CC BY
7
226
материалы v национального конгресса по регенеративной медицине
количество нетрасфицированных клеток в матригеле. Через семь дней область введения имплантов аккуратно иссекали и использовали для гистологического анализа. Дермальный слой кожи в месте имплантации транс-фицированных pBud-VEGF165-FGF2 клеток был богато васкуляризован большим количеством обильно кровос-набжаемых разветвленных сосудов различного диаметра. Фрагменты изолированного матригеля с трансфи-цированными клетками также значительно отличались по уровню васкуляризации по сравнению с контролем, а именно количеством, размером и длиной проросших сосудов, в которых наблюдались внутрисосудистые эритроциты, что свидетельствуют о наличии в них кровотока. Кроме того, во всех исследованных образцах не была обнаружена инфильтрация воспалительных клеток. Таким образом, подкожная имплантация HEK293T, транс-фицированных плазмидной ДНК pBud-VEGF165-FGF2, ко-экспрессирующей гены fgf2 и vegf165, способствует индукции локального ангиогенеза in vivo. Работа была выполнена при финансовой поддержке исследовательского проекта РНФ № 21-75-10035 и в рамках Программы стратегического академического лидерства Казанского федерального университета (ПРИ0РиТеТ-2030).
Литература:
1. Jorgensen S.F. et al. Journal of wound cane. 2013. V. 22. № 10.
P. 540-545.
2. Gottrup F.A. et al. The American journal of surgery. 2004.
V. 187. № 5. P. S38-S43.
КАЛЬЦИФИКАЦИЯ КОЛЛАГЕНОВЫХ
НЕТКАНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПРИ ПОДКОЖНОЙ
ИМПЛАНТАЦИИ
Е.В. Сытина1, Т.Х. Тенчурин1, Е.В. Соловьева1,
А.А. Алексеев2, С.Н. Чвалун1, А.А. Пантелеев1
1 НИЦ Курчатовский институ», Москва, Россия
2 ФГБУ НМИЦ Центр хирургии им. А.В. Вишневского, Москва, Россия
e-mail: esytina@mail.ru
Ключевые слова: биоинженерия, нетканый материал, коллаген, подкожная имплантация, кальцификация.
В тканевой инженерии природные полимеры обладают рядом преимуществ по сравнению с синтетическими, обеспечивая для клеток среду, приближенную к естественной. Ранее нами была разработана методика получения нетканых материалов на основе коллагена. Материалы, полученные из растворов коллагена в уксусной кислоте, подвергали термической обработке для достижения различной степени денатурации в ряду коллаген-желатин и стабилизировали генипином. Коллагеновые и желатиновые матриксы имплантировали под кожу мышам линии BalbC на разные сроки. На 35й день после имплантации отек и спаянность с подлежащими тканями отсутствовали. Гистологическое исследование выявило, что клетки проникали внутрь обоих образцов только с торцов или в местах нарушения их целостности. Растущие капилляры наблюдались лишь в областях, где соединительная ткань образовалась между складками образца. Инфильтрация моноцитами наблюдалась по периметру всех образцов, при этом в желатиновых образцах наблюдались признаки хронического продуктивного воспаления (формирование единичных гранулем, гигантских клеток инородных тел и тонкой капсулы). Коллагеновые образцы резорбировались
медленнее, гранулемы и гигантские клетки не обнаружены. Таким образом, желатиновые нетканые материалы деградировали быстрее коллагеновых и вызывали более выраженную реакцию организма.
Оба типа материалов, сшитых генипином, длительно сохранялись в тканях. Через 3 месяца они были хорошо различимы на гистологических препаратах, признаки воспаления на макроскопическом уровне отсутствовали. Окрашивание ализариновым красным выявило кальци-фикацию только коллагенового материала. Через полгода гистологическая картина осталась без изменений: интенсивная кальцификация коллагенового материала и её отсутствие в желатиновом. Коллагеновые образцы стали жесткими, а желатиновые сохранили мягкость, подверглись лишь частичной резорбции и сохранили структуру. Они не проросли сосудами, оставаясь непроницаемыми для клеток. Кальцификация — серьезное препятствие для использования искусственных материалов при реконструкции мягких тканей, хотя может быть плюсом в тканевой инженерии кости. Желатин может быть перспективным для создания нетканых материалов, ограничивающих проникновение клеточных элементов внутрь импланта. Работа выполнена при поддержке НИЦ «Курчатовский институт».
АНАЛИЗ ПОДВИЖНОСТИ MHSP70-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК МУЛЬТИФОРМНОЙ ГЛИОБЛАСТОМЫ В МОДЕЛИ ЭКСПЛАНТАТА
Р.Б. Тагаева1 2, Н.М. Юдинцева1, 2,
Д.Е. Бобков1, 2, Д.Ф. Гончарова2, А.С. Нечаева2,
Е.В. Федоров2, М.А. Шевцов1, 2
1 ФГБУН Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 Центр персонализированной медицины, НМИЦ им. В.А. Алмазова Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: tagaeva97@yandex.ru
Ключевые слова: мультиформная глиобластома, эксплантат, инвазия, мембранно-связанный белок теплового шока mHsp70.
Мультиформная глиобластома (МГБ) является наиболее распространенной злокачественной опухолью головного мозга со средней выживаемостью пациентов около 15 месяцев [1]. Сложность в исследовании МГБ связана с ее высокой гетерогенностью и повышенной инвазив-ностью [2]. Поскольку способность клеток МГБ проникать в здоровую ткань головного мозга определяется сложным взаимодействием между опухолевыми клетками и их микроокружением [3], для изучения организации опухоли и анализа опухолевого роста используют 313-модель миграции клеток из эксплантата (фрагмента опухоли, полученного в ходе проведения хирургической операции) [4].
В настоящем исследовании анализ подвижности клеток МГБ, мигрировавших из эксплантата, проводили с помощью системы прижизненной микроскопии CQ1 (Yokogawa, Япония) в течение 24 часов с интервалом съемки 15 минут, используя такие параметры, как средняя скорость и извилистость трека. Клетки предварительно окрашивали антителами к мембранно-свя-занной форме белка теплового шока mHsp70 (Thermo Fisher, США), который избирательно экспрессируется на поверхности опухолевых, но не нормальных клеток [5].
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
