CC BY
0
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
активация индуцирует каскад реакций, контролирующих внутриклеточные процессы. Однако при возникновении активирующих мутаций в гене ЕЕТЗ происходит их сбой, что приводит к нарушению процессов пролиферации. Согласно клиническим данным, взрослые пациенты с ОМЛ,у которых выявлены мутации ЕЬТЗ, имели плохой ответ на стандартную полихимиотерапию, что требовало применения таргетных препаратов — ингибиторов тирозинкиназ. По своей структуре ингибиторы тирозинкиназ классифицируются на 5 типов, в зависимости от характера их взаимодействия с молекулярной мишенью.
Цель работы. Цель исследования — определение чувствительности ЕЕТЗ-позитивных ОМЛ к ингибиторам тирозинкиназ у взрослых пациентов
Материалы и методы. Методом прямого автоматического секвенирования и полимеразной цепной реакции с последующим фрагментным анализом определен мутационный статус гена ЕЬТЗ у 100 взрослых пациентов с диагнозом ОМЛ в возрасте 18—60 лет, проходивших лечение на базе ГАУЗ СО «Свердловская областная клиническая больница №1» и ГБУЗ СО «Центральная городская больница №7 город Екатеринбург». Для оценки чувствительности тирозинкиназ к различным типам мутаций была
построена модель третичной структуры тирозинкиназы FLT3 при помощи компьютерной программы Protein Homology/AnalogY Recognition Engine 2.0.
Результаты и обсуждение. В результате исследования он-когенетически значимые мутации FLT3 определены в 20 наблюдениях, в большинстве из которых они оказались представлены внутренними тандемными дупликациями (85%). Во всех случаях с внутренними тандемными дупликациями и в одном — с несинонимичной заменой в тирозинкиназном домене (TKD) FLT3 при компьютерном моделировании была установлена чувствительность к ингибиторам тирозинкиназ типа I. В двух пробах с мутациями FLT3-TKD по позициям 1827 и D835 аминокислотной последовательности, былаустановлена резистентность к ингибиторам тирозинкиназ типа I и чувствительность к ингибиторам типа II. При этом разница между ингибиторами I и II типа определялась структурными особенностями гибкой активационной петли, а именно — положением остатка аспартата DFG-мотива.
Заключение. Таким образом, компьютерное моделирование мутаций FLT3 при ОМЛ взрослых позволяет прогнозировать различную химиочувствительность опухолевых клеток к таргетным ингибиторам.
Виноградов А. В.1, Зубарева А. С.2, Резайкин А. В.3, Константинова Т. С.4, Сазонов С. В.3
ОЦЕНКА МУТАЦИОННОГО СТАТУСА ГЕНА ТЕТ2 У ВЗРОСЛЫХ БОЛЬНЫХ ГЕМОБЛАСТОЗАМИ МЕТОДОМ
ПРЯМОГО СЕКВЕНИРОВАНИЯ
1ГАУЗ СО «Свердловская областная клиническая больница № 1», 2ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, 3ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», 4ГАУЗ СО «Свердловская областная клиническая больница № 1», ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России
Введение. Ген ТЕТ2 картирован в регионе 4q24, состоит из 11 экзонов и имеет открытую рамку считывания 6009 нуклеотидов. ТЕТ2 занимает ключевую роль в эпигенетической регуляции нормального и злокачественного кроветворения. Этот ген является одним из наиболее часто мутирующих при злокачественных опухолях миелоидной дифференцировки. Мутации в гене ТЕТ2 происходят в стволовых кроветворных клетках и выявляются при хроническом миеломоноцитарном лейкозе, миелодиспласти-ческих синдромах и острых лейкозах.
Цель работы. Провести оценку мутационного статуса гена ТЕТ2 у взрослых больных гемобластозами методом прямого се-квенирования.
Материалы и методы. Исследовали 20 проб костного мозга и периферической крови больных гемобластозами, проходивших лечение в ГАУЗ СО «Свердловская областная клиническая больница №1» и ГБУЗ СО «Центральная городская больница №7 города Екатеринбурга» и 10 проб периферической крови здоровых доноров. Возраст обследуемых варьировал от 21 года до 59 лет. Среди пациентов в 18 случаях диагноз соответствовал острому ми-елоидному лейкозу (ОМЛ), по 1 наблюдению — миелодиспласти-ческий синдром (рефрактерная анемия с избытком бластов — 2) и острый лимфобластный лейкоз (В II). Из лейкозных клеток выделяли тотальную РНК с последующей обратной транскрипцией и полимеразной цепной реакцией для получения кДНК. Участок кДНК, соответсвующий кодирующей последовательности экзона
11-го гена ТЕТ2 с прилегающими областями длиной 1590 п.н. исследовали на автоматическом генетическом анализаторе с использованием специально синтезированных праймеров по прямой и обратной последовательностям. Для обработки результатов прямого секвенирования использовалась программа MEGA X.
Результаты и обсуждение. В соответствии с разработанной методикой удалось определить первичную структуру кодирующей части экзона 11 гена ТЕТ2 во всех пробах. Первичная структура гена у исследованных доноров полностью совпадала с «диким типом» (GeneBank NM_001127208). В результате исследования пациентов были обнаружены два вида генетических изменений в ТЕТ2, представленных несинонимичными заменами A5284G и T5162G (во всех случаях — при ОМЛ), частота соответствовала 45,0 и 25,0%. Согласно данным литературы, транзиция A5284G, выявляется при ОМЛ, хроническом миеломоноцитарном лейкозе и других ми-елоидных опухолях. Трансверсия T5162G описана при Т-клеточном пролимфоцитарном лейкозе и гемангиобластоме. При этом однозначной оценки прогностического значения указанных аномалий в доступных нам источниках литературы не приводится.
Заключение. Таким образом, разработана методика и проведена оценка мутационного статуса гена ТЕТ2 на пилотной выборке образцов периферической крови больных гемобластозами и здоровых доноров методом прямого секвенирования. Необходимо проведение дальнейших исследований для оценки частоты и прогностического значения выявленных генетических изменений.
Винокурова А. Н., Ксензова Т. И., Аникина Е. В.
КЛИНИЧЕСКИЙ СЛУЧАЙ ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЛИМФОМЫ С АТИПИЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИЕЙ ПОРАЖЕНИЯ
ГБУЗ ТО ОКБ №1, г. Тюмень
Введение. В статье представлен клинический случай фолликулярной лимфомы с атипичной локализацией поражения, описан этап дифференциальной диагностики, результаты лабораторных и инструментальных методов исследования, результатов проведенной терапии.
Цель работы. Описать клинический случай фолликулярной лимфомы с нетипичной локализацией поражения.
Материалы и методы. Анализ медицинской документации.
Результаты и обсуждение. Мужчина 38 лет, считает себя больным с июня 2020 г., когда появилось небольшое образование в затылочной области с медленным темпом роста, в последующем присоединилась шейная лимфаденопатия. В январе 2021 г. выполнена биопсия шейного лимфоузла. По данным ИГХ-исследования от 02.2021 (г. Тюмень): картина диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы с иммунофенотипом первичной медиасти-нальной лимфомы. ПЭТ/КТ: картина повышения метаболической
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
активности РФП во множественных конгломератах лимфоузлов на исследованном уровне, костях скелета, в костальной плевре, правой почке, спленомегалия. Референс материала в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России от 04.2021 г. по ИГХ-исследованию: клетки диффузно-нодулярного лимфоидного инфильтрата с формированием фолликулоподобных структур экс-прессируют СЭ20, СЭ10, ВСЬ2, ВСЬб, НСАЬ, С058. Часть клеток инфильтрата коэкспрессирует С023. С-Мус-позитивны менее 20% опухолевых клеток. При реакции с антителами к МиМ1 ■— позитивны разрозненно расположенные крупные лимфоидные клетки с морфологией центробластов. Индекс про-лиферативной активности Ki-б7 30—40%. Сус1т 01-позитивны гистиоциты, лимфоидные клетки негативны. Реакция с антителами визуализирует единичные ТсГГ-позитивные клетки. Заключение: Морфологическая картина и иммунофенотип характеризуют субстрат фолликулярной лимфомы ЗА цитологический тип с диффузно-нодулярным характером роста. Госпитализирован в отделение гематологии и химиотерапии с большим опухолевым объемом с отсутствием В-симптомов. При осмотре на волосистой части головы множественные подкожные опухолевидные образования от 5 до 12 см в диаметре, плотные, безболезненные, неподвижные, синюшно-багрового цвета, деформирующие контуры головы и лица (рис. 1). В остальном без особенностей. Лабораторные данные без значимых изменений, вне поражения костного мозга. На основании полученных данных, выставлен диагноз: Фолликулярная лимфома ЗА цитологический тип с поражением мягких тканей Рис.
головы, лимфоузлов шейных, подмышечных, паховых, брюшной полости, малого таза и забрюшинного пространства, костей, костальной плевры справа, правой почки, IVA стадия, промежуточный риск по FLIPI-2. Проведено лечение: 1 R-CHOP, 5 G-CHOP с хорошим клиническим и рентгенологическим ответом в виде полной редукции опухолевого объема на коже (рис. 2). ПЭТ-КТ от 09.2021 г. ■— картина полного метаболического ответа.
Заключение. Таким образом, на фоне стандартной химиотерапии получен регресс множественных конгломератов с атипичной локализацией поражения, полный метаболический ответ с отсутствием очагов патологической гиперфиксации в костях скелета, костальной плевре справа, правой почке по ПЭТ/КТ. Пациент находится на динамическом наблюдении.
Рис.2
Войтко М. С.1, Поспелова Т. И.2, Климонтов В. В.3, Шебуняева Я. Ю.2, Фазуллина О. Н.3
ЗНАЧИМЫЕ ПРЕДИКТОРЫ СНИЖЕНИЯ МИНЕРАЛЬНОЙ ПЛОТНОСТИ КОСТНОЙ ТКАНИ У БОЛЬНЫХ ЛИМФОМОЙ ХОДЖКИНА
Новосибирский государственный медицинский университет; ГБУЗ НСО ГКБ №2, 2Новосибирский государственный медицинский университет, Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной лимфологии (филиал ИЦиГ СО РАН)
Введение. В последние годы достигнуто существенное улучшение результатов лечения пациентов с лимфомой Ходжкина (ЛХ). Становится все более актуальным изучение осложнений химиолучевой терапии, которые могут регистрироваться не только во время лечения пациента, но и через многие годы после его окончания. Поздние осложнения противоопухолевой терапии могут затрагивать эндокринную систему. Функциональные нарушения желез внутренней секреции способны оказывать влияние и на снижение минеральной плотности костной ткани (МПК), способствовать развитию остеопороза и переломов костей. В настоящее время отсутствуют данные о структуре факторов риска формирования остеопорозаубольных ЛХ.
Цель работы. Выделить значимые предикторы снижения МПКупациентов с ЛХ в дебюте заболевания и после лечения.
Материалы и методы. В исследование включено 160 больных ЛХ после химиолучевой терапии, 60 из них были обследованы проспективно. Медиана возраста пациентов — 41 (34; 54,5) год. Контрольную группу составили 40 условно здоровых человек. Оценка МПК проводилась с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DXA). Концентрацию гормонов в сыворотке крови определяли с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Выявление количественных факторов, ассоциированных с развитием остеопороза у больных лимфомой Ходжкина, проведено с помощью построения ROC-кривых с использованием программного обеспечения IBM SPSS Statistics 26.0 (IBM, США).
Результаты и обсуждение. Снижение МПК выявленоу 40,6% обследуемых пациентов с ЛХ. Определены наиболее важные
и информативные клинико-гематологические и эндокринные предикторы снижения МПКу больных ЛХ: использование > 8 курсов полихимиотерапии (ОШ=7,92 (3,49-18,0), р<0,001), суммарная доза алкилирующих цитостатических препаратов > 7500 мг (ОШ=2,34 (1,09-5,01), р=0,03), кумулятивная доза глюкокортикостероидов
> 6250 мг (ОШ=2,96 (1,15-7,62), р=0,025), суммарная доза цик-лофосфамида > 7000 мг (ОШ=2,62 (1,01-6,80), р=0,047), возраст старше 52 лет (ОШ=114 (10,4-1277), р<0,001), концентрация ТТГ
> 1,95 мМЕ/л (ОШ=3,11 (1,44-6,72), р=0,004), уровень паратгор-мона > 78,6 пг/мл (ОШ=3,95 (1,61-9,69), р=0,003), концентрация свободного Т4 < 11 пмоль/л (0ш=3,30 (1,53-7,12), р=0,002), прогестерона в сыворотке крови < 0,90 нмоль/л (ОШ=3,67 (1,46-9,24), Р=0,006), ФСГ > 6,95 мМЕ/мл (ОШ=3,39 (1,35-8,53), Р=0,009).
У больных с впервые выявленной ЛХ наиболее значимыми предикторами формирования остеопороза являются концентрация ЛДГ В сыворотке крови > 593 Ед/л (ОШ=12,6 (2,21-72,0), р=0,004), СОЭ > 28 мм/ч (0ш=10,0 (1,78-51,2), р=0,009), количество лимфоцитов < 21,5% (ОШ=53,7 (5,59-515), Р=0,001), СРВ > 7,95 мг/л (0ш=10,0 (1,78-56,1), р=0,009), количество лейкоцитов > 8,90 тыс/ мкл (ОШ=38,5 (4,15-356), р=0,001), концентрация гемоглобина < 122 г/л (ОШ=8,14 (1,47-45,2), Р=0,02).
Заключение. Высокая распространенность остеопороза у пациентов с ЛХ диктует необходимостьусовершенствования подхода к раннему скринингу и прогнозированию нарушений костного ремоделирования, что является решением важной задачи в рамках медико-социальной адаптации пациентов после химиолучевой терапии ЛХ.
