CC BY
91
RUSSIAN CLINICAL LABORATORY DIAGNOSTICS. 2017; 62(5) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-5-313-316
MICROBIOLOGY
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017 УДК 582.28.08
Ахунова А.М.2, Ахунов В.М.1, 2, Сизова Ж.М.1, Лаврентьева Т.П.3
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ И ПАРАЗИТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ГРИБА РОДА PAECILOMYCES ВИДА PAECILOMYCES VARIOTH BAINIER (1907)
'Кафедра медико-социальной экспертизы и поликлинической терапии ИПО ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава РФ, Москва;
2ГБУЗ «Городская клиническая больница им С. С. Юдина» Департамента здравоохранения Москвы, 115487, Москва; 3ГБУЗ «Диагностический центр (Центр лабораторных исследований)» Департамента здравоохранения Москвы, 115580, Москва, Россия
Грибы рода Paecilomyces повсеместно распространены в природе. С середины 60-х годов прошлого столетия они привлекают к себе внимание как причина развития септического эндокардита, сепсиса, пневмонии и других видов патологии, развившихся на фоне иммунодефита. Индуцируют развитие инфекционно-аллергического альвеолита и бронхиальной астмы. Изучены культуральные особенности и патогенные свойства клинических изолятов (n = 6) гриба Paecilomyces variotii Bainier (1907). Все изоляты выделены из крови больных бронхиальной астмой, обратившихся к аллергологу поликлиники Москвы. На культуре клеток эмбриональной почки бычка изучена морфология и биологические свойства тканевых паразитических форм гриба. Признаком, характерным для паразитической формы гриба P. variotii Bainier (1907) явилось образование хламидоспор, содержащих шаровидные образования - эндоспоры. Изучение трансформации мицелиальной сапрофитной формы гриба в тканевую паразитическую форму выявило причастность хламидоспор и, по-видимому, других органов плодоношения вегетативного тела гриба к переходу к паразитическому образу жизни в организме хозяина с образованием сферул и дрожжеподобных клеток. Цикл развития тканевой паразитической формы от эндоспоры до зрелой тканевой формы составил 6 ч.
Ключевые слова: гриб Paecilomyces variotii Bainier (1907); диморфизм; хламидоспоры; механизм трансформации. Для цитирования: Ахунова А.М., Ахунов В.М, СизоваЖ.М., Лаврентьева Т.П. Культуральные особенности и паразитические свойства гриба рода Paecilomyces вида Paecilomyces variotii Bainier (1907). Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62 (5): 313-316. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-5-313-316
AkhunovaA.M.2, Akhunov V.M.12, Sizova J.M.1, Lavrentieva T.P.3
THE CULTURAL FEATURES AND PARASITIC CHARACTERISTICS OF FUNGUS GENUS PAECILOMYCES SPECIES PAECILOMYCES VARIOTII BAINIER (1907)
1The I.M. Sechenov first Moscow state medical university of Minzdrav of Russia, 119992 Moscow, Russia 2The S.S. Yudin municipal clinical hospital of the Moscow health department, 115487 Moscow, Russia 3The diagnostic center (Center of laboratory studies) of he Moscow health department, 115580 Moscow, Russia The fungi genus Paecilomyces are .spread everywhere in nature. They attract attention from the middle of 1960s as a cause of development of septic endocarditis, sepsis, pneumonia and other types of pathology developed against the background of immunodeficiency. They induce development of infectious allergic alveolitis and bronchial asthma. The cultural features and pathogenic characteristics of clinical isolates (n=6) of fungus Paecilomyces variotii Bainier (1907) are studied. All isolates are separated from blood of patients with bronchial asthma visited allergologist of Moscow polyclinic. The culture of cells of embryonic kidney of bull-calf morphology and biological characteristics of tissue parasitic forms of fungus were analyzed. The typical sign ofparasitic form of fungus P. variotii Bainier (1907) was a development of chlamydospores containing globe-shaped formations - endospores. The analysis oftransformation ofmycelial saprophyte form of fungus into tissue parasitic form established involvement of chlamydospores and apparently others organs of fruiting of vegetative body of fungus into transition to parasitic way of life in host organism with development of spherules and yeast-like cells. The cycle of development of tissue parasitic form from endospore to mature tissue form comprised 6 hours.
Keywords: fungus Paecilomyces variotii Bainier (1907); dimorphism; chlamydospores; transformation mechanism.
For citation: Akhunova A.M., Akhunov V.M., Sizova J.M., Lavrentieva T.P. The cultural features and parasitic characteristics of fungus genus Paecilomyces species Paecilomyces Variotii Bainier (1907) . Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics) 2017; 62 (5): 313-316. (in Russ.). DOI:http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-5-313-316 For correspondence: Akhunova A.M., doctor of medical sciences, allergologist - immunologist. e-mail: akhunova_alima@mail.ru Conflict of interests. The authors declare absence of conflict of interests.
Acknowledgment. In memoriam ofL.A. Belyakova, the Soviet mycologist who for the first time in 1978 identified clinical isolates of fungi from patients i city of Zaamin (Uzbekistan) as a new variety of fungus Paecilomyces variotii Bainier (1907).
Received 24.10 2016 Accepted 29.11. 2017
Введение. Пециломикоз - глубокий системный микоз, при котором в патологический процесс могут вовлекаться
Для корреспонденции: Ахунова Алима Муратовна, д-р мед. наук, аллерголог-иммунолог ГБУЗ ГКБ им С.С. Юдина ДЗМ,142701, Москва, e-mail: akhunova_alima@mail.ru
кровь, сосуды мелкого и среднего калибра, интерстиций, лимфатические узлы, кожа, слизистая оболочка, внутренние органы и нервная система [3]. Как новая нозологическая единица микоз введена Baker в 1971 г. на основании сообщений о поражении человека и животных грибами рода Paecilomyces [13]. Заболевание впервые описано в 1963 г.
МИКРОБИОЛОГИЯ
кардиохирургами из ЮАР у больной 22 лет с септическим эндокардитом, развившимся после корригирующей операции на митральном клапане после 5 мес удовлетворительного состояния за исключением повышенной реакции на стрептомицин [15]. В этом, как и в других аналогичных сообщениях, источник инфекции не установлен. Впервые как возбудитель системного микоза обнаружен на территории Узбекистана [2, 9]. Идентификация культур грибов, выделенных из крови больных - жителей г. Заамин (Узбекистан), с использованием молекулярно-биологических исследований отнесла их к новой разновидности гриба Paecilomyces variotii Bainier (1907), которая обозначена как Paecilomyces variotii Bain. (1907) var. zaaminella [7, 11]. В соответствии с особенностями генома выявлены еще две разновидности патогенных грибов рода Paecilomyces: Purpureocillium li-lacinus [12] и Chаmae leomyces granulomatis gen. et sp. nov. Вид Paecilomyces viridis отнесен к новому роду как вид Chamaeleomyces viridis comb. nov. Обоим видам Chamael-eomyces присущ диморфизм [14]. Их тканевая паразитическая форма представлена округло-овальными или округло-цилиндрическими дрожжеподобными клетками.
Гриб рода Paecilomyces вида Paecilomyces variotii Bain. (1907) выделен из крови и мокроты больных бронхиальной астмой, проживающих на территории Самаркандской области (Узбекистан). Для установления диморфизма и изучения морфологии данного гриба в условиях паразитизма использована культура клеток. Установлен диморфизм гриба P. vari-otii и цикл развития сферулы от эндоспоры до зрелой тканевой формы в течение 6 ч [4].
Лабораторные и эпидемиологические исследования на пециломикоз среди больных, обращающихся в аллергологи-ческий кабинет городской поликлиники Москвы, выявили носительство гриба или активацию пециломикоза с клинической манифестацией аллергии и бронхиальной астмы [6].
Резервуаром пециломикозной инфекции в природе является почва, в организме человека - кровь. Основной путь передачи возбудителя - трансплацентарный [1, 5]. Факторами, активирующими пециломикозную инфекцию у больных бронхиальной астмой, являются ОРВИ и грипп (61,7%), сезонные и возрастные изменения иммунного статуса (28,3%), стресс (10%) [10]. Мы выделяем 4 исхода пециломикозной инфекции:
- клиническое выздоровление;
- развитие иммунопатологии в виде аллергии и/или бронхиальной астмы;
- генерализация с развитием сепсиса, эндотоксического шока и летальным исходом;
- миело- и лимфопролиферативные заболевания.
Проблема пециломикоза - проблема выживания человека
в современных условиях жизни.
Цель исследования: изучить культуральные и патогенные свойства гриба рода Paecilomyces вида Paecilomyces variotii Bain. (1907), выделяемого из крови больных с аллергическими заболеваниями и бронхиальной астмой.
Материал и методы. Для изучения культуральных свойств гриба Paecilomyces variotii Bain. (1907) использовано 6 штаммов данного вида (F-1880, F-1881, F-1883, F-1886, F-1887, F-1899), выделенных из крови больных бронхиальной астмой, обратившихся в аллергологический кабинет городской поликлиники Москвы.
Штаммы выделены и идентифицированы на среде Сабу-ро, Чапека и др. Морфология тканевых форм гриба Paecilomyces variotii Bain. (1907) изучена на биологической модели.
Культуру клеток эмбриональной почки бычка заражали суспензией клеток мицелия клинических изолятов гриба P. variotii Bain. (1907). ЦПД монослоя культуры клеток после внесения 2 мкл суспензии, содержащей 6000 мицелиальных
клеток гриба P. variotii, регистрировали через 1, 6, 24, 48 ч инкубации в термостате при 37°С.
Результаты и обсуждение. Колонии изучаемых грибов на сусле-агаре достигали 5-8 см в диаметре к 14 дню роста при 25°С. Они формировались из плотного войлока, состоящего из многочисленных конидиеносцев, что придавало им оттенок пудры. Центральная часть колоний возвышена (рис. 1, а, см.обложку). Цвет варьировал от оливково-бурого до желтовато-коричневого и более темных оттенков. Запах сладко ароматический, усиливается с возрастом. Иногда обнаруживали выделение бесцветных капель жидкости. Цвет субстратной стороны колоний желтовато-бурый. Вегетативные гифы септированные, гиалиновые шириной 0,5-3 мкм. Субстратные гифы утолщены до 12 мкм. Конидиеносцы гладкие, 35-90 x 3,5-7 мкм, иногда до 150 мкм в длину, располагаются на концах мицелия или вдоль его нити в виде мутовчатых или неправильно расположенных ветвей. Мутовки с фиа-лидами по 2-3, иногда 5-7 в группе. Фиалиды в базальной части цилиндрической или эллипсоидальной формы, резко обрывающейся в длинную цилиндрическую шейку шириной 0,7-1 мкм, которая изредка отклоняется от главной оси. Встречались фиалиды, имеющие по 2-3 латеральные шейки. Размеры фиалид 12-20 x 2,5-5 мкм. Отдельные фиалиды располагались на нитях вегетативного тела гриба.
Конидии гладкостенные в длинных расходящихся спутанных цепочках. У двух штаммов с обильным спороноше-нием и плотно расположенными конидиеносцами образовывались длинные столбики из прилегающих друг к другу цепочек конидий. Цвет конидий от гиалинового до бледно-зеленоватого или желтоватого, желто-коричневые в массе. Конидии шаровидной или эллипсоидальной формы, размерами 3,2-5,8 x 2,2-4,0 мкм. Хламидоспоры гладкостенные или с шероховатой поверхностью, шаровидные, округлые, грушевидной формы, толстостенные, 4-8 мкм, иногда до 12 мкм в диаметре. Располагались на коротких ножках воздушного мицелия и на проростках одиночно или парно (рис.1, б, см.обложку). Хламидоспоры, образующиеся из фиалид, формируют короткие цепочки или грозди, что наряду со склонностью к усиленному их образованию является характерным признаком паразитизма гриба Р. variotii Bain. (1907) var. zaaminella (рис. 2, см. обложку) [8]. Встречаются и одиночные хламидоспоры, на длинных ножках, преобразованных из фиалид. Зрелые хламидоспоры содержат эндоспоры, размером 0,5-1,0 мкм, на поверхности которых определялись очертания пор. Зрелые хламидоспоры дымчатые или оливково-зеленоватые. Культуральные и морфологические свойства патогенного гриба P. variotii, выделяемого в 58,3% случаев из крови пациентов с аллергией и бронхиальной астмой, проживающих на территории Москвы и Московской области, совпадают с морфологией гриба Paecilomyces variotii Bain. (1907) var. zaaminella, выделенного на территории Узбекистана [7].
ЦПД монослоя культуры клеток, зараженных суспензией мицелия гриба P. variotii, через 1 ч инкубации при 37оС представляло субтотальный лизис клеток, что указывает на мем-бранотоксические свойства метаболитов, продуцируемых грибом. На сохранившихся островках монослоя культуры клеток обнаруживались разорванные капсулы хламидоспор, заполненные эндоспорами без признаков дальнейшего развития. В других полях зрения на фоне разрушенного монослоя культуры клеток наблюдались эндоспоры, развивающиеся в зрелые тканевые формы. Эндоспоры - мелкие округлые или дрожжеподобные образования размером 0,5-1,5 мкм в диаметре с двухконтурной капсулой (рис. 3, см. обложку).
Через 6 ч инкубации при 37оС на фоне ЦПД культуры клеток выявлялись шаровидные, округло-овальные, эллипсоидальные образования, 5-20 мкм, иногда до 29 мкм в
Russian clinical laboratory diagnostics. 2017; 62(5)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-5-313-316
диаметре, с двухконтурной капсулой, внутри которой располагалось разное количество эндоспор - 1, 4, 6 и более, что позволяло обозначить их как сферулы (рис. 4, см. обложку). Морфология зрелых сферул гриба P. variotii схожа с морфологией хламидоспор вегетативного тела гриба, отличаясь размером и расположением эндоспор. Одни из них равномерно заполнены эндоспорами. Другие имеют отграниченный округлый центр, в котором располагаются эндоспоры 1-1,5 мкм в диаметре. По наружной поверхности центра располагались эндоспоры диаметром 0,3-0,5 мкм. Рисунок центральной поры имеет развернутый V- или +-образный контур. Выявлены тканевые структуры, размеры которых значительно превышали размер хламидоспор, что указывает на их образование из других органов плодоношения вегетативного тела гриба P. variotii.
Встречались клетки с признаками простого деления за счет перешнуровки (образования перегородки), что указывает на способность гриба P. variotii в зависимости от условий обитания, развиваться в мицелиальной или дрожжевой формах (рис. 5, см. обложку). Для гриба P. variotii характерно образование трех видов дрожжеподобных клеток, образованных путем двух-, четырех- и шестикратного деления. Цикл развития от эндоспоры до зрелой сферулы или дрожжеподоб-ной клетки продолжается 6 ч. Через 24 и 48 ч наблюдается тотальный лизис культуры клеток. В осадке культуральной среды обнаружено большое количество клеточного детрита и тканевые формы гриба P. variotii. В некоторых сферулах выявлялись открытые поры, через которые эндоспоры выделялись в окружающую среду.
Тканевые формы гриба Р. variotii схожи с тканевыми формами гриба Paecilomyces variotii Bain. (1907), выделенного из крови больных бронхиальной астмой и аллергией, проживающих на территории Самаркандской области Узбекистана [4].
Кроме гриба P. variotii, наиболее часто выделяемого из крови больных бронхиальной астмой и аллергией, живущих на территории Москвы и Московской области, выделены и другие виды патогенных грибов рода Paecilomyces: Purpure -ocillium lilacinus (P. lilacinus) и Сhamaeleomyces viridis comb. nov. (P. viridis). Все они диморфные. Их тканевые формы имеют схожее строение с органами плодоношения и различаются между собой по размерам и внутреннему расположению эндоспор.
Выводы. 1. Особенностью морфологии гриба Paecilomyces variotii Bain. (1907), выделенного из крови больных на территории Российской Федерации и Узбекистана, является склонность к образованию хламидоспор и наличие шаровидных образований - эндоспор, ускоренный темп трансформации в тканевую паразитическую форму в организме хозяина.
2. Клинические изоляты гриба Paecilomyces variotii Bain. (1907) обладают диморфизмом, характеризуются разнообразием тканевых структур.
3. Образование клеток различных размеров с неодинаковым содержанием эндоспор и их внутренним расположением может свидетельствовать о трансформации в тканевые формы различных органов плодоношения вегетативного тела гриба Paecilomyces variotii Bain. (1907), среди которых доминируют хламидоспоры.
Благодарность. Памяти советского миколога Л. А. Беляковой, которая первой идентифицировала клинические изоляты грибов от больных в г. Заамин (Узбекистан) как новую разновидность гриба Paecilomyces variotii Bainier (1907) (1978), посвящается.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
MICROBIOLOGY
ЛИТЕРАТУРА (пп. 10-15 см. REFERENCES)
1. Абдухалик-заде Г.А. Роль Paecilomyces в развитии внутриутробной пневмонии: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. Самарканд; 1997.
2. Ахунова А.М., Шустова В.И. Пециломикоз. Проблемы туберкулеза. 1989; (8): 38-42.
3. Ахунова А.М. Инфекционно-аллергический бронхолегочной пециломикоз. Терапевтический архив. 1991; 63 (10): 19-24.
4. Ахунова А.М. Трансформация сапротрофной мицелиальной формы гриба Paecilomyces variotii в тканевую паразитическую форму и ее морфологическая характеристика. Медицинская паразитология. 1992; (3): 53-5.
5. Ахунова А.М., Абдухаликзаде Г. А., Абдусалямов А.А., Атакулов Б.М. Бекирова Т. Л., Хайдарова Г.М. и др. Данные эпидемиологического обследования на пециломикоз рожениц и новорожденных Самаркандского региона. В кн.: Сергеев Ю.В., ред. Успехи медицинской микологии. Том 10. М.: Национальная академия микологии; 2007: 188-9.
6. Ахунов В.М., Сизова Ж.М. Распространенность бронхиальной астмы пециломикозной этиологии и возможности фармакотерапии в амбулаторно-поликлинических условиях. Биомедицина. 2010; (3): 28-9.
7. Газиходжаева М.А., Белякова Л.А., Сизова Т.П. Морфологические и культуральные признаки патогенных грибов, выделенных от больных. В кн.: Материалы VI конференции по споровым растениям Средней Азии и Казахстана. Душанбе; 1978: 131-2.
8. Газиходжаева М.А., Дехкан-Ходжаева Н.А., Очилова Г. Некоторые сравнительные морфофизиологические особенности новых штаммов Paecilomyces variotii Bainier различного происхождения и степени патогенности. В кн.: Новое в диагностике илече-нии грибковых и протозойных заболеваний. Сборник статей и тезисов конференции. Ташкент; 1998: 37-44.
9. Дехкан-Ходжаева Н.А., Шамсиев С.Ш., Шакирова Р.Ю., Макарова Г.И., Мигбаева Ш.Н. Роль Paecilomyces в этиологии затяжных и рецидивирующих бронхолегочных заболеваний у детей. Педиатрия. 1982; 61 (9): 12-4.
REFERENCES
1. Abdukhalik-zade G.A. Paecilomyces Role in the Development of Intrauterine Pneumonia: Diss. Samarkand; 1997.
2. Akhunova A.M., Shustova V.I. Paecilomyces infection. Problemy tuberkuleza. 1989; (8): 38-42. (in Russian)
3. Akhunova A.M. Infectious-allergic bronchopulmonary paecilomycosis. Terapevticheskiy arkhiv. 1991; 63 (10): 19-24. (in Russian)
4. Akhunova A.M. The transformation of the saprotrophic mycelial form of the fungus paecilomyces variotii into the tissue parasitic form and its morphological characteristics. Terapevticheskiy arkhiv. 1991; 63 (10): 19-24. (in Russian)
5. Akhunova A.M., Abdukhalikzade G.A., Abdusalyamov A.A., Atakulov B.M. Bekirova T.L., Khaydarova G.M. Epidemiological survey on maternal and neonatal paecilomycosis in Samarkand region. In: Sergeev Yu.V., ed.Advances Medical Mycology. Volume 10 [Uspekhi meditsinskoy mikologii. Tom 10]. Moscow: Natsional'naya akademiya mikologii; 2007: 188-9. (in Russian)
6. Akhunov V.M., Sizova Zh.M. The prevalence of Paecilomycosis etiology asthma and possible pharmacotherapy in the outpatient conditions. Biomeditsina. 2010; (3): 28-9. (in Russian)
7. Gazikhodzhaeva M.A., Belyakova L.A., Sizova T.P. Morphological and cultural features of pathogenic fungi isolated from patients. In: Proceedings of the VI Conference on Spore Plants of Central Asia and Kazakhstan [Materialy VI konferentsii po sporovym rasteniyam Sredney Azii i Kazakhstana]. Dushanbe; 1978: 131-2. (in Russian)
8. Gazikhodzhaeva M.A., Dekhkan-Khodzhaeva N.A., Ochilova G. Certain comparative morphological and physiological characteristics of new strains of Paecilomyces variotii Bainier different origin and degree of pathogenicity. In: New Diagnosis and Treatment of Fungal
МИКРОБИОЛОГИЯ
and Protozoan Diseases. Collection of Articles and Conference Abstracts [Novoe v diagnostike i lechenii gribkovykh i protozoynykh zabolevaniy. Sbornik statey i tezisov konferentsii]. Tashkent; 1998: 37-44. (in Russian) 9. Dekhkan-Khodzhaeva N.A., Shamsiev S.Sh., Shakirova R.Yu., Makarova G.I., Migbaeva Sh.N. Role in Paecilomyces in the etiology of protracted and recurrent bronchopulmonary diseases in children. Pediatriya. 1982; 61 (9): 12-4. (in Russian)
10. Akhunov V.M. Features of Bronchial Asthma with Paecilomycosis. Saarbrücken: M.: LAPLambertAcademicPublishing; 2014.
11. de Hoog G.S., Guarro J., Gene J., Figueras M.J. Atlas of Clinical Fungi. 2nd ed. Reus, Spain: Universitet Rovire i Virgili; 2000.
12. Luangsa-Ard J., Houbraken J., van Doorn T., Hong S.B., Borman A.M., Hywel-Jones N.L. et al. Purpureocillium, a new genus for the
medicali important Paecilomyces lilacinus. FEMS Microbiol Lett. 2011; 321 (2): 141-9.
13. Samson R.A. Paecilomyces and some allied Hyphomycetes. Studies in Mycology. 1974; (6): 113.
14. Sigler L., Gibas C.F., Kokotovic B., Bertelsen M.F. Disseminated mycosis in veiled chameleons (Chamaeleo calyptratus) caused by Chamaeleomyces granulomatis, a new fungus related to Paecilomy-ces viridis. J. Clin. Microbiol. 2010; 48 (9): 3182-92.
15. Uys C.J., Don P.A., Schrire V., Barnard C.N. Endocarditis following cardiac surgery due to the fungus Paecilomyces. S. Afr. Med. J. 1963; 37: 1276-80.
Поступила 24.10.16.
Принята к печати 29.11.16
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017 УДК 579.852.11.083.1
Шаров Т.Н., Червакова М.П., Баркова И.А., Барков А.М., Викторов Д.В., Топорков А.В.
ПРОБЛЕМЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ РАЗЛИЧНЫХ ШТАММОВ ВЕГЕТАТИВНОЙ ФОРМЫ BACILLUS ANTHRACIS МЕТОДОМ MALDI-ToF MS
ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора, 400131, Волгоград
Описан опыт применения масс-спектрометрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией для быстрой и надежной идентификации Bacillus anthracis, а также гетерологичных видов микроорганизмов. Освещены некоторые интересные особенности и трудности, возникшие в ходе идентификации.
К л ю ч е в ы е с л о в а: масс-спектрометрия; Bacillus anthracis; идентификация; штамм.
Для цитирования: Шаров Т.Н., ЧерваковаМ.П., БарковаИ.А., Барков А.М., Викторов Д.В., Топорков А.В. Проблемы идентификации различных штаммов вегетативной формы Bacillusanthracis методом MALDI-ToFMS. Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62 (3): 316-318. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-3-316-318 Sharov T.N., ChervakovaM.P., BarkovaI.A., BarkovA.M., ViktorovD.V., ToporkovA.V.
THE PROBLEMS OF IDENTIFICATION OF VARIOUS STRAINS OF VEGETATIVE FORM OF BACILLUS ANTHRACIS USING MALDI-ToF MS TECHNIQUE
The VolgogradskiP research anti-plague institute of the Rospotrebnadzor, 400131 Volgograd, Russia
The article considers experience of application of mass-spectrometry with matrix-activated laser desorption/ionization for fast and reliable identification of Bacillus anthracis and heterologous species of microorganisms. The particular interesting characteristics and difficulties occurred during identification are covered.
Keywords: mass-spectrometry; Bacillus anthracis; identification; strain
For citation: Sharov T.N., Chervakova M.P., Barkova I.A., Barkov A.M., Viktorov D.V., Toporkov A.V The problems of identification of various strains of vegetative form of Bacillus anthracis using MALDI-ToF MS technique. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics) 2017; 62 (3): 316-318. (in Russ.). DOI: 10.18821/0869-2084-2017-623-316-318
For correspondence: Sharov T.N., research worker of laboratory of most dangerous mycoses. e-mail: timursharov@gmail.com Conflict of interests. The authors declare absence of conflict of interests. acknowledgment. The study had no sponsor support
Received 06.07.2016 Accepted 01.09.2016
Введение. B. anthracis - единственный облигатный патоген человека и травоядных млекопитающих в группе близкородственных бацилл, именуемой B. cereus sensu lato (в широком смысле) [1]. В данную группу входят B. cereus sensu stricto (в узком смысле), B. thuringiensis, B. mycoides, B. pseudomycoides, B. weihenstephanensis. B. cereus - почвенный сапрофит, отдельные штаммы вызывают пищевые отравления с симптомами рвоты и диареи [2]. Многие штаммы B. thuringiensis содержат параспоральные кристаллические белки, токсичные для насе-
Для корреспонденции: Шаров Тимур Николаевич, науч. сотр. лаб. особо опасных микозов; е-таП: timursharov@gmail.com
комых и некоторых видов беспозвоночных [3]. В. mycoides и В. pseudomycoides - непатогенные сапрофиты, образующие колонии у корней растений [4]. Быстрая индикация В. аnthracis осложняется высоким генетическим и фенотипическим сходством с другими видами группы В. сегет [5].
В последние 2 десятилетия масс-спектрометрия стала важным аналитическим инструментом, который обеспечивает высокую пропускную способность, чувствительность и специфичность анализа в микробиологии, клинической лабораторной диагностике, экологических исследованиях. Белковое профилирование на основе МАЬВ1-ТоР М5 может быть использовано как альтернатива или дополнение гено-
