Клиническое исследование пандемической вакцины Инфлювир на добровольцах в возрасте от 18 до 60 лет Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Клиническое исследование пандемической вакцины Инфлювир на добровольцах в возрасте от 18 до 60 лет

А.Н. Миронов1, Д.С. Бушменков1 (d.s.bushmenkov@microgen.ru), А.А. Романова1, А.А. Цаан1 (a.a.tsaan@microgen.ru), В.А. Меркулов2, Н.Н. Степанов2, Д.А. Голубев2, М.К. Ерофеева3, И.В. Фельдблюм4

1ФГУП «НПО «Микроген» Минздравсоцразвития России, Москва 2Филиал ФГУ «48-й ЦНИИ Минобороны России - ВЦ», Московская область, г. Сергиев Посад

3НИИ гриппа СЗО РАМН, Санкт-Петербург

4ГОУ ВПО «Пермская государственная медицинская академия им. Вагнера»

Резюме

ФГУП «НПО «Микроген» Минздравсоцразвития России разработана вакцина для профилактики гриппа типа А(Н1Ы1). Двукратная иммунизация лабораторных животных вакциной «Инфлювир» не влияет на внешний вид, общее состояние и поведение животных, не оказывает негативного влияния на морфологические и биохимические параметры крови и основные физиологические функции организма, не вызывает патоморфологических изменений, формирует стойкий иммунный ответ и защищает от заражения диким штаммом вируса гриппа типа А(Н1Ы1) 100% иммунизированных животных. В результате проведенного клинического исследования на добровольцах 18 - 60 лет доказаны хорошая переносимость, низкая реактогенность, безопасность и высокая иммуноген-ность вакцины, что позволило рекомендовать препарат для специфической профилактики пандемического гриппа типа А(Н1Ы1) у лиц данной возрастной категории. Ключевые слова: пандемия, грипп, вирус А(Н1Ы1), живая гриппозная вакцина, переносимость, реактогенность, безопасность, иммуногенность

A Clinical Trial of a Pandemic Vaccine Influvir in Volunteers Aged 18 to 60

A.N. Mironov1, D.S. Bushmenkov1 (d.s.bushmenkov@microgen.ru), A.A. Romanova1, A.A. Tsaan1 (a.a.tsaan@microgen.ru), V.A. Merkulov2, N.N. Stepanov2, D.A. Golubev2, M.K. Erofeeva3, I.V. Feldblum4

1 «Microgen» Federal State Scientific-Industrial Company for Immu-nobiological Medicines of the Ministry of Health and Social Development of Russia, Moscow

2 Filial of the Defense Research Institute № 48, Moscow District, city of Sergiev Posad

3 Research Institute of Influenza, St. Petersburg

4 Wagner Perm State Medical Academy Abstract

Federal State Scientific-Industrial Company for Immunobiological Medicines Microgen of the Ministry of Health and Social Developp-ment of Russia had been developed the swine flu vaccine (Influvir). Double immunizating of laboratory animals by the vaccine«Influvir» didn t show harmful influence to the general condition and behavior of animals, both morphological and biochemical values of blood and physiology. Also, afterwards immunization, didn't determine pathologic changes. Moreover, injection of the vaccine favour development strong immune response and 100% protection against wild strain virus influenza in the nonclinic studies. The conducted clinical research on volunteers of 18 - 60 years had been proved good tolerance, low reactogenic, safety and a high immunogenicity of a vaccine. Thereby, the developed swine flu had been recommend for specific prevention men, who is 18 - 60 years old. Key words: flu pandemic, influenza, virus A(H1N1), live influenza vaccine, safety, immunogenic, protective

Введение

В России, как и во всех развитых странах, приоритетным средством профилактики гриппа являются противогриппозные вакцины.

Эффективность вакцинопрофилактики характеризуется рядом показателей, из которых наиболее значимы иммунный ответ на вакцинацию, уровень популяционного иммунитета и охват прививками отдельных групп и населения в целом [2, 3, 6].

К настоящему времени накоплен большой опыт применения как живых (ЖГВ), так и инак-тивированных (ИГВ) гриппозных вакцин. Живые гриппозные вакцины изготавливаются из аттену-ированных (ослабленных) штаммов вируса гриппа и вводятся перорально или интраназально. В последнем случае происходит стимулирование местного секреторного иммунитета, благодаря чему реакция на вакцинацию проявляется быстрее, далее происходит индукция других звеньев

иммунитета - клеточного и гуморального. Таким образом, живая гриппозная вакцина обладает уникальным свойством - в короткие сроки формировать иммунитет, обеспечивающий защиту от гриппа как привитой, так и непривитой части населения [3].

Эксперты ВОЗ считают, что использование живой гриппозной вакцины - наиболее оптимальный путь вакцинопрофилактики в период пандемии. Технологией производства таких вакцин владеют только две страны в мире - Россия и США [8, 9].

В филиале ФГУП «НПО «Микроген» Минздрав-соцразвития России «Иркутское предприятие по производству бактерийных препаратов» на основе изготовления сезонной (Н1И1 и Н3И2) и препан-демической (Н5И2) живых гриппозных вакцин был разработан препарат вакцина Инфлювир - живая гриппозная моновалентная вакцина для профилактики пандемического гриппа А(Н1И1).

При создании вакцины Инфлювир использован штамм А(Н1И1)/17/Калифорния/2009/38, полученный методом классической реассортации дикого штамма гриппа А(Н1М1)/Са!11огп1а/7/2009 и хо-лодоадаптированного донора аттенуации А(Н2И2)/ 1_еп^га^134/17/57, успешно применяемого при создании безопасных и иммунологически эффективных сезонной и препандемической живых гриппозных вакцин.

Проведенные на лабораторных животных доклинические исследования показали, что применение вакцины Инфлювир не влияет на внешний вид, общее состояние и поведение животных, не оказывает негативного воздействия на морфологические и биохимические параметры крови и основные физиологические функции организма, не вызывает патоморфологических изменений, что свидетельствует о хорошей переносимости и безвредности препарата. Двукратная иммунизация не вызывает гибели животных, индуцирует развитие стойкого иммунного ответа и 100%-ную защиту от дикого вирулентного штамма вируса гриппа А(Н1И1)/ Са!Иогп1а/7/2009.

С целью доказательства ареактогенности, безопасности и иммуногенности вакцины Инфлювир было проведено клиническое исследование на добровольцах в возрасте 18 - 60 лет [1, 4, 5, 7].

Материалы и методы

Изучение препарата проводилось в двух исследовательских центрах (НИИ гриппа СЗО РАМН, Санкт-Петербург, и 48-й ЦНИИ Минобороны России - ВЦ, г. Сергиев Пасад) с привлечением 120 добровольцев в возрасте 18 - 60 лет (по 60 добровольцев в каждом центре), которые были ран-домизированно разделены на четыре группы:

• первая - 50 добровольцев, привитых вакциной

Инфлювир двукратно с интервалом 10 дней;

• вторая - 50 добровольцев, привитых вакциной

Инфлювир двукратно с интервалом 21 день;

• третья - 10 добровольцев, которым вводилось плацебо (вода для инъекций) двукратно с интервалом 10 дней;

• четвертая - 10 добровольцев, которым вводилось плацебо (вода для инъекций) двукратно с интервалом 21 день.

Перед началом исследования все добровольцы были проинформированы о целях исследования и возможных рисках. После подписания информированного согласия каждый доброволец был осмотрен врачом-исследователем, неврологом и ЛОР-врачом. У всех добровольцев был собран анамнез, проведена термометрия, измерены АД, ЧСС, взяты пробы крови (из вены) и мочи для клинических, биохимических и иммунологических исследований. У женщин был проведен тест на беременность. Лица, не удовлетворяющие критериям включения в исследование, получили медицинский отвод.

Исследование проводили в два этапа. На первом этапе ставили цель изучить переносимость и реактогенность вакцины на первых включенных в исследование 30 добровольцах, распределенных в четыре группы (по принципу, изложенному выше). За добровольцами наблюдали в течение пяти -семи суток в условиях стационара.

На втором этапе, после получения результатов, подтвердивших низкую реактогенность вакцины, исследование было продолжено в полном объеме на обеих исследовательских базах.

Оценку реактогенности и безопасности вакцины проводили по критериям:

• выраженность и связь с вакцинацией наблюдаемых местных и системных реакций в течение семи дней после первой и второй вакцинации (день вакцинации и шесть последующих дней);

• выраженность и связь с вакцинацией зафиксированных участниками исследования местных и системных реакций (по данным дневников самонаблюдения).

Безопасность определяли лабораторно-инстру-ментальными методами по показателям гематологического (гемоглобин, цветовой показатель, СОЭ, форменные элементы, лейкоцитарная формула) и биохимического (АЛТ, АСТ, щелочная фосфата-за, билирубин, общий белок, мочевина, креатинин, С-реактивный белок, глюкоза) анализов крови, общего анализа мочи, а также по уровню общего ^Е в сыворотке крови.

Безопасность для окружающих оценивали по репродукции вируса в верхних дыхательных путях на 3-и, 5-е, 10-е и 31-е сутки (интервал между прививками 10 суток) и на 3-и, 5-е, 10-е, 14-е, 21-е и 42-е сутки (интервал между прививками 21 сутки).

Оценка иммуногенности вакцины Инфлювир включала определение местного, клеточного и гуморального иммунных ответов на 10-е и 31-е (интервал между прививками 10 суток) и на 21-е и 42-е сутки исследования (интервал между прививками 21 сутки).

Результаты и обсуждение

В ходе проведения первого этапа на ограниченном контингенте добровольцев были получены следующие результаты (табл. 1):

• местных и системных реакций средней и сильной степени выраженности не было отмечено ни у одного добровольца;

• местные и системные реакции слабой степени выраженности имели транзиторный характер и исчезали без применения лекарственных средств.

После анализа данных, полученных на первом этапе клинического исследования вакцины Ин-флювир, был сделан вывод о хорошей переносимости и низкой реактогенности препарата, что позволило рекомендовать проведение второго этапа исследования.

При проведении второго этапа местные реакции наблюдались только после первой вакцинации (см. табл. 1). Системных поствакцинальных реакций не было отмечено ни у одного добровольца.

Местные реакции проявлялись першением в горле, катаральными симптомами в глотке, отечностью слизистой носа, насморком; системные реакции - подъемом температуры до 37,5 °С, кашлем, головной болью, повышенной утомляемостью.

Отклонения средних значений показателей биохимического и клинического анализов крови и мочи в ходе исследования были незначительны и нахо-

дились в пределах нормы вне зависимости от препарата (вакцина или плацебо) и схемы его введения (10-е или 21-е сутки).

У большинства добровольцев (92% в группе с интервалом введения 10 суток и 82% - 21 сутки) не выявлено изменения уровня ^Б, что свидетельствует об отсутствии у вакцины аллергизирующих свойств.

Изучение репродукции вируса в верхних дыхательных путях показало отсутствие выделения изо-лятов и реизолятов после проведения трех последовательных пассажей в РКЭ, что свидетельствует о безопасности вакцины для окружающих.

Иммуногенность вакцины изучали путем оценки местного, клеточного и гуморального звеньев иммунитета.

Данные оценки местного иммунного ответа по уровню секреторных иммуноглобулинов А в носоглоточных смывах методом ИФА приведены в таблице 2.

У 41% добровольцев на 10-е сутки после вакцинации отмечалось стимулирование местного (локального) иммунного ответа. На 21-е сутки процент положительных сероконверсий наблюдался у 34% добровольцев. Проведение повторной иммунизации с интервалами введения 10 и 21 сутки позволило индуцировать локальный иммунитет у 50 и 59% добровольцев соответственно.

На графиках (рис. 1 - 4) представлены данные нарастания субпопуляций Т-лимфоцитов периферической крови при двукратной вакцинации с интервалом 10 и 21 сутки вакциной Инфлювир. У при-

Таблица 1.

Количество добровольцев с выявленными поствакцинальными реакциями (первый и второй этапы клинических испытаний)

Группа (кол-во добровольцев) Количество добровольцев с выявленными поствакцинальными реакциями

местные реакции системные реакции

легкие средней степени тяжелые легкие средней степени тяжелые

Первая вакцинация

Вакцина (100 человек) 33 (33%) - - 14 (14%) 1 (1%) -

Плацебо (20 человек) - - - - - -

Вторая вакцинация

Вакцина (100 человек) 1 (1%) - - 1 (1%) - -

Плацебо (20 человек) - - - - - -

Всего

Вакцина (100 человек) 34 (34%) - - 15 (15%) 1 (1%) -

Плацебо (20 человек) - - - - - -

Таблица 2.

Результаты изучения местного иммунитета в ИФА

Показатели Интервал 10 суток Интервал 21 сутки

V1 V2 V1 V2

Общее количество добровольцев 46 46 47 47

Абсолютное количество лиц с увеличением sIgA 19 23 16 28

Процент лиц с увеличением sIgA 41% 50% 34% 59%

Рисунок 1.

Содержание CD4+-лимфоцитов периферической крови у добровольцев, привитых вакциной Инфлювир с интервалом введения 10 суток

—

%

52 -|

^ 50 -

CQ О 48 -

ÍX 46 -

V

>s 44 -

о 42 -

V

о 40 -

ф X 38 -

S о 36 -

CP 34 -

-t* 32 -

а 30 -

ф IZ 28 -

+ 26 -

о 24 -

о 22 -

20 i

Средняя взвешенная субпопуляции лимфоцитов CD4+ в группе волонтеров Средняя взвешенная субпопуляции лимфоцитов CD4+ в контрольной группе

Сутки

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34

Рисунок 2.

Содержание CD4+-лимфоцитов периферической крови у добровольцев, привитых вакциной Инфлювир с интервалом введения 21 сутки

витых наблюдалось увеличение количества субпопуляций Т-лимфоцитов периферической крови независимо от схемы вакцинации. При этом отмечалось более выраженное повышение содержания 004+-лимфоцитов.

Полученные данные свидетельствовали о развитии клеточного иммунитета в ответ на введение добровольцам вакцины Инфлювир. При этом более быстрая реакция со стороны клеточного звена иммунитета в ответ на повторную вакцинацию

Рисунок 3.

Содержание CD8+-лимфоцитов периферической крови у добровольцев, привитых вакциной Инфлювир с интервалом введения 10 суток

Рисунок 4.

Содержание CD8+-лимфоцитов периферической крови у добровольцев, привитых вакциной Инфлювир с интервалом введения 21 сутки

Таблица 3.

Уровень гуморального иммунного ответа у добровольцев, привитых вакциной Инфлювир

Уровень сероконверсии СГТ Фактор сероконверсии

Интервал введения Число серонегативных добровольцев V0 V V0 V V

абс. % абс. %

10 суток (V) 46 0 0 25 54 5,6 15,6 2,8

21 сутки ^0) 47 0 0 16 34 5,2 10,7 2,1

Плацебо 20 0 0 0 0 5 5 1

добровольцев в группе с интервалом между при- нем включении в иммунный ответ клеток памяти. В вивками 10 суток свидетельствует о более ран- случае 21-суточного интервала между прививками

такая реакция была отсроченной. Эти данные убедительно свидетельствуют в пользу двукратной схемы вакцинации с интервалом 10 суток.

Гуморальный иммунный ответ оценивался по уровню сероконверсии, фактору сероконверсии, среднегеометрическому титров антител. Результаты оценки гуморального иммунитета представлены в таблице 3.

Согласно полученным данным проведение иммунизации у добровольцев с 10-дневным интервалом введения препарата позволило индуцировать развитие гуморального иммунного ответа у 54% привитых. Фактор сероконверсии в группе с интервалом 10 суток достигал 2,8.

Таким образом, в ходе исследования были показаны хорошая переносимость, низкая реакто-генность, безопасность для привитых и окружающих, выраженные иммуногенные свойства вакцины Инфлювир.

Выводы

1. Анализ данных оценки безопасности и имму-ногенности позволил определить оптимальный интервал введения вакцины Инфлювир -10 суток.

2. Результаты доклинических исследований на животных и клинических исследований на добровольцах в возрасте 18 - 60 лет дали возможность зарегистрировать вакцину Инфлювир - живую моновалентную гриппозную вакцину, штамм А(Н1И1) /17/Калифор-ния/2009/38, в Российской Федерации и своевременно провести прививочную кампанию. Это позволило снизить уровень заболеваемости гриппом А(Н1И1) в стране и предотвратить развитие осложнений, характерных для гриппа. ш

Литература

1. Белоусов Ю.Б. Планирование и проведение клинических исследований лекарственных средств, - М.: Изд-во Общества клинических исследователей, 2000.

2. Медицинская вирусология: Руководство / Под ред. Д.К. Львова. - М.: Медицинское информационное агентство, 2008. - 658 с.

3. Медуницын Н.В. Вакцинология. - М.: Триада Х., 1998. - 446 с.

4. Национальный стандарт Российской Федерации «Надлежащая клиническая практика» от 27 сентября 2005 г. № 232-ст.

Приказ МЗ РФ от 19.06.2003 г. № 266 «Правила клинической практики в Российской Федерации».

Руководство по инфекционным болезням / Под ред. Ю.В. Лобзина. -СПб.: Фолиант, 2000.

Федеральный закон о лекарственных средствах от 22.08.2004 г. № 122-ФЗ.

Garten R.J., Davis C.T., Russell C.A. et al. Antigenic and genetic characteristics of swine-origin 2009 A(H1N1) influenza viruses circulating in humans // Science. 2009. V. 325. R 197 - 201. http://www.who.ru

информация воз к всемирному дню борьбы с туберкулезом

Туберкулез мульти- и экстенсивно лекарственно-устойчивый-2011: отчет о ситуации (выдержки)

Основные данные по 27 странам* с высоким уровнем заболеваемости мульти- и экстенсивно лекарственно-устойчивым туберкулезом (МЛУ ТБ** и ЭЛУ ТБ***):

• 26 стран учли в своих национальных планах борьбы с туберкулезом МЛУ-форму инфекции.

• 23 страны увеличили в 2011 году ассигнования на лечение МЛУ-форм ТБ с 0,1 до 0,5 млрд долларов. В Глобальном плане ВОЗ «Стоп ТБ» затраты на эти цели оцениваются в 0,9 млрд долларов.

• Только Эстония, Латвия, Российская Федерация и Южная Африка используют в большей, если не в полной мере, внутренние финансовые ресурсы для контроля МЛУ-форм ТБ.

• По оценкам, 250 тыс. случаев МЛУ ТБ выявляются среди всех больных ТБ в странах с высоким уровнем МЛУ и ЭЛУ ТБ, из них 24 511

- были пролечены.

• В 13 странах, представивших данные об исходе лечения МЛУ-форм туберкулеза, сообщается об успешной терапии, начатой в 2007 году

- 25 - 82% пациентов.

• В 14 странах проводят оценку и контроль ситуации с ТБ и в 11-ти

- созданы национальные планы противотуберкулезных действий.

• С 2008 года Международный лекарственный фонд более чем в два раза пополнился фармацевтическими препаратами для лечения МЛУ ТБ.

• Число лекарств, к которым резистентны микобактерии ТБ, по данным проведенных исследований и прогнозам, вырастет в 2011 году до 11 (2008 г. - один препарат), при этом количество стран, имеющих репрезентативную информацию о таких лекарствах, увеличилось с 19 (2008 г.) до 22 (2010 г.).

• Число стран с высоким уровнем МЛУ ТБ, способных предоставлять достоверную, подкрепленную исследованиями информацию о лекарствах, к которым резистентны микобактерии ТБ, выросло с четырех (2008 г.) до восьми (2010 г.).

* По оценкам, более 85% случаев МЛУ и ЭЛУ ТБ в мире приходится на 27 стран (Армения, Азейрбайджан, Бангладеш, Болгария, Грузия, Япония, Демократическая Република Конго, Эстония, Казахстан, Киргизия, Латвия, Литва, Республика Молдова, Российская Федерация, Таджикистан, Украина, Узбекистан, Вьетнам, Китай, Эфиопия, Индия, Индонезия, Мьянма, Нигерия, Пакистан, Филиппины, Южно-Африканская Республика).

** Мульти-лекарственно-устойчивый туберкулез - резистентность микобактерий к наиболее эффективным противотуберкулезным препаратам (изониазид и рифампицин). Может возникнуть в результате лечения другой инфекции или развиться в процессе терапии ТБ.

*** Экстенсивно лекарственно-устойчивый туберкулез - резистентность микобактерий не только к изониазиду и рифампицину, но также ко всем фторхинолонам и всем препаратам лечения ТБ второго ряда - ами-кацину, канамицину или капреомицину.

МЛУ и ЭЛУ ТБ не поддаются шестимесячной стандартной терапии препаратами первого ряда, и для их лечения назначается двухлетний курс более мощных, более токсичных и значительно более дорогостоящих лекарств.

Источник:

Отчет ВОЗ «Вперед к всеобщему успеху в диагностике и лечении мульти- и экстенсивно лекарственно-устойчивого туберкулеза к 2015 году»

http://www.who.int/tb/features_archive/world_tb_day_mdr_ report_2011/en/index.html