Клинические испытания препарата гепакардин на собаках старшей возрастной группы Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 619:615.038

Ключевые слова: гепакардин, ветеринарная гериатрия, гепатопротектор, кардиопротектор, антиоксидант

Key words: hepacardin, veterinary geriatrics, hepatoprotector, cardioprotector, antloxidant

Глотова С. В., Чуваев И. В., Андреева Н. Л.

КЛИНИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ ПРЕПАРАТА ГЕПАКАРДИН НА СОБАКАХ СТАРШЕЙ ВОЗРАСТНОЙ ГРУППЫ

CLINICAL TRIAL oF THE PREPARATioN HEPACARDIN IN DoGs of THE sENioR AGE GRouP

Институт Ветеринарной Биологии1, Санкт-Петербург

Institute of Veterinary Biology1, saint-Petersburg ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»2, Санкт-Петербург

saint-Petersburg state Academy of Veterinary Medicine2, saint-Petersburg

Глотова Светлана Вячеславовна, аспирант каф. фармакологии и токсикологии2. Тел. (812) 232-55-92

glotova svetlana V., Pharmacology and Toxicology Dept. Postgraduate2. Tel. +7 (812) 232-55-92

Чуваев Игорь Валерьевич, канд. биол. наук, главный врач1. Тел.: (812) 232-55-92 Chuvaev Igor V., Ph.D. in biology science, Chief Veterinary Physician1. Tel.: +7 (812) 232-55-92 Андреева Надежда Лукояновна, проф., докт. биол.наук, зав. каф. фармакологии и токсикологии2. Тел.: (812) 387-11-58 Andreeva Nadezhda l., Professor, Doctor of biology scinece, head of Pharmacology and Toxicology Dept.2.

Tel.: +7 812 387-11-58

Аннотация. Применение препарата гекпакардин (30 дней из расчета 1 капсула на 10 кг массы тела два раза в день, внутрь) собакам старше 10 лет с различными заболеваниями сердца, печени, костно-суставной системы, приводило к нормализации в сыворотке крови активности АЛТ, АСТ, щелочной фосфатазы; снижало до нормальных значений содержание билирубина, малонового диальдегида, диенкетоны в крови. В значительной степени улучшалась двигательная активность животных.

Summary. Application of the preparation hepacardin (within the period of 30 days at 1 capsule per 10 kg body mass twice a day, orally) in dogs over 10 years of age with different heart, liver diseases, diseases of osteoarticular system led to normalization of the activity of AlT, АсАТ, alkaline phosphatase in blood serum; lowered bilirubin, malondialdehyde, dienketones content in blood to normal value. Motion activity of animals improved considerably.

Введение

Согласно исследованиям, проведенным ранее, установлено, что в последние годы возросло относительное число посетителей ветеринарных клиник с возрастными собаками, т. е. с собаками в возрасте от 7-8 лет и старше [10].

В связи с этим разработка и создание гериатрических препаратов для домашних животных становится актуальной задачей ветеринарной фармакологии. Препараты данной группы позволят не только комплексно про-филактировать и лечить болезни, возникающие в старости, но и продлевать срок активной и полноценной жизни животных [9].

Ранее был разработан и создан препарат ЧИН 3607 (гепакардин), включающий в себя экстракты растительного и животного происхождения. Доклинические исследования свойств препарата выявили его высокую безопасность [3] и эффективность на различных моделях поражения печени и миокарда [4, 8].

Кроме того, учитывая свойства компонентов, входящих в состав препарата, предполагается выраженный хондропротекторный эффект.

Целью настоящего исследования было изучение терапевтических свойств препарата гепакардин на собаках старше 10 лет.

Материалы и методы

Исследование было выполнено на базе приюта для собак Санкт-Петербурга. В исследовании участвовало 10 собак в возрасте 11-15 лет; среди них 4 суки и 6 кобелей, все беспородные.

Собаки в течение всего периода наблюдения содержались в одинаковых условиях, получали готовый сухой корм. Препарат давали вместе с кормом из расчета 1 капсула на 10 кг живой массы 2 раза в день в течение месяца.

Полный клинический осмотр животных, клинический анализ крови и контроль биохимических показателей крови проводили на момент начала и окончания исследования.

Оценку биохимических показателей крови, таких как АЛТ, АСТ, щелочная фосфатаза, креатинин, общий билирубин, общий белок, кальций и фосфор, осуществляли колориметрическим методом с использованием биохимического анализатора Stat Fax 1904 Plus (США) и стандартных наборов импортного и отечественного производства.

Уровень перекисного окисления липидов оценивали следующим образом: концентрацию малонового диальдегида определяли методом с тиобарбитуратовой кислотой, концентрацию диеновых конъюгатов и ди-енкетонов определяли модифицированным методом Плацера с соавтор. [5] на кафедре биохимии СПбГАВМ. Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием критерия Стъюдента.

Поведение животных, аппетит и потребление воды контролировали ежедневно.

Результаты и обсуждение

На момент начала исследования у всех собак был хороший аппетит, оформленный стул, отсутствовали признаки обезвоживания, а также полидипсии - полиурии.

При первичном клиническом осмотре было установлено следующее.

Упитанность у собак №№ 1, 5, 6, 7, 8, 9 - нормальная; №№ 2, 3, 4 - ожирение; № 10 - понижена.

Состояние шерстного покрова: у собак №№ 2, 3, 4, 5 отмечена жирная себорея; у остальных - нормальное.

Цвет слизистых оболочек у собак №№ 2 и 5 иктеричный, у остальных животных - розового цвета.

При аускультации грудной полости у собак №№ 1, 5, 7, 8, 10 были выявлены глухие сердечные тоны, у №№ 5, 6, 9, 10 - аритмия, у №№ 1, 10 - сердечный шум.

Дыхание у всех собак при аускультации было везикулярным.

При пальпации брюшной полости болезненность в области почек была выявлена у собаки № 1, болезненность в области печени - у собак №№ 2, 5, 10, увеличение границ печени - у собак №№ 2, 3 и 5.

У собаки № 7 были выявлены сильная болезненность и крепитация при движении

левого скакательного сустава, клинические признаки остеоартроза. Болезненность при движении суставов, скованность в движениях, периодическая хромота были отмечены у всех собак.

Результаты первичного биохимического и клинического анализов крови собак наблюдаемой группы (на момент начала исследования) представлены в таблицах 1 и 2.

Анализируя результаты биохимических исследований (на начало испытания), представленные в таблице 1, следует отметить значительное увеличение показателей АЛТ, щелочной фосфатазы и билирубина в сыворотке крови данной группы животных, что может свидетельствовать о нарушении целостности, а, следовательно, и функции гепатоцитов (внутри- и внепеченочный хо-лестаз, токсические поражения гепатоцитов, недостаточность синтетических процессов в печени, воспалительные процессы, а также возрастные изменения в паренхиме органа).

При заболеваниях, ведущих к повреждениям клеток, насыщенных АЛТ (гепатоциты, клетки почек, миокард и пр.), аланинамино-трансфераза выбрасывается в кровь - повышается уровень АЛТ. По результатам анализов на уровень АЛТ в комплексе с АСТ (т. е. печеночные пробы) чаще судят о патологических процессах в печени. В связи с тем, что специфическая активность АЛТ в печени почти в 10 раз выше, чем в миокарде и скелетной мускулатуре, повышенная активность этого фермента в сыворотке рассматривается как индикатор поражения паренхимы печени. При различных гепатопа-тиях уровень АЛТ может превышать норму в несколько раз.

Гипербилирубинемия при нормальном уровне эритроцитов (что исключает гемолитическую желтуху) может быть результатом пониженной способности к метаболизму и транспорту против градиента в желчь билирубина гепатоцитами (паренхиматозные желтухи), а также следствием механических затруднений желчевыделения (обтурацион-ные - застойные, механические, холестати-ческие желтухи).

Фермент щелочная фосфатаза присутствует во всех органах животных, высокая актив-

ность определяется в печени, остеобластах и кишечном эпителии. Патологическое повышение активности ЩФ наблюдается чаще всего при холестазе и при некоторых заболеваниях костей.

При этом следует отметить, что значительное увеличение биохимических показателей, характеризующих состояние печени, было не только по суммарно среднему значению всей выборки животных, но и у каждого животного в отдельности:

- уровень АЛТ в сыворотке крови животных на момент начала испытания только у двух собак в пределах нормы (до 70 Е/л), у шести собак - от 70 до 100 Е/л, у двух собак - выше 100 Е/л; в целом по группе уровень АЛТ составил от 67,3 до 282,8 Е/л;

- уровень щелочной фосфатазы в сыворотке крови животных на момент начала испытания у всех собак был больше нормы (выше 120 Е/л) - от 163,7 до 434,6 Е/л;

- уровень общего билирубина в сыворотке крови животных на момент начала испытания в пределах нормы был лишь у двух собак (до 8 мкмоль/л), у пяти собак - от 8 до 15 мкмоль/л и у трех - выше 15 мкмоль/л; в целом по группе уровень общего билирубина составил от 7,1 до 31,2 мкмоль/л.

Уровень АСТ (аспартатаминотрансфера-зы) на момент начала исследования у семи собак был выше нормы (больше 70 Е/л): у трех - от 70 до 100 Е/л и у четырех - от 100 до 250 Е/л; в целом по группе уровень АСТ составил от 62,3 до 250 Е/л. Наиболее высокая активность АСТ отмечена в печени, нервной ткани, скелетной мускулатуре, миокарде. При инфаркте миокарда активность АСТ в 95 % случаев повышена в первую неделю после приступа. Активность данного фермента значительно повышается также при заболеваниях гепатобилиарной системы и повреждениях скелетной мускулатуры.

Уровень кальция и фосфора в сыворотке крови у большинства животных был в пределах нормы: Са - от 1,9 до 2,4 ммоль/л; Р -у восьми животных 2,0-3,0 ммоль/л, а двух собак выше нормы - 3,0-4,9 ммоль/л.

В организме животных большая часть кальция содержится в костной ткани и зубах. Ионы кальция играют важную роль при

передаче нервных импульсов, являются кофактором многих ферментов, необходимы для поддержания нормальной сократимости мышц, процесса свертывания крови.

Повышение уровня фосфора в сыворотке крови может говорить о остеопорозе, распаде костной ткани, а также при циррозе печени, почечной недостаточности.

Обмен фосфора и кальция тесно взаимосвязаны, и при оценке уровня кальция и фосфора в крови следует обращать внимание не только на их количество в крови, но и на их соотношение. Считается [7], что оптимальным является соотношение между кальцием и фосфором (Са : Р), равное 1,5 : 1. Гиперкальциемия, снижая секрецию парати-реоидного гормона, стимулирует реабсорб-цию фосфатов. Фосфат может соединяться с кальцием и приводить к отложению кальция в тканях и гипокальциемии.

На момент начала исследования соотношение Са : Р в сыворотке крови в среднем составляло 1 : 1,25, что может свидетельствовать о нарушении кальце-фосфорного обмена.

Показатели перекисного окисления липи-дов (ПОЛ) - малоновый диальдегид и диен-кетоны в сыворотке крови собак на момент начала испытания были выше нормы (больше 20 мкмоль/л и 0,1 едА/мл соответственно); в целом по группе уровень малонового диальдегида составил от 22,5 до 40,0 мкмоль/л, а уровень диенкетонов - от 0,14 до 0,3 едА/мл. Увеличение концентрации маркеров перекисного окисления липидов -малонового диальдегида и диенкетонов происходит с возрастом [1], что связано с ослаблением антиоксидантной защиты организма (снижение уровня витаминов С, Е, А, а также активности ферментов-антиоксидантов - су-пероксиддисмутазы и каталазы).

Также известно, что в условиях кислородного голодания тканевых структур происходит перестройка внутриклеточного метаболизма с ограничением аэробных и преобладанием анаэробных процессов, при этом активируется протеолиз, развивается внутриклеточный ацидоз, которые, в свою очередь, вызывают повреждения цитомембран, сопровождающиеся инициацией перикисного окисления липидов [6] и накоплением в жид-

ких средах его продуктов: малонового диаль-дегида, диеновых и триеновых конъюгатов, гидроперикисей липидов, диенкетонов [2]. Таким образом, повышение этих веществ в сыворотке крови может указывать на наличие метаболических нарушений в различных органах и тканях организма (в ЦНС, печени, почках и т. д.).

Показатели клинического анализа крови животных, проведенного в начале исследования, были в пределах нормы: уровень эритроцитов был в диапазоне 4,6-6,8 (1012/л), лейкоцитов - 8,1-18,7 (109/л), гемоглобин - 127,7-247,2 г/л, цветной показатель - 0,9-1,3, СОЭ - 1-6 мм/ч.

Клинический осмотр животных на момент окончания исследования выявил следующее.

1. В период проведения испытания аппетит у всех собак оставался хороший, стул оформленный, признаков полидипсии - по-лиурии не наблюдалось.

2. Были отмечены изменения в поведении: собаки стали более активные, подвижные.

3. Слизистые оболочки у всех собак при вторичном осмотре были розового цвета.

4. У собак №№ 2, 3, 4, 5 отмечено улучшение состояние шерстного покрова, отсутствие себореи.

5. Упитанность у всех собак осталась прежняя.

6. Состояние сердца при аускультации у собак осталось без явных изменений, за ис-

ключением животных №№ 5, 6, у которых отмечено улучшение ритма сердечных тонов.

7. При пальпации брюшной стенки болезненности в области печени, почек у собак не выявлено. Границы печени у собаки № 3 остались на прежнем уровне.

8. Улучшение опорной и динамической функций конечностей наблюдалось у всех собак.

Данные повторного клинического и биохимического анализов крови собак представлены в таблицах 1, 2.

Как представлено в таблице 1, применение препарата гепакардин в дозе 1 капс./10 кг массы 2 раза в день привело к снижению до нормальных значений таких показателей крови наблюдаемых животных, как: АЛТ, АСТ, щелочная фосфатаза, общий билирубин. Что может свидетельствовать о восстановлении целостности и функции гепатоцитов и, возможно, кардиомиоцитов.

Так, при повторном взятии крови через месяц после приема препарата:

- уровень АЛТ в сыворотке крови стал в пределах нормы (до 70 Е/л) у 7 собак, в пределах от 70 до 101,0 Е/л - у трех собак; в среднем по группе уровень АЛТ снизился на 46,4 % от исходного значения;

- уровень щелочной фосфатазы в сыворотке крови стал в пределах нормы (до 120 Е/л) у 6 собак, а у остальных четырех - в пределах от 120 до 198,5 Е/л; в среднем по группе

Таблица 1.

Некоторые биохимические показатели крови собак на момент начала и окончания приема гепакардина ^+_п)

Показатель На начало испытания (п=10) Через месяц применения препарата гепакардин (п=10)

АЛТ (Е/л) 105,14 ±23,3 56,37±7,89*

АСТ (Е/л) 116,03±20,3 27,96±2,52*

Щелочная фосфатаза (Е/л) 249,35±29,3 125,7±15,47*

Креатинин (мкмоль/л) 90,87±4,7 85,09±5,52

Общий билирубин (мкмоль/л) 13,89±2,6 6,21±1,26*

Об. белок (г/л) 62,75±2,27 59,98±0,98

Кальций (ммоль/л) 2,13±0,05 2,46±0,05*

Фосфор (моль/л) 2,53±0,31 2,0±0,03

Малоновый диальдегид (мкмоль/л) 30,16±1,54 22,25±1,15*

Диенкетоны (едА/мл) 0,20±0,02 0,13±0,01*

* - р<0,05

Таблица 2.

Показатели клинического анализа крови собак (среднее значение) на момент начала и окончания приема гепакардина

Показатель На начало испытания Через месяц применения препарата гепакардин

Эритроциты (1012/л) 5,93 6,17

Лейкоциты (109/л) 13,83 15,04

Гемоглобин (г/л) 174,91 165,21

Цветной показатель 1,04 0,97

СОЭ (мм/ч) 2,4 1,7

уровень щелочной фосфатазы снизился на 49,5 % от исходного значения;

- уровень общего билирубина в сыворотке крови стал в пределах нормы (до 8 мкмоль/л) у 8 собак, однако у двух оставался немного повышенным (до 13,7 мкмоль/л); в среднем по группе уровень общего билирубина снизился на 55,29 % от исходного значения;

- уровень АСТ в сыворотке крови у всех животных стал в пределах нормы (до 70 Е/л); в среднем по группе уровень АСТ снизился на 75,9 % от исходного значения.

Это может свидетельствовать о гепато- и кардиопротекторном действии препарата ге-пакардин.

Уровень креатинина, уровень общего белка в течение исследования достоверно не изменились и остались в переделах нормы.

Содержание кальция в крови собак через месяц применения препарата гепакардин увеличилось на 15,5 % по сравнению с начальным уровнем. В связи с чем данный препарат, видимо, можно рекомендовать в качестве дополнительного источника кальция для животных. Кроме того, изменилось соотношение Са : Р - 1,25 : 1, что может говорить о нормализации кальце-фосфорного обмена у животных.

Содержание в крови собак малонового диальдегида и диенкетонов (продукты пере-кисного окисления липидов в организме) достоверно снизилось и приблизилось к нормальным значениям:

- уровень малонового диальдегида в сыворотке крови испытуемых животных стал в пределах нормы (до 20 мкмоль/л) у трех собак, а у остальных данный показатель оказался в пределах до 27,8 мкмоль/л; в среднем по группе уровень малонового альдегида снизился на 26,2 % от исходного значения;

- уровень диенкетонов в сыворотке крови испытуемых животных стал в пределах 0,090,2 едА/мл); в среднем по группе уровень диенкетонов снизился на 35 % от исходного значения.

Снижение концентрации в крови продуктов перекисного окисления липидов может говорить о высокой антиоксидантной активности препарата гепакардин, связанной, скорее всего, со свойствами компонентов, входящих в состав препарата, способных повысить уровень антиоксидантной защиты организма.

Показатели клинического анализа крови собак на момент начала испытания существенно не отличались через месяц применения препарата и оставались в пределах нормы.

Выводы

1. Тридцатидневный курс применения препарата гепакардиин в терапевтической дозе (1 капсула на 10 кг живой массы 2 раза в день) способствует восстановлению опорных и двигательных функций конечностей собак, больных остеоартрозом.

2. Тридцатидневный курс применения препарата гепакардиин в терапевтической дозе (1 капсула на 10 кг живой массы 2 раза в день) вызвал снижение в сыворотке крови уровня АСТ в 4,1 раза, АЛТ - в 2 раза, щелочной фосфатазы - в 1,9 раз, общего билирубина - в 2,2 раза, приведя их к значениям, характерным для здоровых собак.

3. Применение препарата гепакардиин в течение месяца в терапевтической дозе (1 капсула на 10 кг живой массы 2 раза в день) не вызывал у собак достоверных изменений уровня креатинина, общего белка в сыворотке крови.

4. Применение препарата гепакардиин в течение месяца в терапевтической дозе (1 капсула на 10 кг живой массы 2 раза в день) не оказывал влияния на показатели клинического анализа крови собак (количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина, цветной показатель, СОЭ).

5. Тридцатидневный курс применения препарата гепакардин в терапевтической дозе (1 капсула на 10 кг живой массы 2 раза в день) вызывал нормализацию показателей перекисного окисления липидов, таких как малоновый диальдегид и диенкетоны, снижая их уровень на 26,2 % и на 35 % соответственно.

Список литературы

1. Бахта, А. А. Возрастные особенности антиок-сидантного статуса организма собак / А. А. Бахта // Ученые записки Казанской гос. академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. - Т. 185. - Казань, 2006. - С. 13-17.

2.Бурмистров, С. О. Перикисное окисление ли-пидов, белков и активность антиоксидантной системы сыворотки крови новорожденных и взрослых. / С. О. Бурмистров и соавт. // Акушерство и гинекология. - 1997, - № 6. - с. 36-39.

3. Глотова, С. В. Изучение острой и хронической токсичности препарата ЧИН 3607 (гепакардин) /

С. В. Глотова // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - № 2 (2). - СПб, 2009. - С. 15

4. Глотова, С. В. Изучение противотоксических свойств препарата ЧИН 3607 на модели острого гепатита / С. В. Глотова, И. В.Чуваев, Н. Л. Андреева // Ветеринарная практика. - № 3 (42). - СПб, 2008.

5. Камышников, В. С. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика / В. С. Камышников. -Т. 1. - Минск, 2003. - С. 230.

6. Лукьянова, Л. Д. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние / Л. Д. Лукьянова и соавт. - М., 1982. - 301 с.

7. Смоляров, В. И. Рациональное питание / В. И Смоляров. - Киев, 1991. - С. 156.

8. Чуваев, И. В. Изучение гепатопротекторных свойств препарата ЧИН 3607 на модели острого гепатита / И. В. Чуваев, В. Д. Соколов, С. В. Глотова // «Эффективные и безопасные лекарственные средства». I международный конгресс ветеринарных фармакологов : [материалы]. - СПб, 2008.

9. Чуваев, И. В. Необходимость изыскания гериатрических средств для плотоядных / И. В. Чуваев, В. Д. Соколов, С. В. Глотова // XIX Международная научно-практическая конференция по фармакологии и токсикологии : [материалы]. - СПб, 2007.

10. Чуваев, И. В. Сравнительный анализ обращений владельцев собак в клинику ООО «Институт Ветеринарной Биологии» за 1998-2008 гг. / И. В. Чуваев, В. Д. Соколов, С. В. Глотова // «Эффективные и безопасные средства в ветеринарии». Всероссийского съезд ветеринарных фармакологов и токсикологов : [материалы]. - 2009. - С. 90

АППАРАТ ДЛЯ ИМПУЛЬСНОЙ БИОСИНХРОНИЗИРОВАННОЙ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОЙ ТЕРАПИИ «УМИ-05»

На протяжении многих лет клиника БНПЦ ЧИН и Институт Ветеринарной Биологии (Санкт-Петербург) использует в своей практике уникальный прибор - генератор низкочастотного магнитного импульсного излучения большой мощности «УМИ-05» (ранее «УИМТ-2», «УИМТ-3») для моно- или комплексной терапии целого ряда заболеваний, которые ранее считались неизлечимыми или очень тяжело поддавались лечению.

Основные направления применения:

- заболевания мочевой системы: мочекаменная болезнь, пиелонефрит, поликистоз, цистит;

- желчекаменная болезнь;

- заболевания опорно-двигательного аппарата: остеохондроз позвоночника, дископатия, артрозо-артриты, бурсит, растяжение связок, ушибы, контрактуры суставов, миозит;

- купирование эпилептических приступов и эпилептического статуса;

- гипертензия;

- отит гнойный;

- отит аллергический.

Наш почтовый адрес: 196657, Санкт-Петербург, Колпино-7, а/я 36. Тел./факс: (812) 232-88-61. E-mail: virclin@mail.ru. URL: http://invetbio.spb.ru