CC BY
35
DOI: 10.24411/2074-5036-2019-10035 УДК: 619:616.995.
Ключевые слова: собаки, дирофиляриоз, лейкоформула, белковый обмен, ферменты крови, липидный обмен Keywords: dogs, dirofilariasis, leykoformula, protein metabolism, blood enzymes, lipidic metabolism
1Беспалова Н. С., 2Золотых Т. А.
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС СОБАК, БОЛЬНЫХ ДИРОФИЛЯРИОЗОМ
GEMA TOLOGICAL STATUS OF DOGS WITH DIROFILARIASIS
1ФГБОУ ВО «Воронежский государственный аграрный университет имени императора Петра I» Адрес: 394087, Россия, г. Воронеж, ул. Мичурина, д. 1 Voronezh State Agrarian University named after Emperor Peter I Adress: 394087, Russian Federation, Voronezh, Michurina st., 1 2Ветеринарная клиника ВетЛига Адрес: 394042, Россия, Воронеж, Минская ул., д. 9а Veterynary clinic "VetLiga" Adress: 394042, Russian Federation, Voronezh, Minskaya st., 9a
Беспалова Надежда Сергеевна - доктор ветеринарных наук, профессор, профессор кафедры ветеринарно-санитарной экспертизы, эпизоотологии и паразитологии.
E-mail: Nadezh.bespalova2014@yandex.ru. Тел.: 8(920)423-06-92 Bespalova Nadezhda Sergeevna. Doctor of Veterinary Science, Professor, Professor of the Department of Veterinary-Sanitary Expertise, Epizootology and Parasitology.
E-mail: Nadezh.bespalova2014@yandex.ru. Тел.: 8(920)423-06-92 Золотых Татьяна Алексеевна - кандидат ветеринарных наук, ветеринарный врач ветеринарной клиники «ВетЛига».
E-mail: zlata69@mail.ru. Тел.: 8(920) 219-22-17 Zolotykh Tatyana Alekseevna. PhD of Veterinary Sciences, Veterinary Clinic "VetLiga".
E-mail: zlata69@mail.ru. Тел.: 8(920) 219-22-17
Аннотация. Объектом исследования служили собаки, заразившиеся дирофиляриозом в естественных условиях. Для определения гематологического статуса крови больных дирофиляриозом собак изучили в динамике клинические и биохимические показатели. Установлено, что при интенсивности инвазии (ИИ) 249,6±9,5 - 254,8±10,6 экз. личинок в мл крови развиваются эритропения, гипергемоглобинемия, лейкоцитоз, эозино-филия, увеличивается СОЭ. Количество эритроцитов было снижено, а лейкоцитов повышено в 15 % случаев. В 40 % случаев установлена лимфопения, в 45 % - эозинофилия. У 45 % собак была умеренно повышена СОЭ при высокой гиперхромии эритроцитов. У 85 % животных концентрация гемоглобина была выше, чем у здоровых в среднем на 16 %. В биохимическом статусе крови установлено в 65 % случаев повышение активности АСТ и в 70 % случаев - АЛТ. Более чем у половины больных животных установлено повышение амилазы, щелочной фосфатазы и креатинина. Показатель общего билирубина был высоким у 25 % больных животных за счет фракции свободного билирубина. При исследовании минерального обмена установлено у 35 % больных собак повышение количества калия и кальция, у 40 % - неорганического фосфора, при снижении концентрации натрия в 40 % случаев. При исследовании липидного обмена установлено снижение общих липидов у 40 % и общего холестерина - у 30 % больных животных. Полученные результаты исследований позволяют использовать показатели гематологического статуса, как биомаркеры глубины патологических процессов в организме собак при дирофиляриозе и определяют сроки начала проведения патогенетической терапии.
Summary. The object of the research were the dogs who caught dirofilariasis under natural conditions. For determination of the hematologic status of blood of the dogs sick with a dirofilariasis clinical and biochemical indicators in dynamics were studied. It is found that at the intensity of invasion of 249.6±9.5 - 254.8±10.6 units of larvae in ml of blood erythrosinging, hypergemoglobinemia, leukocytosis, and eosinophilia develop, blood sedimentation rate increases. The quantity of erythrocytes was reduced, and leukocytes increased in 15 % of cases. In 40 % of cases the limfopeniya, in 45 % - an eozinofiliya were determined. At 45 % of dogs blood sedimentation rate at a high hyperchromia of erythrocytes was moderately risen. 85 % of animals showed higher concentration of hemoglobin than that of healthy ones, on average by 16%. In the biochemical status of blood an increase in activity of aspartateaminotransferase was detected in 70 % of cases - alanineaminotransferase increased in 65 % of cases as well. More than a half of sick animals showed an increase in amylase, alkaline phosphatase and creatinine. 25 % of sick animals had a high indicator of the general bilirubin at the expense offraction offree bilirubin. The research of mineral exchange revealed an increase in amount ofpotassium and calcium in 35 % of sick dogs, 40 % had an increase in inorganic phosphorus alongside with a decrease in concentration
of sodium in 40 % of cases. Research of lipidic metabolism found a decrease in the general lipids in 40 % of subjects and the general cholesterol decrease in 30 %. The received results of the research allow to use indicators of the hematologic status as biomarkers of depth ofpathological processes in an organism of dogs at a dirofilyariasis and determine terms of starting pathogenetic therapy.
Введение
Дирофиляриоз - тяжелое инвазионное заболевание собак, сопровождающееся функциональными расстройствами разных систем организма. Попадая в кровь, токсины и продукты обмена веществ дирофилярий вызывают патологические изменения в организме больных собак, отражением состояния которого является гематологический статус. Глубина функциональных нарушений зависит от вида возбудителя, места его локализации в организме, длительности периода болезни и интенсивности инвазии. Все ученые, занимающиеся проблемой дирофиляриоза, указывают на изменения в общеклинических и биохимических показателях крови у больных собак [4, 7]. Изучение данного вопроса необходимо для определения глубины патологических изменений в организме больных дирофиляриозом собак и определения начала проведения патогенетической терапии.
Целью нашей работы было оценить роль и значимость гематологического статуса больных дирофиляриозом собак, вызванного D. repens и D. Immitis, в характеристике тяжести течения инвазии и определении необходимости патогенетической терапии.
Материалы и методы
Для изучения гематологического статуса было исследовано 126 проб крови от служебных собак пород немецкая овчарка и лабрадор в возрасте 4-5 лет, зараженных D. repens и D. immitis в естественных условиях, и 47 проб от здоровых животных. Вид D. immitis был обнаружен в 35,4 %, D. repens - в 58,5 %, микстинвазия - в 6,1 % случаев. Интенсивность инвазии (ИИ) составляла 249,6±4,7 - 254,8±5,3 экз. личинок в мл крови. Для определения общеклинических показателей крови проводили дифференциальный подсчет лейкоцитов с выведением лейко-формулы в окрашенном методом Романов-ского-Гимзе мазке крови. Подсчет общего количества эритроцитов и лейкоцитов проводили в камере Горяева, скорость оседания
эритроцитов (СОЭ) определяли микрометодом Панченкова, количество гемоглобина - в биохимическом анализаторе.
Для определения биохимических показателей сыворотки крови собак использовали полуавтоматический анализатор «STAT FAX 3300» (США) и набор реактивов «Витал Ди-агностикс» (Россия). Определяли общий белок, активность трасфераз: аспартат- (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), амилазы, общий, свободный и связанный билирубин, глюкозу, мочевину, креатинин, общие липиды и общий холестерин. Обмен минеральных веществ оценивали по содержанию в сыворотке крови макроэлементов: калия, натрия, общего кальция и неорганического фосфора. Полученный цифровой материал статистически обрабатывали с помощью прикладных компьютерных программ с определением критерия достоверности.
Результаты исследований
Анализ состояния гематологического статуса показал, что у больных дирофилярио-зом собак в стадии компенсации, независимо от вида возбудителя, наблюдается изменение в клинических показателях крови в сторону повышения гемоглобина в 11,4 % случаев, нейтрофилов за счет увеличения количества палочкоядерных форм в 16,7 % случаев по сравнению со здоровыми животными (таблица 1).
Количество эритроцитов было снижено, а лейкоцитов повышено в 15 % случаев. В 40 % случаев установлена лимфопения, в 45 % - эозинофилия. У 45 % собак была умеренно повышена СОЭ при высокой ги-перхромии эритроцитов. У 85 % животных концентрация гемоглобина была выше, чем у здоровых в среднем на 16 %.
В биохимическом статусе установлено в 65 % случаев повышение активности АСТ и в 70 % случаев - АЛТ. Более чем у половины больных животных установлено повышение амилазы, щелочной фос-
з!
Таблица 1
Клинические показатели крови здоровых и больных дирофиляриозом собак
№ п/п Показатели крови Здоровые собаки Собаки, больные дирофиляриозом
1 Гемоглобин, г/л 151,4±13,1 175,5±19,1
2 Эритроциты, 1012/л 6,5±0,8 5,7±0,5
3 Лейкоциты, 109/л 9,6±1,7 11,9±3,9
4 Нейтрофилы палочкоядерные, % 3,2±0,3 4,5±0,2
5 Нейтрофилы сегментоядерные, % 64,8±5,0 65,4±8,5
6 Лимфоциты, % 23,6±3,4 20,7±2,9
7 Эозинофилы, % 4,8±0,2 5,7±0,9
8 Моноциты, % 4,5±0,8 4,3±0,8
9 СОЭ, мм/ч 2,4±0,01 5,7±0,2
фатазы и креатинина. Показатель общего билирубина был высоким у 25 % больных животных за счет фракции свободного билирубина.
При исследовании минерального обмена установлено у 35 % больных собак повышение количества калия и кальция, у 40 % - неорганического фосфора, при снижении концентрации натрия в 40 % случаев.
При исследовании липидного обмена установлено снижение общих липидов у 40 % и холестерина - у 30 % больных животных (таблица 2).
Обсуждение результатов
Ряд авторов описывает отклонения в лейкоцитарной формуле собак, больных дирофиляриозом, независимо от вида гельминта, которые характеризуются развитием анемии с уменьшением количества эритроцитов и гемоглобина, повышением СОЭ в 67,52±4,35 % случаев при нормальном количестве лейкоцитов у 81,06±3,66 % ин-вазированных собак. В лейкоформуле было повышено содержание сегментоядерных клеток у 70,83±9,48 % и снижение лимфоцитов у 67,83±4,38 % животных. Процентное
Таблица 2
Биохимические показатели крови здоровых и больных дирофиляриозом собак
№ п/п Показатель Здоровые собаки Больные собаки
1 АЛТ, ЕД/л 36,3±9,7 56,9±4,5
2 АСТ, ЕД/л 30,5±8,1 35,2±9,9
3 ЩФ, ЕД/л 34,63±9,1 38,6±3,1
4 Амилаза, ЕД/л 790,2±30,2 938,4±19,2
5 Глюкоза, ммоль/л 4,2±0,7 4,6±0,7
6 Креатинин, мкмоль/л 85,1±6,0 112,5±19,1
7 Мочевина, ммоль/л 5,8 ±0,2 6,7±0,4
8 Билирубин общий, мкмоль/л 6,3±1,5 8,0±0,7
9 Билирубин свободный, мкмоль/л 4,7±0,4 4,9±0,6
10 Билирубин связанный, мкмоль/л 1,6±0,1 3,1±0,5
11 Общий белок, г/л 62,6±7,3 68,9±7,1
12 Общий холестерин, ммоль/л 8,6±0,1 4,2±0,02
13 Общие липиды, г/л 11,16±0,4 7,68±0,2
14 Неорганический натрий, ммоль/л 144,3±13,1 135,4±11,1
15 Калий, ммоль/л 5,5±0,04 7,2±0,01
16 Общий кальций, ммоль/л 2,73±0,03 3,75±0,03
17 Неорганический фосфор, ммоль/л 1,42±0,01 0,56±0,04
соотношение эозинофилов, палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов было в пределах нормы. В частности, в общеклинических показателях наблюдается гипохромная регенеративная анемия, лейкоцитоз, лимфоцитоз, нейтрофилия, эозинофилия, базофилия, увеличение СОЭ [3, 5, 6].
В результате проведенных нами исследований, в клиническом статусе крови больных ди-рофиляриозом собак, как при моно- так и при микст-инвазии при ИИ 249,6±4,7 - 254,8±5,3 экз. личинок в мл крови, были установлены явления эритропении, гипергемоглобинемии, лейкоцитоза, эозинофилии, повышение СОЭ по сравнению с группой здоровых собак, содержащихся в одинаковых условиях. Однако все исследуемые показатели не выходили за пределы референтных значений, соответствующих физиологической норме животных данного вида и возраста. Все перечисленные изменения в клиническом статусе крови характерны для гемопаразитозов, и их можно рассматривать как компенсаторный механизм в ответ на гипоксию при дирофиляриозе. При данной инвазии активируются воспалительные и аллергические процессы, которые иллюстрируют нейтрофилия, эозинофилия, лимфопения.
Отечественные и зарубежные исследователи указывают, что у собак, инвази-рованных разными видами дирофилярий, а также обоими видами одновременно, в биохимическом составе крови наблюдается увеличение уровня мочевины и креа-тинина на 27% при уменьшении уровня натрия в плазме до 145 ммоль/л - 136 ммоль/л в зависимости от тяжести заболевания. В то время, как показатели АЛТ, билирубин, глюкоза, щелочная фосфатаза мало изменялись [4]. По мнению Л. Ю. Кочетко-вой с соавт. (2012) [2], у собак с бессимптомным течением дирофиляриоза близкими к норме остаются показатели уровня билирубина, альбумина, АЛТ, АСТ. У собак со средней тяжестью течения уровень альбумина находится или на верхней границе нормы, или на 7 % превышает ее, а общий билирубин повышается на 44 %. Показатели гаммаглутаминтранспептидазы (ГГТП) и щелочной фосфатазы (ЩФ) повышены
на 13-20,3 % и 26,4 % соответственно. У собак со средней тяжестью течения повышение активности АСТ является следствием токсического воздействия на клеточные и субклеточные мембраны. Содержание натрия, калия, кальция, глюкозы и глобулинов изменялось недостоверно по отношению к здоровым животным [1, 3].
Проведенные нами исследования показали, что рост концентрации общего белка связан с синтезом белков острой фазы воспаления, запущенный в ответ на гибель личинок дирофилярий, и представляет собой универсальную защитную реакцию макроорганизма. Повышение концентрации таких показателей крови, как мочевина и креатинин, является отражением дисфункции почек у инвазированных животных. Причем в компонентном составе у больных собак преобладала фракция связанного билирубина. Активность ами-нотрансфераз связана с продуктами обмена микрофилярий и свидетельствует о патологическом процессе в миокарде и печени. У 68 % собак, пораженных обоими видами дирофилярий, было увеличено количество АЛТ, АСТ в 67 %, мочевины в 78 % случаев. Динамика активности амилазы слабо коррелирует с клиническим состоянием опытных собак, поэтому для характеристики функционального состояния поджелудочной железы необходимо проводить дополнительные исследования. Показатели креатинина были повышены по сравнению с группой здоровых собак в 74 % случаев. Полученные результаты иллюстрируют состояние интоксикации у собак в стадии компенсации. Общий кальций участвует в регуляции проницаемости клеточных мембран, сокращении мышечных волокон и свертываемости крови. Его содержание связано с содержанием фосфора и магния. Изменение содержание калия и натрия связаны с нарушением электролитного баланса.
Установлено, что оба вида дирофилярий одинаково патогенны и затрагивают все системы макроорганизма, а гематологические показатели отражают глубину вовлеченности организма в патологический процесс.
33
Заключение
Результаты исследований показывают, что в стадии компенсации при отсутствии видимых клинических признаков у инвазирован-ных собак развиваются изменения в гематологическом гомеостазе, как при заражении одним, так и двумя видами дирофилярий. Отклонения в клинических и биохимических показателях крови могут использоваться ветеринарными врачами, как биомаркеры глубины патологических процессов при дирофилярио-зе, и определяют необходимость и сроки начала проведения патогенетической терапии.
Список литературы
1. Архипов И. А. Дирофиляриоз / И. А. Архипов, Д. Р. Архипова. М.: Типография Россельхозакадемии. 2004. 194 с.
2. Кочеткова А. Ю. Биохимические аспекты патогенеза при дирофиляриозе собак, вызванного
Dirofilaria immitis: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 06.02.01 / Кочеткова Анастасия Юрьевна. Ставрополь, 2016. 23 с.
3. Нагорный С. А. К вопросу патогенеза при дирофиляриозе собак / С. А. Нагорный, Ю. Г. Бескровная, Ю. И. Васерин // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: Матер. докл. науч. конф. М., 2008. Выпуск 9. С. 316-319.
4. Серебрякова Н. В. Научное обоснование комплекса мероприятий при дирофиляриозе служебных собак: автореф. дис.....канд. вет. наук: 16.00.03,
03.00.19 / Серебрякова Наталья Валерьевна. Новочеркасск, 2009. 21 с.
5. Schrey C. F. Heartworm disease in cats and dogs -diagnosis and therapy / C. F. Schrey, E. Trautvetter // Waltham Focus. 1998. Volume 8. № 3. P. 23-30.
6. Sharma M. C. Blood cellular and biochemical studies in canine dirofilariasis / M.C. Sharma, S.P. Pachauri // Veterinary Research Communications. 1982. Volume 5. № 3. P. 295-300.
7. Stephen J. Key Findings from the 2013 American Heartworm Society Survey / J. Stephen // Today's Veterinary Practice. 2014. Volume 4. № 4. P. 69-71.
ro s ro Щ Œ ' fr ' ЧОУДПО«ИНСТИТУТВЕТЕРИНАРНОЙ БИОЛОГИИ» г. Санкт-Петербург Курсы повышения квалификации
Ш • Ветеринарная кардиология - 4 ступени • Л абораторная диагностика • Ветеринарная офтальмология • Ветеринарная рентгенология - 2 ступени • [Ветеринарная ультразвуковая диагностика -4 ступени • [Ветеринарная фармация
Предварительная регистрация обязательна! Справки по тел. (812) 612-13-334 или (812) 232-55-92 доб. 208 График проведения и информация на сайте: www.invetbio.spb.ru/seminars.html Лицензия Комитета по образованию Санкт-Петербурга на осуществление образовательной деятельности по образовательным программам дополнительного профессионального образования № 1093 от 04.08.2014 г.
