CC BY
16
BÎCHHK Украгнсъког медичног cm оматолог in ног' академИ'
УДК 616.314.17 - 092: 616.379 - 008.64
МЕХАН13МИ Р03ВИТКУ ПАТ0Л0Г1ЧНИХ 3MIH У ТКАНИНАХ ПАР0Д0НТА ЗА П0ЕДНАН0Г0 ПЕРЕБ1ГУ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗУ ТА ЦУКР0В0Г0 Д1АБЕТУ
Давиденко C.B., Непорада К.С.
Вищий державний навчальний заклад УкраУни "Укра'Гнська медична стоматолопчна академ1я"
На nidcmaei моделювання експерименталъног виразки шлунка на mëi цукрового diaôemy доведено розвиток namологiчниx змт в м'яких тканинах пародонта ùypie, а саме дисбаланс протегназ-но/антипротегназног системи, активащя вшъно-радикалъного окислення, що призводитъ до тдсилення кamaболiзмy колагенових та неколагенових бшкгв сполучног тканини.
Ключов1 слова: пародонт, ультрацерогенез, цукровий д1абет.
Сучасна стоматолопя, вступаючи в нове тися-чол1ття, повинна визначити, за яким доцтьним напрямком буде проходити розвиток наукових знань в стоматологи, та Тх практична реал1зац1я. Слщ зазначити, що бтьшють дослщжень, як1 ¡с-нують в тепер1шнш час в обласп стоматологи, не мають системного узагальнення. За думкою експерт1в ВОЗ, використання системного пщходу е основою в проведены стоматолопчних обсте-жень населения \ оргашзацп стоматолопчноТ до-помоги. „Ми живемо в епоху пол1морб1зносл су-часного пащента, яка буде прогресувати" (Эль-штейн Н.В., 2001). Поряд з ростом тривалосп життя людей росте й ктькють хворих. За даними М1жнародноТ д1абетично1 асоц1ацЛ (2003), у свт на цукровий д1абет (ЦД) страждае 171 млн. оаб, не враховуючи пащетчв молодше 20-ти рош. В УкраТж зареестровано понад 1 млн. хворих на ЦД (понад 2% населения), при цьому справжня захворюванють в 2-3 рази бтьша.
Серед дорослого населения поширенють ви-разковоТ хвороби (ВХ) сягае 6-10%. Частота по-еднання ВХ \ ЦД складае 1-6,6%.
Загальносоматичш захворювання у 85% випа-дш е супутшми та актив1зуючими патолопчний процес у пародотч [8]. Ретельне терапевтичне обстеження хворих хроычним генерал1зованим пародонтитом дозволило встановити 100 % захворюванють даних пац1ент1в внутр1шыми хворобами [5].
Хрошчний генерал1зований пародонтит вщно-сять до найпоширеыших захворювань людини, що у середнш та старшш вкових трупах населения являеться головною причиною втрати зу-б1в [9]. Медико-сощальне значения визначаеть-ся не ттьки патолопею опорно-утримуючого апарату зуба, але й порушенням процеав травления, обмшу речовин, ¡нфкуванням та сенсебн л1зац1ею оргашзму, загрозою виникнення нерво-во-псих1чних розлад1в депресивного характеру [6, 7].
Серед причин розвитку пародонтиту видтяють м1кробний фактор та порушений метабол1зм кю-тково1 тканини альвеолярного вщростка. Так, на сьогодш встановлено, що ¡нщ1ац1я запального процесу в тканинах пародонту спричинена мк-рооргашзмами зубно'Г бляшки, зубного нальоту, твердих зубних вщкладень. 3 ¡ншого боку, роз-
лади метабол1зму кютковоТ тканини е одним з центральних мехаызм1в патогенезу гене-рал1зованого пародонтиту, тому що остеопоро-тичн1 змши в альвеолярнш кютц1, резорбщя и кортикального шару та атроф1я м1жзубних перегородок розглядаються як патогномошчш ознаки захворювання [3, 10, 11, 14].
В патогенез! патолопчних процеав тканин пародонту велике значения мають м1кроциркуля-торы, метабол1чш, ферментативы та ¡мунолопч-ш порушення [15].
Метою нашого дослщженя було вивичення мехаызм1в розвитку патолопчих змш у тканинах пародонта щур1в за умов поеднаного переб1гу експериментальноТ виразки шлунка та цукрового д1абету.
Дослщження проводились на 65 статевозртих самцях-щурах лшп «WistaD> масою 170 - 220 г з дотриманням рекомендацш, щодо проведения медико-бюлопчних дослщжень згщно з Свро-пейською конвенщею. Евтаназш тварин здшс-нювали пщ тюпенталовим наркозом шляхом кровопускания.
Об'ектами дослщження були сироватка кров1 та гомогенат м'яких тканин пародонту.
Моделювання пептичноТ виразки шлунка у по-еднанш з цукровим д1абетом вир1шували у такий споаб: пероральне введения 10% розчину кон-сервованоТ бичачоТ жовч1 (1 мл/кг) на фоы дозо-ваного голодування (зменшення стандартного добового рацюну на одну третину), вщтворення хроычного ¡ммобт1зацшного стресу за К. Кип-]ата et а1. (1984) з наростаючою експозиц1ею 1-й день - 15 хв., 2-й день - 30 хв., 3-й день - 45 хв., з 4-го по 12-й день - 60 хв. та внутр1шньочерев-не введения аллоксану в доз1 100 мг/кг одноразово на шосту добу.
Вивчали протеТназно-шпб1торний потенц1ал на пщстав1 дослщження загальноТ протеол1тичноТ активное^ та активносп агшпбпюра протешаз. Загальну протеол1тичну активнють визначали за методом Мура \ Стейна, що базуеться на визна-ченн1 приросту гл1цину, що утворюеться в процес! реакцп г1дрол1зу казеТну протеТназами супе-рнатанту гомогенату тканин пародонту чи нати-вно1 сироватки кров1. Розрахунок проводили в мкмолях г1дрол1зованого гл1цину за 1 хв. ¡нкуба-цИ' на 1 мл сироватки кров1 чи 1г тканини [13].
* Публжащя е фрагментом науково - досп1дно( роботи кафедри медичног, бюлоячно)' та бюоргашчно)' юми (державний ре-естращйний номер 010074001557)
Актуальн проблеми сучасно! медицини
Антипротеол1тичну активнють вивчали за методикою К.Н. Веремеенка [2], визначаючи р1зницю м1ж активнютю проби з певною ктькютю трипсину та пробою, в якш присутнш a-i-протеТназний ¡Hri6iTop.
Окислювальну модифкацш бшмв, як ¡нтегра-льний показник процес1в пероксидаци, визнача-ли за методикою, принцип якоТ базуеться на спектрофотометричному анал1з1 карбонтьних груп, ям утворюються при взаемодп активних форм кисню ¡з залишками амшокистлот з вико-ристанням 2,4 - диытрофешлгщразину [4].
Процеси катабол1зму колагенових бтш вивчали за вм1стом втьного оксипролшу за методом L.Bergman, R.Loxlly у модифкацп С.С.Тетянець, який фунтуеться на кольоровш реакцп з реактивом Ерл1ха [12].
Стан сполучнотканинних структур оцшювали за показниками вмюту гексуронових (глюкуроно-BOi та ¡дуроновоТ) кислот карбазоловим методом, принцип якого базуеться на нагр1ванш до-
npome'iHa3HO-iHai6imopHuO потенциал сироватки кровi та M'f
слщжуваних бюлопчних субстрат1в з концентро-ваною арчаною кислотою. В результат! реакцп цукри перетворюються в альдегщ фурфуролу або його гомологи, як1 з карбазолом утворюють хромоген фюлетово-рожевого кольору [1].
Отримаы результати дослщжень проанал1зо-ваш з використанням метод1в вар1ацшноТ статистики.
Нами встановлено, що у грут тварин з експе-риментальною виразкою шлунка загальна про-теол1тична активнють сироватки кров1 збтьши-лась у 2,1 раз1в пор1вняно з контрольною гру-пою, загальна протеол1тична активнють в м'яких тканинах пародонта збтьшилась у 2,6 рази вщ-повщно, а при сполученш дм експериментальноТ виразки шлунка та цукрового д1абету загальна протеол1тична активнють сироватки кров1 збть-шилась у 3,3 раз1в, в м'яких тканинах пародонта - у 4,6 рази пор1вняно з контрольною групою (табл.1).
Таблиця 1
тканин пародонта за поеднаного перебяу ульцерогенезу та
цукрового дебету, (М±т)
Групи тварин _______— —-—" "" "Дослщжуваш Активн1сть протеТ-наз, мкмоль/мл/хв а1 - ¡Hri6iTop проте-Тназ, мкг/ кг, мкг/л
_____—-—- "" тканини
1.Контрольна (n=7)
- сироватка KpoBi 0,28±0,12 2,65±0,4
- тканини пародонта 1,58±0,42 4,25±0,63
2. Експериментальна виразка шлунка (n=9)
- сироватка KpoBi 0,61±0,13* 1,51 ±0,3*
- тканини пародонта 4,15±0,66* 2,61 ±0,33*
3. Експериментальна виразка шлунка та цукровий д1абет (n=8)
- сироватка KpoBi 0,93±0,14** 0,85±0,02**
- тканини пародонта 7,34±1,06** 1,85±0,12**
* - рЬниця достов1рна поршняно з контролем, Р1.2<0,05 ** - рЬниця достов1рна поршняно з експериментальнок
У rpyni тварин з експериментальною виразкою шлунка активн1сть а1- антитрипсину в м'яких тканинах пародонта зменшилась у 1,6 рази nopi-вняно з контрольною групою, а при сполученш дм експериментальноТ виразки шлунка та цукрового д1абету активнють а1- антитрипсину зменшилась 1,8 рази (табл.1).
Окислювальна модификация бтшв сироватки кровi та м'яки>
виразкою шлунка, Р2.3<0,05
BMicT окислювально модифкованих бтш пародонта у щур1в за експериментальноТ виразки шлунка на тл1 цукрового д1абету збтьшився у 2,3 рази, у сироватц1 KpoBi модифковаы бтки збтьшились у 1,3 рази пор1вняно з тваринами, яким моделювали експериментальну виразку (табл. 2).
Таблиця 2
тканин пародонта за поеднаним переб&ом ульцерогенезу та
цукрового dia6emy, (M±m)
Групи тварин Сирватка KpoBi, ум.од М'як1 тканини пародонта, ум.од
1. Експериментальна виразка шлунка (n=8) 0,574±0,056 0,280±0,052
2. Експериментальна виразка шлунка та цукровий д1абет (n=8) 0,751±0,027* 0,649±0,086*
* - рЬниця достов1рна поршняно з експериментальною виразк Отже, за умов моделювання експериментальноТ виразки шлунка на тл1 цукрового д1абету в м'яких тканинах пародонта BiporiflHO збтьшуеть-ся активац1я протеол1тичних та втьно - радика-льних процес1в. В м'яких тканинах пародонта вмют втьного
шлунка, Р1-2<0,05 оксипролшу за експериментальноТ виразки шлунка збтьшився у 5 раз1в пор1вняно з контрольною групою, а при сполученш дм експериментальноТ виразки шлунка та цукрового д1абету вмют втьного оксипролшу пщвищився у 9,4 рази (табл.3).
Том 8, Выпуск 4
87
BÎCHHK Украгнсъког медичног' cm оматолог in ног' академИ'
Таблиця 3
BMicm втьного оксипрол1ну та гексуронових кислот в м'яких тканинах пародонта за поеднаним nepeöizoM ульцерогенезу та
цукрового diaöemy, (M±m)
Групи тварин Вмют втьного оксипролшу, ммоль/г Bmîct гексуронових кислот, ммоль/г
1. Контрольна група (n=8) 2. Експериментальна виразка шлунка (n=8) 3. Експериментальна виразка шлунка та цукровий д1абет(n=8) 0,95±0,16 4,84±0,12* 8,95±0,14** 2,9±0,4 5,78±0,85* 6,49±0,08**
* - р1зниця достов1рна поршняно з контролем, Р1.2<0,05
** - рЬниця достов1рна поршняно з експериментальною виразкою
Вмют гексуронових кислот, як1 е мономерами дисахаридних одиниць глкозамшоглкашв спо-лучноТ тканини, в м'яких тканинах пародонта збтьшився у 1,9 раз1в у тварин з експеримента-льою виразкою шлунка пор1вняно з котролем; у груш за умов експериментальноТ виразки шлунка та цукрового д1абету - у 2,2 рази вщповщно, по-р1вняно з контрольною групою (табл.3), що свщ-чить про депол1мер1зацш протеоглкашв.
Отже, у мехаызм1 розвитку патолопчних змш в тканинах пародонта за поеднаноТ дм ульцерогенезу та цукрового д1абету важпива роль нале-жить дезоргашзаци сполучнотканних структур внаслщок катабол1зму колагенових та неколаге-нових бшмв, про що свщчить збтьшений вмют втьного оксипролшу та гексуронових кислот.
Таким чином, за умов поеднаного переб1гу експериментальноТ виразки шлунка та цукрового д1абету протеТназно - шпб1торний потенц1ал сироватки кров1 та м'яких тканин пародонта набу-вае декомпенсованого характеру, тобто достовн рне пщвищення активносп протеТназ на тл1 в1ро-гщного зменшення активносп а-Ннпб^ора протеТназ. За цих умов вщбуваеться активац1я втьно-радикального окисления, про що свщчить до-стов1рне зростання окисномодиф1кованих проте-Т'шв в досл1джуваних тканинах.
Таким чином, при поеднаному переб1гу експериментальноТ виразки шлунка та цукрового д1а-бету в1дбуваються патолог1чн1 зм1ни в тканинах пародонта, а саме - дисбаланс системи протеТ-нази/1нг1б1тори протеТназ, активац1я в1льно-радикального окисления, що призводить до п1д-силення катабол1зму бюпол1мер1в сполучноТ тканини пародонта.
шлунка, Р1.2й0,05
Л1тература
1. Архипова О.Г. Методы исследования в профпатологии,-М.:Медицина, 1988.- 208 с.
2. Веремеенко К.Н., Голобородько О.П., Кизим А.Н. Проте-олиз в норме и при патологии.- К.: Здоров'я,1988.- 200с.
3. Вишняк Г.Н. Генерализованные заболевания пародонта (пародонтоз, пародонтит). - К., 1999. - 216 с.
4. Данилевский Н.Ф., Борисенко A.B. Заболевания пародо-нта.- К: Здоровье, 2000. - 461с.
5. Заверна A.M., Головня 1.0., Харламова К.е., Поперека Г.М. Медична реаб1л1тац1я oci6 ¡з захворюваннями пародонта, як1 зазнали рад1ац1йного впливу з аварию на ЧАЕС // Матер1али I (VIII) з'Тзду Ассоц1ацГ| стоматолог1в Украши. - К. 1999. - 203 с.
6. Иванов B.C. Заболевания пародонта. - М.: Медицинское информационное агенство, 2001. - 300с.
7. Курякина Н.В., Кутепова Г.Ф. Заболевания пародонта. -М.: Медицинская книга , Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2003. - 250 с.
8. Немеш О.М., Гонта З.М., Шилшський I.B., Скалат А.П. Зв'язок захворювань пародонту з загальносоматичною патолог1ею. Огляд л1тератури. // Новини стоматологГ|. -№ 2 (47). - 2006. - С. 34-37.
9. Дубинина Е.Е., Бурмистров С.О., Ходов Д.А., Поротов И.Г. Окислительная модификация белов сыворотки крови человека, метод ее определения // Лечебное дело. -1995. - №2. - С.24 - 26.
10. Поворознюк В.В., Мазур И.П. Костная система и заболевания пародонта. - К., 2005. - 445 с.
11. Тарасенко Л.М., Петрушанко T.A. Стрес и пародонт. -Полтава, 1999. -192 с.
12. Тетянец С.С. Метод определения свободного оксипро-лина в сыворотке крови //Лабор.дело.-1985.-№1 .-С.61-62.
13. Уголев A.M., Иезуитова H.H., Масевич У.Г. Исследования пищеварительного аппарата у человека.- Л.: Наука, 1969.- 216с.
14. Цепов Л.Н., Николаев А.И. Диагностика и лечение заболеваний пародонта . - М.: МЕДпресс-информ, 2002. -192 с.
15. Z. Schartz, J. Gonltchin, D. Dean et al. Mechanisms of alveolar bone destruction in periodontitis // Periodontol. -2000. - 1997. - Vol. 26. - P. 158-172.
Реферат
МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ В ТКАНЯХ ПАРОДОНТА ПРИ СОЧЕТАННОМ ТЕЧЕНИИ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗА И САХАРНОГО ДИАБЕТА Давыденко C.B., Непорада К.С.
Ключевые слова: парадонт, ульцерогенез, сахарный диабет
На основании моделирования експериментальной язвы желудка на фоне сахарного диабета доказано развитие патологических изменений в мягких тканях пародонта крыс, а именно дисбаланс протеиназно/антипротеиназной системы, активация свободно - радикального окисления, которые приводят к усилению катаболизма коллагеновых и неколлагеновых белков соединительной ткани.
Актуальт проблеми сучасно! медицини
Summary
MECHANISMS OF THE DEVELOPMENT OF PATHOLOGICAL CHANGES IN PERIODONTIUM TISSUES UNDER ASSOCIATED COURSE OF ULCEROGENESIS AND DIABETES MELLITUS Davydenko S.V., Neporada K.S.
Key words: periodontium, ulcerogenesis, diabetes mellitus
By modeling experimental gastric ulcerative disease against diabetes mellitus we have proved the development of pathological changes in soft periodontium tissues in rats. The chances include disbalance of proteinase/ anti-proteinase system, activation of free-radical oxidation that results in the enhancing catabolism of collagenous and non-collagenous proteins of connective tissue.
УДК 616-001.1-36.11-008.8-037-028.77
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ГИПЕРМЕТАБОЛИЗМА ПРИ ТЯЖЕЛОЙ МЕХАНИЧЕСКОЙ ТРАВМЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Золотухин С.Е., Корнейчук A.C., Крюк А.Ю., Шпаченко H.H.
НИИ травматологии и ортопедии Донецкого национального медицинского университета им. М. Горького, г. Донецк
В работе представлены данные об оценке гиперметаболизма при различных по течению типах посттравматической реакции у крыс. Показано, что такая оценка возможна на основании общедоступных и простых биохимических показателей сыворотки крови: общего белка, креати-нина, мочевины, мочевой кислоты, глюкозы, молекул средней массы, холестерина, триглицери-дов, малонового диальдегида, диеновых конъюгат, билирубина. Повышению диагностической значимости биохимических параметров способствует использование относительных показателей, выражающих сдвиги биохимических величин относительно контроля в %. Суммарная оценка гиперметаболизма по биохимическим показателям имеет обратную корреляцию с продолжительностью жизни животных и может служить на практике дополнительным прогностическим критерием тяжести течения посттравматической реакции.
Ключевые слова: гиперметаболизм, посттравматическая реакция, биохимические показатели.
Феномен гиперметаболизма при тяжелой ме- На основании дискретных значений показате-ханической травме выражает совокупность из- ля «К», вычисляемых в течение 4 часов после менений обмена веществ, сочетающих гипер- травмы у животных, находящихся в иммобили-
потребность организма в энергии и различных субстратах для ликвидации последствий травмы с толерантностью тканей к этим субстратам [1, 8]. Характерной особенностью гиперметаболизма является увеличение скорости обмена веществ, что сопровождается увеличением потребления кислорода, отрицательным азотистым балансом, гиперпродукцией С02 [3, 7]. Следствием прогрессирующего гиперметаболизма оказывается специфическая органная дисфункция, приобретающая характер недостаточности, в том числе с закономерным развитием полиорганной недостаточности (ПОН) [2, 7].
Цель исследования: разработка биохимических критериев гиперметаболизма и оценка их прогностической значимости при различных типах течения посттравматической реакции в эксперименте.
Материалы и методы исследования. Опыты выполнены на 82 белых беспородных крысах обоего пола весом 250-300 г. Тяжелую механическую травму моделировали путем дозированного воздействия электромагнитным ударником силой 250 Н/см2 в количестве 50 ударов по обоим бедрам [2, 5]. Индивидуальную реактивность организма в динамике посттравматической реакции определяли с помощью модифицированного нами метода измерения кожно-гальванического рефлекса посредством показателя «К» [5].
зированном состоянии, строили графики. Определенный тип кривых указывал на принадлежность крыс к стандартным группам животных, у которых течение посттравматической реакции обозначалось как «шоковый смертельный тип», «шоковый не смертельный» и «не шоковый» [2, 5].
После типирования посттравматической реакции животных под легким тиопенталовым наркозом забивали декапитацией. Определяли биохимические показатели сыворотки крови забитых крыс. Для оценки гиперметаболизма выбраны 11 наиболее информативных. Эти показатели, на наш взгляд, с разных сторон характеризовали явление гиперметаболизма. Таковыми показателями являлись: концентрация в сыворотке крови общего белка, креатинина, мочевины, мочевой кислоты (МК), глюкозы, холестерина, триглицеридов, малонового диальдегида (МДА), диеновых конъюгат, билирубина и уровень молекул средней массы (МСМ).
Все биохимические показатели определяли с помощью наборов жидких реагентов, готовых к употреблению. Содержание веществ измеряли с помощью биохимического анализатора «Kone Progress Plus» (Финляндия). Уровень маркера эндогенной интоксикации МСМ определяли скрининговым методом по Н.И. Габриелян и со-авт. [10]. Детекцию МСМ в супернатанте проводили на спектрофотометре СФ-46 при длине
Том 8, Випуск 4
89
