CC BY
57Новости клинической цитологии 2020, т.24, №1, с. 10-16
Russian News of Clinical Cytology 2020, vol.24, no 1, pp. 10-16
https://doi.org/10.24411/1562-4943-2020-10102
МАРКЕРЫ ПРОГНОЗА РАЗВИТИЯ ЦЕРВИКАЛЬНОИ ИНТРАЭПИТЕЛИАЛЬНОЙ НЕОПЛАЗИИ, АССОЦИИРОВАННОЙ С ВИРУСОМ ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА ВЫСОКОГО КАНЦЕРОГЕННОГО РИСКА
В.А. Ершов
СПб Государственное бюджетное учреждение здравоохранения '"Городской клинический онкологический диспансер ", Санкт-Петербург, Россия
Актуальность. Рак шейки матки - одно из наиболее часто встречаемых среди женщин злокачественных новообразований. Ему предшествуют интраэ-пителиальные изменения, которые могут исчезать спонтанно или прогрессировать в рак. На настоящий момент нет маркеров, характеризующих исход цер-викальных интраэпителиальных неоплазий (англ. cervical intraepithelial neoplasia - CIN).
Цель исследования. Изучение информативности белков L1 и NuMAI в качестве маркеров прогноза цер-викальных интраэпителиальных неоплазий, ассоциированных с ВПЧ высокого канцерогенного риска.
Материал и методы. Биоптаты шейки матки 196 женщин с цервикальными неоплазиями, ассоциированными с ВПЧ высокого канцерогенного риска, исследованы цитологическим, гистологическим, имму-ноцитохимическим методами и методом ПЦР.
Результаты. Верифицированы ВПЧ высокого канцерогенного риска позитивные CIN I (43,37 %), CIN II (34,18 %), CIN III - тяжелая форма дисплазии (21,43 %) и карцинома in situ (1,02 %). В 81,82 % исследований CIN с ядерной экспрессией L1 и NuMA1 отметили регресс дисплазии, в 13,63 % - сохранение степени тяжести поражения плоского эпителия, в 4,55 % - про-грессирование дисплазии. В 73,07 % наблюдений CIN с экспрессией только NuMA1 плоский эпителий восстановил типичное строение, в 26,93 % - явления атипии были сохранены. В 46,15 % CIN с экспрессией только L1 отметили регресс клеточных поражений, в 48,72 % - персистенцию, в 5,13 % - прогрессирование неопла-зии. Регресс CIN с экспрессией L1 и NuMA1 или одного из этих белков впервые обнаружены спустя 6 месяцев после выявления клеточных изменений, прогрессирование - через 3 месяца.
Заключение. Интраэпителиальные неоплазии шейки матки могут завершаться регрессом, перси-стенцией или прогрессированием. При экспрессии атипичными клетками L1 и NuMA1 отмечено наибольшее количество - 81,82 %, случаев регресса CIN. При экспрессии атипичными клетками только белка NuMA1 CIN завершились регрессом или длительной
персистенцией. Течение CIN с экспрессией белка L1 характеризовалось наибольшими показателями пер-систенции и прогрессирования, отмечаемых, соответственно, в 48,72 % и 5,13 % случаев.
Ключевые слова: шейка матки, CIN, L1 ВПЧ, NuMA 1. Информация об авторах:
Ершов Владимир Анатольевич - канд. мед. наук, заведующий лабораторией ГБУЗ "Городской клинический онкологический диспансер" https://orcid.org/0000-0002-8641 -1489
Автор, ответственный за переписку: Ершов В.А. - e-mail: ershov415@gmail.com, телефоны: мобильный +79523576820, служебный: 8126070303, добавочный 51311
Как цитировать:
Ершов В.А. Маркеры прогноза развития цервикаль-ной интраэпителиальной неоплазии, ассоциированной с вирусом папилломы человека высокого канцерогенного риска. Новости клинической цитологии России. 2020;24(1 ):10-16. https://doi.org/10.24411 /15624943-2020-10102
Введение. Рак шейки матки (РШМ) остается одним из наиболее часто встречаемых среди женщин злокачественных новообразований. С начала второго десятилетия нынешнего века ежегодно в мире регистрируют более 500000 новых случаев цервикального рака [1] и до 280000 смертельных исходов данного заболевания [2]. Пик возрастных показателей смертности РШМ выявляется на 10-15 лет ранее, чем при других раковых образованиях, что делает существенным число потенциальных лет жизни, теряемых при данном заболевании [3]. Актуальным данный злокачественный процесс является и для Российской Федерации, в которой заболеваемость РШМ в 2016 году достигла максимального
за последние 30 лет значения - 15,45 на 100000 женщин [4].
В настоящее время основным этиологическим фактором РШМ признан эпителиотропный ДНК-вирус - вирус папилломы человека (ВПЧ) [5]. Согласно существующей на настоящий момент концепции вирусного канцерогенеза возникающая на фоне снижения регуляторной функции Е2 ВПЧ гиперэкспрессия вирусных белков Е6 и Е7 может запускать механизм злокачественной трансформации клетки [6], развитие которой проходит несколько этапов интраэпителиальных изменений шейки матки - стадий так называемой цервикальной интраэпителиальной неоплазии - cervical intraepithelial neoplasia (CIN), геномные изменения которой до сих пор остаются недостаточно исследованными [7].
Длительное время было принято считать, что эти интраэпителиальные изменения шейки матки, в подавляющем числе случаев прогрессируют в рак. Поэтому, в отношении CIN II-III, выявляемых ежегодно у 2-3 % женщин в мире [8], с целью предотвращения РШМ рекомендовано хирургическое вмешательство.
Опубликованные в начале XXI века результаты многолетних исследований подтвердили способность CIN к регрессу, характеризующуюся тем, что CIN I и CIN II в 60 % наблюдений исчезают спонтанно в течение первого года и в 30 % случаев - по истечению 24 месяцев [9,10,11,12]. В 10 % наблюдений CIN I и CIN II прогрессируют к CIN III и в 1-1,5 % случаев - к плоскоклеточному раку [12,13,14].
На настоящий момент остается актуальным поиск маркеров, характеризующих с высокой степенью вероятности способность атипичных клеток к регрессу или, наоборот, к нарастанию в них более тяжелых изменений. Наличие критерия прогрессии интраэпителиальной неоплазии в случае CIN I будет являться основанием проведения резекции пораженного участка слизистой, не дожидаясь дальнейшего нарастания атипии. Маркер, характерный для регресса CIN, позволит в случаях CIN II+ вместо конизации, используемой в большинстве стран мира как метод профилактики РШМ [8], провести консервативное лечение, сохраняющее целостность шейки матки и устраняющее у молодых женщин одну из причин истмико-цервикальной недостаточности, способной негативно отразиться на их репродуктивной способности. Наличие маркеров прогноза определит и тактику ведения беременных женщин, у 1 % которых ежегодно диагностируют CIN различных степеней [15].
Открытие все новых аспектов взаимодействия ВПЧ и пораженной им клетки предлагает в качестве маркеров прогноза CIN продукцию или, наоборот, отсутствие экспрессии некоторых вирусных и/или клеточных генов. Однако на настоящий момент нет ни общепринятого клинического, ни морфологического, ни молекулярно-генетического критериев [7,16], позволяющих определить исход CIN.
Такие характеристики ВПЧ как генотип высокого канцерогенного риска [11,17], наличие ин-
теграции вирусной ДНК в ДНК клетки [18,19], экспрессия белков Е2 и/или Е7 [20] и высокие -"клинически значимые" показатели "вирусной нагрузки" [21,22,23] не нашли своего применения в качестве факторов прогноза развития интраэпи-телиальных изменений, так как они были обнаружены не только при неоплазиях, но и при латентной форме папилломавирусной инфекции.
Изменения экспрессии клеточных белков Ki-67 [21,24,25], PCNA [26,27], p53 [21,28], p16(INK4a) [21,24,25,29], Bcl-2 [28], OCT-4 [30], COX-2 [24], SOX2, р63 [31] оказались более информативны в качестве дифференциальных признаков цер-викальной неоплазии разной степени тяжести [21,29]. Их корреляция с тяжестью цитологических и/или гистологических поражений [32] может быть обусловлена механизмом, не связанным с вирусным поражением клетки [33].
Наиболее информативным из всех известных на настоящий момент критериев зарекомендовал себя капсидный белок L1 [14,16,34,35,36] - специфичный для ВПЧ-поражения фактор, связанный с вирусным производством, которое осуществляется только при сохранении неизмененной продукции генов папилломавируса в неизмененном эпителии [14,16,36]. Возникающие при репликации повреждения ДНК ВПЧ приводят к нарушению цикла пораженной им клетки, которая становится генетически нестабильной и не способна осуществлять свою программу дифференцирования [37]. При этом вирусный ген L1 функционально инак-тивируется и утрачивает способность к синтезу капсидного белка, что при CIN и РШМ не позволяет сформировать вирусные частицы [14]. Использование с начала нынешнего века этого маркера в Германии позволило применить стратегию выжидания [14,35] и изучить клинические результаты CIN II+.
Еще одним специфичным фактором, отражающим клеточные изменения, ассоциированные с ВПЧ, можно считать белок ядерного митотиче-ского аппарата - nuclear mitotic apparatus protein (NuMA1) [38]. Его экспрессия в G1, S, G2 фазах клеточного цикла характеризует организацию хроматина [38] и продукцию ряда генов, в первую очередь, семейства р53 [39], свидетельствующих о контроле клеточного цикла.
Целью исследования являлось изучение информативности экспрессии белков L1 и NuMA1 в качестве маркеров прогноза цервикальных ин-траэпителиальных неоплазий, ассоциированных с ВПЧ высокого канцерогенного риска.
Материал и методы
Проведен анализ результатов цитологического, иммуноцитохимического, гистологического и молекулярно-генетического методов исследования биопсий шейки матки 196 женщин 18-62 лет, находившихся на обследовании и/или лечении в Санкт-Петербургском государственном бюджетном учреждении здравоохранения "Городской
клинический онкологический диспансер" с октября 2014 года по сентябрь 2018 года.
Всем пациенткам при первичном обращении осуществляли забор цервикальных биоптатов для цитологического, гистологического и молекуляр-но-генетического исследования.
Материал для цитологического и молекулярно-генетического исследования получали при браш-биопсии и помещали в маркированные емкости с транспортной средой.
Во всех случаях выявление и генотипирование ДНК ВПЧ в соскобе цервикального канала проводили методом мультиплексной ПЦР в режиме реального времени.
Цитологические препараты готовили из осадка, полученного методом центрифугирования. Первый (из материала эктоцервикса) и второй (из материала эндоцервикса) препараты окрашивали по методу Папаниколау. Из двух препаратов, приготовленных из объединенных осадков экто- и эн-доцервикса, в одном проводили иммуноцитохи-мическое исследование на выявление в атипичных клетках L1, в другом - NuMA1. Во всех случаях для иммуноцитохимических исследований использовали систему детекции "NovolinkTM" и моно-клональные антитела к NuMA1 (LS-B7380, 44529), LifeSpanBioSciences Inc (США) и моноклональные антитела к белку L1 вируса папилломы человека 16 генотипа - HPV 16 (CAMVIR-1, Mob 394, P333), DBS (США). Положительной реакцию считали при наличии исследуемых белков в не менее чем 5 % атипичных клеток.
Для гистологического исследования материал щипцовой биопсии и/или электроэксцизии шейки матки фиксировали в 10 % растворе формалина, обезвоживали в изопропиловых спиртах, заливали в парафиновые блоки, с помощью микротома готовили срезы толщиной 5-6 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином.
Заключения результатов цитологических и гистологических исследований формулировали в соответствии с редакциями ВОЗ, выделяя тяжелую форму диспластических изменений эпителия и интраэпителиальный рак.
С учетом результатов иммуноцитохимических исследований 62 больным CIN, в том числе 2-м пациенткам с карциномой in situ, с отрицательными реакциями на оба белка провели электроэксцизию шейки матки. 131 женщину с экспрессией атипичными клетками L1 и NuMA1 или одного из них и 3-х беременных с отрицательными реакциями на антитела к обоим ядерным протеинам оставили для динамического наблюдения. Контрольные осмотры и забор материала для цитологического исследования проводили с периодичностью каждые 3 месяца. 84 женщины наблюдали свыше 24 месяцев, 6 - 24 месяца, 12 - 21 месяц, 1 - 18 месяцев, 7 - 15 месяцев, 2 - 12 месяцев, 11 - 9 месяцев, 9 -6 месяцев, 2 - 3 месяца. При выявлении при контрольных осмотрах в 5 случаях прогрессирования первично выявленной степени CIN провели элек-троэксцизию шейки матки.
Достоверность различий полученных результатов оценивали на основании критерия Фишера.
Результаты
В результате морфологического исследования у 85 (43,37 %) пациенток 18-62 лет диагностирована CIN I, у 67 (34,18 %) 23-53 лет - CIN II, у 42 (21,43 %) 26-56 лет - тяжелая форма дисплазии (CIN III), у 2 (1,02 %) 30 и 33 лет - карцинома in situ (CIN III) шейки матки.
ВПЧ 16 генотипа обнаружили в 135 (68,88 %) случаях, его сочетания с папилломавирусами филогенетической группы (ФГГ) а9 - в 47 (23,98 %) и с ФГГ а7 - в 14 (7,14 %) исследованиях.
В результате иммуноморфологических исследований у 66 (33,67 %) женщин выявили экспрессию капсидного белка L1 ВПЧ 16 генотипа и белка NuMA1, у 39 (19,9 %) - продукцию протеина L1, у 26 (13,27 %) - белка NuMA1. У 65 (33,16 %) пациенток антител к обоим белкам не обнаружили (таблица 1).
10 (5,1 %) женщин были беременны. Из них CIN
I степени верифицирована у 2-х (1,02 %) пациенток в первом триместре, CIN II - у 2-х (1,02 %) в первом и у 1-й (0,51 %) - во втором триместре. У 4-х (2,04 %) женщин тяжелая дисплазия (CIN III) выявлена в сроки 14-15 недель, у 1-й (0,51 %) - на 30 неделе беременности.
Из всех случаев CIN I степени продукцию обоих белков выявили в 38 (44,71 %), экспрессию только L1 - в 23 (27,06 %), только NuMA1 - в 9-и (10,58 %) случаях. Отсутствие обоих белков обнаружили в 15 (17,65 %) случаях (таблица 1). Всего белок L1 наблюдали в 61 (71,76 %), NuMA1 - в 47 (55,29 %), случаях CIN I.
При CIN II продукцию обоих белков отметили в 18 (26,87 %), экспрессию только L1 - 11 (16,41 %) (вклейка 7, рис. 1), только NuMA1 - в 12 (17,91 %) исследованиях (вклейка 7, рис. 2). Отсутствие обоих белков обнаружили в 26 (38,81 %) случаях. Всего L1 определили в 29 (43,28 %), белок NuMA1 - в 30 (44,78 %) случаях CIN II степени.
При тяжелой дисплазии (CIN III) продукцию обоих белков обнаружили в 10 (23,82 %), экспрессию только L1 - 5-и (11,9 %), только NuMA1 - в 5-и (11,9 %) исследованиях. Отсутствие обоих белков выявили в 22 (52,38 %) случаях. Всего белок L1 определили в 15 (35,71 %), NuMA1 - в 15 (35,71 %) случаях тяжелой дисплазии (CIN III).
При интраэпителиальном раке (CIN III) в обоих случаях экспрессия NuMA1 и L1 в атипичных клетках отсутствовала.
Положительные реакции на L1 и NuMA1 выявили у всех беременных с CIN I степени и у 2-х женщин с тяжелой дисплазией (CIN III) во втором и третьем триместрах, соответственно. Экспрессию белка NuMA1 отметили у 2-х пациенток с CIN
II в первом и втором триместрах и у 1-й - с тяжелой дисплазией (CIN III) во втором триместре. Отрицательные реакции на антитела к обоим белкам обнаружены у 1-й женщины в первом триместре
с CIN II и у 2-х - во втором триместре с тяжелой дисплазией (CIN III).
В 54 (81,82 %) из 66 исследований CIN с ядерной экспрессией L1 и NuMAl отметили регресс дисплазии (таблица 2). Из них плоский эпителий шейки матки восстановил типичное строение у 35 женщин с CIN I, у 9-и - с CIN II, у 4-х - с тяжелой дисплазией (CIN III) спустя 12 месяцев, у 4-х больных CIN II и у 2-х с тяжелой дисплазией (CIN III) -через 9 месяцев.
В 9-и (13,63 %) исследованиях CIN с экспрессией обоих белков выявили сохранение степени тяжести поражения плоского эпителия. Из них в 1-м случае CIN I, в 4-х CIN II и в 4-х случаях тяжелой дисплазии (CIN III) в течение 12 месяцев наблюдали изменения эпителия, выявленные первично (вклейка 7, рис. 3).
В 3-х (5,66 %) случаях CIN с продукцией в атипичных клетках обоих протеинов обнаружили прогрессирование дисплазии. Из них в 2-х случаях CIN I через 6 месяцев выявили критерии CIN II, в 1-м случае CIN II через 9 месяцев - тяжелую дис-плазию (CIN III).
В 18 (46,15 %) из 39 случаев CIN с экспрессией только L1 в ядрах атипичных клеток отметили регресс клеточных поражений (таблица 2). Из них у 10 пациенток ЦИН I, у 2-х с CIN II и у 2-х с тяжелой дисплазией (CIN III) спустя 12 месяцев обнаружены критерии эктопии, а у 2-х больных CIN II и у 2-х с тяжелой дисплазией (CIN III) спустя 12 месяцев критерии CIN I степени шейки матки.
В 19 (48,72 %) исследованиях CIN с положительной реакцией на антитела к L1 первично выявленные изменения плоского эпителия были сохранены в срок от 6 до 30 месяцев. Из них первично выявленную CIN I отмечали в 7-и случаях в срок до 6 месяцев, в 3-х случаях - в течение 12 месяцев и в 3-х - в течение 24 месяцев. Изменения плоского эпителия шейки матки, выявленные первично, отмечали в 4-х случаях CIN II в течение 12 месяцев и в 1-м - в течение 30 месяцев, в 1-м случае тяжелой дисплазии (CIN III) - в течение 12 месяцев.
В 2-х (5,13 %) случаях у больных CIN II обнаружено прогрессирование дисплазии (вклейка 7, рис. 3). Из них у 1-й больной через 3 месяца и у 1-й через 9 месяцев выявлены критерии тяжелой дис-плазии (CIN III).
В 19 (73,07 %) наблюдениях CIN с экспрессией только NuMA1 в ядрах атипичных клеток плоский эпителий восстановил типичное строение (таблица 2). Из них отсутствие атипии обнаружили спустя 6 месяцев у 8-и больных ЦИН I, через 12 месяцев у 10 CIN II и у 1-й CIN III. В остальных 7-и (26,93 %) исследованиях в срок до 24 месяцев явления атипии были сохранены в 1-м случае CIN I, в 2-х случае CIN II, в 4-х случаях CIN III.
Всего из 131 исследования CIN с ядерной экспрессией L1 и NuMA1 или одного из этих белков регресс дисплазии отметили в 91 (69,46 %), пер-систенцию в 35 (26,72 %), прогрессирование в 5-и (3,82 %) случаях.
Через 3 месяца наблюдения у всех беременных CIN I с экспрессией обоих белков отметили восстановление типичного строения плоского эпителия, у 1-й с CIN III - признаки эндоцервикальной эктопии. У 1-й больной с тяжелой дисплазией (CIN III) с обоими положительными маркерами только после родов отметили восстановление эпителия. Через 3 месяца у беременных CIN II с экспрессией NuMAl наблюдали снижение степени атипии до CIN I, у беременной CIN III изменения эпителия присутствовали до родов. У женщин с отрицательными реакциями на оба белка с CIN II и CIN III тяжесть поражения плоского эпителия шейки матки была сохранена на всем протяжении беременности. При контрольных осмотрах после родов отметили восстановление типичного строения плоского эпителия.
Полученная нами частота выявление регресса CIN в 72 (68,57 %) и персистенции в 28 (26,67 %) L1-положительных случаях (в сочетании с экспрессией NuMA1 или без нее) превысила литературные данные [14,40], а показатели прогрессии CIN, отмечаемой в 5 (4,76 %) L1-позитивных случаях, наоборот, им уступали [11,14,16,17,41].
Наиболее благоприятный исход отмечен в случаях NuMA1-позитивных CIN с сохранением контроля клеточным циклом и способностью пораженных клеток к дальнейшей дифференцировке, которые завершились в наших исследованиях или регрессом или длительной персистенцией.
Регресс случаев CIN с сочетанной экспрессией белков L1 и NuMA1 атипичными клетками превышал его численность в L1-позитивных дисплази-ях (р=0,0112), а персистенция, наоборот, им уступала (таблица 2). Показатели прогрессирования CIN (таблица 2) были сопоставимы (р<0,05) с собственными аналогичными случаями ЦИН с экспрессией только белка L1 и, по-видимому, могли быть обусловлены папилломавирусной инфекцией. Если регресс и персистенция CIN в наших исследованиях объяснимы сохранением атипичными клетками контроля клеточного цикла и их способности к последующей дифференцировке, то механизм прогрессии CIN требует дальнейшего изучения, по-видимому, с учетом сохранения исследуемыми клетками свойств стволовых клеток эпителия шейки матки.
Наступление регресса CIN в сроки от 6 до 12 месяцев согласуется с литературными данными [9,10,11]. Длительность персистенции CIN от 12 до 30 месяцев и выявление прогрессирования в сроки от 3 до 9 месяцев были сопоставимы [14,42] или наступили ранее временных параметров, изложенных в других исследованиях [9,11].
Механизм регресса 3-х случаев CIN с отрицательными реакциями на L1 и NuMA1, выявленный после родов, требует дальнейшего изучения.
Заключение. Интраэпителиальные неоплазии шейки матки могут завершаться регрессом, пер-систенцией или прогрессированием. При экспрессии атипичными клетками L1 и NuMA1 отмечено наибольшее количество - 81,82 % случаев регресса
CIN. При экспрессии атипичными клетками только белка NuMA1 CIN завершились регрессом или длительной персистенцией. Течение CIN с экспрессией белка L1 характеризовалось наибольшими показателями персистенции и прогрессирова-ния, отмечаемых, соответственно, в 48,72 % и 5,13 % случаев. Регресс CIN с экспрессией L1 и NuMA1 или одного из этих белков впервые обнаружили спустя 6 месяцев после выявления клеточных изменений.
Автор заявляет об отсутствии конфликта интересов.
Лигература/References
1. Nayir T, Okyay RA, Nazlican E, Yesilyurt H, Akb ab a M, Ilhan B, Kemik A. Cervical Cancer Screening in an Early Diagnosis and Screening Center in Mersin, Turkey. Asian Pac J Cancer Prev. 2015;16(16):6909-12.
2. Lorenzi AT, Syrjänen KJ, Longatto-Filho A. Human papillomavirus (HPV) screening and cervical cancer burden. A Brazilian perspective. Virol. J. 2015; 12: 112. https:doi.org/ 10.1186/s12985-015-0342-0
3. Maguire RL, Vidal AC, Murphy SK, Hoyo C. Disparities in Cervical Cancer Incidence and Mortality: Can Epigenetics Contribute to Eliminating Disparities? Adv Cancer Res. 2017;133:129-156. https:doi.org/10.1016/bs.acr.2016.09.001.
4. Каприн А. Д., Старинский В. В., Петрова Г. В. ред. Состояние онкологической помощи населению России в 2016 году. М.: МНИОИ им. П. А. Герцена - филиал ФГБУ "НМИРЦ" Минздрава России; 2017. [Kaprin AD, Starinskiy VV, Petrova GV. eds.. Condition of the oncological help to the population of Russia in 2016. Moscow: M.: FGBU "MNIOI im. P.A. Gercena" Minzdrava Rossii; 2017. (In Russ.)]
5. zur Hausen H. Papillomaviruses and cancer: from basic studies to clinical application. Nat. Rev. Cancer. 2002; 2(5): 342-50. https:doi.org/10.1038/nrc798
6. Doorbar J. Molecular biology of human papillomavirus infection and cervical cancer. Clin. Sci. (Lond.). 2006; 110: 525-41. https:doi.org/10.1042/ CS20050369
7. Jung SH, Choi YJ, Kim MS, Baek IP, Lee SH, Lee AW, Hur SY, Kim TM, Lee SH, Chung YJ. Progression of naive intraepithelial neoplasia genome to aggressive squamous cell carcinoma genome of uterine cervix. Oncotarget. 2015;6(6): 4385-93. https:doi.org/ 10.18632/oncotarget.2981м
8. Santesso N, Mustafa RA, Schünemann HJ, Arbyn M, Blumenthal PD, Cain J, Chirenje M, Denny L, De Vuyst H, Eckert LO, Forhan SE, Franco EL, Gage JC, Garcia F, Herrero R, Jeronimo J, Lu ER, Luciani S, Quek SC, Sankaranarayanan R, Tsu V, Broutet N; Guideline Support Group. World Health Organization Guidelines for treatment of cervical intraepithelial neoplasia 2-3 and screen-and-treat strategies to prevent cervical cancer. Int J Gynaecol Obstet. 2016 Mar;132(3):252-8. https:doi.org/10.1016/j. ijgo.2015.07.038.
9. Moscicki A-B, Ma Y, Wibbelsman C, Darragh TM, Powers A, Farhat S, Shiboski S. Rate of and Risks for Regression of CIN-2 in adolescents and young women. Obstet Gynecol. 2010 Dec; 116(6): 1373-1380. https:doi.org/10.1097/AOG.0b013e3181fe777f
10. Munro A, Powell RG, A Cohen P, Bowen S, Spilsbury K, O'Leary P, Semmens JB, Codde J, Williams V, Steel N, Leung Y. Spontaneous regression of CIN2 in women aged 18-24 years: a retrospective study of a state-wide population in Western Australia. Acta Obstet Gynecol Scand. 2016 Mar;95(3):291-8. https:doi.org/10.1111/aogs.12835. Epub 2016
11. D'Ottaviano MGL, Discacciati MG, Andreoli MA, Costa MC, Termini L, Rabelo-Santos SH, Villa LL, Zeferino LC. HPV 16 Is Related to the Progression of Cervical Intraepithelial Neoplasia Grade 2: A Case Series. Obstet Gynecol Int. 2013; 2013: 328909. https:doi.org/10.1155/2013/328909
12. Costa C, Espinet B, Molina MA, Salgado R, Salido M, Baró T, Fusté P, Mancebo G, Carreras R, Solé F, Serrano S, Alameda F. Analysis of gene status in cervical dysplastic lesions and squamous cell carcinoma using tissue microarrays. Histol. Histopathology. 2009; 24(7): 821-9. https:doi.org/10.14670/HH-24.821
13. Киселев В. И., Муйжнек Е. Л. Молекулярные механизмы развития дисплазии шейки матки: новые знания - новые возможности. М.; 2012. [Kiselev VI, Mujzhnek EL. Molecular mechanisms of development of displasia of cervix uteri - new opportunities. M.; 2012. (in Russ.).]
14. Griesser H, Sander H, Walczak C, Hilfrich RA. HPV vaccine protein L1 predicts disease outcome of high-risk HPV+ early squamous dysplastic lesions. Am. J. Clin. Pathol. 2009; 132(6): 840-5. https:doi. org/10.1309/AJCPCU0HBFFFGDTV
15. Frega A, Verrone A, Manzara F, Schimberni M, Catalano A, Milazzo GN, Marziani R, Cozza G, Bianchi P, French D, Sesti F, Caserta D. Expression of E6/E7 HPV-DNA, HPV-mRNA and colposcopic features in management of CIN2/3 during pregnancy. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2016; 20(20):4236-42.
16. Stemberger-Papic S., Vrdoliyak-Mozetic D., Ostojic D. V., Rubesa-Mihaliyevic R., Manestar M. Evaluation of the HPV L1 capsid protein in prognosis of mild and moderate dysplasia of the cervix uteri. Coll. Antropol. 2010; 34(2): 419-23.
17. Jaisamrarn U, Castellsagué X, Garland SM, Naud P, Palmroth J, Del Rosario-Raymundo MR, Wheeler CM, Salmerón J, Chow S-N, Apter D, Teixeira JC, Skinner SR, Hedrick J, Szarewski A, Romanowski B, Aoki FY, Schwarz TF, Poppe WAJ, Bosch FX, de Carvalho NS, Germar MJ, Peters K, Paavonen J, Bozonnat M-C, Descamps D, Struyf F, Dubin GO, Rosillon D, Baril L, HPV PATRICIA Study Group, Cameron DW. Natural History of Progression of HPV Infection to Cervical Lesion or Clearance: Analysis of the Control Arm of the Large, Randomised PATRICIA Study. PLoS One. 2013; 8(11): e79260. https:doi.org/10.1371/journal. pone.0079260
18. Arias-Pulido H, Peyton CL, Joste NE, Vargas H, Wheeker CM. Human papillomavirus type 16
integration in cervical carcinoma in situ and in invasive cervical cancer. J Clin Microbiol. 2006; 44(5):1755-62. https:doi.Org/10.1128/JCM.44.5.1755-1762.2006
19. Wang L, Shen H, Feng B, Zhu D, Yu L, Tian X, Ren C, Gao C, Li X, Ma D, Hu Z, Wang H. Reduction in the copy number and expression level of the recurrent human papillomavirus integration gene fragile histidine triad (FHIT) predicts the transition of cervical lesions. PLoS One. 2017;12(4):e0175520. https:doi.org/10.1371/journal.pone.0175520. eCollection 2017.
20. Xue Y, Bellanger S, Zhang W, Lim D, Low J, Lunny D, Thierry F. HPV16 E2 is an immediate early marker of viral infection, preceding E7 expression in precursor structures of cervical carcinoma. Cancer Res. 2010; 70(13):5316-25. https:doi.org/10.1158/0008-5472. CAN-09-3789
21. Chang MS, Oh S, Jung EJ, Park JH, Jeon HW, Lee TS, Kim JH, Choi E, Byeon SJ, Park IA. High-risk human papillomavirus load and biomarkers in cervical intraepithelial neoplasia and cancer. APMIS. 2014;122(5):427-36. https:doi.org/10.1111/ apm.12163.
22. Luo H, Belinson JL, Du H, Liu Z, Zhang L, Wang C, Qu X, Pretorius RG, Wu R. Evaluation of Viral Load as a Triage Strategy With Primary High-Risk Human Papillomavirus Cervical Cancer Screening. J Low Genit Tract Dis. 2017 Jan;21(1):12-16. https:doi. org/10.1097/LGT.0000000000000277.
23. Depuydt CE, Jonckheere J, Berth M, Salembier GM, Vereecken AJ, Bogers JJ. Serial type-specific human papillomavirus (HPV) load measurement allows differentiation between regressing cervical lesions and serial virion productive transient infections. Cancer Med. 2015;4(8):1294-302. https:doi.org/10.1002/cam4.473.
24. Zhou WQ, Sheng QY, Sheng YH, Hou WJ, Xu GX, Wu YM, Lu H. Expressions of survivin, P16(lNK4a), COX-2, and Ki-67 in cervical cancer progression reveal the potential clinical application. Eur J Gynaecol Oncol. 2015;36(1):62-8.
25. Bergeron C, Ikenberg H, Sideri M, Denton K, Bogers J, Schmidt D, Alameda F, Keller T, Rehm S, Ridder R; PALMS Study Group. Prospective evaluation of p16/ Ki-67 dual-stained cytology for managing women with abnormal Papanicolaou cytology: PALMS study results. Cancer Cytopathol. 2015; 123(6): 373-81. https:doi.org/10.1002/cncy.21542.
26. Goel MM, Mehrotra A. Immunohistochemical expression of MIB-1 and PCNA in precancerous and cancerous lesions of uterine cervix. Indian J Cancer. 2013;50(3):200-5. https:doi.org/10.4103/0019-509X.118729.
27. Emanuele MJ, Ciccia A, Elia AE, Elledge SJ. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA)-associated KIAA0101/PAF15 protein is a cell cycle-regulated anaphase-promoting complex/cyclosome substrate. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011;108(24):9845-50. https:doi.org/10.1073/pnas.1106136108.
28. Shukla S, Dass J, Pujani M. p53 and bcl2 expression in malignant and premalignant lesions of uterine cervix and their correlation with human
papilloma virus 16 and 18. South Asian J Cancer. 2014;3(1):48-53. https:doi.org/10.4103/2278-330X.126524.
29. Krishnappa P, Mohamad IB, Lin YJ, Barua A. Expression of P16 in high-risk human papillomavirus related lesions of the uterine cervix in a government hospital, Malaysia. Diagn. Pathol. 2014; 9: 202. https:doi.org/10.1186/s13000-014-0202-z.
30. Stefanidis K, Pergialiotis V, Christakis D, Patta J, Stefanidi D, Loutradis D. OCT-4 and DAZL expression in precancerous lesions of the human uterine cervix. J Obstet Gynaecol Res. 2015;41(5):763-7. https:doi. org/10.1111/jog.12640.
31. Canham M, Charsou C, Stewart J, Moncur S, Hoodless L, Bhatia R, Cong D, Cubie H, Busby-Earle C, Williams A, McLoughlin V, Campbell JD,Cuschieri K, Howie S. Increased cycling cell numbers and stem cell associated proteins as potential biomarkers for high grade human papillomavirus+ve pre-neoplastic cervical disease. PLoS One. 2014;9(12):e115379. https:doi.org/10.1371/journal.pone.0115379. eCollection 2014.
32. Vasilescu F, Ceau§u M, Tanase C, Stanculescu R, Vladescu T, Ceau§u Z P53, p63 and Ki-67 assessment in HPV-induced cervical neoplasia. Rom J Morphol Embryol. 2009;50(3):357-61.
33. Mulvany NJ, Allen DG, Wilson SM. Diagnostic utility of p16INK4a: a reappraisal of its use in cervical biopsies. Pathology. 2008 Jun;40(4):335-44. https:doi. org/10.1080/00313020802035907.
34. Xiao W, Bian M, Ma L, Liu J, Chen Y, Yang B, Wu Q. Immunochemical analysis of human papillomavirus L1 capsid protein in liquid-based cytology samples from cervical lesions. Acta Cytol. 2010; 54(5): 661-7. https:doi.org/10.1159/000325229
35. Schmidt D. Precancerous lesions of the cervix. Biomarkers in cytological diagnosis. Pathologe. 2011; 32(6): 484-90. https:doi.org/10.1159/000325229
36. Ungureanu C, Socolov D, Anton G, Mihailovici MS, Teleman S. Immunocytochemical expression of p16INK4a and HPV L1 capsid proteins as predictive markers of the cervical lesions progression risk. Rom. J. of Morphol. and Embryol. 2010; 51(3): 497503.
37. Korzeniewski N., Spardy N., Duensing A., Duensing S. Genomic instability and cancer: lessons learned from human papillomavirus. Cancer Lett. 2011; 305(2): 113-22. https:doi.org/10.1016/j. canlet.2010.10.013.
38. Nguyen CL, Munger K. Human papillomavirus E7 protein deregulates mitosis via an association with nuclear mitotic apparatus protein 1. J. Virol. 2009; 83(4):1700-07. https:doi.org/10.1128/JVI.01971-08
39. Kivinen K, Taimen P, Kallajoki M. Silencing of Nuclear Mitotic Apparatus protein (NuMA) accelerates the apoptotic disintegration of the nucleus. Apoptosis. 2010; 15(8): 936-45. https:doi. org/10.1007/s10495-010-0506-8.
40. Moscicki A.B., Schiffman M., Burchell A. Updating the natural history of human papillomavirus and anogenital cancers. Vaccine. 2012; 30(5): F24-33. https:doi.org/ 10.1016/j.vaccine.2012.05.089.
41. Persson, M., Brismar Wendel S., Ljungblad L. High-risk human papillomavirus E6/E7 mRNA and L1 DNA as markers of residual/recurrent cervical intraepithelial neoplasia. Oncol. Rep. 2012; 28(1):346-52.
42. Zhang H., Zhang T., You Z. Positive surgical margin, HPV persistence, and expression of both TPX2 and
PD-L1 are associated with persistence/recurrence of cervical intraepithelial neoplasia after cervical conization. PLoS One. 2015; 10(12):e0142868.
https:doi.org/10.1371/journal. pone.0142868.
eCollection 2015
MARKERS OF THE FORECAST OF DEVELOPMENT OF CERVICAL INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA BY HIGH-RISK HUMAN PAPILLOMAVIRUS
V.A. Ershov
Municipal Clinical Oncology Dispensary, St.-Petersburg, Russia
Introduction. Cancer cervix uteri - one of malignant new growths most often met among women. To it precede intraepithelial changes which can disappear spontaneously or progress into cancer. For the present moment there are no the markers describing an outcome cervical intraepithelial neoplasia (CIN).
The purpose of research. The expression L1 HPV and NuMA1 as factors of prognosis HPV-positive cervical intraepithelial neoplasies by high-risk human papillomavirus.
Material and methods. The biopsies of 196 women from HPV-positive cervical neoplasies were studied by cytological, histological, immunocytochemical methods and PCR.
Results. Are verified HPV-HR-positive CIN I (43.37 %), CIN II (34.18 %), CIN III - severe dysplasia (21.43 %), carcinoma in situ (1.02 %). In 81.82 % of researches CIN with expression of L1 and NuMA1 have regression of dysplasia, in 13.63 % - persistence of grade squamous intraepithelial lesion, in 4.55 % - progression of dysplasia. In 73.07 % cases CIN with expression of NuMA1 have regression, in 26.93 % - persistence of dysplasia. In 46.15 % of researches CIN with expression of L1 have regress of dysplasia, in 48.72 % - persistence of grade squamous intraepithelial lesion, in 5.13 % - progression of dysplasia. Regression of CIN with expression L1 and NuMA1 or one of these proteins, for the first time is revealed later 6 months, progress - later 3 months.
The conclusion. CIN can come to the end with regress, persistence or progressing. At expression of atypical cells L1
and NuMA1 the greatest quantity - 81.82 %, cases of regress CIN is noted. At expression of atypical cells only NuMA1 CIN have come to the end with regress or long persistence. Current CIN with expression L1 HPV was characterized by the greatest parameters persistence and the progressing, marked, accordingly, in 48.72 % and 5.13 % of cases.
Key words: cervix uteri, CIN, L1 HPV, NuMA1
Information about the authors:
Ershov V. A. - https://orcid.org/0000-0002-8641-1489 Corresponding author:
V. A. Ershov - e-mail: ershov@gkod.spb.ru, Phone: mobile +79523576820, service +78126070303
To Cite This Article: Ershov V. A. Markers of the forecast of development of cervical intraepithelial neoplasia by high-risk human papillomavirus. Russian News of Clinical Cytology. 2020;24(1):10-16. https://doi.org/10.24411/1562-4943-2020-10102
The author declares no conflict of interest.
Иллюстрации к статье «МАРКЕРЫ ПРОГНОЗА РАЗВИТИЯ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ ИНТРАЭПИТЕЛИАЛЬНОЙ НЕОПЛАЗИИ, АССОЦИИРОВАННОЙ С ВИРУСОМ ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА ВЫСОКОГО КАНЦЕРОГЕННОГО РИСКА» Ершов В.А., стр. 10
Illustrations for the article «MARKERS OF THE FORECAST OF DEVELOPMENT OF CERVICAL INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA BY HIGH-RISK HUMAN PAPILLOMAVIRUS» Ershov V.A., рage 10
Рис. 1. Факторы прогноза развития CIN. Иммунопероксидаз-ное окрашивание. Экспрессия капсидного белка L1 ВПЧ 16 генотипа в атипичных клетках CIN II. х400.
Fig. 1. CIN development prediction factors. Immunoperoxidase staining.
Expression of the HPV 16 genotype capsid protein L1 in atypical CIN II cells. х400.
Рис. 2. Факторы прогноза развития CIN. Иммунопероксидаз-ное окрашивание. Экспрессия NuMA1 в атипичных клетках CIN II. х630.
Fig. 2. CIN development prediction factors. Immunoperoxidase staining. NuMA1 expression in atypical CIN II cells. х630.
>24
21
месяцы 15
10
20
30
40
50
60
70
80 90
9
3
0
□ Прогрессия ППерсистенция □ Регресс
Рис. 3. Исход CIN, ассоциированных с ВПЧ 16 генотипа. Fig. 3. The outcome of CIN associated with HPV genotype 16.
