Научная статья на тему 'Лабораторная диагностика листериоза экспериментальные и клинические исследования'

Лабораторная диагностика листериоза экспериментальные и клинические исследования Текст научной статьи по специальности «Прочие медицинские науки»

CC BY
1665
103
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
LABORATORY DIAGNOSTIC / LISTERIOSIS / ЛАБОРАТОРИЯЛЫқДИАГНОСТИКА / ЛИСТЕРИОЗ / ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Аннотация научной статьи по прочим медицинским наукам, автор научной работы — Арзымбетова Ж.Х., Ахметова А.Т., Нургалиева К.Ж.

В последние десятилетия повсеместно отмечается рост заболеваемости листериозом, что связано как с истинным подъемом заболеваемости, так и с улучшением лабораторной диагностики. С целью повышения высеваемости бактерий применяется использование селективных сред и метод холодового обогащения. Схема выделения листерий в зависимости от контаминации и количества листерий в исследуемом материале включаетлибо непосредственный высев на селективный агар, либо обогащение материала на селективных бульонах.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по прочим медицинским наукам , автор научной работы — Арзымбетова Ж.Х., Ахметова А.Т., Нургалиева К.Ж.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

LABORATORY DIAGNOSTIC OF LISTERIOSIS

During the last 10 years incidence oflisteriosis is permanentlyincreasing everywhere. There are 2 reasons of this fact real growing of the incidence as well as the improvement of laboratory diagnostic. For increasing the quality of Listeria testing specialists recommend to use selective culture and method of cold inreaching. The scheme of Listerias' allocation depending on contamination and quantities of Listerias in an investigated material includes either direct seeding on a selective agar or enrichment of material on selective broths.

Текст научной работы на тему «Лабораторная диагностика листериоза экспериментальные и клинические исследования»

SUMMARY

N. NIKOLAYENKO

CEREBROVASCULAR PATHOLOGYAS A PERIOPERATIVE FACTOR OF EXTRACARDIAC SURGERY RISK

West Kazakhstan Marat Ospanov State Medical University, Department of Therapy Faculty of Postgraduate Education, Aktobe city

The article is regarded to the questions of the prevalence of cerebrovascular disease, options of its course andfeatures ofthe management of patientswith cerebrovasculardisease inthe perioperative period in notcardio-surgical operations.

Key words; cerebrovascularpathology, ischemic stroke, risk factor, perioperative risk.

УДК 616.9:616-071

Ж.Х. АРЗЫМБЕТОВА А.Т. АХМЕТОВА, К.Ж. НУРГАЛИЕВА

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ЛИСТЕРИОЗА

Актюбинская противочумная станция, г.Актобе

В последние десятилетия повсеместно отмечается рост заболеваемости листериозом, что связано как с истинным подъемом заболеваемости, так и с улучшением лабораторной диагностики. С целью повышения высеваемости бактерий применяется использование селективных сред и метод холодового обогащения. Схема выделения листерий в зависимости от контаминации и количества листерий в исследуемом материале включаетлибо непосредственный высев на селективный агар, либо обогащение материала на селективных бульонах.

Ключевые слова: лабораторная диагностика, листериоз.

Структура инфекционной патологии человека за последние десятилетия ХХ века претерпела существенную эволюцию, обусловленную какоткрытием целого ряда неизвестных ранее инфекционных агентов, так и изменением роли удельного веса хорошо известных ранее возбудителей. Ко второй группе в полной мере можно отнести и листериоз. Хотя упомянутые микроорганизмы давно известны эпидемиологам, бактериологам и инфекционистам, в последние годы заметно расширился удельный вес вызываемых ими инфекций, равно как и спектр их клинических проявлений. Этому способствовали, с одной стороны, существенный прогресс в области лабораторной и клинической диагностики, с другой, антропогенная трансформация внешней среды, повлиявшая на условия репродукции возбудителя, пути передачи инфекции и восприимчивость к ним групп риска человеческой популяции, прежде всего, с различными видами иммунодефицитов [1,2,3]. Несмотря на прогресс в лабораторной диагностике инфекционных болезней, проблема диагностики листериоза заслуживает пристального внимания и дальнейшего изучения. Нашей задачей явилось ознакомление широкого круга практических врачей, прежде всего, бактериологов и инфекционистов с современными методамидиагностики этой инфекции.

До начала 80-х годов выделение культур на питательных средах, окраска мазков из клинического материала в сочетании с серологическими методами диагностики являлись основными компонентами лабораторной диагностики листериоза. Однако рост числа спорадических случаев и эпидемиологических вспышекспособствовал выявлениюмногочисленныхуязвимыхместтрадиционнойдиагностики [4,5,6].

Серологические методы исследования получили в нашей стране наиболее широкое распространение для диагностики листериоза. Как правило, это различные варианты агглютинационных тестов, применение которых регламентируется утверждёнными в 1987 г. Министерством здравоохранения и Госагропрома СССР инструктивными документами: «Лабораторная диагностика листериоза животных и людей, меры борьбы и профилактики», «Инструкция по эпидемиологии,

12 Батыс Казахстан медицина журналы №2 (30) 2011 ж. / ' '

__/ Медицинский журнал Западного Казахстана №2 (30) 2011 г.

эпизоотологии, профилактике, клинике илечениюлистериозаулюдей иживотных», приложение кпр. РК № 946/326 от 17.10. 2002 года и совместный пр. МЗ РК и Министерства сельского хозяйства № 507 от 16.08.2007 года «Об утверждении санитарно - эпидемиологических, ветеринарно-санитарных правил и норм «Организация эпидемиолого-эпизоотологического надзора и проведение санитарно -противоэпидемических (профилактических) и ветеринарно-профилактических (противоэпизоотологических) мероприятий полистериозувРеспублике Казахстан».

На практике в лабораторной диагностике листериоза чаще всего используются два серологических метода: реакция связывания комплемента с инактивированным цитоплазменным антигеном и реакция непрямой гемагглютинации эритроцитарным антигенным диагностикумом. Вместе с тем, ещё в 1967 году один из основоположников отечественной школы исследователей листериоза академик И.А. Бакулев обращал внимание на недостаточную специфичность серологических реакций для диагностики листериоза. Аналогичных взглядов придерживался крупнейший авторитет по проблеме листериоза немецкий учёный Зеелигер, писавший, что «оценка серологических данных должна проводиться с большой осторожностью, и при этом наряду с эпидемиологическими особенностями должна учитываться и клиническая картина» [7].

Однако, как справедливо отмечают органы санитарно-эпидемиологического надзора стран СНГ, методы лабораторной диагностики листериоза за последние 30 лет практически не изменились, тогда как эпидемиологическаязначимость инфекции продолжает возрастать[8,9].

Тем не менее, серологические методы полностью сохраняют своё значение для выяснения эпизоотологической и эпидемиологической ситуации, так как результаты серологических исследований несут определённую информацию о контакте различных групп населения или групп риска с возбудителем, но не позволяют с высокой степенью точности диагностировать листериоз даже при применении нескольких серологических методов.

Основным методомдиагностики инфекционного процесса является бактериологическаядиагностика и идентификация возбудителя. За последние годы бактериологическая диагностика листериоза претерпела существенную эволюцию. Значительный прогресс в области методов обогащения исследуемого материала и конструирования питательных сред для выделения листерий позволяет сделать процедуру выделения и идентификации листерий доступной для широкого круга практических микробиологическихлабораторий.

При подозрении на листериоз исследованию подвергают, в первую очередь, кровь и ликвор при септической форме, менингитах и менигоэнцефалитах, меконий при заболеваниях новорожденных, околоплодную жидкость, плаценту, отделяемое родовых путей женщин, разрешившихся мёртвым плодом. При отягощённом акушерском анамнезе, патологическом течении беременности, воспалении яичников, шейки матки обследование на наличие листерий является обязательным компонентом расширенного исследованиягенитальноготракта.

При менее распространённыхклиническихформахлистериоза исследованиюподлежатсодержимое абсцесса, экссудат, отделяемое носоглотки. Биологический материал для микробиологического исследования листериоза следует брать в максимально стерильных условиях, тщательно соблюдая правила асептики и антисептики, по возможности избегая контаминации образцов с микроорганизмами из окружающей среды [10,11].

Для успешного выделения листерий из клинического материала, а также из продуктов питания существенное значение имеет процедура обогащения. За исключением спинномозговой жидкости клинический материал, а тем более продукты питания сильно контаминированы сопутствующей микрофлорой. На общем микробном фоне количество листерий в исследуемом материале может быть невелико, скорость роста листерий уступает многим условно патогенным бактериям, поэтому процедура обогащения, грамотное использование селективных факторов зачастую является необходимым условием выделения культурлистерий из исследуемого материала [11,12].

Еще в 40-е годы ХХ века для выделения листерий стали использовать процедуру холодового обогащения и добавления в средутелурита калия [13,14,15].

Метод холодового обогащения основан на присхрофильной природе листерий, их способности размножаться при низкихтемпературах. Методика предполагает, помимо обычного высева исследуемого образца на питательные среды, хранение части исследуемого материала в холодильнике при температуре + 4°С в течение 2 месяцев. Еженедельный посев хранящегося на холоде материала на стандартные питательные среды зачастую приводил к положительному результату при отрицательном результате первичного высева материала, подозрительного на наличиелистерий. Хотя инкубация при 4°С

„ , _I I „„ _______ ^^ Батыс Казахстан медицина журналы №2 (30) 2011 ж. 13

Медицинский журнал Западного Казахстана №2 (30) 2011 г. \ _____!_

ингибируетбольшуючастьпосторонней микрофлоры, скорость росталистерий в начале процедуры также снижается. Поэтому в настоящее время этот метод не находит широкого практического применения в лабораторнойдиагностике.

Поскольку метод холодового обогащения из-за необходимости длительной экспозиции неприменим в практике лабораторной диагностики, процедура обогащения включает заражение исследуемого материала с селективными агентами и инкубацию при 30°С в течение 24 часов с последующим высевом на селективный агар [4,15].

Телурит калия рекомендовали добавлять в различные питательные среды (мясо-пептонный агар, кровяной агар) для выделения листерий в качестве фактора, подавляющего рост многих грамотрицательных бактерий. В дальнейшем в качестве селективных агентов для выделения использовали широкий спектр химических соединений, солей металлов, антибиотиков и красителей. Наибольшее практическое значение из них получил хлорид лития, акрифлавин, налидиксовая кислота, циклогексимид, входящие в состав наиболее распространенных питательных сред и обогатительных бульонов [7].

В последнее время широкое распространение для диагностики и типирования получили методы, основанные на анализе ДНК. Это связано с их высокой специфичностью, а также относительной технической простотой идоступностью.

Сегодня наиболее распространенным и перспективным методом молекулярно-генетической диагностики является полимеразная цепная реакция (ПЦР). ПЦР основана на искусственном синтезе фрагмента ДНК, в качестве матрицы которого используется ДНК исследуемого микроорганизма. Метод очень чувствительный и специфичный. При исследовании клинического материала налистериоз в нашей лаборатории от 73 человек, при отрицательных серологических реакциях, в 40 % случаев методом ПЦР выявлен положительный результатнаданнуюинфекцию. Списоклитературы:

1. Инструкция по эпидемиологии, эпизоотологии, профилактике, клинике и лечению листериоза человека и животных. Приложение к Приказу МЗ РК №946/326 от 17 октября 2002.

2. Дмитровский А.М., Степанов В.М. Мусабекова И.Н. и др. Экологические и социальные основы листериоза. В сб. «Проблемы профилактики инфекционных заболеваний в популяции Казахстана»// Алматы-2002. С486-489.

3 . Карликанова Н . Р. , Куваева И . Б . ,Карликанова Н . С . Листериоз в молоке и молочных продуктах - Москва

- Углич -1999.-25c.

4. Тартаковский И.С. Листерии: роль в инфекционной патологии человека и лабораторная диагностики // КМАХ-2000- Том2-№2-С. 1-15.

5. Карпова Т.И., Ермолаева С.А., Лопырев И.В. Новые методы диагностики идентификации Listeria monocytogenes/Жлиническая микробиология-2001 -№3-С. 266-273.

6 . КарповаТ. И . , Шустрова Н. М . , СнегирёваА. Е . Размножениелистерий в молочных продуктах//Журнал микробиологии - 2001 - №1- С. 80-81

7. Тартаковский И.С., Малеев В.В., Ермолаева С.А. Листерии: роль в инфекционной патологии человекаилабораторнаядиагностика - М: «Медицинадля всех»-2002-195 стр.

8. Родина Л.В., Маненкова Г.М., Степанова Н.В. Состояние эпид. надзора за листериозом //В сб «Листериоз на рубежетысячелетний»- Покров-1999. С. 172-174

9. Салова Н.Я., Голованова В.П., Шестеперова Т.И., Современное состояние лабораторной диагностики листериоза в сан. эпид. службе г. Москвы // В сб. Листериоз на рубеже тысячелетий» -Покров-1999, С. 68-71.

10. Литвин В.Ю., Емельяненко Е.Н., Пушкарева В.И. Патогенные бактерии, общие для человека и растений: проблемы и факты //Журнал микробиологии -1996- №2-С. 101-104

11. Тартаковский И.С., Трофимова О.Д. Этиология и микробиологический контроль ВБИ //Справочник госпитальногоэпидемиолога.- М.-1999-19-29.

12. Тартаковский И.С., Шевелёва С.А., Карпова Т.И. Методические подходы к выделению и идентификации листерий // В сб: «Профилактическая медицина - практическому здравоохранению»

- Вып. 1 - частьП-М-2001 С. 92-94.

13. Шарма Р.К. Обнаружение листерий в продуктах морей и океанов // В сб. «Листериоз на рубеже тысячелетий»-Покров-1999-С. 97-99.

14. Бакулов И.А., Васильев Д.А. Листериоз как пищевая токсикоинфекция.// Вопросы диагностики и профилактики - Ульяновск-1991.-45c.

15 . Степанов В . М . , Дмитровский А . М . , Меркер В . А . Методическиеуказания по этиологии, эпидемиологии эпизоотологии, клинике, лечению и лабораторнойдиагностикелистериоза» - Алматы -2003. - 34с.

14 Батыс Казахстан медицина журналы №2 (30) 2011 ж. / ' '

__/ Медицинскии журнал Западного Казахстана №2 (30) 2011 г.

TY^H

Ж.Х. АРЗЫМБЕТОВА, А.Т. АХМЕТОВА, К.Ж. НУРГАЛИЕВА ЛИСТЕРИОЗДЫН ЛАБОРАТОРИЯЛЬЩ ДИАГНОСТИКАСЫ

Актебе обага карсы станциясы, Актебе каласы

Соцгы он жылда жаппай листериозбен аурушачдылыктыч ecyi байкалады, ол аурушачдылыктыч шынайы кeтерiлуiмен катар, лабораториялыкдиагностиканычжаксаруымен де байланысты бактерияныч eсiмдiлiгiн жаксарту максатында селективтi ортаны жэне салкындатып каныктыру эдiсiн колдану усынылады. Листерияны бeлiп алу сулбесше, листерия санына жэне контаминациясына тэуелдi зерттеу материялында агарга себу немесе материалды селективтi сорпада каныктыру болады.

Нег'зг'! свздер: лабораториялык диагностика, листериоз.

SUMMARY

ZH. H. ARZYMBETOVA, A.T. AXMETOVA, K.ZH. NURGALIYEVA LABORATORY DIAGNOSTIC OF LISTERIOSIS

Antipplague station ofAktobe, Aktobe city

During the last 10 years incidence oflisteriosis is permanentlyincreasing everywhere. There are 2 reasons of this fact - real growing of the incidence as well as the improvement of laboratory diagnostic. For increasing the quality of Listeria testing specialists recommend to use selective culture and method of cold inreaching. The scheme of Listerias' allocation depending on contamination and quantities of Listerias in an investigated material includes either direct seeding on a selective agar or enrichment of material on selective broths.

Keywords: laboratory diagnostic, listeriosis.

„ , _I I „„ _______ ^^ Батыс Казахстан медицина журналы №2 (30) 2011

Медицинскии журнал Западного Казахстана №2 (30) 2011 г. \ ___

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.