диатеза: уровень мочевой кислоты выше 0,48 ммоль / л - в 46,7-80% кур.
Взаимосвязь двух патологий подтверждается коэффициентом
корреляции между уровнем мочевой кислоты в сыворотке крови и активностью гепатоиндикаторних ферментов: АлАТ - у кур 242-суточного возраста г = 0,634, 309 - г = 0,546, АсАТ (г = 0,694 и 0,497), ГГТП (г = 0,451 и 0,812); содержанием мочевой кислоты и триацилглицеролов у кур в возрасте 309 суток (г=0,717).
Результаты биохимических исследований подтверждаются
патологоанатомическими изменениями в органах кур-несушек. Из 204 трупов в 44 случаях выявлено патолого-анатомические изменения, характерные для висцеральной формы мочекислого диатеза (21,6%), 80
(39,2%) - для гепатодистрофии. В 12,25% кур диагностировали сочетанную патологию.
Литература
1. Болезни птиц [Текст]: учебное пособие, 2-е издание / Б.Ф. Бессарабов, И.И. Мельникова, Н. К. Сушкова, С. Ю. Садчикова. - СПб.: Лань, 2009. - 448 с.
2. Кожемяка Н. Профилактика болезней кур / Н. Кожемяка // Птицеводство. - 2002. - № 5. - С. 30-33.
3. Кондрахин И. Диагностика и терапия внутренних болезней животных [Текст] / И. Кондрахин, В. Левченко. - М.: Аквариум - Принт, 2005. - 830 с.
4. Кондрахин И.П. Метаболичекие диагностические маркеры при внутренних болезнях животных [Текст] / И.П. Кондрахин // Наук. вюник вет. медицини: Зб. наук. праць. - Бша Церква, 2010. - Вип. 5 (78). - С. 14-19.
5. Левченко В.1. Клiнiко-бiохiмiчний статус та морфолопчш змши нирок при гепаторенальному синдромi у високопродуктивних корiв [Текст] / В.1. Левченко, Н.В. Вовкотруб, В.В. Сахнюк та ш. // Вюник Бшоцерюв. держ. аграр. ун-ту. - Бша Церква, 2003. - Вип. 28. - С. 124-131.
6. Медведев М.А. Клиническая ветеринарная лабораторная
диагностика [Текст]: справочник для ветеринарных врачей / М.А. Медведев.
- М.: «Аквариум-Принт» 2009. - 416 с.
7. Ветеринарна кшшчна бiохiмiя [Текст] / В.1. Левченко, В.В. Влiзло, 1.П. Кондрахш та ш.; за ред. В.1. Левченка i В. Л. Галяса. - Бша Церква, 2002.
- 400 с.
8. Архипов А.В. Липидное питание, продуктивность птицы и качество продуктов птицеводства [Текст] / А.В. Архипов. - М.: Агробизнесцентр, 2007. - 440с.
9. Кирдяев В.М. Морфофункциональные изменения крови и печени кур яичных пород в зависимости от возраста, условий содержания и кормления [Текст]: автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. вет. наук (16.00.02) / В.М. Кирдяев - Саранск, 2006. - 20 с.