CC BY
5
титр грязной воды 10_s, Ю-4, воды средней степени загрязненности Ю-1 и условно чистой воды 10,0). Опыты проводили при температуре 18—20 и 4—5°С в сырой и автоклавиро-ванной морской воде.
Установлено, что выживаемость Е. coli в загрязненной морской воде значительно ниже, чем в условно чистой, что, по-видимому, связано с антибиотическим действием токсинов, лизинов, ферментов, выделяемых в загрязненной воде бактериями-антагонистами, фитопланктоном, микрофитобентосом и другими продуцентами антибиотических веществ.
Низкая температура морской воды способствует более длительному выживанию кишечной палочки, что свидетельствует о заторможенности процессов самоочищения в условиях акваторий высоких широт.
Выживаемость в пробах воды аллохтонных микроорганизмов, несомненно, зависит от их концентрации. Мы проверяли интенсивность отмирания Е. coli, добавленных в различных концентрациях к пробам морской нативной и автоклавированной воды при температуре 4°С. Для экспериментов брали условно чистую морскую воду (.коли-титр 10,0). В нативной воде отмирание кишечной палочки во всех концентрациях идет значительно быстрее, чем в автоклавированной. Однако в обоих случаях наиболее быстрое освобождение от Е. coli наблюдалось в пробах с наименьшей концентрацией микроорганизмов.
Выводы
1. Естественная морская вода обладает значительно большей бактерицидностью, чем озерная.
2. В пробах с естественной и инактивированной морской водой за счет присутствия биологических факторов самоочищения отмирание кишечной палочки происходит быстрее, чем в автоклавированной воде.
3. В пробах морской воды, содержащихся при низкой температуре, тест^микробы отмирают медленнее, чем при 20°С, что свидетельствует о заторможенности процессов самоочищения в условиях акваторий высоких широт.
Поступила 27/1 1977 г.
УДК 6 14.777:632.95
Канд. мед. наук И. Б. Бойко, канд. биол. наук Б. А. Пулатов
МАТЕРИАЛЫ К ГИГИЕНИЧЕСКОМУ ОБОСНОВАНИЮ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ БАЗУДИНА В ВОДЕ ВОДОЕМОВ
Узбекский научно-исследовательский институт санитарии, гигиены и профзаболеваний,
Ташкент
Внедряемый в практику сельского хозяйства страны базудин относится к группе фос-форорганических соединений и является высокоэффективным препаратом в борьбе против многих вредителей сельскохозяйственных культур. Он может представлять опасность для здоровья населения при попадании в водоемы, что возможно при смыве базудина с поверхностным стоком, особенно в условиях поливного земледелия, а также при спуске сточных вод производства препарата.
Базудин — гетероциклическое соединение, относящееся к группе сложных эфиров тиофосфорной кислоты [0,0-диэтил-0-(2-изопропил-4-метил-6-пиримидил)-тиофосфат], с молекулярным весом 303,97. Температура кипения 89°С, летучесть 1,39 мг/м3, растворимость в воде 40 мг/л при 20°С. Препарат хорошо растворим в большинстве органических растворителей, быстро гидролизуется в щелочной среде. Базудин выпускается в различных препаративных формах: в виде 40—50% смачивающихся порошков, 60—80% эмульсии и гранул.
В настоящем сообщении представлены данные экспериментальных исследований по гигиеническому нормированию базудина в воде водоемов. В доступной литературе нет данных о влиянии базудина на качество воды, ее способность к самоочищению, а также о воздействии на организм теплокровных животных при длительном поступлении препарата с водой в количествах, которые могут оказаться в водоемах.
Стабильность базудина в воде
Первоначаль- День исследования
ная концентрация, внесенная в воду, мг/л 3-Я 7-й 10-й 14-й 16-й 21-й 27-й 30-й 35-й 38-й
0,6 6.0 60,0 0,12 5.08 57,0 0,11 4,27 55,1 0,10 3.87 44,9 0,08 2,2 33,45 0.04 1.11 22,1 0.45 14,9 6,£5 2,79 1,41 _
При органолептической оценке воды, содержащей базудин, выявлено, что он придает воде гнилостный запах. Порог ощущения (запах интенсивностью 1 балл) колеблется в пределах 0,19—1,56 мг/л, практический порог (запах интенсивностью 2 балла) находится в пределах 0,39—6,25 мг/л. Ввиду колебаний пороговых величин, обусловленных индивидуальной чувствительностью одораторов, полученные результаты были обработаны статистически методом Стьюдента—Фишера с целью определения нижней доверительной границы средней арифметической величины пороговой концентрации базудина по запаху. Для проверки точности и правильности проведения опытов был использован также графический метод оценки органолептических данных. Результаты оценки позволяют считать порогом ощущения по запаху концентрацию 0,39 мг/л, а практическим порогом 0,78 мг/л. Ошибка опыта не превышала 10%, что свидетельствует о достаточной надежности результатов. При изучении влияния на привкус воды установлено, что в пороговых концентрациях по запаху базудин не придает воде специфического привкуса.
О стабильности препарата судили по динамике остаточных количеств его в воде. Опыты были поставлены в специальных аквариумах. Анализ остаточных количеств базудина до исчезновения вели на газожидкостном хроматографе «Цвет-5». Были исследованы концентрации 0,6, 6,0 и 60 мг/л (см. таблицу).
Представленные данные позволяют отнести базудин к веществам, довольно стабильным с гигиенической точки зрения.
Известно, что условия водопользования населения могут быть ухудшены при нарушении самоочищающей способности водоема от органических загрязнений. Самоочищение является в основном биохимическим процессом, связанным с жизнедеятельностью разнообразной микрофлоры, и характеризуется динамикой развития и отмирания всей сапрофитной микрофлоры, а также процессом окисления органических веществ, который состоит из последовательно протекающих стадий минерализации. Интенсивность процессов самоочищения определяется по степени минерализации органических веществ и позволяет оценить степень разрушения и ликвидации органических загрязнений.
Влияние базудина на процессы самоочищения воды водоемов от органического загрязнения изучали как путем наблюдения за динамикой биохимического потребления кислорода (ВПК), отражающего первую фазу минерализации органического вещества, так и контролируя вторую фазу процесса минерализации — процесс нитрификации, и учитывали по динамике содержания аммонийного, нитритного н нитратного азота.
Полученные результаты в опытах по ВПК» и БПКг0 показали, что базудин способен первые 5 сут снижать ВПК до 40%, а в последующие дни повышать его во всех концентрациях. Интенсивность процесса повышения зависела от концентрации базудина в воде. В опытах с 60 мг/л базудина ВПК в пробах увеличивался по отношению к контролю на 20-е сутки до 140%. По всей вероятности, обнаруженные изменения в потреблении кислорода обусловлены окислением самого базудина. Проведенное наблюдение за динамикой раз-вития*и отмирания общей бактериальной флоры позволило установить, что препарат в испытанных концентрациях не оказывает выраженного влияния на динамику развития и отмирания общей бактериальной флоры.
Течение второй стадии минерализации органического загрязнения в воде определяли в моделях водоемов в присутствии этих же концентраций базудина. Полученные результаты позволили установить, что при содержании его 0,6 мг/л не было заметного влияния его на процессы аммонификации и нитрификации по сравнению с контролем, тогда как в испытанных концентрациях 6,0 и 60 мг/л обнаружено заметное изменение в аммонификации и нитрификации. Так, при аммонификации в дозе 6,0 и 60 мг/л сохранялось постоянство в сторону его увеличения, тогда как при этих дозах указанные закономерности не выявлены.
Принимая во внимание сказанное, в качестве пороговой концентрации базудина по общесанитарному показателю вредности следует принять концентрацию 0,6 мг/л. Задачей токсикологических исследований явилось изучение токсичности препарата и установление токсических и недействующих концентраций его, что позволило подойти к оценке степени его опасности и уровня безвредности. Острые опыты на лабораторных животных при перо-ральном введении базудина показали, что для белых крыс £.Оь0 равна 240 (375,3—104,1) мг/кг, для кроликов — 370 мг/кг. Кумулятивные свойства базудина изучены также на двух видах лабораторных животных, которые в течение 4 мес получали базудин перорально в дозах 1/10, 1/20 и 1/50 ЬО50- Из-за незначительной гибели животных (в группах, получавших 1/10 ЬО50 базудина, из 20 крыс погибли 5) не представилось возможным вывести коэффициент кумуляции, выраженный критерием гибели. Следовательно, кумулятивные свойства базудина выражены слабо и носят функциональный характер.
С целью установления токсического действия базудина при длительном поступлении в организм малых доз и определения недействующих доз, необходимых для нормирования препарата, был проведен 10-месячный хронический эксперимент. Четырем группам крыс ежедневно вводили базудин в дозах 4,8, 2,4, 0,48 и 0,24 мг/кг, т. е. 1/50, 1 /100, 1/500 и 1/1000 ЬО50. Кролики подопытных групп получали следующие дозы препарата: 7,4, 1.85,0,9 и 0,6 мг/кг, что соответствовало 1/50, 1/200, 1/400 и 1/600 ЬОь0. Критерием при установлении недействующих доз базудина служил специфический показатель интоксикации ФОС — ингибирование активности холинэстеразы. Дозы, при введении которых не отмечено статистически значимых изменений (для крыс 0,48 мг/кг, для кроликов 0,9 мг/кг), оценены нами как недействующие.
Сопоставление пороговых концентраций базудина по влиянию на органолептические свойства воды и санитарный режим водоемов, а также по результатам токсикологических
исследований (недействующая доза базудина в хроническом 10-месячном эксперименте на белых крысах равна 0,48 мг/кг) позволило рекомендовать ПДК препарата в воде водоемов 0,3 мг/л по органолептическому лимитирующему' показателю вредности.
Поступила 29/XI 1976 г.
УДК 615.277.4:662.613.132
Доктор биол. наук А. Я- Хесина, Т. Я- Гаевая, канд. биол. наук
А. Б. Линник
СОДЕРЖАНИЕ ПОЛИЦИКЛИЧЕСКИХ АРОМАТИЧЕСКИХ УГЛЕВОДОРОДОВ И КАНЦЕРОГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКСТРАКТОВ ИЗ САЖИ ОТОПИТЕЛЬНЫХ СИСТЕМ
Институт экспериментальной и клинической онкологии АМН СССР, Москва; Всесоюзный
центральный научно-исследовательский институт охраны труда ВЦСПС, Москва
Присутствие некоторых полициклических ароматических углеводородов (ПАУ) может усиливать или ослаблять канцерогенную активность других веществ этого класса. Сведения о количестве ПАУ в составе загрязнений окружающей среды в сочетании с изучением канцерогенной активности последних могут способствовать решению вопроса о возможности оценки канцерогенной опасности тех или иных объектов по наличию известных легко идентифицируемых соединений. С этой целью исследовали на содержание ряда ПАУ и канцерогенную активность экстракты из образцов саж, предоставленных нам Веттигом (Университет им. Гумбольдта, Берлин, ГДР).
Образцы саж были взяты из дымоходов деревообделочной мастерской, отапливаемой отходами древесины (сажа I) и домов с индивидуальным отоплением брикетами из бурого угля (сажа II). Извлечение фракции ПАУ проводили экстракцией сажи ацетоном в аппаратах Сокслета. Для использования экстракта в биологическом эксперименте ПАУ переводили в оливковое масло. Предварительные анализы ацетоновых экстрактов и масляных растворов на содержание бенз(а)пирена (БП) показали, что в оливковое масло переходит 1/3 ПАУ, остальная часть остается в осадке и не может быть использована для исследования. Путем расчета установлено, что для использования в биологическом эксперименте адекватных количеств БП необходимо проэкстрагировать 68 г сажи 1и 1483 г сажи II.
В качестве аналитического метода использовали спектрально-люминесцентное определение ПАУ при —196°С. Исследование на содержание ПАУ ацетоновых экстрактов и масел включало ряд этапов: выделение суммарной фракции ПАУ, хроматографкческое фракционирование, идентификацию соединений во фракциях, количественное определение идентифицированных соединений. Концентрированные ацетоновые экстракты (0,5 мл) хромато-графировали в тонком слое сорбента без предварительной подготовки. Для извлечения фракции ПАУ из масел наиболее эффективным оказался метод с использованием селективных растворителей — циклогексана и нитрометана (Grimmer). В нашем опыте 1,5 мл масляного экстракта растворяли в 10 мл циклогексана и в делительной воронке экстрагировали 4 раза равными объемами нитрометана. Объединенный нитрометановый экстракт концентрировали до 1 мл и хроматографировали в тонком слое незакрепленной окиси алюминия: пластина 20X20 см, сорбент II степени активности по Брокману, развитие хроматограммы в системе циклогексан : бензол (4 : 1). В свете ртутно-кварцевой лампы с фильтром УФС-6 на каждой хроматограмме отмечали 5 зон, отличающихся по цвету люминесценции, и переносили окись алюминия в воронки с пористыми фильтрами. Элюировали ПАУ с сорбента 200 мл перегнанного бензола. Для идентификации ПАУ 1 мл элюата каждой фракции вносили в кварцевую пробирку и добавляли 2 мл н-октана. Пробирку помещали в кварцевый сосуд Дьюа-ра, заполненный жидким азотом. Флюоресценцию растворов возбуждали ртутно-кварцевой лампой ДРШ-500 с фильтром УФС-2. Регистрировали спектры флюоресценции спектрометром ДФС-12. Фосфоресценцию растворов возбуждали ксеноновой лампой ДКСШ-1000 с фильтром УФС-2, а спектры фосфоресценции регистрировали на установке с фосфороскопом, собранной на основе монохроматора СКБ АМН СССР с дифракционной решеткой 1200 штрихов на 1 мм.
Запись спектров флюоресценции и фосфоресценции растворов проводили, отмечая на спектрограмме длины волн интенсивных линий, проявившихся в спектре. Сравнением спектрограмм фракций и растворов стандартных соединений в областях аналитических и наиболее интенсивных линий в спектрах флюоресценции и фосфоресценции идентифицировали отдельные ПАУ. Результаты идентификации ПАУ во фракциях представлены в табл. 1.
Количественное определение идентифицированных соединений проводили комбинированным методом добавок и внутреннего стандарта (Г. Е. Федосеева и А. Я. Хесина, 1968) по методикам, разработанным для многокомпонентных растворов стандартных соединений (Т. Я. Гаевая и А. Я. Хесина, 1974). Условия количественного определения ПАУ приведены в табл. 2. При определении их во фракциях в качестве внутреннего стандарта использовали либо фон, создаваемый люминесценцией примесей, либо линии других соединений, присутствующих в исследуемой фракции. Средние показатели, полученные путем трехкрат-
