3. Гигиена и токсикология смазочио-охлаждающей жидкости / Кундиев Ю. И., Трахтснберг И. М., Поруцкий Г. В. и др.— Киев, 1982.—С. 47.
4. Иванов Н. Г.. Поздняков В. С., Розова Т. Л. // Гиг. труда— 1978. — № 5.— С. 28—31.
5. Лазарева Г. И. // Научно-практическая конф. молодых гигиенистов и санитарных врачей, 10-я: Материалы.— М„ 1965.—С. 50—51.
Поступила 18.12.86
УДК 614.718-07:612.8674-612.867.014.46
Н. Н. Костродымов, Т. К. Семина, О. Ю. Фролов
КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ОБОНЯТЕЛЬНОГО АНАЛИЗАТОРА БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ЗАПАХОВЫХ
СОЕДИНЕНИЙ
ЦОЛИУВ, Москва
Известно, что запаховые загрязнители атмосферного воздуха, воздействуя на обонятельный анализатор, вызывают неблагоприятные реакции у человека, поэтому дальнейшее совершенствование критериев оценки этого эффекта является актуальной методической задачей.
По современным представлениям о процессах первичной обонятельной рецепции механизм восприятия запаха связан с захватом и освобождением молекул воздействующих веществ и сопровождается значительными энерготратами в клетках обонятельного эпителия [5, 6]. Известно также, что на поверхности обонятельного эпителия имеется слой слизи, в который погружены волоски эпителия, а сама слизь является многокомпонентным раствором полимеров, способных связывать молекулы пахучих веществ, в результате чего изменяется их состав [2, 4). В связи с этим при запаховых воздействиях можно ожидать изменений со стороны ферментных систем обонятельного эпителия. Как известно, центральный отдел обонятельного анализатора входит в состав лимбической системы мозга, являющейся центром эмоций и половой активности. Химические вещества, воздействуя на ее структуры через обонятельный анализатор, могут вызвать изменения сексуальной активности (СА) экспериментальных животных [7).
В настоящей работе предпринята попытка дать комплексную оценку состояния обонятельного анализатора (его центрального и периферического отделов) при воздействии душистых веществ цитронеллола и гераниола, обладающих выраженным цветочным запахом. Исследования проведены на белых крысах, подвергавшихся однократной 4-часовой затравке данными веществами в субтоксических концентрациях, равных 0,4±0,06 и 0,5±0,06 мг/м3 соответственно.
С целью изучения состояния периферического отдела обонятельного анализатора исследовали активность ферментов гомогената обонятельного эпителия: лактатдегндро-геназы. аланинаминотрансферазы, сорбитолдегидрогеназы, I аланинаминотрансферазы, сорбитолдегидрогеназы, 5-нукле-отидазы. сукцинатдегидрогеназы, щелочной фосфатазы [1. 3. 4, 9].
Состояние центрального отдела анализатора оценивали по изменению СА экспериментальных крыс-самцов на основании следующих показателей: латентного периода обнюхивания самцом генитальной области эстралыюй самки (ЛПО), количества обнюхиваний (КО), длительности обнюхиваний (ДО), латентного периода садки (ЛПС), количества садок (КС) |8]. Кроме того, в дополнительном эксперименте изучены особенности процесса спаривания крыс после запахового воздействия .гераниола на крыс-самок. С этой целью проведено 3 опыта, по следующей схеме. Животные опытных групп (крысы-самки в стадии эструса) подвергались однократному 4-часовому воздействию гераниола. По окончании затравок в 2 опытах экспериментальных животных подсаживали к интактным крысам-самцам на 20 мин в соотношении 1:1 и затем методом влагалищных мазков определяли наличие в исследуемом материале сперматозоидов. В 3-м спыте экспериментальных самок подсаживали к интактным самцам на 5 мин в специальную камеру с одной прозрачной створкой и регистрировали СА
крыс-самцов, т. е. наличие сексуального контакта между животными определяли по СА крыс-самцов. На всех этапах изучения поведенческих реакций в опыт брали крыс-самцов с высоким уровнем СА (Л ПО не более 30 с, КО не менее 10 обнюхиваний, ДО не менее 30 с). Экспериментальные данные обрабатывали статистически с использованием параметрических и нспараметрических критериев.
В результате исследований установлено, что удельные активности ферментов гомогената обонятельного эпителия у животных опытных групп не отличались от таковых у контрольных, что свидетельствует об отсутствии выраженных изменений со стороны периферического отдела обонятельного анализатора белых крыс при однократном 4-часовом воздействии цитронеллола и гераниола на уровне изученных концентраций.
При оценке состояния центрального отдела обонятельного анализатора белых крыс-самцов, подвергавшихся однократному 4-часовому воздействию гераниола, выявлено увеличение ЛПО по сравнению с контролем. Эти изменения мы связываем со сдвигами в аналитической функции обонятельного анализатора и нарушением процесса распознавания самцами ферромонов эстральных самок.
Методом влагалищных мазков выявлено, что число спариваний экспериментальных самок с интактными самцами в одном опыте было в 4 раза, а в другом в 5 раз меньше, чем в контрольных группах. При изучении СА интактных крыс-самцов при их контакте с экспериментальными самками обнаружено статистически достоверное увеличение ЛПО, снижение КО, ДО, т. е. всех показателей, связанных с механизмом, повышающим СА. Одной из причин изменения уровня СА подопытных самок при подсадке к интактным самцам, по-видимому, является снижение способности последних к различению ферромонов эстраль-ной самки на фоне воздействия гераниола, адсорбированного на шкурке самок. Качественных различий в половом поведении крыс-самок опытных и контрольных групп (отношение самок к самцам, поза лордоза, реакция хвоста и т. д.) не выявлено.
Таким образом, комплексная оценка состояния обонятельного анализатора позволила установить, что однократное 4-часовое воздействие изученных концентраций цитронеллола и гераниола не вызывает статистически достоверных изменений со стороны периферического отдела обонятельного анализатора (по показателям активности ферментов гомогената эпителия). Вместе с тем запаховое воздействие гераниола приводит к снижению аналитической функции центрального отдела обонятельного анализатора (по показателям СА крыс-самцов). Выявленные изменения со стороны центрального отдела анализатора являются биологически значимыми для организма экспериментальных животных, так как связаны с одной из важных функций организма — функцией воспроизводства.
Литература
1. Барбье М. Введение в химическую экологию: Пер. с
франц. — М., 1978.
2. Бронштейн А. А. Обонятельные рецепторы позвоночных. —Л., 1977.
3. Жидкова JI. В., Беляева Н. П., Воронова К. В. // Биохимические методы исследований в гигиене. — М., 1973.—
С. 38—45.
4. Колб В. С., Камышников В. С. Клиническая биохимия. — Минск, 1976.
5. Королев А. М.. Фролов О. Ю. // Науч. докл. высш. школы. — Биол. науки. — 1975. — № 8. — С. 23—29.
6. Королев А. М„ Фролов О. Ю. // Всесоюзный симпозиум
по хемореценцин насекомых, 2-й: Материалы. — Вильнюс, 1975, —С. 37—41.
7. Костродымов Н. Н.Ц Гиг. и сан. — 1981. — № 9. — С. 37—41.
8. Костродымов Н. //.//Там же.— 1986, —№ 1,—С. 38—
43.
9. Малышева М. В. // Биохимические методы исследования в гигиене, —М., 1973.— С. 13—18.
Поступила 08.04.86
УДК 615.288.7.099.084:615.3561.076.9
Г. Г. Ладнова
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЗАЩИТНОГО ЭФФЕКТА СМЕСИ ВИТАМИНОВ И АМИНОКИСЛОТЫ ПРИ ИНТОКСИКАЦИИ ПЕСТИЦИДАМИ
ВНИИ охраны труда Госагропрома СССР, Орел
Одним из путей профилактики развития пестицидной интоксикации является применение биологически активных препаратов, участвующих в биотрансформацни пестицидов в организме, разрушающих или препятствующих накоплению их в тканях организма, восполняющих дефицит ферментов.
В литературе есть сведения об использовании некоторых витаминов и аминокислот в качестве лечебных и профилактических средств при интоксикации отдельными пестицидами [1, 3, 5, 7].
Ранее нами было показано, что смесь, состоящая из витаминов С, В|, В2, РР и аминокислоты метионина, введенная за 30 мин до воздействия пестицида, более эффективно защищала клетки крови доноров от ингибирующего действия пестицидов, чем другие исследованные смеси (2, 4]. Цель настоящей работы заключалась в исследовании защитных свойств этой смеси при интоксикациях карбофосом, кельтаном и бетаналом.
Острые эксперименты проведены на белых мышах-самцах массой 18—21 г, подострые — на мышах-самцах с той же массой тела и белых крысах-самцах массой 160—200 г. Животные каждого вида были разделены па 8 групп. Животным 1-й группы вводили физиологический раствор, 2-й — смесь витаминов и метионина, 3-й — карбофос, 4-й — изучаемую смесь и карбофос, 5-й — кельтан, 6-й — смесь и кельтан, 7-й — бетанал, 8-й — смесь и бетанал. В острых опытах смесь вводили за 30 мин до воздействия пестицида, в подострых — ежедневно внутрижелудочно на протяжении 14 дней. Содержание каждого компонента в смеси соответствовало суточной потребности человека со средней массой тела 60 кг (в мг/мг): С — 1,67, В| — 0,083, В2 — 0,167, РР — 0,42, метионин — 25. Пестициды в подостром эксперименте вводили ежедневно внутрибрю-шиино в дозе 1/14 ЬО50 (к концу опыта животные получили дозу, равную ЬО50). В остром опыте вредные вещества вводились однократно внутрибрюшинно в дозе, равной ЬО50. Защитный эффект смеси в остром эксперименте оценивали по числу выживших животных через 2 ч после введения пестицидов, в подостром — по активности ферментов гранулоцитов периферической крови: миелоперок-сидазы — (МП, I. II. I. 7), кислой (КФ, 3. 1.3.2) и щелочной — (ЩФ, 3.1.3.1) фосфатаз, по проценту выживаемости животных и остаточным количествам пестицидов в биологических пробах (кровь, печень, почки). Активность ферментов исследовали цитохимическими методами [8, 9] и выражали средним количеством гранул на клетку (КГК) в средним цитохимическим коэффициентом (СЦК). Остаточные количества карбофоса в биологических пробах определяли колориметрически по фосфору, а кельта на и бс-танала — методом хроматографии в тонком слое [6].
Результаты острых экспериментов показали, что в группе животных, получавших изученную смесь и карбофос, выживаемость увеличилась на 40%, получавших смесь
и кельтан, а также смесь и бетанал — на 33 % по сравнению с животными, получавшими только эти пестициды (табл. 1).
При цитохимическом исследовании гранулоцитов периферической крови крыс и мышей в подостром эксперименте установлено, что в группах животных, получавших только пестициды, активность МП в нейтрофилах снижалась в среднем в 1,6—3,2 раза, КФ — в 1,3—1,7 раза по сравнению с животными, получавшими физиологический раствор или смесь. Одновременно наблюдалось достоверное повышение активности ЩФ в нейтрофилах и КФ в лимфоцитах. В группах животных, получавших фармакологическую смесь и пестициды, активность МП в нейтрофилах была в 1,5—2 раза, КФ — в 1,5—1,8 раза выше, чем в контрольных группах. В этих же группах наблюдалось и достоверное снижение активности КФ в лимфоцитах. Показатели активности этих ферментов были близки к таковым в 1-й и 2-й группах. Активность ЩФ в опытных группах имела тенденцию к снижению, но различия между контролем и опытом статистически недостоверны.
Содержание пестицидов в крови, печени и почках крыс и мышей, получавших фармакологическую смесь, оказалось значительно ниже, чем у животных, получавших только пестициды. Так, концентрация карбофоса в крови опытной группы крыс была в 1,8 раза, мышей — в 7,5 раза, соответственно кельтана — в 3 и 3,6 раза, бетанала — в 1,7 и 3,5 раза ниже, чем в контрольных группах. Количество пестицидов в печени животных опытных групп было в 1,6— 2,9 раза, а в почках — в 1,5—2,4 раза меньше, чем в контроле. Влияние фармакологической смеси на выживаемость животных при затравке их пестицидами показано в табл.2.
Таким образом, проведенные эксперименты показали, что смесь витаминов и аминокислоты оказывает защитное
Таблица 1
Влияние смеси на выживаемос1ь мышей в остром эксперименте
X 3 (0 X с н Число Число Выжи-
с о д Введенное вещество животных павших ваемость,
£= в группе животных %
i- X
1-я Физиологический рас-
твор 10 — 100
2-я Смесь 10 — 100
3-я Карбофос 15 И 26,7
4-я Смесь + карбофос 15 5 66,6
5-я Кельтан 15 6 60
6-я Смесь + кельтан 15 1 93,4
7-я Бетанал 15 10 33,3
8-я Смесь + бетанал 15 5 66,6