CC BY
11ЛАБОРАТОРНЫЕ МОДЕЛИ РЕПЛИКАЦИИ ВИРУСА ГЕПАТИТА С. Потребность
в удобных и дешевых лабораторных моделях для HCV-инфекции очень актуальна. Их отсутствие долго сдерживало развитие научных и прикладных исследований в изучении этой инфекции. К настоящему времени создан ряд интересных генноинженерных моделей in vivo и in vitro.
В 1999 г. была создана система репликации субгеномной РНК HCV в гепатомной клеточной линии [Lohmann V. и соавторы]. Однако эта система имела недостатки, связанные с тем, что невозможно было проанализировать полный клеточный цикл, процесс проникновения и выхода вируса из клетки. А эти процесссы очень важны для целенаправленного создания и испытания противовирусных фармакологических агентов ивакцин.
Наиболее оптимальными для изучения всех аспектов HCV-инфекции являются чувствительные лабораторные животные, круг которых очень ограничен. Шимпанзе до сих пор остаются единственными лабораторными животными, наиболее полно воспроизводящими HCV-инфекцию. Имеются однократные сообщения о воспроизведении HCV-инфекции в древесных землеройках (тупаях) [Xie Z.C. и соавторы, 1998] и в совиных обезьянах [Asher L. и соавторы, 1994]. Как суррогатная модель могут рассматриваться тамарины, чувствительные к вирусу GBV-B (очень близкий к HCV вирус). Но инфицирование тамарин вирусом GBV-B обычно заканчивается самоэлиминацией вируса. Еще одна модель - трансгенные мыши, содержащие хромосомно интегрированную ДНК полипротеина HCV [Moriya К. и соавторы, 1998]. Однако по поводу этой модели остаются сомнения: насколько реально она воспроизводит процессы проникновения и выхода вируса.
Еще в 1995 г. Galun Е. и соавторы предложили использовать иммунодефицитных мышей для трансплантации человеческих фрагментов печени [Galun E. и соавторы, 1995]. В 2001 г. Mercer D.F. и соавторы создали новую мышиную модель из трансгенных (Alb-uPA) и иммунодефицитных мышей, что позволило осуществить ортотопическую пересадку человеческих гепатоцитов. Экспрессия мышиного активатора плазминогена урокинизного типа под транскрипционным контролем альбуминового промотора (Alb-uPA) запускает программируемую гибель мышиных гепатоцитов, создавая тем самым благоприятное окружение для трансплантированных человеческих гепатоцитов. Поскольку клетки, не экспрессирующие этот трансген, имеют ростовое преимущество, то у трансгенных мышей в печени преобладают либо человеческие трансплантированные гепатоциты, либо мышиные гепатоциты, у которых элиминировал трансген Alb-uPA. Элиминация двух трансгенов сразу маловероятна. Действительно, у гомозиготных по трансгену Alb-uPA мышей преобладали трансплантированные человеческие гепатоциты. Причем содержание человеческих гепатоцитов у таких животных было значительным -почти 50% от массы клеток печени.
Введение таким химерным животным сыворотки от людей, имеющих гепатит С, приводило к появлению виремии HCV у большинства мышей (75%). Причем РНК HCV детектируется продолжительно (до 35 недель), достигая титров 3x104 - 3x106 копий/мл. Величины титров напоминают те, что наблюдаются у инфицированных людей. В пользу активной репликации и продукции HCV в этих животных свидетельствуют следующие факты: увеличение вирусных титров на 3 логарифма после инокуляции, выявление минус-цепи РНК в печени и пассирование вируса в нескольких поколениях животных.
Эта химерная мышиная модель удобна для ведения HCV-инфекции тем, что репликация вируса идет в человеческих гепатоцитах, что позволяет изучать естественное течение инфекции и проводить нейтрализационный тест in vivo. Заманчиво использование этой модели при анализе действия ингибиторов вирусной сериновой протеазы или ингибиторов РНК-зависимой РНК-полимеразы. Однако в такой системе невозможно изучать активацию и метаболизм этих ингибиторов, так как в человечеком организме она может быть иной, В этой химерной мышиной модели можно анализировать действие рибозимов и противовирусных антисенсорньгх олигонуклеотидов, а также веществ, препятствующих проникновению вируса в клетку, и проведение генетических экспериментов с направленной мутацией вариантов HCV,
и
приводящих к нарушениям репликации вируса. Следует подчеркнуть, что и в этой лабораторной животной модели создается HCV-инфекция, приближенная кчеловеческой. Она не воспроизводит полностью течение HCV-инфекции у человека, так как не учитывается воздействие иммунной системы человека на вирус.
Таким образом, к настоящему времени наряду с известными животными моделями созданы удобные для определенного круга экспериментов трансгенные лабораторные животные и геноинженерные системы для репликации HCV in vitro. Л. И. Николаева, ГУ НИИ полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН, Московская обл.
ВНИМАНИЕ!!!
С 1 января 2000 года в Интернете по адресу www. hepatitinfo. ru открыта страница нашего некоммерческого партнерства «ГЕПАТИТИНФО».
Только на этой странице Вы найдете:
Полнотекстовые варианты бюллетеня «Мир вирусных гепатитов» и бюллетеня «Вирусные гепатиты: достижения и перспективы», издаваемых при содействии Московского представительства фирмы «ШерингПлау» (до выпуска их печатных аналогов).
Информацию о различных конференциях с опубликованием наиболее интересных тезисов.
Электронную обновляемую версию «Энциклопедический словарь -Вирусные гепатиты» (М.С. Балаян и М.И. Михайлов).
Специальный раздел, посвященный препарату «Зеффикс» ("«Ламивудин») фирмы «ГлаксоВэллком». Вы найдёте тезисы, слайды и ещё много разнообразной информации.
ЗАХОДИТЕ, НЕ ПОЖАЛЕЕТЕ.
МЕДИЦИНСКАЯ
РАВ ОЧНАЯ
КРУГЛОСУТОЧНО БЕСПЛАТНО
(095) 964-8401 (095) 964-8403
• о видах, объемах, стоимости медицинских услуг,
• о порядке госпитализации в федеральные медицинские центры,
• о ведущих специалистах России по профилю заболевания,
9 об условиях пребывания пациентов в стационарах,
• о лечении наркотической и алкогольной зависимости у подростков и взрослых.
Служба располагает наиболее полной информацией о деятельности медицинских учреждений.
