CC BY
3
УДК 579.835.12: [579.61:6Ю.З<1-002.1-02-053.2
Т. Б. Сафонова, Т. С. Спирина, Л. А. Тараненко, В. П. Тимина, Л. А. Павлова, В. В. Скуратовскал, В. Р. Соболев
КАМПИЛОБАКТЕРИИ — ВОЗМОЖНЫЕ ВОЗБУДИТЕЛИ ДИАРЕЙНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДЕТЕЙ
ЦИУВ, Москва
В последние годы проблема диарейных заболеваний кампилобактериозной этнологии привлекает внимание эпидемиологов и бактериологов.
В некоторых странах кампилобактерии выделяются в 2 раза чаще, чем возбудители сальмо-неллеза и дизентерии [3]. При этом регистрируются как крупные вспышки, охватывающие сотни и даже тысячи людей и связанные с употреблением молока или воды, так и спорадические случаи.
Возбудители кампнлобактериоза высокорезистентны к неблагоприятным воздействиям внешней среды. Они сохраняют жизнеспособность в » фекалиях до 7 сут, в речной воде около недели. »При 4СС возбудитель сохраняет жизнестойкость до 96 ч [1]. Источниками инфекции могут служить сельскохозяйственные и домашние животные и птицы, а также инфицированные продукты питания.
В отечественной литературе мы встретили лишь отдельные работы по бактериологической диагностике кампнлобактериоза в нашей стране. Однако, по результатам работ зарубежных исследователей, возбудитель кампнлобактериоза должен обнаруживаться у больных с диарейным синдромом и особенно часто у детей раннего возраста.
Сходство клинической картины кампнлобактериоза с другими диарейными инфекциями затрудняет постановку клинического диагноза. Пожатому существенное значение приобретает лабораторная диагностика этого заболевания.
Нами была проведена работа по выделению \ С. ]е]'ит'/соН у детей с диареей. Исследованы пробы фекалий от 448 госпитализированных детей в возрасте от 5 дней до 14 лет с клиническими диагнозами: энтероколит — 203 (преимущественно ранний возраст), гастроэнтерит—148, га-строэнтероколит — 35, энтерит—18, гастрит — 10, острые респираторные заболевания с кишечным синдромом или подозрением на неинфекционную патологию — 34. Забор материала производили до начала антибиотикотерапии, параллельно с посевами на патогенную флору. У некоторых больных забор материала осуществляли повторно. До посева фекалии хранили при 4°С и —18°С. Полученные нами результаты не выявили преимущества среды Кери-Блер и при-N менеиия низкой температуры (—18°С) для кратковременного сохранения кампилобактерий (2— 3 дня) в материале. Поэтому в последующей работе мы отказались от транспортной среды и
хранили материал до посева при 4°С. Замораживание фекалий при —20°С позволило сохранить жизнеспособность кампилобактерий в течение 2 нед.
Начальным этапом исследования явилась первичная микроскопия нативных препаратов фекалий, окрашенных I % водным раствором основного фуксина. По данным литературы, для ускоренной ориентировочной диагностики кампнлобактериоза рекомендуется исследовать тонкий мазок фекалий, окрашенный 1 % водным раствором основного фуксина [2]. Для этого мазок фиксируется на огне, заливается 1 % водным раствором основного фуксина на 10—20 с, а затем избыток красителя смывается водой. Так как для окраски большинства бактерий требуется 2—5 мин, то в мазке за 10—20 с окрашиваются в основном только кампилобактерии. Под микроскопом по характерной морфологии клеток (Б-образные, короткие цепочки в виде крыльев чайки, реже С-образные палочки с оттянутыми концами) определяли наличие кампилобактерий в образцах. В случае обнаружения в мазках типичных по морфологии клеток материал засевали на плотные питательные среды с добавлением 10 % крови и смеси антибиотиков 5к1гго\у [1]. В качестве питательной среды использовали среды для выделения бруцелл.
Выращивание при 42°С является селективным условием культивирования С. ]е]иги/соП, так как другие виды кампилобактерий не растут при этой температуре. Посевы инкубировали в специальном вакуумном термостате с готовой газовой смесью (азот — 85%, кислород — 5%, углекислый газ—10%) при 42°С в течение 48—72 ч. После инкубации посевы просматривают, отмечая типичные для кампилобактерий колонии,— мелкие, диаметром 0,2—1 мм, полупрозрачные, правильной формы. Чаще всего рост на плотных питательных средах наблюдался в виде влажной пленки. Дополнительно проверяли аэротолерантность выделенных микроорганизмов, выращивая культуры в аэробных условиях при 37°С. Культуры микроскопировали, окрашивали мазки 1 % раствором основного фуксина параллельно с окраской по Граму для подтверждения принадлежности выросших культур к роду кампилобактерий. Изучали способность культур продуцировать оксидазу, каталазу, рост в присутствии на-лидиксопой кислоты, а также оценивали подвижность с применением фазово-контрастной микроскопии.
Единственным надежным тестом для дифференциации С. coli от С. jejuni считается гидролиз гиппурата натрия [4]. Так как оба вида вызывают заболевания человека, мы считали возможным не дифференцировать их при исследовании фекалий детей дошкольного возраста. Способность гидролизовать гиппурат натрия проверяли лишь у культур кампилобактерий, выделенных у детей старшей возрастной группы. Полученные данные показали, что от этих детей был выделен С. jejuni.
В начале нашей работы высевы делали из всех проб фекалий независимо от данных первичной микроскопии, но ни в одном случае нам не удалось получить рост кампилобактерий в тех пробах, в которых не было выявлено типичных по морфологии клеток. Поэтому в дальнейшем для исследования отбирали те пробы фекалий, в которых при первичной микроскопии были обнаружены клетки, сходные с кампилобактериями. Таким образом было отобрано 175 проб. Кампило-бактерии были высеяны из 97 (55,4 %) проб фекалий. При обследовании 149 детей в возрасте 1—12 мес кампилобактерии были выделены в 21,4 % случаев. Частота выделения этих бактерий у 27 детей первых дней жизни составила 29,6 %• Причина выделения большого количества кампилобактерий от новорожденных требует дальнейшего изучения. Можно предположить, что заражение детей данной группы происходит в интра- или ранний постнатальный период.
В других обследованных группах отмечался приблизительно одинаковый процент (22—16) положительных находок кампилобактерий. По данным литературы, дети старших возрастных групп реже болеют кампилобактериозом [1]. В наших исследованиях установлен достаточно высокий процент (16,5) высеваемости кампилобактерий от детей 7—14 лет.
Помимо зависимости высеваемости кампилобактерий от возраста ребенка, нами была выявлена и зависимость высеваемости от сезона года.
Тенденция к увеличению высеваемости кампилобактерий прослеживается с февраля, а в июне отмечается выраженный пик высеваемости: если среднегодовая высеваемость кампилобактерий у детей с острыми кишечными заболеваниями была около 20 %, то в июне она увеличилась Bj> 2 раза. В осенне-зимние месяцы высеваемост* была на одном уровне, что совпадает с данными литературы. Исследование в августе мь: не про-водили.
Полученные результаты позволяют считать, что кампилобактериоз занимает значительное место в этиологии острых кишечных заболеваний у детей. Однако требуются проведение дальнейших исследований различных объектов окружающей среды для выяснения источников инфекции и путей ее передачи, а также клинический анализ полученных данных и исследование факторов патогениости выделенных штаммов для уточнения этиологического значения кампилобактерий.
Литература
1. Butzler F. P., Skirrow М. В. //Clin. Gastroenterol. — 1979. — Vol. 8. — P. 737—765.
2. Park С. H.. Hixon D. L., Polkemus A. S., Farguson С. B. et al. // Amer. Clin. Path. — 1983. — Vol. 80. — P. 388— 390.
3. Roop R. M„ Shubert R. M.. Krieg N. R. // J. clin. Microbiol. — 1984. — Vol. 20. — P. 990—992.
4. Smibert R. M. // Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. — Baltimore, 1984.— P. 111 — 118.
Поступила 10.11.87
Summary. The results of the examination of 448 children aged 5-14 years suffering from diarrhoea are presented. The methods of collection and storage of material before inoculation are described. Potentiality of using microscopy of native feces containing cainpilobacteria is demonstrated. 97 campilobacterium strains have been detected. The findings indicate campilobacteria correlation with children's age and season of the year. It is suggested that further analysis oW clinical material and investigation of various environmental objects for determining sources of infection and ways of its transmission be carried out.
УДК 614.777:579.68]-078
10. Г. Талаева, Т. 3. Артемова
СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ ПОТЕНЦИАЛЬНОЙ ЭПИДЕМИЧЕСКОЙ ОПАСНОСТИ ПИТЬЕВОГО ВОДОПОЛЬЗОВАНИЯ
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сыснна АМН СССР, Москва
Инфекционная заболеваемость продолжает оставаться одним из ведущих показателей в общей патологии человека и наносит огромный социальный и экономический ущерб. В связи с этим весьма актуальны исследования по изучению влияния факторов окружающей среды на заболеваемость населения кишечными инфекциями с целью прогнозирования эпидемической си-
туации и разработки научно обоснованных профилактических мероприятий.
Для установления степени эпидемической опасности возникновения кишечных инфекций при разных уровнях микробного загрязнения пить- 4 евой воды проведены экспериментальные исследования, а также об' 'щены многолетние данные по 19 контролируемым территориям, которые от-
