УДК 619:616.9:618.6:636.2
Красиков А.П., Трофимов И.Г., Алексеева И.Г., Заболотных М.В..
КОМПЛЕКСНАЯ ДИАГНОСТИКА АССОЦИАТИВНЫХ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Резюме: Цель исследований: провести комплексное обследование коров родильно-профилак-торного периода и полученных от них больных телят. Определить чувствительность и диагностическую ценность РНИФ и РПИФ, при ассоциативных формах проявления инфекционного процесса. Установить место локализации, структурный состав, пути выделения микроорганизмов и механизм заражения животных. Для прижизненной диагностики использовали в качестве биоматериала: бронхоальвеолярную слизь телят, полученную методом альвеолярного лева-жа, сыворотку крови, слизь и кал с прямой кишки. От коров исследовали сыворотку крови, секрет вымени и урогенитального тракта. Применяли разработанные нами методы серологической диагностики прямой и непрямой иммунофлуоресценции (РПИФ и РНИФ) для прижизненного и посмертного выявления антигенов и антител. Для бактериологического исследования на микоплазмоз использовали питательные среды, разработанные совместно с Омским НИИ природно-очаговых инфекций Роспотребнадзора. Комплексные исследования, по выявлению антител и антигенов с помощью РНИФ и РПИФ, позволили дополнительно к реагирующим животным (коровы и телята) обнаружить от 10 до 89% носителей вируса ИРТ-ПВ, сальмонелл, хла-мидий, лептоспир и листерий в различных сочетаниях. Ассоциации возбудителей: хламидиоза, ку-лихорадки, микоплазмоза, ИРТ-ПВ, лептоспироза, листериоза выделяли в урогенитальном тракте у 20-50% коров после отела и у 10-50% в вымени. Выводы:
1. РПИФ и РНИФ высокочувствительные диагностические тесты, позволяющие в короткие сроки проводить комплексные прижизненные исследования биоматериала на наличие антител и антигенов в кровеносной, пищеварительной, респираторной, половой системах и вымени животных, а также определена их диагностическая ценность для выявления ассоциативных форм проявления инфекционного процесса у коров родильно-профилакторного периода и у полученных от них телят.
2. Комплексное обследование больных телят разных возрастных групп и коров родильно-про-филакторного периода позволило дополнительно к реагирующим по крови выявить от 10 до 40% и от 10 до 89%, соответственно, животных носителей и выделителей с фекалиями, брон-хоальвеолярной и цервиковагинальной слизью, молоком, молозивом - стрептококков, стафилококков, диплококков, энтеротоксигенных E. Coli, хламидий, вируса ИРТ, сальмонелл, лепто-спир, листерий, коксиелл и микоплазм.
3. Заражение телят хламидиозом, лептоспирозом, листериозом, сальмонеллезом, коксиеллезом, ИРТ-ПВ и микоплазмозом в основном происходит: внутриутробно, при прохождении через родовые пути при отелах и через молоко и молозиво.
Ключевые слова: ассоциативные инфекции, комплексная диагностика, микропаразитоценоз, антитела, антигены, микробо- и вирусоносительство.
Введение
Учитывая довольно широкое распространение ассоциативных инфекций, перед специалистами ветеринарной медицины возникают новые особые требования при проведении диагностических исследований [1-4]. Правильно оценить сложившуюся эпизоотическую ситуацию, эффективно спланировать профилактические мероприятия, можно лишь в случаях полного представления о структурном составе этиологических значимых агентах, входящих в состав таких ассоциаций.
В борьбе с инфекционными болезня-
ми также большое значение имеет быстрота и точность в постановке диагноза, своевременная изоляция и лечение больных животных. Клиническое проявление при многих инфекционных болезнях имеют много общих признаков. Кроме того, некоторые болезни протекают бессимптомно в латентной или стертой, атипичной и ассоциативной формах. В связи с этим лабораторные методы исследования зачастую имеют определяющее значение в установлении основных этиологических факторов инфекционных болезней. При этом необходимо использовать экспресс-
методы диагностики, позволяющие в сжатые сроки установить причину болезни и своевременно принять меры по купированию инфекции. Лабораторные методы диагностики должны носить комплексный характер. Известно, что в ответ на внедрение в организм возбудителей инфекционных болезней, клетки (А, Т и В) центральных органов иммунитета запускают иммунную систему на синтез специфических антител, которые улавливаются в сыворотке крови в основном на 7-14 дни после заражения, уровень и продолжительность нахождения которых, зависят от дозы, вирулентности возбудителей и функциональной активности иммунной системы. В более ранние сроки, а также после уменьшения концентрации или элиминации возбудителей из макроорганизма, антитела в сыворотке крови могут не выявляться, но они могут синтезироваться независимо или одновременно в самих органах и тканях животных в силу формирования локального (местного) тканевого иммунитета. Одним из таких органов у молодняка являются легкие, а у взрослых животных вымя и матка. В секрете этих органов можно одновременно выявлять антигены возбудителей инфекционных болезней и вырабатываемые ими антитела, что было показано нами при проведении эпизоотологиче-ского обследования ряда хозяйств Омской области [5- 10]. При этом в зависимости от формы течения инфекции (острая, подо-страя, хроническая), индивидуальной особенности у одних и тех же животных могут преобладать или одновременно проявляться антигены или антитела.
В связи с этим цель данных исследований провести комплексное, обследование коров родильно-профилакторного периода и полученных от них больных телят. Определить чувствительность и диагностическую ценность РНИФ и РПИФ, при ассоциативных формах проявления инфекционного процесса. Установить место локализации, структурный состав, пути выделения микроорганизмов и механизм заражения животных.
Материал и методы
В качестве объекта для изучения были выбраны 40 телят (по 10 голов из каждой возрастной группы) 2-20, 15-30 и 30-45, 60-120 дневного возрастов и 61 корова ро-дильно-профилакторного периода (стельные и 1-10 дней после отела) трех хозяйств: «Россия», «Большевик» и «Новороссийское» с различной эпизоотической обстановкой по инфекционным болезням мо-
лодняка крупного рогатого скота. Патологический материал исследовали от погибших и вынужденно убитых с диагностической целью телят.
Для прижизненной диагностики использовали в качестве биоматериала: бронхоальвеолярную слизь телят, полученную методом альвеолярного леважа, сыворотку крови, слизь и кал с прямой кишки. От коров исследовали сыворотку крови, секрет вымени и урогенитального тракта.
Применяли разработанные нами методы серологической диагностики прямой и непрямой иммунофлуоресценции (РПИФ и РНИФ) для прижизненного и посмертного выявления антигенов и антител. Фиксацию мазков проводили по методу Моди с соавт. (1958), а постановку РНИФ по методике, предложенной Уэллером и Кунсом (1945).
В качестве антигенов применяли: вакцинные штаммы и стандартные антигены, используемые для постановки РА и РСК, а в качестве антител - гомологичные антигенам кроличьи и бычьи антисыворотки, антивидовые для РНИФ и специфические сальмонеллезные, коксиеллезные, листе-риозные для РПИФ люминесцентные сыворотки меченные ФИТЦ (ИЭМ им. Гамалеи). Учет результатов РНИФ осуществляли с помощью люминесцентного микроскопа Люмам Р-8. Степень флуоресценции антител оценивали по 4-х крестной системе (Вайтекер и др., 1958). Для бактериологического исследования на микоплазмоз применяли питательные среды, разработанные совместно с Омским НИИ природ-но-очаговых инфекций Роспотребнадзора.
Результаты и обсуждение
СПК «Большевик». В сыворотке крови у 30% телят, от количества исследуемых, были выявлены хламидиозные, фузобак-териозные, сальмонеллезные и лептоспи-розные антитела. Антигены возбудителей кокковых микроорганизмов (диплококки, стрептококки, стафилококки), лептоспир, пастерелл, эшерихий (К99) зарегистрировали в бронхоальвеолярных смывах у 60% животных. При этом у 10% телят инфекционный процесс носил ассоциативный характер. В сыворотке крови у 40% коров были выявлены антитела против кокков, хламидий, лептоспир, вируса ИРТ-ПВВ и фузобактерий, что указывало на их микро-бо- и вирусоносительство. Причем в 30% случаев в различных сочетаниях выявляли ассоциации трех возбудителей. В секрете вымени у 20% от количества исследо-
Таблица 1
Т^интмчтир лнтнгенсж и антител у бальных телжг СПК «Россия» в РНИФ и РПИФ СОейЕйпп иГ Ап1щыня аш! АпШнмЬе* ш Бкк СУия л! Азии БРКтктШ ИАТ аш! ПАТ АпЛртй)
№ 1 1 ^ £ и 1 « £ §
п/п и |1 1 ^ 31 II
1 -!+ +/+ -1-1+
2 +/+ +/-
3 -!+
4
5 +/-
6 +:+ -1+1+
7 +/-
8
9 +!- +/- -1-1-
10 -!- +!+
Всего: 8Ш0% 30/,'20% 40% 30% 20/,'40% 10*/.
Примечание антитела в сыворотки храни / ашшшы в бргашалиеапхр-пых смывах / антигены в жалсжых массах // дсиюлннтл'лг.ио выхолено.
Таблица 2
Сракншхяьиое изучение ыикрашряжтшцтазш нпвхи жслуда!чн(мншсчлого трягта от теяжг из СПК «России» (СшпрагаИтс 5Ьн)у Мдпориаи1г ГУдгмк та Ли- Т дддд зп1 СакЬппйекЬла! Тгас± пГСа1«та л! Азии) БРК.
Фекалии
№ И''!! я и 1 1 5 1 г I ! ! Сальмонеллы (сип Д)
1 + - - - - - - + -
2 + - - - - - - + -
3 + - - - - - - + -
4 5 - - - - - - - + -
6 - - - - - - + + -
7 - - - - - - - - -
£ - - - ■ - - - + -
9 - - - - - - - - -
10 - - - - - - - + -
Всего: 30% 30*/. 10% 20% 30*/. 10% 10% 70% 60*/.
ванных стельных коров были обнаружены коксиеллы (возбудители ку-лихорадки), из них у 10% - в ассоциации со стафилококками, а в цервико- вагинальной слизи дополнительно у 10% животных были выделены сальмонеллы типа Д.
СПК «Новороссийское». В бронхоаль-веолярных смывах у 60% обследованных больных телят выявлено носительство антигенов возбудителей: пастереллеза, хла-
мидиоза, лептоспироза, сальмонеллеза и ИРТ. При этом в 20% случаев одновременно обнаружены возбудители хламидиоза и ИРТ, хламидиоза, лептоспироза, сальмо-неллеза и пастереллеза. Локальный синтез тканевых антител в легких был зарегистрирован также у 60% телят. Кроме того, в сыворотке крови выявлены антитела у 90% телят против хламидиоза, ИРТ, сальмонеллеза, пастереллеза, лептоспиро-
за, листериоза и ПГ-3, что свидетельствовало об их сенсибилизации данными микроорганизмами и иммунным ответом макроорганизма. В фекалиях у телят были обнаружены энтеротоксигенные адгезивные антигены патогенной кишечной палочки К99, К88, 987Р и А20 у 50% больных телят, а у 10% - сальмонеллы типа В. У коров в сыворотке крови выявлены антитела против сальмонеллеза и ПГ-3, а в молоке -против хламидиоза, лептоспироза и листе-риоза. В цервико-вагинальной слизи у 70% коров выделены антигены лептоспир, у 40% - листерий, у 30% - хламидий, диплококков, коксиелл и у 50% - стрептококков и стафилококков.
СПК «Россия». На примере животных данного хозяйства показана взаимосвязь между микропаразитоценозами различных систем макроорганизма, общим и локальным (местным) синтезом антител. Так, в сыворотке крови больных телят с клиническими признаками диареи, конъюнктивита, полиартритов, ринита и бронхопневмонии у 80% были зарегистрированы хла-мидиозные, у 40% лептоспирозные, у 30% листериозные и вирусные против ИРТ, у 20% сальмонеллезные и у 10% пастерел-лезные общие антитела. В бронхоальве-олярных смывах в 30% случаев выделяли антигены возбудителей: хламидиоза, саль-монеллеза тип В и ИРТ, в 20% - листерио-
за, в 10% случаев лептоспироза, пастерел-леза и коксиеллеза, а в фекальных массах у 70% обследованных животных обнаружены сальмонеллы типа Д и у 60% энтеро-токсигенные адгезивные антигены кишечной палочки 987Р (табл. 2). При этом смешанные формы проявления хламидиоза с сальмонеллезом имели место в 30% случаев, с лептоспирозом, листериозом, коли-бактериозом и ИРТ - в 20%, в 10% случаев - сочетания хламидиоза с сальмонеллезом и пастереллезом (табл. 1).
У коров родильно-профилакторного периода СПК «Россия» в сыворотке крови зарегистрированы антитела против хла-мидиоза и лептоспироза и
аналогичные возбудители в цервико-вагинальной слизи и молоке в первом (10 голов) и во втором (9 голов) случаях только у двух коров.
В патологическом материале от трех телят в РНИФ и РПИФ в мазках отпечатках были выделены антигены: лепто-спир и листерий, хламидий и стрептококков у двух, пастерелл, вируса ИРТ, кокси-елл, сальмонелл, диплококков, эшерихиий (К88 и F41)- у одного животного. При комплексном исследовании биоматериала дополнительно выявлено от 10 до 40% телят вирусо- и бактерионосителей.
Комплексные исследования, по выявлению антител и антигенов, позволило до-
ТэЁлнщЗ
Вшмрние ЯНТШЕЛ В ШЮраПЕ ХрПНИ Н ант! гили в CCKpCIE НЫМГНИ Н
урогеннгального тражтау коров роднльно^трофилзггорного пертода (1-5дн. после б-10дв_ до отела} из СПК «Россия» (DrtHrmmtioTi of Aiiibodjes m thr TJlood Snum and Antigrnes in the Udder and Genital Fluids in Cows Calvmg and Prophylactic Follow-iip Period (L - 5 days
№ i s е II £ 5 Е ** Sg
и/и I 5 к а 1! 1 * 5 ? Р
1 +!+!!+ +/+/!- +/+U+ 4+1/- 44/- 441-
1 +!+/!- -74-//- 441- 44/- 441-
Ъ 4+Ц+ 4+//- 44/- 4-4- 4-4- 441-
4 +/+/Н- -/-■"/- 44/- 4-4- +141- 441-
5 +/+//- 44/+ 441- 4+0+ +141- 441-
6 441- 44/- 44/. 44!- 44/- 441-
1 +/-/!+ 44/- +■-■!- 44!+ 4-U- 441-
8 44/- 441- 44!- 4-U- 441-
9 44/+ 44/- 441- 44!- +14/- 441-
10 +¡41- 44/- 441- 44!- +/41- 441-
Всего: % 90 30 40 50 4fl 0
анштела-ангагены
Доп-но антигены 20 10 20 50 0 0
Примечание антитела сыворотки ijxkh / лишни церввинипшишшй синя if шшгенн нши, деш-во - дополнительно ]
Таблица 4
Двягносттжсжая ценность РНИФ и РПИФ do кыхвпснню антител в сыворотке трони ангнгсяов возбудителей бшкшйи антител в шшлс (ножвиве) корив СПК «Россия» (Diagnostic Value of ПАТ andDLAT Used in DdEnmiiaitioii of Antibodies in Blood Senun, Aniigenes of Disease Agents, and Antibodies in Milk (Beestings) in Cows at
SPKKossia)
№ n-'n
1 2 3
+/+1/+
+1+H+
+/+!/+ +1+11-
i 8 II
+1-1/-
W
---
ц f 4
+ -
+ -
+ -
+ -
+ _
-1-11+ +I+U-
+/+H--Hf--1-11-
-Mt--f+ti--Mf--Mt--1+11-
-1-1!--/+!/-
-1+1!+
+ + + +
+1-1!-+1-11-+1+1/+
-1+1!-+i-ii-
--
-1-11--i-ii--1+H-+1-11-1-11-1-11-
+ +
----
Всего: % антитела-
доп-но, %
89
33
100
89
78
44
89
100
78
56
44
78
59
Примечают mbiihiij мппгаа i ятпии мплта U jhttpjci жрптм
полнительно к реагирующим животным обнаружить в первом случае от 10 до 50% носителей вируса ИРТ-ПВ, хламидий, леп-тоспир и листерий, а во втором - от 33 до 89% (табл. 3, 4).
Ассоциации хламидиоза в различных вариантах отмечали с возбудителями: ку-лихорадки, микоплазмоза, ИРТ-ПВ, леп-тоспироза, листериоза у 20 -50% животных после отела в урогенитальном трак-
те (табл. 5) и у 10-50% в вымени (табл. 6). У 22 обследованных коров родильно-про-филакторного периода в сыворотке крови в 100% случаев были зарегистрированы лептоспирозные, в 95% - сальмонеллез-ные, 86% - листериозные и у 68% - хлами-диозные и против ИРТ-ПВ антитела.
На сенсибилизацию организма животных данными микроорганизмами указывало и наличие антигенов, против кото-
ТСшщаЗ
Митропдрд-титпчдшд урогенитального тракта коров родильно^фофилжтортого
1К}нода СПК «Россия» (MKTopaiasite Genesis of Genital Trad in Cows during Calving and Prophylactic Pe-
nod alSPKRossia)
и
ж
nn
1
2
3
4
5
+ + + + +
£
+
+
-
-
---
i
Я 3 A
а I 3
& 3
-
-
■ -
- -
+ -
6 7 S
9
10 Итого:
50%
30%
20%
40%
0%
0%
20%
5C%
Телица б
«Россию
(MinopaiaKile Cenosis of Udtln m Cows dining Calving antl Prophylactic Poiod al
SPKKtuan)
№ а/к 1 gg ц п а б Ли стерли i jj J Я 1а lщ *
1 - - - _ _ - -
2 - - - - - - -
3 - - - - - - -
4 - - - - - - -
5 - + - + - - -
6 - - - - -
7 - - - - - -
8 - - + - - -
9 - - _ _ _ - -
10 - - - - - - -
Итого: 50*/. 10% 10% 20% 0 0 20%
Таблица 7
Покжитсли ■литшгжгтлс исследований бншЕртзяа от хорл роднльно-профииакгортнго периода (Ю дн. да отеля н 15 дн_ после отела) СПК «Россию (Results of Complex Examination of Biological Matemis Obtained fiom Cows during Calving and Prophylactic Period (10 days before and 1-5 days after calving) 3tSPK
Russia)
Кол-во ЖИ
БОТНЫХ.
10
Наличие антител и агадш» при инфекциях в %
70 20 20
Сыворотка крова (штитепа) О | 40 | h';i | н/и | ни
Цервшсе-вапшальная ^шзь (антигены возоуднтепей)
50 | 30 | 30 | 50 | 0 I 20 | 50 | 0
Молоко, молозиво (антигены) 50 | 10 | 10 | 20 | 0 | 0 | 0 | 0 | в/к
Молоко, молозиво (антигены) 44 | 44 | 44 | 29 | н/и | 56 | и.'и | 89 | 22
f
и
н/и
10 10
9
н/и а/и S9
н/и н/и 78
Молоко, молозиво (антитела)
67 | 89 | 67 | 44 | в/к | в/к \ в/к | в/к | 22
Сыворотка крови (антитела)
56 I 11 I 33 I I 44 I в/к I и.'и I в/к I и.'и
н/и и/и
22
22 22
Сыворотка крови (антитела) 68 | 68 | 100 | 86 | 95 | в/к \ в/к \ в/к \ в/к
Молоко, молозиво (антигены) 45 | 36 | 50 | 32 | 100 | 100 | в/к | 0 | 95 Цервико-вагинальная слизь (антигены возбудителей)
н/и
77
73
22
14 | 32 | 32 | 41 | 77"
64
59 | 0
100
100
95
Примечание н/и- не мошсдикиш
рых синтезировались локальные антитела в секрете молочной железы у 100% коров против сальмонелл и коксиелл (ку-лихорадка), 95% - диплококков, 77% - ста-
филококков, 73% - стрептококков, 50% -лептоспир, 45% - хламидий, 36% - ИРТ-ПВ и у 32% коров против листерий.
В молоке и молозиве выявлены ассоци-
ации хламидий и лептоспир у 20%, а лепто-спир и листерий у 10% животных. В церви-ко-вагинальной слизи также у 95-100% животных обнаружены стрептококки, диплококки и стафилококки, - 77% сальмонеллы, - 64% риккетсии, - 59 % микоплазмы, - 41% листерии, - 32% лептоспиры и вирус инфекционного ринотрахеита-пустулезно-го вульвовагинита (ИРТ-ПВ) и у 14% животных - хламидии (табл. 7).
При аналогичных исследованиях телят в данном хозяйстве была зарегистрирована у 50% животных одновременная циркуляция антител в сыворотке крови и наличие возбудителей в бронхоальвеолярных смывах и фекальных массах.
На основании результатов проведенных исследований можно сделать следующие выводы:
1. РПИФ и РНИФ высокочувствительные диагностические тесты, позволяющие в короткие сроки проводить комплексные прижизненные исследования биоматериала на наличие антител и антигенов в кровеносной, пищеварительной, респираторной, половой системах и вымени животных, а
также определена их диагностическая ценность для выявления ассоциативных форм проявления инфекционного процесса у коров родильно-профилакторного периода и у полученных от них телят.
2. Комплексное обследование больных телят разных возрастных групп и коров родильно-профилакторного периода позволило дополнительно к реагирующим выявить от 10 до 40% и от 10 до 89%, соответственно, животных носителей и выделителей с фекалиями, бронхоальвеоляр-ной и цервиковагинальной слизью, молоком, молозивом - стрептококков, стафилококков, диплококков, энтеротоксиген-ных E. Coli, хламидий, вируса ИРТ, сальмонелл, лептоспир, листерий, коксиелл и ми-коплазм.
3. Заражение телят хламидиозом, леп-тоспирозом, листериозом, сальмонелле-зом, коксиеллезом, ИРТ-ПВ и микоплаз-мозом в основном происходит - внутриутробно, при прохождении через родовые пути при отелах и через молоко и молозиво.
Библиография
. Красиков, А.П. Современные взгляды на инфекционные болезни телят и опыт борьбы с ними // Актуальные проблемы ветеринарной медицины в современных условиях и пути их разрешения / Сб. научн. работ ИВМ Ом ГАУ Омск. 2000. С. 5761.
2. Красиков, А.П., Лобанова, Н. В. Изучение микроб-
ного пейзажа в патологическом материале от павших телят в хозяйствах Омской области с различной эпизоотической ситуацией //Вклад ученых и специалистов в развитие животноводства и ветеринарии / Сб. научн. работ ИВМ Ом ГАУ. Омск, 2001. С. 49-50.
3. Красиков, А.П. Ассоциативные инфекционные бо-
лезни телят / А.П. Красиков, В.И. Афанасенко // Монография.- Омск: Изд-во ФГОУ ВПО ОмГАУ 2008. -275с.
4. Лобанова, Н.В. Паразитоценозы при микст-инфекциях телят / Н.В. Лобанова,
А.П. Красиков // Актуальные проблемы инфекционных, паразитарных и незаразных болезней домашних животных и меры борьбы с ними: материалы юбил. науч.-практич. конф. сотр. и аспир. ИВМ ОмГАУ - Омск:1998.- С. 205-209.
5. Маркевич, А.П. Ассоциативные болезни живот-
ных / А.П. Маркевич, В.М. Апатенко // VI Съезд паразитоценологов Украины: тез. докл. - Харьков, 1995,- С. 79-80.
6. Марчук, А.Т. Ассоциированные инфекции у ново-
рожденных телят / А.Т. Марчук // Инфекционные болезни телят: межвуз. сб. науч. ст. - Кишинев: 1988. - С. 20-25.
7. Масимов, И.А. Смешанные респираторные инфек-
ции КРС / И.А. Масимов // Ветеринарный консультант. 2003.- № 9-10. - С. 10-14.
8. Мельник, Н.Г., Красиков, А.П. Проблема ассоциа-
тивных инфекций животных и задачи паразито-ценологии по ее решению [ ] / Н.Г Мельник, А.П. Красиков // Материалы учредительной конференции международной ассоциации паразитоце-нологов. Витебск. 1999. С. 42-43.
9. Петров, Ю.Ф. Паразитоценозы и ассоциативные
болезни сельскохозяйственных животных / Ю.Ф. Петров - Л.: ВО Агропромиздат, 1988. - С. 9-12.
10. Терехов В.И. Профилактика ассоциативных желудочно-кишечных инфекций телят и меры борьбы с ними / Состояние и перспективы развития ветеринарной науки России // В.И. Терехов.-М.: 1999. - Т. 2. - С. 179-182.
References
1. Krasikov, A.P. Sovremennye vzgljady na infekcionnye
bolezni teljat i opyt bor>by s nimi [Modern views on infectious diseases of calves and experience to deal with them] //Aktual>nye problemy veterinarnoj mediciny v sovre-mennyh uslovijah i puti ih razreshenija / Sb. nauchn. rabot IVM Om GAU. Omsk. 2000. S. 57-61.
2. Krasikov, A.P., Lobanova, N. V Izuchenie mikrobnogo
pejzazha v patologicheskom materiale ot pavshih teljat v hozjajstvah Omskoj oblasti s razlichnoj jepizooticheskoj situaciej [Study microbial landscape in pathological material from dead calves
on farms Omsk region with different epizootic situation] //Vklad uchenyh i specialistov v razvitie zhivotnovodstva i veterinarii / Sb. nauchn. rabot IVM Om GAU. Omsk, 2001. S. 49-50.
3. Krasikov, A.P. Associativnye infekcionnye bolezni teljat [Associative infectious diseases of calves] / A.P Krasi-kov, VI. Afanasenko // Monografija.- Omsk: Izd-vo FGOU VPO OmGAU, 2008. -275s.
4. Lobanova, N.V Parazitocenozy pri mikst-infekcijah
teljat [Parasitocenoses with mixed infection of calves] / N.V. Lobanova, A.P Krasikov // Aktual>nye problemy infekcionnyh, parazitarnyh i neza-raznyh
boleznej domashnih zhivotnyh i mery bor>by s nimi: materialy jubil. nauch.-praktich. konf. sotr. i aspir. IVM OmGAU. - Omsk:1998.- S. 205-209.
5. Markevich, A.P. Associativnye bolezni zhivotnyh [Associative animal diseases] / A.P. Markevich, V.M. Apatenko // VI S#ezd parazitocenologov Ukrainy: tez. dokl. - Har>kov, 1995,- S. 79-80.
6. Marchuk, A.T. Associirovannye infekcii u novorozhdennyh teljat [Associated infections in newborn calves] / A.T. Marchuk // Infekcionnye bolezni teljat: mezhvuz. sb. nauch. st. - Kishinev: 1988. - S. 20-25.
7. Masimov, I.A. Smeshannye respiratornye infekcii KRS
[Mixed respiratory infections cattle] / I.A. Masimov // Veterinarnyj konsul>tant. 2003.- № 9-10. - S. 10-14.
8. Mel>nik, N.G., Krasikov, A.P. Problema associativnyh
infekcij zhivotnyh i zadachi parazitocenologii po ee resheniju [Problem associative infections of animals and parazitotsenologii problem to solve it] / N.G. Mel>nik, A.P. Krasikov // Materialy uchreditel>noj konferencii mezhdunarodnoj associacii
parazitocenologov. Vitebsk. 1999. S. 42-43.
9. Petrov, Ju.F Parazitocenozy i associativnye bolezni
sel>skohozjajstvennyh zhivotnyh [Parasitocenoses associative and diseases of agricultural animals] / Ju.F Petrov - L.: VO Agropromizdat, 1988. - S. 9-12.
10. Terehov VI. Profilaktika associativnyh zheludochno-kishechnyh infek-cij teljat i mery bor>by s nimi [Prevention associative gastrointestinal infections of calves and their control] / Sostojanie i perspektivy razvitija veterinarnoj nauki Rossii // VI. Terehov.- M.: 1999. - T. 2. - S. 179-182.
UDC 619:616.9:618.6:636.2
Krasikov A.P., Trofimov I.G., Alekseeva I.G., Zabolotnysh M.V.
COMPLEX DIAGNOSIS OF MIXED INFECTIVE DISEASES IN CATTLE
SUMMARY
Objective: to perform complex examination of cows during calving and prophylactic follow-up period and derived infected calves. To assess selectivity and diagnostic value of indirect (IIAT) and direct (DIAT) immunofluorescence antibody tests in mixed infections manifestation. To establish localization, structural composition, ways of microbe extraction, and infection mechanisms. Biological material used in life-time diagnosis was: calves' bronchioloalveolar mucus obtained by alveolar lavage; blood serum, mucus and feces from straight intestine. Blood serum, udder fluid, and urogenital tract secreta were tested in cows. We developed and applied methods of serum diagnosis through direct and indirect immunofluorescence (DIAT and IIAT) for life-time and postmortal detection of antigens and antibodies. Growth media developed in cooperation with Omsk Scientific and Research Institute of Natural and Focal Infections of Rospotrebnadzor were used in bacteriological tests. Complex tests for antibodies and antigens using DIAT and IIAT allowed detection of 10 to 89% of animals (cows and calves) carrying IBR-PV, Salmonella, Chlamydia, Leptospira, and Listeria in various combinations in addition to responsive animals. Associations of causative agents of Chlamydia infection, Q-fever, mycoplasmosis, IBR-PV, leptospirosis, and listeriosis were found in urogenital tract of 20 to 50% of cows after calving and in 10 to 50% of udder fluid samples. Conclusion:
1. DIAT and IIAT are highly sensitive diagnosis tests providing for rapid complex life-time examination of biological materials for presence of antibodies and antigens in the blood, intestine, respiratory, and genital systems and udder in animals; moreover, these diagnosis tests were validated for detection of mixed infection manifestation in cows during calving and prophylactic follow-up period and in delivered calves as well.
2. Complex examination of infected calves in two age groups allowed detection of 10 to 40% and 10 to 89% respectively animals carrying and extracting with feces, bronchioloalveolar and cervicovaginal mucus, milk, and beestings Streptococcus, Staphylococcus, Diplococcus, enterotoxigenic E. Coli, Chlamydia, IBR virus, Salmonella, Leptospira, Listeria, Coxiella, and mycoplasms in addition to responsive animals.
3. Calves are generally infected with Chlamydia, Leptrospira, Listeria, Salmonella, Coxiella, IBR-PV, and mycoplasms transplacentally, while passing through parturient canals during calving, or with milk and beestings.
Keywords: mixed infections, complex diagnosis, microparasite cenosis, antibodies, antigens, virus and microbiota carriage.
Контактная информация об авторах для переписки
1. Красиков Александр Пантелеевич, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры ветеринарной микробиологии, инфекционных и инвазионных болезней института ветеринарной медицины и биотехнологии Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина; д. 92, ул. Октябрьская-92,Омск, Россия, 644122, тел.: 8-950-79395-22, e-mail: krasikovap1950@mail.ru
2. Трофимов Игорь Георгиевич, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры ветеринарной микробиологии, инфекционных и инвазионных болезней института ветеринарной медицины и биотехнологии Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина; д. 92, ул. Октябрьская-92, Омск, Россия, 644122, тел.: 8-913-672-94-61.
3. Алексеева Ирина Геннадьевна, канд. вет. наук, старший преподаватель кафедры ветеринарной микробиологии, инфекционных и инвазионных болезней института ветери-
нарной медицины и биотехнологии Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина; д. 92, ул. Октябрьская-92, Омск, Россия, 644122, тел.: 8-950-793-95-22, e-mail: irinaalekseeva63@mail.ru
4. Заболотных Михаил Васильевич, доктор биологических наук, профессор, зав. кафедрой ветеринарно-санитарной экспертизы института ветеринарной медицины и биотехнологии Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина; д. 92, ул. Октябрьская-92, Омск, Россия, 644122, тел.: 8-950-785-68-84 e-mail:
Ответственный за переписку с редакцией: Красиков Александр Пантелеевич, доктор вет. наук, профессор кафедры ветеринарной микробиологии, инфекционных и инвазионных болезней института ветеринарной медицины и биотехнологии Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина; д. 92, ул. Октябрьская-92, Омск, Россия, 644122, тел.: 8-950-793-95-22, e-mail: krasikovap1950@mail.ru
1. Krassikov Alexander P., doctor of veterinary sciences, department of veterinary microbiology, infectious and parasitic diseases of the Institute of veterinary medicine and biotechnology Omsk State Agrarian University PA. Stolypin; 92, st. October 92, Omsk, Russia, 644122, phone: 8-950-793-95-22, e-mail: krasikovap1950@mail.ru
2. Trofimov Igor G., doctor of veterinary sciences, department of veterinary microbiology, infectious and parasitic diseases of the Institute of veterinary medicine and biotechnology Omsk State Agrarian University P. A. Stolypin; 92, st. October 92, Omsk, Russia, 644122, phone: 8-913-672-94-61.
3. Alekseeva Irina G., PhD. vet. Sciences, Senior Lecturer, department of veterinary microbiology, infectious and parasitic diseases of the Institute of veterinary medicine and biotechnology Omsk State Agrarian University PA. Stolypin; 92, st. October 92, Omsk, Russia, 644122, phone: 8-960-988-58-15, e-mail: irinaalekseeva63@mail.ru
4. Zabolotnysh Mikhail , D. Sc. , professor, head. the department of veterinary-sanitary examination Institute of veterinary medicine and biotechnology Omsk State Agrarian University PA Stolypin; 92, st. October 92, Omsk, Russia, 644122, phone: 8-950-785-68-84, e-mail:
Responsible for correspondence with the editors: Alexander Krassikov. Doctor vet. sc, professor, department of veterinary microbiology, infectious and parasitic diseases of the Institute of veterinary medicine and biotechnology Omsk State Agrarian University. PA. Stolypin; 92, st. October 92, Omsk, Russia, 644122, phone: 8-950-793-95-22, e-mail: krasikovap1950@mail.ru