CC BY
14
ИЗВЕСТИЯ
ТОМСКОГО ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ Том 102 ПОЛИТЕХНИЧЕСКОГО ИНСТИТУТА имени С. М. КИРОВА 1959 г.
КОМПЛЕКСНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ТРИПАФЛАВИНА И ИХ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНАЯ АКТИВНОСТЬ
Среди производных акридина трипафлавин (10—хлор метил —3,6—ди-ашшоакридин) выделяется как препарат с широким бактерицидным спектром. Он значительно энергичнее, чем сулема, действует на дифтерийные палочки, стрептококки, стафилококки, менингококки и другие микробы [Г'. Токсичность трипафлавина относительно невелика.
В 1926 г. Изар установил, что трипафлавин вне организма убивает культуры б руде л л в разведении 1:500 000—1:1 000 000. Однако при лечении бруцеллезных животных этот препарат в большинстве случаев оказался мало эффективным.
Среди терапевтически активных препаратов, полученных на базе трипафлавина, особый интерес представляют соединения комплексного характера. Так, уже давно предложен препарат «септакрол» [2], представляющий собой комплексное соединение нитрата 2,7—диметил—3,6—диами-но—10—метилакридиния с азотнокислым серебром.
Этот препарат активнее трипафлавина, но плохо растворим в воде. Позднее септакрол был предложен [3] в новой модификации в виде раствора комплексной соли лактата 3,6—■ диамино—10— метилакридиния и лак-тата серебра. В советской литературе этот препарат описывается под названием «флаоваргин» [4]. Флаваргин применялся в клиниках и признан высокоактивным бактерицидным и химиотерапевтическим средством [5].
В 1946 г. А. М. Григоровский и Т. А. Веселитская [6] выделили комплексную соль флаваргина в сухом виде и назвали ее «сухим флаваргином», который с успехом применяется внутривенно при септических заболеваниях, эндокардите, артритах, циститах и т. п. Однако при бруцеллезе флаваргин и аналогичные ему препараты, по-видимому, не испытывались.
Высокая антимикробная активность комплексных соединений такого-типа обусловливается наличием в них двух сильных бактерицидных веществ — трипафлавина и соли серебра.
Вероятно, при расщеплении комплекса в организме освобождаются входящие в его состав компоненты и каждый из них проявляет свое действие.
Учи7ъгвая высокую физиологическую активность комплексных соединений указанного выше типа, мы поставили перед собой задачу расширить рамки исследования в этом ряду. С этой целью нами были получены и испытаны некоторые комплексные соединения трипафлавина общей, формулы.
Л. П. КУЛ ЕВ, А. Г. ПЕЧЕНКИН
При выборе второго компонента (МсХ) комплекса учитывалась его способность к комплексоо-бразованию с гетероциклическими аминами и антибруцеллезная активность.
Наши соображения базировались на том, чти свободный трипафлавмп своей активной аминогруппой вступает, вероятно, во взаимодействие с веществами макроорганизма, вследствие чего он и инактивируется, не успевая проявить своих сильных антимикробных свойств. В связанном же состоянии, т. е. с защищенной тем или иным способом аминогруппой, o;i утрачивает антимикробную активность и вновь приобретает ее в организме только после распада сложного соединения. Наиболее благоприятный терапевтический эффект 'При этом может быть достигнут при оптималь-ион скорости гидролиза или растепления препарата.
Для защиты аминогруппы трип а фл а вина нами бы,та использована реакция комплексообразоваиия, позволяющая получить большое число разнообразных соединений с различной гидролитической устойчивостью. Комплексные соединения в большинстве случаев получались в виде кристаллических осадков при взаимодействии концентрированных йодных млн спиртовых растворов трипафлавина с соответствующими двоимыми или простыми солями металлов.
Исходный продукт 10 хлорметнл 3,6 диаминоакридин был получен по методике Бенда [7j путем метилирования медицинского препарата ирофлавина с последующим высушиванием продукта при 110-115° 'i течение 24 часов и перекристаллизацией его из спирта. Состав комплексных соединений определялся химическими и физико-химическими методами (элементарным анализом, электропроводностью и колориметрированн-ем), которые давали хорошо совпадающие результаты.
Электропроводность систем определялась по схеме Кольрауша в термостате ТС -15М; оптическая плотность систем определялась с помощью электрофотоколориметра «ФЭК-2».
Все микробиологические и фармакологические испытания синтезированных препаратов проводились в Новосибирской научно-исследовательской ветеринарной опытной станции (НИВОС) К. Ф. Ламиховым и С. С. Назаровым.
Список синтезированных препаратов, результаты их анализа и активность против различных штаммов брунелл вне организма приводятся в табл. 1.
В опытах вне организма наибольшую активность против бруцелл козьего и бычьего типов проявили комплексные соединения трипафлавина с йодистым натрием Í.Ni> 12), с подпетым калием- {№ 11), с ртутно-иодис-тым калием (,Nb 15) и с кислым пиросурьмяно-кислым калием (№ БОА).
Из результатов микробиологических испытаний вне организма видно, что ни один из полученных нами препаратов не проявил сколько-нибудь заметного увеличения активности по сравнению с самим трипафлавином, антибруцеллезное действие которого в наших опытах равнялось 1:500 000.
Наоборот, в подавляющем большинстве случаев получено резкое снижение активности, что находится в соответствии с. высказанными нами соображениями об инактивации трипафлавина при защите одной или обеих аминогрупп.
Выше было отмечено, что наиболее благоприятный терапевтически:"! эффект, по нашему мнению, будет достигнут при оптимальной скорости гидролиза (расщепления) препарата внутри организма. Поэтому, наряду с микробиологическими испытаниями синтезированных веществ, мы определили сравнительную гидролитическую устойчивость некоторых их них м ет<)до м :-) л е кт р t т р о в од»\; кл" 11.
К? ( ире- |
парата;
Комплексное соединение
'ИСХ. I В-ПО I
I
т р и п а ф л а п и н
1 23 Трипафлавин — гилосульфитное серебро
2 24 « серебрянороданистып калин
3 22 « серебря ной одист ый калий
4 59 « и одист ый кадмий
5 13 « иодистый висмут
6 31 « иодистая сурьма
7 15 « ртутноиодистый ■ калий
8 57 « ртутнороданистый калин
9 50 « кислый пиросурьмянокислый
кали
10 50А црдмегил-—3,6диамикоакридин
квелый шро'сурьмянокислый калий
11 11 Трипафлавин иодистый калий
12 12 « иодистый натрий
Таблица 1
Найдено, проц. • Вычислено, проц.
хлор—13,62
хлор---! 3,73
Активность против ору цел л. при разведении и тысячах
до 500
серебро --21.-12 серебро --21.46 1 1 50 — 200
серебро - 13.78 серебро -13.86 2 1 50 — 200
серебро -- 17 40 серебро 17.38 1 1 25 — 50
кадмий ■ — 18.01 кадмий - 17.49 1 1 50- 200
висмут — 24.75 висмут -24.64 1 1 50- 200
сурьма —15.77 сурьма - -15.99 1 1 50— 100
ртуть -23.85 ртуть -23.96 1 1 100 — 400
ртуть — 29.53 ртуть -30.14 1 1 50 — 200
сурьма 25.00 сурьма -25.55 2 1 25- 200
сурьма - 22.20 сурьма 22.34 2 1 50- - 400
иод -•39.62 не оиред. 50- -400
иод — 39.79
азот — 9.54 не оиред. 100- -500
Скорость гидролиза характеризуется увеличением ьлектропроводи ос тн растворов во времени при постоянной температуре (рис. ]).
^ -О* ..
£ ' ^^
^г/С. X
1. Зависимость противобруцеллезной активности от скорости гидролиза препаратов (проц. увеличения электропроводности).
Кривая I.— преп. № 12—бактериостатичестий эффект при разведения 1:500 000; II —прел. № 11—1:400 000; III.—претт. № 15—1:400000: IV --преп. .Ni? 23- 1:200000; V.- -npen. № 50А —1:200 000; VI.— прея No 50 — 1:200 000 VII.- преп. № 24—1:100 000; VIII. —преп. № 57 — 1:200 000.
Из рис. 1 видно, что среди однотипных комплексных соединений (1 i и 12; 23 и 24; 15 и 57; 50 и 50А) препараты, имеющие большую скорость гидролиза, обладают и большей антибактериальной активностью.
Некоторые из полученных нами соединений были испытаны на морских сшнках, зараженных бруцеллезом, причем активность этих соединений проявлялась по-разному, в зависимости от их гидролитической устойчивости. Так, сравнительно легко гидролизующиеся препараты № 11, 12. 50А оказались эффективными при острой форме бруцеллеза и мало активными при хронической. Наоборот, трудно расщепляющиеся препараты, например, № 24, 57 и т. п., дали положительный результат при лечении хронического бруцеллеза. Следует отметить, что токсичность испытанных препаратов в 5—10 раз ниже токсичности самого трипафлавина.
Экспериментальная часть
Г. Пре п арат № 23. К 4,96 г гипосульфита, растворенного в 20 мл воды, постепенно' прибавляется 1,43 г свежеосажденнош> хлористого1 серебра . Полученный прозрачный раствор гипосульфита серебра 'постепенно при интенсивном перемешивании прибавляется к раствору 5 г трипафлавина в 100 мл воды. Комплекс сразу же выпадает в осадок в виде оранжевых кристаллов с,т. пл. 215°. Выход кол и ч еств ен я ы й. Продукт плохо растворим в воде и спирте.
II. Препарат № 24. К раствору 2 г роданистого калия в 5 мл воды небольшими порциями прибавляется 1,65 г роданистого серебра. Полученный раствор приливается по каплям при интенсивном перемешивании к раствору 5 г трипафлавина в 100 мл воды. Комплексное соединение выпадает сразу же ,в осадок в виде оранжевых кристаллов. После перекристаллизации из горячей воды продукт имеет т. пл. 135°. Выход 4.7 г (90%).
III. П р е п а р а т № 22. 3,32 г прокаленного йодистого калия растворяют в 10 мл воды. К полученному раствору небольшими порциями прибавляется 2.37 г иодистого серебра. Последние порции иодистого серебра растворяются при нагревании. Полученный таким образом раствор при интенсивном перемешивании вносится по каплям в. раствор 5 г трипафлавина в 200 мл воды. При этом комплекс выпадает в осадок в виде кристаллов оранжевого цвета; тщательно промытый горячей водой и высушенный при 100--105°, имеет т. пл. 233—235°. Выход 7,4 г.
IV. П р ей арат № 59. Раствор 3.66 г иодистого кадмия в 50 мл воды прибавляется при 'интенсивном перемешивании к раствору 2.5 г трипафлавина в 100 мл воды. Оранжевые кристаллы (из воды), т. пл. 148 -150". Выход 4.97 г (82%).
V. П р е и а р а т 13. Получен аналогично IV из раствора 5.9 г иодистого висмута в 300 мл спирта и раствора 2,5 г трипафлавина в 50 мл спирта. Выход количественный. Не растворим в воде и спирте Т. разл, 285 -290'".
VI. Препарат № 31. Получен аналогично IV из раствора 5,03 г йодистой сурьмы в 100 мл 20-<проц. винной кислоты и раствора 2,5 г трипафлавина 'в 50 мл воды. Выход 7,0 г (94%). Красные кристаллы умеренно растворимые в воде. Т. пл. 195°.
VII. Препарат № 15. Получен аналогично III из раствора 7,86 г ртутноиодистого калия в 10 мл воды и раствора 2,5 г трипафлавина в 100 мл воды. Выход количественный. Желтые кристаллы плохо растворимые в воде. Т. пл. 210°.
VIII. Препарат № 57. Получен аналогично II из раствора 6,16 г ртутнороданистого калия в 20 мл воды и раствора 2,5 г трипафлавина в 100 мл воды. Вьгход продукта, перекристаллизованного из 40-п рои. водного спирта, 5,55 г (85%). Красный порошок. Т. пл. 175°.
IX. П р е п а р а т № 50. К раствору 5 г трипафлавина в 50 мл воды при перемешивании добавляется раствор 5 г кислого пиросурьмяно-кисло-го калия в 200 мл воды. Постепенно при стоянии образуется осадок комплексного соединения. При перекристаллизации из небольшого количества воды получают красные кристаллы с т. пл. 160°. Выход 3,29 г (36%).
X. П р е п а р а т № 50 А. К раствору 2 г препарата № 50 в 50 мл воды прибавляется раствор 1 г иодистого калия в 20 мл воды. Красно-коричневые кристаллы (из воды) с т. пл. 245—247°. Выход 1,98 г (87%).
XI. Препарат № 11. Получен аналогично IV из раствора 5 г иодистого калия в 20 мл воды и раствора 2,4 г трипафлавина в 50 мл воды. Комплекс выпадает в осадок в виде оранжево-красных кристаллов, которые после повторной перекристаллизации из воды имеют т. разл. 240— 242°. Выход 1,9 г.
XII. Препарат 12. Получен аналогично XI из раствора 5 г иодистого натрия в 20 мл воды и раствора 2,4 трипафлавина в 50 мл воды. Т. разл. 243 245э. Выход 2,1 г.
Выводы
I. Получены некоторые комплексные соединения трипафлавина, определен их состав и проведены микробиологические испытания на различных штаммах бруцелл козьего и бычьего типов. Найдено, что большинство из полученных комплексов имеет состав 1:1.
2. Методом электропроводности определена сравнительная гидролитическая устойчивость соединений. Показано, что антибруцеллезная активность этих соединений зависит от их состава и гидролитической устойчивости. Менее устойчивые соединения проявляют активность при острой форме экспериментального бруцеллеза, более устойчивые — при хронической .
3. Высказаны соображения об инактивации трипафлавина внутри организма и о способах устранения ее путем защиты аминогруппы. Установлено, что в ряде случаев комплексообразование сопровождается значительным снижением токсичности трипафлавина и связанного с ним второго компонента комплекса.
ЛИТЕРАТУРА
1 ;М и к; к о г к и и Л\. Д., Лекарственные средства, Медгиз, 1955.
2. С. В г о Ii п i к J. Cohen. — Brit. Med. J. II, 695, 1921.
а Г. П. Лй> 614067, j\o 64464b, FrdL 22, 534—536, 1939.
4. 'Груды Фярмак<»иеиного комитета ученого медицинского Совета, в 1 м 2, 90, 1940 *
5. М а ш к о в с к и й М. Д., Фармация, 4, 41, 1941, Ашбель С. И., Клиническим медицина, XX, I---2, 89, 1942.
8 Григоровский А. М., Весел и т с к а я Т. А., Фармация, 6, 1946.
7. L. Ben da. — Berichte, 1913, 45, 1787.
