CC BY
7
разность латентных периодов (Г) 0,7 мс (0,0007 с), расстояние (S) между раздражающими электродами 29 мм (0,029 м), то СРВ равна 41,4 м/с (рис. 2).
У контрольных кур СРВ по периферическим нервам составляет 40—50 м/с. При воздействии i классических нейропаралитических ФОС (триор-токрезилфосфат, афос) снижение СРВ (на 20— 30 % по сравнению с исходным уровнем) наблюдается уже на 6—7-е сутки и предшествует появлению видимых признаков ОНД. На фоне развития парезов и параличей (14—17-е сутки исследования) СРВ замедляется на 40—70 %, при этом развитие процесса демиелинизации в периферических нервах подтверждается морфологическими исследованиями [2, 4].
Функциональное состояние нервно-мышечной передачи у кур при воздействии ФОС определяется по способности мышцы (m. adductor) воспроизводить ПД как на ритмическую (50— 300 Гц), так и одиночную стимуляцию. Условия регистрации ПД мышцы в этом случае такие же, как и при регистрации СРВ. Критерием развития блока мионевральной передачи при воздействии ФОС служит изменение амплитуды ПД мышцы по сравнению с контролем. Как видно из рис. 2, у контрольных кур мышца способна воспроизводить ПД при частоте раздражения до 250 Гц, с амплитудой 5—6 мВ. При воздействии триорто-крезилфосфата и афоса [2—4] нарушение нервно-мышечной передачи у кур наблюдается уже на 8—10-е сутки после введения препарата; на фоне развития параличей (14—21-е сутки) проведение высокочастотных импульсов (50—100
Гц) блокируется. В этом случае ПД воспроизводятся лишь на 2—3 первых стимула, после чего развивается пессимум.
Таким образом, предложенный методический подход дает возможность изучать функциональное состояние периферической нервной системы у кур в опытах in vivo на одних и тех же птицах в течение длительного времени без оперативного вмешательства. Это существенно повышает достоверность получаемых экспериментальных данных, сокращает время снятия показателей и необходимое число подопытных животных.
Данная методика позволяет оценивать степень выраженности патологического процесса в периферической нервной системе кур, выявлять локализацию поражения, ранние процессы аксональ-ной дегенерации или демиелинизирующие расстройства нервных волокон, нарушение мионевральной передачи при воздействии фосфорорга-нических соединений, обладающих отдаленным нейротоксическим действием.
Литература
1. Зильбер Ю. Д. // Актуальные вопросы промышленной токсикологии,— Л., 1970.— С. 129—145.
2. Каган Ю. С.. Кокшарева Н. В., Овсянникова Л. М. и др. // Депонир. в ВИНИТИ, № 6844—84 Деп.
3. Ковтун С. Д., Кокшарева Н. В. // Гиг. и сан.— 1980 — № 6. —С. 51—52.
4. Ткаченко И. И., Каган /О. С., Кокшарева И. В., Бадаева JI. Н.Ц Фармакол. и токсикол.— 1985,— №6.— С. 80—83.
5. Hayes W. J. Pesticides Studied in Man. — Baltimore, 1982.
6. Johnson M. /(. Il Mechanisms of Toxicity and Hazard Evaluation.— Amsterdam, 1980.— P. 27—38.
Поступила 09.07.85
УДК 614.445: [574.64:546.17
Е. Ю. Андрейко, Т. В. Струбицкая, Д. Л. Брасюк, И. В. Струбицкий
К ВОПРОСУ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АММОНИЙНЫХ И НИТРИТНЫХ ИОНОВ В ВОДЕ ВОДОЕМОВ
Львовский НИИ эпидемиологии и микробиологии
В настоящее время для количественного определения аммонийного и нитритного азота в водах различного типа, в том числе открытых водоемов, наиболее широко применяются фотометрические методы [1—5]. Стандартная методика количественного определения аммонийного азота в воде заключается в фотометрировании окрашенного комплекса, который образуется при взаимодействии сегнетовой соли и реактива Несслера с катионом аммиака. При этом исходный объем пробы 100 мл, а реактивов сегнетовой соли и Несслера по 2 мл. Общепринятый метод определения нитритного азота в воде основан на фотометрировании аддуктного комплекса нитрит-ион — реактив Грисса. Исходный объем пробы также 100 мл, а реактива Грисса 5 мл. Многолетний опыт нормирования вредных ве-
ществ в водной среде позволил нам апробировать указанные методы на более чем 150 веществах различной химической структуры. При работе с модельными водоемами малого объема (10—20 л) многократное изъятие 100 мл воды отрицательно влияет на экологический баланс системы, а длительная инкубация (30 мин) большого -объема пробы отдаляет время получения информации. Кроме того, зачастую лаборатории испытывают определенные трудности в приобретении реактивов Грисса и Несслера.
Настоящая работа является этапной в серии экспериментов по усовершенствованию методик изучения влияния ксенобиотиков на санитарный режим водоемов при гигиеническом регламентировании веществ в воде. Основная цель наших исследований — оптимизация объема отбирае-
мых для анализа проб из модельных или натурных водоемов наряду со значительной экономией используемых реактивов и сокращением времени проведения опытов.
Модификация способов определения аммонийного и нитритного азота заключается в следующем; объем отбираемой пробы сокращают до 10 мл, а реактивов — сегнетовой соли, Несслера и Грисса — до 0,15, 0,15 и 0,30 мл соответственно. При фотометри.ровании используют кюветы с толщиной оптического слоя 10 мм. Из исследуемого водоема отбирают 10 мл пробы и добавляют к ней либо 0,15 мл 50% раствора сегнетовой соли и 0,15 мл реактива Несслера (при определении содержания азота аммония), либо 0,3 мл реактива Грисса (для определения концентрации азота нитритов). Затем при определении нитритов полученные реакционные смеси инкубируют в течение 10 мин при 37°С и фотометрируют. Содержание азота в пробе устанавливают по градуировочному графику. При построении последнего для определения содержания аммонийного азота в пробирки помещают 0, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 и 1,0 мл рабочего стандартного раствора хлорида аммония с содержанием 0,01 мг азота в 1 мл, доливают до 10 мл дистиллированную воду. Таким образом получают шкалу растворов с содержанием 0, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 и 1,0 мг азота аммония в 1 л.
При построении градуировочного графика для определения концентрации азота нитритов в реакционные сосуды помещают 0, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 и 1,0 мл рабочего стандартного раствора азотнокислого натрия с содержанием 0,001 мг азота в 1 мл, доливают до 10 мл дистиллированную воду и получают шкалу растворов с содержанием 0, 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09 и 0,10 мг азота нитритов в 1 л.
Модифицированные методы не уступают по чувствительности стандартным. Статистическая обработка результатов определения азота аммония и нитритов при объемах пробы 100 и 10 мл и соответствующих объемах вводимых реактивов (для каждой концентрации п=3) показала, что в определяемом диапазоне концентраций среднее | квадратичное отклонение находится в пределах 0,000—0,006 в обоих случаях. Коэффициент Стыодента имеет значения от 0,000 до 1,000, что свидетельствует об отсутствии статистически значимых различий между концентрациями, найденными с использованием разных объемов проб.
Предлагаемые модификации методов определения аммонийного и нитритного азота позволяют в 10 раз сократить объем отбираемой пробы. Это особенно важно при проведении исследований в динамических модельных системах, а также натурных водоемах, что подтверждено исследованиями в полевых условиях. Одновременно достигается 13-кратная экономия сегнетовой соли и реактива Несслера и 16-кратная — реактива Грисса, а также сокращается время получения результатов.
Литература
1. Кочетов Г. А. Практическое руководство по энзимоло-гии.-М., 1980. —С. 208—209.
2. Лурье Ю. Ю. Аналитическая химия промышленных
сточных вод, —М., 1984, —С. 170—171.
3. Методы биохимического исследования растений / Ермаков А. И., Арасимович В. В., Смирнова-Иконникова М. И. и др. —Л., 1972.
4. Минх А. А. Методы гигиенических исследований. — М., 1971. —С. 158-163.
5. Новиков Ю. В., Ласточкина К■ О., Болдина 3. Н. Методы определения вредных веществ в воде водоемов. — М., 1981, —С. 61—69.
Поступила 02.06.86
УДК 777:547.593.2И1-074::>43.432
Е. М. Севастьянова, 3. С. Смирнова
ФОТОКОЛОРИМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПЕРОКСИДОВ ЦИКЛОГЕКСАНОНА В ВОДЕ
Новокунбышевский филиал ВНИИ органического синтеза
Пероксиды циклогексанона применяются в качестве инициаторов холодного отверждения полиэфирных смол и имеют 3 структуры, отличающиеся количеством активного кислорода: 1,1-диок-сидициклогексилпероксид (I), 1-окси-1-гидропе-роксидициклогексилпероксид (II), 1,1-дигидропе-роксидициклогексилпероксид (III). Токсические свойства этих пероксидов мало изучены, предельно допустимые концентрации не установлены. Вместе с тем в процессе их производства и
применения пероксиды могут попадать в объекты окружающей среды.
Необходимость контроля содержания их в воде и воздухе требует разработки чувствительных методов анализа. Известен полярографический метод определения пероксидов циклогексанона [1] путем восстановления на фоне 0,2 М раствора уксусной кислоты и 0,2 М ацетата аммония в бензол-метанольной (3:7) среде. Минимально определяемые этим методом концентрации в пе-
